Técnica Histológica. El presente material didáctico tiene como fin describir el concepto de técnica histológica, así como los pasos que la conforman

1. Diplomado en incorporación de TIC en la Docencia y
Digitalización de Contenidos
Módulo VI. Tecnología como Apoyo a la Docencia
Actividad 4. Presentación Slideshare
Alumna: Alma Lilián Guerrero Barrera
Fecha: 8 noviembre 2013

2. Título: Técnicas de estudio de la Citología e Histología
Tema: Técnica Histológica
Descripción: Presentación Slideshare
Área: Histología
Departamento: Morfología
Autor: Alma Lilián Guerrero Barrera
Versión: 0001
Fecha de creación: 8 de noviembrede 2013
Propósito: El presente material didáctico tiene como fin
describir el concepto de técnica histológica, así como los pasos
que la conforman
Palabras clave: Citología, Técnicas de estudio, Técnica
Histológica
Tiempo de navegación: 30 minutos
Perfil: Estudiantes de primer semestre de la Carrera de
Medicina Veterinaria y Zootecnia

3. Introducción
¿Qué es una célula?
La célula es la Unidad morfológica, funcional, metabólica y
evolutiva de los Seres Vivos. Existen dos tipos celulares en la
naturaleza, la célula Procarionte y la Célula Eucarionte. Todos
los animales estamos formados por células eucariontes, cuya
característica fundamental es tener un núcleo celular
delimitado por doble membrana y organelos celulares
membranosos.

4. ¿Qué es un tejido?
Conjunto organizado de células que presentan un origen
embrionario común y que realizan una función
específica

5. ¿Cómo estudiamos las células y los
tejidos?
Las células y los tejidos son microscópicos (en promedio de 5100 μm), para su estudio se requiere del uso del microscopio

6. Tipos de microscopio
Óptico compuesto, límite de resolución 0.2 μm
Electrónico de transmisión, límite de resolución 0.2 nm
Electrónico de barrido

7. Tipos de microscopio

8. Escala de visualización de diferentes componentes de los animales
Tomado de Alberts et al., 1998.

9. Órdenes de magnitud de la microscopía. El cuadro muestra un panorama general
sobre los órdenes de magnitud de diferentes células y componentes celulares. Los
órdenes de magnitud de la microscopía electrónica de rutina oscilan entre varios
micrómetros y unos pocos nanómetros (nm es la milésima parte del micrómetro).

10. El microscopio permite aumentar el poder de resolución del ojo humano para
realizar la observación de células y tejidos

11. Al microscopio las células y los tejidos son transparentes a la
luz, sólo presentan cambios de claro oscuros debidos a la
diferencia en densidad

12. Métodos de estudio para células y
tejidos
Para brindar mejor contraste a las células y tejidos
observados a través del microscopio (óptico o
electrónico), se han desarrollado métodos de tinción
(microscopio óptico) o de contraste (microscopio
electrónico).
Para estudiar las células y tejidos se prefiere
preservarlas para que muestren su estructura al
microscopio.

13. Técnica citológica y Técnica
histológica
El método de preservación y tinción de células se llama
técnica citológica
El método de preservación y tinción de tejidos se llama
técnica histológica

14. Toma de muestra
Histología
Biopsia
Animal experimental
Sacrificio
Perfusión

15. Toma de muestra
Citología
Frotis celular
Cultivo Celular
Disgregado Celular

16. Perfusión
La perfusión es la técnica mediante la cual se sustituye la sangre del animal de
experimentación por solución fijadora, para garantizar la fijación homogénea de todos
los órganos del animal.

17. Realización de la técnica histológica. Representación de los pasos consecutivos que se
requieren para obtener a partir de una muestra de tejido fresco un corte histológico
coloreado apto pare el examen microscópico óptico.

18. Técnica histológica
Fijación. Conserva la morfología y composición de los
tejidos, fijador más empleado formalina neutra (4 o
10%, pH 7.4). Duración aproximadamente 12 h.
Deshidratación en concentraciones crecientes de
alcohol, se puede empezar con 50% hasta llegar a
alcohol absoluto. Elimina el agua de los tejidos.
Duración de 6 a 24 h.
Aclaramiento o diafanización xilol, solvente de alcohol y
parafina. Se realiza para embeber el tejido en parafina.
Duración de 1 a 6 h.

19. Técnica histológica
Inclusión en parafina fundida 60ºC. Se infiltra en los
vasos, espacios intercelulares y en el interior de las
células, embebiendo el tejido para hacer más fácil la
realización de los cortes histológicos en el microtomo.
Duración 30 min a 6 h.
Confección del bloque. La pieza se coloca en un molde
rectangular que contiene parafina fundida. Se persigue
obtener el bloque de parafina para ser cortado en el
microtomo.
Nota: los tiempos de duración estimados dependen de la
pieza, del tamaño y del animal de procedencia.

20. Fundamentos químicos de la
coloración, tinción o contraste
Colorantes ácidos. Son aquéllos que poseen carga global
negativa (aniónicos) por lo que reaccionan con los
componentes catiónicos de las células y los tejidos. Por
ejemplo: eosina, fucsina ácida.
Colorantes básicos. Poseen una carga global positiva
(catiónicos), por lo que reaccionan con los componentes
anitónicos de las células y los tejidos. Por ejemplo:
hematoxilina, fucsina básica.
Colorantes neutros. Su carga global es neutra por lo que
conservan la propiedad de colorear conjunta o
separadamente diversas estructuras. Por ejemplo
tinción de Giemsa.

21. Fundamentos químicos de la
coloración, tinción o contraste
Colorantes metacromáticos. Colorantes básicos que
reaccionan con algunas estructuras tisulares que
producen tonos de color totalmente distintos al que se
espera por el colorante empleado. Ejemplos: azul de
metileno o de toluidina en la sustancia fundamental del
cartílago (coloración brindada de azul al rojo púrpura).
Colorantes indiferentes: Aquéllos que no poseen
carácter ácido, básico o salino definido. Colorean
mediante impregnación. Por ejemplo el nitrato de
plata.

22. Histoquímica y citoquímica
Procedimientos químicos específicos que proporcionan
información detallada sobre sustancias químicas y
componentes en las células y tejidos. Los cuales se
fundamentan en:
La unión específica a un colorante
El uso de anticuerpos marcados con un colorante
fluorescente dirigidos a un componente celular en
particular
La actividad enzimática inherente de un elemento
constitutivo de las células

23. Técnica de PAS O del ácido
peryódico de Schiff
Se basa la ruptura de los enlaces C-C presentes en los
carbohidratos a través de la acción del ácido peryódico,
agente oxidante fuerte. Se liberan grupos aldehído que al
combinsrse con el reactivo de Shiff dan un compuesto de
color rojo púrpura intenso.

24. Inmunohistoquímica
Detección específica de biomoléculas de la célula mediante el uso de
anticuerpos “in situ”

26. d
c
a
b
e
Técnica Histológica. a) Microtomo; b) baño de flotación; c) histoquinet,
d)centro de inmersión e) tren de tinción.

27. Interpretación de los cortes histológicos. Se debe de conocer la anatomía del órgano y
su histología para poder realizar la interpretación correcta de los cortes histológicos.

28. Bibliografía
 López Moreno I. 2013. La Tecnología del Ambiente en Línea.
Presentación interactiva. Departamento de Innovación Educativa.
Universidad Autónoma de Aguascalientes.
 López Moreno I. 2013. Manual de Slideshare. Docencia de Pregrado.
Departamento de Innovación Educativa. Universidad Autónoma de
Aguascalientes.
 López Moreno I. 2013. Manual de Podcasting. Docencia de Pregrado.
Departamento de Innovación Educativa. Universidad Autónoma de
Aguascalientes.
 López Moreno I. Manual de Hotpotatoes. Docencia de Pregrado.
Departamento de Innovación Educativa. Universidad Autónoma de
Aguascalientes.

29. Bibliografía
Samuelson, D. A. 2007. Texbook of Veterinary Histology.
Saunders Elsevier. USA. pp. 1-10.
Gartner, L. P., Hiatt, J. L. 2011. Histología Básica.
Elsevier Saunders. México. pp.2-7.
Welch, U. 2006. Sobotta Welsch Histología. 2º Edición.
Editorial Médica Panamericana México. pp. 1-13.
Bancroft J. D., Gamble, M. 2008. Theory and Practice of
Histological Techniques. Sixth Edition. Churchill
Livingstone Elsevier. pp. 1-119.