Utilidad del hemograma en equinos

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N Ú M E R O 14 P R I M E R C U AT R I M E S T R E 2006

C a p í t u l o I I

Utilidad del hemograma
en la clínica equina

Rafaela Cuenca Valera, Josep Pastor Milán
Patología General y Médica - Facultad de Veterinaria - Universidad Autónoma de Barcelona

R e s u m e n
Una de las pruebas laboratoriales más empleadas por el veterinario especialista en medi-
cina equina actualmente es el hemograma, debido a la facilidad y rapidez de su reali-
zación y a la excelente relación entre su coste y la información proporcionada.
Los componentes celulares de la sangre pueden reflejar un cambio específico produci-
do en un órgano o sistema corporal o, con más frecuencia, reflejan una respuesta gene-
ral del individuo frente a la enfermedad.
En este trabajo revisamos las técnicas analíticas que se utilizan para valorar los diferen-
tes parámetros del hemograma, así como la interpretación de los mismos. Se exponen
también las aportaciones que los nuevos analizadores hematológicos automatizados
han traído consigo, contribuyendo a mejorar la precisión y exactitud de los parámetros
analizados y a abrir nuevas expectativas sobre la utilidad práctica de otros parámetros
menos conocidos.

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L
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UTILIDAD DEL HEMOGRAMA EN LA CLÍNICA EQUINA N

a función principal de las diferencia evidente entre los caballos deri-
pruebas laboratoriales en- vados del árabe, denominados de “sangre
tre las que se encuentra el caliente” y los caballos de tiro y ponies, o
hemograma, es la de ge- de “sangre fría”, es un hematocrito ligera-
nerar una información que mente superior en descanso en los primeros
ayude al clínico en los (Tabla 3).
procesos de diagnóstico, toma de decisiones, La muestra de sangre se ha de reco-
formulación del pronóstico y manejo y con- ger con el animal en descanso, antes de rea-
trol del paciente (Rowan, 1999). Incluso lizar ejercicio, y bajo unas condiciones que
para los clínicos con experiencia que con disminuyan al máximo la probabilidad de
frecuencia son capaces de hacer diagnósti- causarle temor o excitación. Con ello se
cos seguros sin contar con pruebas laborato- minimiza el efecto de la contracción esplé-
riales, entre ellas el hemograma, el uso ade- nica (elevaría el valor hematocrito, el
cuado del mismo le proporciona una dimen- recuento de eritrocitos y la concentración de
sión añadida en la práctica clínica. hemoglobina), y la liberación de adrenalina
El hemograma, dentro de las pruebas o corticosteroides (provocan modificacio-
laboratoriales, es quizá una de las que más nes en el leucograma). El temperamento del
se utiliza debido a la facilidad y rapidez de caballo y la técnica empleada en la extrac-
su realización y a la excelente relación entre ción pueden tener un efecto importante
su coste y la información que proporciona. tanto en los valores eritrocitarios como leu-
A este respecto, sólo en contadas ocasiones cocitarios del hemograma (Archer y
un hemograma completo sirve como méto-
Clabby, 1965; Stewart et al., 1970).
do diagnóstico para una enfermedad con-
La extracción sanguínea se ha de rea-
creta; con mucha más frecuencia refleja la
lizar, siempre que sea posible, con el animal
condición general del individuo o su res-
en ayunas, para evitar la lipemia postpandrial
puesta general frente a la enfermedad
que puede interferir con los resultados de
(Kidd, 1991).
otras determinaciones y provocar la hemóli-
Los resultados del hemograma han
sis in vitro de la muestra. Se debería evitar
de interpretarse teniendo siempre en cuenta
recoger la muestra de sangre en las tres horas
el paciente (edad, raza, sexo, aptitud, trata-
inmediatas a la administración de una comi-
mientos médicos instaurados, etc.) y los
resultados de la exploración clínica que se da rica en concentrados o una ración de heno,
le ha realizado. La forma en la que la mues- puesto que en este intervalo se produce un
tra se haya recogido y manejado, y la meto- incremento importante en el valor hematocri-
dología empleada en la determinación de to y también un incremento del 12% en la
los diferentes parámetros, puede, influir concentración de proteínas plasmáticas (Kerr
también en los resultados obtenidos y, por y Snow, 1982) debido al aumento de la pro-
tanto, en su interpretación. ducción salivar y a la desviación de líquidos
De todas las variables mencionadas, desde la circulación al tracto gastrointestinal
sin duda las que generan una mayor causa (Clarke et al., 1990; 1998).
de variación son la edad y el estado emo- Las muestras de sangre se recogen
cional del animal (Tablas 1 y 2). normalmente en tubos de cristal en vacío,
Los équidos domésticos presentan con la sal del ácido etilén diaminotetracéti-
entre si tan sólo diferencias hematológicas co (EDTA) como anticoagulante, que pro-
sutiles (Archer y Jefcott, 1977). La única longa el tiempo en el que la morfología

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Tabla I. Valores hematológicos de referencia en potros

Parámetros Nacimiento 24 horas 7 días +

Recuento de eritrocitos (x1012/L) 9,0-13,0 8,0-11,0 7,5-10,5
Concentración de hemoglobina (g/L) 120-180 130-155 115-175
Valor hematocrito (L/L / %) 0,40-0,52 0,34-0,46 31-40
Volumen Corpuscular Medio (fl) -- 37-49 --
Concentración Corpuscular Media
de Recuento total de leucocitos (x109/L) 5,5-11,5 -- 7,0-12,0
Recuento diferencial de leucocitos
Linfocitos (x109/L) 1,8-3,0 1,8-3,0 2,0-4,0
Monocitos (x109/L) -- 0,2 --
Neutrófilos (x109/L) 3,5-10,0 3,0-9,6 7,0-10,0
Eosinófilos (x109/L) -- 0,0-0,1 --
Basófilos (x109/L) -- 0,1 --
Recuento de plaquetas (x109/L) 100-250 125-300 100-400

Datos obtenidos de Knottenbelt, D. C. ; Holdstock, N. y Madigan, J. E. (2004).

Tabla II. Valores hematológicos de normalidad en potros Pura Sangre
y Cuarto de Milla de ambos sexos (media ± 1SD)

Parámetros 1er dia 2-7 dias 8-14 días 21-30 días 1-3 meses
(promedio 5) (promedio 9) (promedio 28) (promedio 51)
n=34 n=16 n=15 n=8 n=14

Recuento de eritrocitos (x106/µL) 10,5±1,4 9,5±0,8 9,0±0,8 11,2±1,3 11,9±1,3
Concentración de hemoglobina (g/dL) 14,2±1,3 12,7±0,9 11,8±1,2 13,1±1,1 13,4±1,6
Valor hematocrito (%) 41,7±3,6 37,1±2,8 34,9±3,7 37,8±3,3 38,3±4,1
VCM (fl) 40,1±3,8 39,2±2,8 39,1±2,2 34,2±0,4 32,4±1,9
CCMH (%) 9.602±3.372 9.300±2.346 9,483±2.196 9.688±1.940 10.893±2.977
Recuento total de leucocitos /µl
Linfocitos 2.192±891 2.420±739 2.633±933 3.823±863 5.086±1.419
Monocitos 414±373 308±172 302±124 266±192 348±175
Neutrófilos 6.824±2.757 6.448±2.128 6.338±1.849 5.501±1.346 5.315±2.437
Eosinófilos 0 30±34 21±38 48±53 115±88
Basófilos 14±78 41±44 29±50 11±29 12±2

Datos obtenidos de Feldman, B. F.; Zinki, J. G. y Jain, N. C. (2000).

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Tabla III. Rangos hematológicos de normalidad para el caballo

Parámetros Razas de “Sangre Caliente” Razas de “Sangre Fría”
(Basado en 147 caballos (Recogido de la literatura)
clínicamente normales)

Recuento de eritrocitos (x106/µL) 6,8-12,9 5,5-9,5
Concentración de hemoglobina (g/dL) 11,0-19,0 8,0-14,0
Valor hematocrito (%) 32,0-53,0 24-44
VCM (fl) 37,0-58,5 --
CCMH (%) 31,0-38,6 --
Recuento total de leucocitos/µl 5.400-14.300 6.000-12.000
Linfocitos 15.000-7.700 --
Monocitos 0-1.000 --
Neutrófilos 2.260-8.580 --
Eosinófilos 0-1.000 --
Basófilos 0-290 ---

Datos obtenidos de Feldman, B. F.; Zinkl, J. G. y Jain, N. C. (2000).

celular se mantiene intacta. Dado que el se incluye el recuento de eritrocitos, el valor
EDTA puede causar pseudotrombocitopenia hematocrito, la concentración de la hemo-
(Hinchcliff et al., 1993) se puede recoger globina, el volumen corpuscular medio
también un tubo adicional en citrato sódico (VCM), la concentración corpuscular media
para asegurar la fiabilidad del recuento pla- de hemoglobina (CCMH), el recuento total
quetario. El análisis debe realizarse tan y diferencial de leucocitos, el recuento de
pronto como sea posible tras la recogida, plaquetas y el estudio de la morfología celu-
puesto que los componentes celulares de la lar en las tres líneas.
sangre sufren cambios degenerativos a las Los recuentos celulares de eritroci-
pocas horas. Si el examen no puede realizar- tos, leucocitos y plaquetas se pueden reali-
se rápidamente es mejor hacer una extensión zar de forma manual con cámara hemocito-
sanguínea y adjuntarla al tubo de sangre métrica de Neubauer y distintos diluyentes
para asegurar, al menos, que los cambios o bien de forma automatizada mediante
que se obervan en la extensión no son varia- contadores celulares (véase a continuación)
ciones provocadas por el almacenaje. que han aumentado la fiabilidad de los
El hemograma comprende la cuanti- resultados obtenidos y disminuido el tiempo
ficación de los componentes sanguíneos, así empleado en el análisis. El número de pla-
como la observación de las alteraciones en quetas en el caballo es relativamente bajo,
su composición o morfología. En su estudio comparado con el de otras especies (Fig. 1).

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ictericia, hemólisis o lipemia. Éste es el
método considerado goal standard para
esta determinación.
El valor hematocrito es el parámetro
más fiable del hemograma al estar sujeto a
menor error técnico que el recuento eritro-
citario y la concentración de hemoglobina.
Sin embargo, es un parámetro muy poco
estable en el animal, especialmente en razas
equinas muy excitables. La contracción
esplénica, cuando se produce, hace que en
Fgura 1. Plaquetas 100X, Diff-Quick. cuestión de minutos entre “en masa” en el
torrente circulatorio un gran reservorio de
El recuento manual en cámara lleva eritrocitos que normalmente están secues-
asociado un error que puede oscilar entre el trados en este órgano (pueden producirse
10-25%, según la serie celular. Con la utili- incrementos superiores al 15%).
zación de los métodos electrónicos los Los contadores hematológicos elec-
recuentos pueden verse sometidos a gran- trónicos dan un valor hematocrito al que se
des errores sobre todo si no se realiza un le denomina packed cell volumen (PCV),
control diario y una calibración periódica
que se calcula matemáticamente a partir del
del analizador.
número de eritrocitos que el aparato detecta
y de su tamaño (VCM).
VALOR HEMATOCRITO
CONCENTRACIÓN DE HEMOGLOBINA
Este parámetro es especialmente
útil en el caballo puesto que permite valo-
La hemoglobina se determina espec-
rar y controlar el estado de hidratación de
un animal con síntomas de cólico, proceso trofotométricamente mediante el método de
que es frecuente en esta especie. El valor la cianometahemoglobina. Los contadores
hematocrito se define como el volumen hematológicos actualmente disponibles en
que ocupan los eritrocitos contenidos en el mercado también utilizan este método.
100 ml de sangre (expresado en porcenta- La hemoglobina ocupa aproximada-
jes). Se obtiene al centrifugar la sangre con mente un tercio del volumen eritrocitario;
anticoagulante en un capilar de microhe- por lo tanto, en la mayor parte de las mues-
matocrito para conseguir la separación de tras sanguíneas, el valor que se obtenga
ésta en sus tres componentes principales. dividiendo el hematocrito por tres se apro-
La sangre se ha de centrifugar aproxima- ximará al contenido de hemoglobina en el
damente entre 12.000-15.000 rpm durante animal.
5’. En la parte distal del tubo se acumulan Cuando las muestras presenten hemó-
los glóbulos rojos, separados del plasma lisis, lipemia o un alto número de cuerpos de
por una capa delgada blanco-grisácea que Heinz, hay que tener cuidado en la interpre-
incluye los leucocitos y las plaquetas. En tación del parámetro, puesto que en estas
la parte superior la apariencia macroscópi- situaciones varían las propiedades ópticas de
ca del plasma, permite obtener informa- la sangre y las lecturas que se realizan de la
ción adicional al poder detectar si existe hemoglobina no son fiables.

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VOLUMEN CORPUSCULAR MEDIO importante del hemograma que sirve para
Y CONCENTRACIÓN MEDIA identificar anormalidades no documentadas
DE HEMOGLOBINA CORPUSCULAR en los valores cuantitativos obtenidos. La
lectura de la extensión de sangre se ha de
El VCM da idea del tamaño medio de hacer de forma sistematizada para evitar
los eritrocitos. Los equinos tienen un VCM pasar por alto algún detalle importante.
de 44-54 fL. LA CMHC expresa la relación A pocos aumentos, utilizando el
entre el peso de la hemoglobina y el volumen objetivo de x10 se observan los bordes de la
de los eritrocitos y es un parámetro muy preparación para buscar parásitos, células
semejante en todas las especies domésticas. parasitadas, grandes células atípicas y agre-
Los nuevos contadores hematológicos de gación plaquetar o leucocitaria. En esta
rayo láser miden el VCM automáticamente, zona de la extensión las céllulas suelen estar
y el valor de la CMHC lo miden directamen- deformadas o incluso rotas.
te del anàlisis célula a célula, aunque tam- La zona adecuada para realizar el
bién se puede calcular matemáticamente: recuento diferencial es aquélla en la que los
eritrocitos están muy cercanos, tocándose
VCM (fl) = PCV% : n.º eritrocitos x106 /µl X 10 pero sin llegar a superponerse. En el cuerpo
CMHC (g/dl) = Hb (g/dl): PCV% x 100 de la preparación las células tienden a amon-
tonarse, siendo difícil apreciar los detalles.
Estos parámetros, que principalmente Con el objetivo de x40 se puede
en pequeños animales ayudan a valorar la res- obtener una impresión del recuento de leu-
puesta medular frente a las anemia, son menos cocitos (bajo, normal o alto) y podríamos
útiles en la especie equina puesto que, a dife- realizar el recuento diferencial leucocita-
rencia de los primeros, en el caballo no se pro- rio, aunque ciertas células se deben identi-
duce la liberación de eritrocitos inmaduros y ficar con el objetivo de inmersión. Final-
nucleados en sangre ante una anemia. El mente, con este último objetivo se lleva a
VCM y la CCMH se consideran indicadores cabo el diferencial leucocitario, se examina
poco sensibles de regeneración periférica, la morfología celular y se realiza, si es
puesto que se requiere de un gran número de necesario, una estimación del número de
eritrocitos macrocíticos e hipocrómicos para plaquetas.
detectar modificaciones en sus valores. El
VCM en un caballo anémico podría aumentar Serie eritrocitaria
algo, antes de que el valor hematocrito se
incremente (Weiser et al., 1983). Este cambio, Los eritrocitos del caballo tienen
de pequeña magnitud, se demuestra con forma discoide bicóncava, y un tamaño de
mayor claridad cuando se utilizan analizado- 5-6 µm de diámetro. De forma fisiológica
res automáticos que producen eritrogramas se observa la presencia de rouleaux o “pilas
donde se muestra la distribución del tamaño de moneda”, hileras de eritrocitos super-
de los eritrocitos (Brown and Darien, 1989). puestos los unos a los otros (Fig. 2), lo que
genera que la sangre de esta especie sedi-
FROTIS SANGUÍNEO mente de forma rápida y que los eritrocitos
se separen más rápidamente del plasma en
La evaluación morfológica celular las muestras anticoaguladas, que en otras
en la extensión de sangre es una parte especies.

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de organelas como ribosomas y
mitocondrias.
• Esquistocitos. Son fragmentos de eri-
trocitos que se producen por desgarro
de éstos, debido a un trauma intra-
vascular. Aparecen en animales con
neoplasias muy vascularizadas
(hemangiosarcoma), con coagula-
ción intravascular diseminada o bien
en las deficiencias por hierro.
• Acantocitos. Son eritrocitos espicu-
Fgura 2. Pilas de moneda 100X, Diff-Quick.
lados que presentan una serie de pro-
yecciones de superficie distribuidas
Entre los cambios morfológicos que de forma no uniforme. Se producen
se pueden observar en los eritrocitos equi- por alteraciones en la concentración
nos (Latimer y Andreasen, 2002; Prasse et de fosfolípidos-colesterol a nivel de
al., 1981; Korbutiak y Schneiders, 1994) la membrana eritrocitaria.
destacamos los siguientes:
• Equinocitos (crenación). Son eritro-
citos que presentan numerosas pro-
• Hipocromia. Son eritrocitos con una
yecciones en la superficie, cortas,
zona aumentada de palidez central,
puntiagudas y uniformes en cuanto
indicativos de una deficiencia de
al tamaño y la forma. Su formación
hierro. En el caballo, la pérdida cró-
puede ser artefactual o estar asociada
nica de sangre a través del tracto
a enfermedad renal, linfoma, picadu-
gastrointestinal, producida por para-
ra de serpiente o producirse en res-
sitación, es probablemente la causa
más frecuente de la deficiencia en puesta al ejercicio (Weiss et al.,
hierro. 1994) asociado aparentemente con
• Anisocitosis. Indica la presencia de alteraciones electrolíticas, especial-
eritrocitos de diferentes tamaños. mente hiponatremia.
Tiene poca importancia para el clíni- • Esferocitos. Son eritrocitos que se
co porque tan sólo informa de la tiñen de una tonalidad más intensa a
existencia de algún cambio morfoló- la normal porque tienen un área de
gico que debe ser detectado. superficie disminuida respecto al
• Policromasia. No se observa en los volumen, como resultado de una
frotis sanguíneos de caballo puesto fagocitosis parcial producida por la
que, como se ha mencionado ante- presencia de anticuerpos o comple-
riormente, los équidos no liberan de mento en su superficie. Su presencia
forma temprana eritrocitos inmadu- en la sangre equina no se detecta con
ros de la médula ante una situación facilidad al ser los eritrocitos equi-
de anemia. Indica la presencia de nos más pequeños y no tener una
eritrocitos jóvenes que han sido palidez central tan evidente como los
liberados de forma temprana y que eritrocitos caninos. Su presencia
se tiñen de tonalidad más azulada a sugiere una anemia hemolítica inmu-
las células maduras por la presencia nomediada, producida en el potro

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ocasionalmente como consecuencia de moneda, características de la san-
de la isoeritrolisis neonatal. gre de esta especie. Para ello se mez-
• Cuerpos de Heinz. Son inclusiones cla una parte de sangre con 4-5 par-
pequeñas, eccéntricas, de hemoglo- tes de solución salina, que deshará
bina precipitada que protruyen lige- las pilas, pero no la aglutinación.
ramente desde el margen celular, • Cuerpos de Howell-Jolly. Son rema-
provocadas por un daño oxidativo nentes nucleares, pequeños, redon-
debido a la exposición a agentes oxi- dos y de color púrpura. Un incre-
dantes. Se forman por la desnaturali- mento de su concentración se produ-
zación oxidativa de la hemoglobina ce en los casos de anemias regenera-
y su presencia hace que las células tivas, esplenectomía y supresión de
sean menos deformables y, por tanto, la función esplénica.
más susceptibles a la hemólisis. • Inclusiones. Babesia caballi, Theile-
Cuando se tiñen con una tinción vital ria equi y Ehrlichia spp.
como el nuevo azul de metileno,
aparecen de color azul, más eviden- Serie leucocitaria
tes que en las tinciones Roma-
nowsky. Se pueden forman por la La morfología de los leucocitos equi-
ingesta de plantas de la familia nos es similar en muchos aspectos a la de
Allium (cebollas y ajos silvestres), otras especies. Las membranas nucleares de
de hojas secas de arce (Acer los neutrófilos son más irregulares que las
rubrum), o como consecuencia de la de otras especies, dándole a estos núcleos
administración de fenotiacina o azul una apariencia multilobulada que no debe
de metileno (Carlson, 2002; Boyer et confundirse con hipersegmentación. Los
al., 2002). monocitos son similares a los de otras espe-
• Eccentrocitos. Son eritrocitos que cies. Aparecen tanto linfocitos pequeños
tienen una zona del citoplasma clara como de tamaño moderado. Los linfocitos
y la restante ocupada por Hb con- son células de vida larga (de semanas a
densada. Son también indicativos de años) que recirculan entre los tejidos linfoi-
una exposición a agentes oxidantes y des y la sangre. El eosinófilo es característi-
se cree que se forman por alteracio- co, debido a sus múltiples y grandes gránu-
nes de la membrana eritrocitaria los de color rosa-anaranjado. Los basófilos
(Stockham et al., 1994). se reconocen con facilidad por sus gránulos
• Aglutinación. Los eritrocitos apare- múltiples de color púrpura (Figs. 3 a 7).
cen agregados de forma irregular,
como racimos de uva, indicativo de • Cambios tóxicos. Los PMNs tóxicos
anemia hemolítica inmunomediada presentan cambios morfológicos
(AHIM), que puede estar inducida causados normalmente por infeccio-
por la administración de fármacos, nes bacterianas. Entre estos cambios
causada por infecciones por Clostri- está la granulación tóxica. Su pre-
dium o bien ser idiopáticas. Es sencia en el caballo sugiere infeccio-
importante distinguir esta alteración nes por bacterias gram negativas o
en la que los eritrocitos se agregan anomalías intestinales que generan
de forma desorganizada, de las pilas una absorción alta de endotoxinas.

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Fgura 3. Linfocito 100X, Diff-Quick. Fgura 6. Eosinófilo 100X, Diff-Quick.

Fgura 4. Monocito 100X, Diff-Quick. Fgura 7. Basófilo 100X, Diff-Quick.

cinco ó más lóbulos unidos por fila-
mentos finos.
• Linfocitos reactivos. Presentan una
cantidad aumentada de citoplasma
azul oscuro y, en ocasiones, una
zona perinuclear clara. Se producen
cuando hay estimulación antigénica.

En ocasiones se pueden observar en
las extensiones de sangre mórulas de Ehrli-
chia ewengi, que aparecen en PMNs y en
Fgura 5. Polimorfonuclear neutrófilo 100X, Diff- ocasiones en los eosinófilos; o bien E. risticii,
Quick. que se presenta en monocitos y linfocitos.
Aparecen como cuerpos de inclusión pleo-
• Hipersegmentación. Es el resultado mórficos de color azul grisáceo a azul oscuro.
de un tiempo de tránsito aumentado
de los neutrófilos en sangre; la Interpretación leucocitaria
mayoría de veces por administración
de corticoides o su liberación endó- Durante el primer año de vida el
gena. El núcleo del PMN presenta recuento total de leucocitos no cambia de

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forma significativa, pero si lo hacen los • Leucocitosis en respuesta a corticoi-
diferentes tipos leucocitarios. A medida que des, se caracteriza por neutrofilia
el potro madura, el recuento de neutrófilos (normalmente sin desviación a la
tiende a disminuir y el de linfocitos y eosi- izquierda) y linfopenia, con eosino-
nófilos a aumentar (alcanza la meseta a los penia. El recuento total de leucocitos
seis meses). Desde los ocho meses hasta no suele exceder de 20.000/µl. La
uno o dos años, la relación N:L es de 1:1; respuesta está causada por la admi-
luego el número de linfocitos disminuye nistración de corticoides exógenos o
lentamente y la ratio N:L aumenta gradual- su liberación endógena y se produce
mente hasta alcanzar 2:1 en caballos de entre las dos y cuatro horas, desapa-
mayor edad. reciendo a las 24 horas de haberse
En el caballo se pueden observar tres eliminado el estímulo.
respuestas leucocitarias: Cuando se presenta esta respuesta
hay que considerar también que el
• Leucocitosis fisiológica, bastante fre- animal puede tener un proceso infla-
cuente en caballos de menos de dos matorio crónico, donde hay neutrofi-
años. En esta situación se incrementa lia con estrés asociado que genera
el número de PMNs maduros y/o lin- linfopenia. Otras pruebas laborato-
focitos (Rossdale et al., 1982). Se riales confirmarán o descartarán una
produce por la liberación de adrena- u otra situación.
lina como consecuencia del temor, la Otras causas de linfopenia, pueden
excitación o el ejercicio físico, que ser las infecciones sistémicas agudas,
provocan un aumento de la presión las enfermedades víricas agudas (her-
sanguínea y la frecuencia cardíaca y pesvirus, influenza) o la pérdida de
generan una contracción esplénica. linfocitos en las cavidades corporales.
La respuesta se produce en segundos • Leucocitosis de la respuesta inflama-
y se observa sobre todo en animales toria, el indicador más sensible y espe-
muy nerviosos. Es transitoria, puesto cífico de inflamación en el caballo es
que tras 20-30’ de producido el estí- la presencia de un número alto de neu-
mulo, la cifra de PMNs vuelve a la trófilos inmaduros circulantes. En una
normalidad. La de linfocitos tarda respuesta inflamatoria se puede ver
aproximadamente una hora. leucocitosis, leucopenia o un número
Otras situaciones en las que se normal de leucocitos circulantes,
puede producir neutrofilia son en las dependiendo del equilibrio entre la
leucocitosis mediadas por corticoi- demanda tisular y/o el secuestro indu-
des o las generadas en procesos cido por endotoxinas y el nivel de pro-
inflamatorios, si bien en este último ducción de PMNs en la médula. Si la
caso la neutrofilia es persistente y producción medular excede el nivel de
no transitoria como la de la leucoci- demanda tisular o de secuestro se pro-
tosis fisiológica. duce una leucocitosis y neutrofilia. Si
Las linfocitosis se pueden generar se genera la situación inversa el resul-
también en casos de estimulación anti- tado es una leucopenia con neutrope-
génica crónica (enfermedades víricas) nia. Si, finalmente, la demanda o el
o en la insuficiencia adrenocortical. secuestro son similar a la producción

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de la médula ósea, el recuento de suelen inducir eosinofilia (Jain,
leucocitos y neutrófilos podría ser 1986); sí lo hace en cambio la migra-
normal. ción larvaria, sobre todo si es masiva.
En la especie equina, la leucopenia y
neutropenia se producen con fre- Fibrinógeno
cuencia en problemas gastrointesti-
nales en individuos adultos (salmo- El fibrinógeno es una proteína de
nelosis, impactación grave, estran- fase aguda que suele utilizarse junto con el
gulación, etc.) y en los problemas leucograma para valorar la inflamación. Su
gastrointestinales y las septicemias, determinación resulta especialmente útil
normalmente por microorganismos cuando el proceso inflamatorio no se acom-
gram negativos, en potros. En estas paña de cambios en el leucograma. No obs-
situaciones se produce una demanda tante, no todos los procesos inflamatorios
intensa de neutrófilos por parte de cursan con aumento de fibrinógeno, por lo
los tejidos y/o una endotoxemia que un valor normal de dicho parámetro no
grave que genera, marginación de permite descartar la inflamación. El interva-
los neutrófilos en los pequeños lo de referencia en équidos va de 100-400
vasos. mg/dl. Su concentración plasmática empie-
En estos casos es frecuente observar za a aumentar a las 48 horas del inicio de la
neutrófilos tóxicos, debido a la parti- inflamación y alcanza un pico máximo (que
cipación de bacterias y sus toxinas puede exceder los 1.000 mg/dl) entre los
en la patogenia de la leucopenia. cinco y siete días.
Otras causas de neutropenia, acom-
pañada con frecuencia de linfopenia, Aportaciones
son las enfermedades víricas agudas de los nuevos analizadores
como la arteritis, la infección por
herpesvirus 1 -EHV 1- y la anemia La necesidad de producir resultados
infecciosa equina (Duncan y Prasse, fiables, que a su vez sean efectivos en tiem-
1986). La neutropenia se produce po y coste, ha impulsado el desarrollo de
también en la ehrlichiosis granulocí- sistemas hematológicos automatizados,
tica (Madigan y Gribble, 1987) y puesto que el recuento manual tiene poca
durante las primeras fases de la ehr- precisión (ICSH, 1994). Los nuevos anali-
lichiosis monocítica. zadores hematológicos tienen una alta
La monocitosis se produce durante reproductividad y exactitud respecto a los
la inflamación crónica, especialmen- recuentos manuales puesto que evalúan
te aquellas que se asocian a necrosis miles de células de cada muestra.
tisular (Jain, 1986; Tyler et al., En 1956, durante la Conferencia
1987). Anual Electrónica de Chicago, USA, se pre-
La situación de eosinofilia se produ- sentó un sistema de recuento basado en una
ce en enfermedades de origen alérgi- medida de resistencia o conductividad
co (dermatitis por Culicoides) o para- (impedancia). Esta tecnología utiliza el prin-
sitario (vermes pulmonares y ásca- cipio de que las células son malas conducto-
ris). Los estados intraluminales de ras eléctricas. En estos instrumentos la san-
los parásitos gastrointestinales no gre se diluye en un medio eléctricamente

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conductor y se la fuerza a pasar a través de método de recuento denominado anàlisis
un pequeño orificio entre dos electrodos. cuantitativo del buffy-coat. Este sistema se
Las células desplazan una pequeña cantidad basa en que la diferente densidad de cada
de líquido conductor e incrementan la resis- grupo de células sanguíneas hace que se
tencia eléctrica causando un cambio de coloquen en bandas diferenciadas, cuando la
potencial entre los electrodos, con la consi- sangre se coloca en un tubo de hematocrito
guiente producción de un pulso, en donde la y se somete a centrifugación. La anchura de
amplitud es proporcional al tamaño de la cada banda refleja el número de células pre-
célula y la cantidad de impulsos, al número sentes en cada población.
de células. La citometría de flujo es el último
Los eritrocitos y plaquetas se sepa- avance en la tecnología de analizadores
ran basándose en el tamaño y los leucocitos hematológicos. Dentro de ellos, los que uti-
se determinan tras lisar los eritrocitos con lizan doble ángulo de luz láser son los más
unas gotas de saponina, dejando los núcleos novedosos. En este sistema, las células
celulares libres (que es lo que realmente se pasan a través de un haz de luz láser que es
cuenta). Estos analizadores permiten dife- absorbido y dispersado por la célula. Las
renciar dos poblaciones leucocitarias que si interrupciones en el haz de luz se utilizan
bien no facilitan datos fiables en las espe- para determinar el recuento celular, mien-
cies canina y felina respecto al diferencial tras que los cambios en la dispersión de la
leucocitario (Pastor et al., 1999a, 1999b), sí luz se utilizan para determinar el tamaño
lo hacen en el caso de la especie equina celular y su complejidad interna o densidad.
(Pastor et al., 1992). Los modernos analizadores de rayo
La anchura de distribución del histo- láser con tinciones de peroxidasa y basofilia
grama de hematíes (RDW) informa sobre el permiten realizar el diferencial leucocitario
grado de anisocitosis eritrocitaria presente en prácticamente todas las especies domés-
en la muestra. En veterinaria no se dispone ticas con gran precisión y exactitud (Tved-
de suficientes datos publicados para facili- ten y Haines, 1994; Tvedten et al., 2000)
tar la interpretación de la RDW; sin embar- (Fig. 8).
go, sí se ha confirmado éste como un pará- Una aportación novedosa y de apli-
metro útil para evaluar anemias por defi- cación práctica importante, en un futuro
ciencia en hierro –muy poco frecuente en mediato, es la información que proporcio-
los équidos–, eritropoyesis activa y, en nan estos analizadores de rayo láser sobre la
muestras almacenadas, casos en los cuales presencia de reticulocitos circulantes. Como
se produce un aumento de la anisocitosis se ha mencionado anteriormente, la médula
(Weiser, 1982; Tvedten, 1993). ósea del caballo responde a la pérdida de
El histograma de la concentración de sangre incrementando la eritropoyesis y
hemoglobina y el ancho de distribución del produciendo reticulocitos; sin embargo,
mismo (HDW) proporcionan información éstos no son liberados durante la homeosta-
sobre la anisocromía de la muestra. Sin sis o las situaciones de anemia suave o
embargo, su utilidad e interpretación en moderada (Jeffcott, 1977; Fernández y
medicina veterinaria debe evaluarse todavía, Grindem, 2000).
debido a que sólo son capaces de determi- Hasta muy recientemente, la tinción
narla los analizadores de rayo láser. A prin- manual, incubando la sangre con un coloran-
cipios de la década de los 80 se desarrolló el te vital (como el nuevo azul de metileno),

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Fgura 8. Ejemplo de diferencial leucocitario obtenido con el ADVIA 120 con sangre de caballo.

específico para ácidos nucléicos, y el recuen- la serie roja, es decir, del grado de anisoci-
to manual de los eritrocitos que contienen el tosis que muestran los eritrocitos (RDW),
precipitado de colorante (Deiss y Kurth, de los citogramas eritrocitarios o de los his-
1970; Fernández y Grindem, 2000), no per- togramas de la distribución del volumen
mitían detectar reticulocitos en el caballo, –parámetros todos ellos que aportan los
incluso cuando el animal presentaba una ane- nuevos analizadores hematológicos (Tved-
mia grave (Smith y Agar, 1976). ten y Weiss, 2000).
Por tanto, la forma, de comprobar el Mediante la observación de biopsias
grado de regeneración eritropoyética en la de médula ósea (Lumsden et al., 1975; Eas-
especie equina se limitaba al anàlisis del ley, 1985; Radin et al., 1986; Malikides et
tamaño de los eritrocitos, es decir, de su al., 2000) donde se determina la relación
volumen (VCM) –indicador tardío de rege- mieloide:eritroide (la relación normal es de
neración–, de la anchura de distribución de 0,5:1,5), asumiendo que el comportamiento

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mieloide es normal, se puede también valo- ángulos (el bajo que mide el tamaño de la
rar el grado de respuesta eritropoyética. Una célula y el alto que mide su cantidad de
ratio < a 0,5 supone que hay un incremento hemoglobina), mediante la detección de las
en la serie eritroide y, por tanto, una anemia células que fluorescen, tras incubarlas con un
regenerativa. Otra forma de valorar la eritro- colorante de ácidos nucléicos catiónico, oxa-
poyesis en esta especie es contar los reticulo- zina 750 (Tvedten, 1993; Weiss, 2002), que
citos mediante preparaciones de médula ósea tiñe las células de acuerdo a su cantidad de
teñidas con nuevo azul de metileno (Schalm, ARN. Esto permite que el analizador informe
1975). Un caballo normal tiene hasta un 3% sobre los reticulocitos con baja (reticulocitos
de reticulocitos en médula ósea y su incre- maduros), media (reticulocitos de madurez
mento sugiere un aumento de la eritropoye- intermedia) y alta absorbancia (reticulocitos
sis (Lassen y Swardson, 1995; Schalm, inmaduros) (Fig. 9).
1980; Tablin y Weiss, 1985). Estos métodos automatizados identi-
En la actualidad, al aumentar la sensi- fican la proporción de células que contienen
bilidad de los analizadores hematológicos ácido nucléico en > 40.000 eritrocitos (Coo-
automatizados más actuales, como el ADVIA per et al., 2005), dependiendo de la densidad
120 que cuantifican aquellos eritrocitos que eritrocitaria de la muestra, en lugar de en
contienen ácidos nucléicos por citometría de 1.000 eritrocitos como sucede en el método
flujo, se ha detectado la presencia de reticulo- manual. Además, la medida directa del
citos en sangre de équidos con anemia grave tamaño y concentración de hemoglobina de
(Weiss y Moritz, 2003). un gran número de reticulocitos, que llevan
Este analizador determina las propor- a cabo estos contadores, permite analizar de
ciones de reticulocitos por la combinación de forma automatizada la variación de estos
la aborción de la luz y su dispersión en dos parámetros, lo que no era posible realizar

Fgura 9. Ejemplo de recuento de reticulocitos. Se identifican varias poblaciones según la cantidad de grá-
nulos. EjeY = densidad celular, EjeX = tamaño celular.

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con la determinación manual de reticuloci- 3. Boyer JD, Breeden DC and Brown DL.
tos y sólo en una medida limitada en los apa- (2002). Isolation, identification, and cha-
ratos que utilizan un sistema de funciona- racterization of compounds from Acer
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los que se le impuso un tratamiento con eri- volume and urinary electrolyte clearance
tropoyetina se comprobó el incremento del in ponies. Am J Vet Res, 51: 571-576.
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HDWr –anchura de distribución del conteni- 8. Cooper C, Sears W and Bienzle D (2005).
do en hemoglobina de los reticulocitos). Reticulocyte changes after experimental
En conclusión, el examen laboratorial anemia and erythropoietin treatment of hor-
de la sangre equina proporciona una informa- ses. J Appl Physiol 99: 915-921.
ción que contribuye a reducir la lista de diag- 9. Cuenca R, Pastor J, Viñas L y Lavín S
nósticos potenciales o, en menor número de (1993). El hemograma en clínica equi-
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