Comparaison des Profils des Alvéolites Lymphocytaires en
Immunocytochimie et en Cytométrie en Flux dans le Lavage
Bronchio...
Plan
Introduction : les pneumopathies interstitielles diffuses
Objectif
Patients et méthodes
Résultats et discussion
Concl...
Les pneumopathies interstitielles diffuses (PID)
Définition des PID
• Groupe hétérogène de pathologies
pulmonaires diffuse...
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Pneumopathies interstitielles diffuses (PID)
Pneumopathies interstitielles idiopathiques
NSIP
COP RB-ILD LIPUIP
AIP DIP
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Pneumopathies interstitielles diffuses (PID)
Pneumopathies interstitielles idiopathiques
ATS/ERS consensus ERS 2012
Les ...
Épidémiologie:
• En Tunisie:
2000-2005 : 1707  7.2% des motifs d’hospitalisation.
Âge moyen = 51 ans.
Sex-ratio = 0,51.
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Les pneumopathies interstitielles diffuses (PID)
Physiopathologies des
PID
• Mécanismes méconnus:
• Origine infectieuse
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Démarche diagnostique:
• Processus dynamique résultant
d’une concertation multi-disciplinaire
• Peut prendre du temps
• Pe...
Démarche diagnostique:
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Endoscopie bronchique et Lavage Broncho-
Alvéolaire
Imagerie médicale
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Démarche diagnostique: Interrogatoire et ATCD
• L’interrogatoire joue un rôle clé:
• Recherche de signes d’orientation
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• Bilan immunologique:
systématiquement en cas:
Atteinte extra-respiratoire
Une maladie systémique était suspectée
Selon C...
Démarche diagnostique: Examen Clinique, Bilan biologique et
explorations respiratoires
Imagerie médicale
Radiographie stan...
Le lavage broncho-alvéolaire
Outil diagnostique peu invasif d’exploration du
poumon profond.
Informations fiables sous cou...
• Détection :
Des cellules (inflammatoire, néoplasiques …)
Du matériel acellulaire anormal (lipoprotéines)
• Mise en évi...
Réalisation et interprétation du LBA:
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• Endoscopie bronchique
• Instillation du liquide isotonique stérile par
fraction...
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Les pneumopathies interstitielles diffuses (PID)
Analyse du LBA chez un
sujet adulte, sain et non-
fumeur
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Orientation diagnostique selon le profil cellulaire trouvéCertitude diagnostique
Les pneumopathies infectieuses
Les h...
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Les pneumopathies interstitielles diffuses (PID)
Immunocytochimie
• Détection in situ d’un antigène à l’aide d’anticorp...
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Les pneumopathies interstitielles diffuses (PID)
Peroxydase:
Décomposition de l’H2O2
Présente de façon endogène dans
ce...
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Les pneumopathies interstitielles diffuses (PID)
Systèmes d’amplification:
Système d’amplification polymérique:
Conjugu...
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Les pneumopathies interstitielles diffuses (PID)
Apport de l’immunocytochimie :
Diagnostic en: Oncologie, Pneumopathies...
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Les pneumopathies interstitielles diffuses (PID)
Cytométrie en Flux
Analyse qualitative et quantitative de
multiples pa...
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Les pneumopathies interstitielles diffuses (PID)
Cytométrie en Flux
Champ d’application très large
Hématologie
Cancérol...
Comparaison du profil en immunocytochimie et en
Cytométrie en flux des alvéolites lymphocytaires dans
le lavage bronchiolo...
32 cas d’alvéolites lymphocytaires
Sex-ratio (H/F) = 0,44
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Cytométrie en flux
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Richesse cellulaire Cellule de Malassez
Cellularité normale: 150-300 000 cellule/ml
Vitalité cellulaire
Bleu de Trypan
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Cytocentrifugation
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lames
Cytochambres maintenues contre des lames Super Frost par des cytoclips méta...
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Coloration Trois colorations standards: MGG – Perls - Papanicolaou
MGG
Papanicolaou
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Inclusion du culot
dans de la paraffine
Centrifugation 1500 tours/min ( 3 min)
Fixation AFA ( 3 heures)
Cassette à incl...
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Marquage
immunocytochimique
Marquage sur des étalements cytologiques frais
Marquage sur des coupes incluses en paraffin...
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Méthodes : Protocole de marquage immunocytochimique
Étapes particulières aux coupes incluses en paraffine ( Cytoblocs)
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Blocage des peroxydases
endogènes
Incubation avec le H2O2à 3%
10 minutes
Lavage avec TBS
Trois bacs de 5 minutes chacun...
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Méthodes : Protocole de marquage par Cytométrie en flux
Centrifugation
1200 tours/min
10 minutes
100-200 µl de PBS au c...
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Hype-rcelluleire Normo-cellulaire Hypo-cellulaire
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Résultats et Di...
Macrophages Lymphocytes PNN PNE
45% 45%
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Lymphocytaire: moyenne 45% [18-78]
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Concluants Non concluants
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Problèmes d’acheminements et de
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Concluants Non concluants
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Concluantes Non concluantes
75%
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Hypo-cellularité du liquide?
Faible vitalité?
Résultats et...
Comparaison entre Immunocytochimie sur étalements et en Immunocytochimie
sur cytoblocs
4 cas discordants sur 8 cas
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Comparaison entre Immunocytochimie sur étalements et en
Cytométrie en flux
9 cas discordants sur 23 cas
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Immunocytochimi...
Comparaison entre Immunocytochimie sur cytoblocs et en Cytométrie
en flux
2 cas discordants sur 5 cas
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Immunocytochimie ...
• Mauvaise reproductibilité entre Immunocytochimie et Cytométrie en flux:
• Comparables à plusieurs études:
Comptage lymp...
Selon d’autres études
l’immunocytochimie énumère plus
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cytométrie en flux même si le LBA est
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Conclusion et Perspectives
Conclusions
• Deux techniques comparées non réalisées dans les
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Comparaison des Profils des Alvéolites
Lymphocytaires en Immunocytochimie et en
Cytométrie en Flux dans le Lavage Broncho-
Alvéolaire

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  1. 1. Comparaison des Profils des Alvéolites Lymphocytaires en Immunocytochimie et en Cytométrie en Flux dans le Lavage Bronchiolo-Alvéolaire 1 FACULTE DES SCIENCES DE TUNIS DEPARTEMENT DE BIOLOGIE HÔPITALABDERRAHMEN MAMI DE L’ARIANA LABORATOIRE D’ANATOMIE ET CYTOLOGIE PATHOLOGIQUE INSTITUT PASTEUR DE TUNIS LABORATOIRE D’HÉMATOLOGIE RÉPUBLIQUE TUNISIENNE, MINISTÈRE DE L’ENSEIGNEMENT ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE UNIVERSITE DE TUNIS EL MANAR Réalisé et présenté par: Rihem KASMI Soutenue devant: Président de Jury: Pr. MARRAKCHI Raja Examinateur : Pr. MEZNI Faouzi Encadreurs: Dr. MLIKA Mouna Dr. SAFRA Inès
  2. 2. Plan Introduction : les pneumopathies interstitielles diffuses Objectif Patients et méthodes Résultats et discussion Conclusions et perspectives 2
  3. 3. Les pneumopathies interstitielles diffuses (PID) Définition des PID • Groupe hétérogène de pathologies pulmonaires diffuses. • Caractéristiques histologiques: Atteinte de l’interstitium pulmonaire Espaces entre les cellules alvéolaires et les membranes basales endothéliales par de l’inflammation et de la fibrose • Autres structures: les lumières alvéolaires les bronchioles les vaisseaux 3
  4. 4. 4 Pneumopathies interstitielles diffuses (PID) Pneumopathies interstitielles idiopathiques NSIP COP RB-ILD LIPUIP AIP DIP ATS/ERS consensus ERS 2002 Les pneumopathies interstitielles diffuses (PID) Cause connue Connectivite, médicament, exposition Cause inconnue, entités bien déterminées Granulomatose Sarcoïdose l’alvéolite allergique l’histiocytose X
  5. 5. 5 Pneumopathies interstitielles diffuses (PID) Pneumopathies interstitielles idiopathiques ATS/ERS consensus ERS 2012 Les pneumopathies interstitielles diffuses (PID) Formes particulières HPCL, LAM, lipoprotéinose alvéolaire, PCIE Granulomatose Sarcoïdose Cause connue Connectivite, médicament, exposition Pneumopathies interstitielles idiopathiques inclassables Pneumopathies interstitielles idiopathiques rares Pneumopathies interstitielles idiopathiques majeures
  6. 6. Épidémiologie: • En Tunisie: 2000-2005 : 1707  7.2% des motifs d’hospitalisation. Âge moyen = 51 ans. Sex-ratio = 0,51. 6 Les pneumopathies interstitielles diffuses (PID) Prévalence 67-81/100 000 Incidence 26-32/100 000/an Âge moyen 51-69 ans Coultas et al. Am J Respir Crit Care Med 1994 Cas asymptomatiques non diagnostiqués Cas symptomatiques=10X Les pneumopathies interstitielles diffuses (PID)
  7. 7. 7 Les pneumopathies interstitielles diffuses (PID) Physiopathologies des PID • Mécanismes méconnus: • Origine infectieuse • Origine immunologique • Origine environnementale • Origine toxique. Facteurs génétiques Facteurs environnementales Poussières, fumées Agression Infections Tabagisme Radiation Facteurs immunologiques Autres maladies Lésions de l’épithélium alvéolaire Pneumopathie interstitielle Guérison Activation du processus de réparationPrédisposition génétique à une altération du processus de réparation 7
  8. 8. Démarche diagnostique: • Processus dynamique résultant d’une concertation multi-disciplinaire • Peut prendre du temps • Peut être révisé à tout moment lors du suivi 8 Les pneumopathies interstitielles diffuses (PID) Démarche diagnostique Radiologues PathologistesPneumologues
  9. 9. Démarche diagnostique: 9 Endoscopie bronchique et Lavage Broncho- Alvéolaire Imagerie médicale Radiographie standard du thorax TDM-HR Examen clinique Explorations respiratoires Examens biologiques Interrogatoire Histoire du patient Les pneumopathies interstitielles diffuses (PID)
  10. 10. Démarche diagnostique: Interrogatoire et ATCD • L’interrogatoire joue un rôle clé: • Recherche de signes d’orientation • Recherche d’une éventuelle exposition • Recherche d’ATCD à valeur dianostique Interrogatoire Histoire du patient 10
  11. 11. • Bilan immunologique: systématiquement en cas: Atteinte extra-respiratoire Une maladie systémique était suspectée Selon Cottin: recherche Anticorps anti-nucléaires Anticorps anti-peptides cycliques citrulinés Facteur rhumatoide. Recherche de précipitines justifiée si notion d’exposition à des antigènes organiques ou suspicion de PHS à l’interrogatoire • Examen clinique: • selon les dernières recommandations de la Société Française de Pneumologie, râles crépitants secs et bilatéraux reproduisant le bruit du « velcro » constants et précoces • Hippocratisme digital présent dans près de 50% des cas. Démarche diagnostique: Examen Clinique, Bilan biologique et explorations respiratoires Examen clinique Examens biologiques Explorations respiratoires Explorations respiratoires Gazométrie arterielle Hypocapnie au repos: plus fréquente et plus précoce. Test de marche de 6 minutes Selon Cottin, moyen fiable pour évaluer la fonction respiratoire au cours de l’exercice. Exploration fonctionnelle respiratoire Selon les recommandations de la Société Française de Pneumologie: il faut évaluer la CVF et la TLco chez tout patient présentant une PID au moment du diagnostic à la recherche d’un trouble ventilatoire restrictif et d’une diminution de la Tlco, souvent seules anomalies détectées lors du diagnostic précoce de PID. 11
  12. 12. Démarche diagnostique: Examen Clinique, Bilan biologique et explorations respiratoires Imagerie médicale Radiographie standard du thorax TDM-HR Radiographie du thorax Selon Brauner: 90%: diagnostic positif  Images pulmonaires anormales diffuses dont l’évolution est supérieure à 3 mois. 10% des cas infra-radiographiques: le diagnostic positif de PID repose sur la TDM + LBA + EFR. Diagnostic correct avec haute probabilité que dans 25% des cas Tomodensitométrie thoracique • Place importante à toutes les étapes de prise en charge. • Elle permet: • Diagnostic positif et étiologique des PID • Surveillance évolutive et pronostique. • Éviter le recours aux méthodes invasives de diagnostic de PID, telles que la biopsie, et d’éviter de ce fait le risque non négligeable de complications. • Certaines études ont mis en évidence un apport contributif de la TDM dans le choix du site de lavage en l’orientant vers les zones à priori les plus lésées. 12
  13. 13. Le lavage broncho-alvéolaire Outil diagnostique peu invasif d’exploration du poumon profond. Informations fiables sous couvert d’une technique rigoureuse: Endoscopie bronchique. Analyse dans le laboratoire d’anatomie pathologique. Analyse de la cytologie alvéolaire normale Corrélation avec les données radiologiques 13 Les pneumopathies interstitielles diffuses (PID) Endoscopie bronchique et Lavage Bronchiolo-Alvéolaire
  14. 14. • Détection : Des cellules (inflammatoire, néoplasiques …) Du matériel acellulaire anormal (lipoprotéines) • Mise en évidence de nombreux agents pathogènes (Pneumocystis carinii …) • Suivi de l’évolution du processus pathologique • Évaluation la réponse à un traitement 14 Les pneumopathies interstitielles diffuses (PID) Acte non invasif, rapide, peu onéreux Entreprendre devant tout signe de PID avant d’envisager d’autres moyens diagnostiques plus invasifs Biopsie Trans-pariétale ou Trans- bronchique Biopsie chirurgicale Le lavage broncho-alvéolaire
  15. 15. Réalisation et interprétation du LBA: 15 • Endoscopie bronchique • Instillation du liquide isotonique stérile par fraction (40-50 ml). Récupération du liquide dans des aliquots  LBA • Pas de contre-indication. • Complications: Douleurs thoraciques dues au liquide résiduel du LBA dans les alvéoles. Pneumothorax. Les pneumopathies interstitielles diffuses (PID) Le lavage broncho-alvéolaire
  16. 16. 16 Les pneumopathies interstitielles diffuses (PID) Analyse du LBA chez un sujet adulte, sain et non- fumeur
  17. 17. 17 Orientation diagnostique selon le profil cellulaire trouvéCertitude diagnostique Les pneumopathies infectieuses Les hémorragies intra-alvéolaires Les lipoprotéinoses alvéolaires Les pneumopathies chroniques à éosinophiles Les tumeurs Alvéolites à polynucléaires neutrophiles Alvéolites macrophagiques Alvéolites lymphocytaires Alvéolites à polynucléaires éosinophiles Immunocytochimie Cytométrie en flux Les pneumopathies interstitielles diffuses (PID) Lavage Broncho-Alvéolaire
  18. 18. 18 Les pneumopathies interstitielles diffuses (PID) Immunocytochimie • Détection in situ d’un antigène à l’aide d’anticorps spécifiques • Visualisation du complexe immun à l’aide d’un marqueur morphologique: • Plusieurs méthodes possibles Mise en évidence d’une activité enzymatique. la peroxydase extraite de raifort (cruciféracée)  disponible en grande quantité  peu couteuse  détectable par plusieurs chromogènes  couplée de façon stable à des protéines
  19. 19. 19 Les pneumopathies interstitielles diffuses (PID) Peroxydase: Décomposition de l’H2O2 Présente de façon endogène dans certains tissus biologiques Signal non spécifique Technique immuno-peroxydasique Immunocytochimie
  20. 20. 20 Les pneumopathies interstitielles diffuses (PID) Systèmes d’amplification: Système d’amplification polymérique: Conjugués polymériques-HRP anticorps de liaison Immunocytochimie
  21. 21. 21 Les pneumopathies interstitielles diffuses (PID) Apport de l’immunocytochimie : Diagnostic en: Oncologie, Pneumopathies diagnostic des PID Immunocytochimie Confirmation d’un diagnostic suggéré CD1a  Histiocytose X Orientation du diagnostic devant un profil cellulaire lymphocytaire Marquage anti CD3/CD4/CD8
  22. 22. 22 Les pneumopathies interstitielles diffuses (PID) Cytométrie en Flux Analyse qualitative et quantitative de multiples paramètres à l’échelon cellulaire dans une population hétérogène en suspension dans un liquide. Analyse des signaux optiques ou physiques émis par une particule coupant le faisceau lumineux d’un laser.
  23. 23. 23 Les pneumopathies interstitielles diffuses (PID) Cytométrie en Flux Champ d’application très large Hématologie Cancérologie Génétique Diagnostic et suivi clinique Typage des leucémies Suivi du SIDA Traitements immunosuppresseurs Immunophénotypage des alvéolites lymphocytaires
  24. 24. Comparaison du profil en immunocytochimie et en Cytométrie en flux des alvéolites lymphocytaires dans le lavage bronchiolo-alvéolaire. 24 Objectif
  25. 25. 32 cas d’alvéolites lymphocytaires Sex-ratio (H/F) = 0,44 Âge moyen = 46,5 [6-68] Tabagisme : 2 cas de sexe masculin 25 22 femmes 10 hommes Patients et méthodes Patients
  26. 26. 0% 10% 20% 30% 40% 50% 60% 70% 80% 7% 3% 3% 3% 9% 75% Les antécédents respiratoires Les antécédents respiratoires 26 Patients et méthodes 0% 10% 20% 30% 40% 50% 60% 70% 66% 40% 6% 13% 13% Signes cliniques Signes cliniques 0% 10% 20% 30% 40% 50% 60% 53% 17% 12% 12% 6% Diagnostics radio- cliniques suspectés Diagnostics radio-cliniques suspectés Patients
  27. 27. Étude statistique Marquage par Cytométrie en flux Marquage immunocytochimique 27 Analyse cytologique du LBA Patients et méthodes Méthodes
  28. 28. 28 Richesse cellulaire Cellule de Malassez Cellularité normale: 150-300 000 cellule/ml Vitalité cellulaire Bleu de Trypan Vitalité cellulaire normale : ± 86%
  29. 29. 29 Cytocentrifugation et préparation des lames Cytochambres maintenues contre des lames Super Frost par des cytoclips métalliques Volume mis selon la richesse cellulaire Cytocentrifugeuse SHANDON CYTOSPIN4 Cytocentrifugation 650 tours/min ( 10 min)
  30. 30. 30 Coloration Trois colorations standards: MGG – Perls - Papanicolaou MGG Papanicolaou Perls
  31. 31. 31 Inclusion du culot dans de la paraffine Centrifugation 1500 tours/min ( 3 min) Fixation AFA ( 3 heures) Cassette à inclusion Enrobage en paraffine
  32. 32. 32 Marquage immunocytochimique Marquage sur des étalements cytologiques frais Marquage sur des coupes incluses en paraffines ( Cytoblocs) Marquage immunocytochimique sur des étalements frais ( Anticorps anti CD4) Marquage immunocytochimique sur des Cytoblocs ( Anticorps anti CD4)
  33. 33. 33 Méthodes : Protocole de marquage immunocytochimique Étapes particulières aux coupes incluses en paraffine ( Cytoblocs) Déparaffinage • 3 bains toluène ( 5 min chacun) • Réhydratation: 3 bains d’alcool 100°, 70°, 50° ( 5 min chacun) • Lavage à l’eau distillée Démasquage antigénique • Tampon citrate (pH=6)- Four à Micro-ondes – Deux cycles : 5’ - 90°/10’ - 97° • Rinçage à l’eau Rompre les liaisons moléculaires crées par le fixateur Accessibilité des sites antigéniques Délimitation des coupes – Crayon hydrophobe
  34. 34. 34 Blocage des peroxydases endogènes Incubation avec le H2O2à 3% 10 minutes Lavage avec TBS Trois bacs de 5 minutes chacun Incubation avec Post Primary Block 30 minutes Incubation avec Polymère Peroxydase (anticorps secondaire) 30 minutes Immunomarquage Anticorps primaires : anti CD3- CD4-CD8 Chambre humide Température ambiante 1 heure Révélation avec le Chromogène DAB  coloration brune Rinçage à l’eau Lavage avec TBS Trois bacs de 5 minutes chacun Lavage avec TBS Trois bacs de 5 minutes chacun Lavage avec TBS Trois bacs de 5 minutes chacun Contre coloration Hématéine de Mayer Montage Étapes communes aux étalements et aux coupes incluses en paraffine ( Cytoblocs) Méthodes : Protocole de marquage immunocytochimique
  35. 35. 35 Méthodes : Protocole de marquage par Cytométrie en flux Centrifugation 1200 tours/min 10 minutes 100-200 µl de PBS au culot CD8-FITC, CD4-PE et CD3-PerCP-Cy5.5 20 minutes +4° à l’abri de la lumière Lavage 2 ml PBS Centrifugation 1200 tours/min 10 minutes Fixation 300 µl de fixateur 1X ( 3g de para- formaldéhyde dans 100 ml de PBS 1X, dilué) Acquisition des données et analyse des échantillons Contrôle 100 µl LBA Contrôle Marquage Contrôle Marquage Marquage
  36. 36. 69% 12% 19% Hype-rcelluleire Normo-cellulaire Hypo-cellulaire 72% 16% 12% Opalesent Clair Rosé Cellularité Résultats et Discussions Résultats du LBA Aspect du LBA Opalescent Hypercellulaire Volume total récupéré Entre 27 et 163 ml Vitalité cellulaire 58% 36
  37. 37. Macrophages Lymphocytes PNN PNE 45% 45% 8% 2% Macrophages Lymphocytes PNN PNE Lymphocytaire: moyenne 45% [18-78] Résultats et Discussions Formule cellulaire 37
  38. 38. Concluants Non concluants 87,5% 12,5% Concluants Non concluants Problèmes d’acheminements et de conservation ? Problèmes de fixation ? Résultats et Discussions Immunocytochimie sur étalements 38
  39. 39. Concluants Non concluants 58,8% 41,2% Concluants Non concluants Réalisée chez 17 patients (53,1%) Autres cas  Absence du culot lors de l’inclusion en paraffine Fixation insuffisante des lames? Mauvais séchage? Démasquage insuffisant secondaire à Tampon de pH inapproprié? Résultats et Discussions Immunocytochimie sur cytoblocs 39
  40. 40. Concluantes Non concluantes 75% 25% Concluantes Non concluantes Hypo-cellularité du liquide? Faible vitalité? Résultats et Discussions Cytométrie en flux 40
  41. 41. Comparaison entre Immunocytochimie sur étalements et en Immunocytochimie sur cytoblocs 4 cas discordants sur 8 cas 41 Immunocytochimie sur étalements Total CD4/CD8<1 1<CD4/CD8<1,6 CD4/CD8>1,6 Immunocytochimie sur cytoblocs CD4/CD8<1 2 2 2 6 1<CD4/CD8<1,6 0 1 0 1 CD4/CD8>1,6 0 0 1 1 Total 2 3 3 8 Coefficient de concordance kappa = 0,7 Bonne concordance entre les deux techniques Même Laboratoire Mêmes conditions d’acheminement et de conservation Résultats et Discussions
  42. 42. Comparaison entre Immunocytochimie sur étalements et en Cytométrie en flux 9 cas discordants sur 23 cas 42 Immunocytochimie sur étalements Total CD4/CD8<1 1<CD4/CD8<1,6 CD4/CD8>1,6 Cytométrie en flux CD4/CD8<1 5 1 0 6 1<CD4/CD8<1,6 0 2 1 3 CD4/CD8>1,6 2 5 7 14 Total 7 8 8 23 Coefficient de concordance kappa = 0,34 Reproductibilité médiocre entre les deux techniques Résultats et Discussions
  43. 43. Comparaison entre Immunocytochimie sur cytoblocs et en Cytométrie en flux 2 cas discordants sur 5 cas 43 Immunocytochimie sur cytoblocs Total CD4/CD8<1 1<CD4/CD8<1,6 CD4/CD8>1,6 Cytométrie en flux CD4/CD8<1 2 0 0 2 1<CD4/CD8<1,6 1 0 0 1 CD4/CD8>1,6 1 0 1 2 Total 4 0 1 5 Coefficient de concordance kappa = 0,3 Reproductibilité médiocre entre les deux techniques Résultats et Discussions
  44. 44. • Mauvaise reproductibilité entre Immunocytochimie et Cytométrie en flux: • Comparables à plusieurs études: Comptage lymphocytaire par immunocytochimie fait sur un nombre bien limité de cellules (maximum de 400 éléments). Fiabilité des résultats dépend fortement de l’expérience de l’observateur. Signal non spécifique détecté sur les PNN peut donner lieu à une fausse interprétation Cytométrie en flux plus apte à détecter des épitopes faiblement présents dans les cellules. 44 Résultats et Discussions
  45. 45. Selon d’autres études l’immunocytochimie énumère plus de cellules que l’analyse par cytométrie en flux même si le LBA est hypo-cellulaire. « La cytométrie en flux ne peut être aussi sensible que l’œil humain avec un microscope dans la détection d’une cellule légèrement colorée ». 45 Résultats et Discussions Autres études Bonne reproductibilité entre ces deux techniques. Pourtant, les auteurs ont préféré la cytométrie en flux par rapport à l’immunocytochimie vu qu’elle nécessite beaucoup moins de temps (4 heures pour l’immunocytochimie vs. 40 min pour la cytométrie en flux dans notre étude).
  46. 46. un opérateur expérimenté Conclusion et Perspectives Conclusions • Deux techniques comparées non réalisées dans les mêmes conditions expérimentales • Cas discordants non corrélés aux diagnostics cliniques retenus Perspectives • Réaliser les 2 techniques dans notre laboratoire • Consulter les dossiers médicaux pour les cas discordants afin d’évaluer la justesse des résultats 46 un matériel de très bonne qualité avec une préservation cellulaire optimale Fiabilité dépend de plusieurs facteurs
  47. 47. 47 Merci pour votre attention

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