2. • الطبقة الرقٌقة جروماتوجرافً
Thin-Layer chromatography
• تستخدم هذه الطرٌقة لفصل المكونات عن بعضها
• تنفذ هذه التقنٌة على لوح زجاجً أو بالستٌكً
او بالستٌكٌة .
ّ
• ٌتم تغطٌتهم بطبقة رقٌقة من مادة إمتصاصٌة
كالسٌلٌولوز أوهالمٌة السٌلٌكا ( جل السٌلٌكا )
ُ
حٌث تمثل هذه الطبقة االمتصاصٌة طور الثبات
ّ
غٌر المتحرك فً هذه التجربة.
3. • توضع العٌنه المراد فصلها على وٌتبعها وضع المحلول
المذٌب الذي ٌمثل الطور المتحرك فً عملٌة الفصل حٌث
ٌتحرك بفعل الخاصٌة الشعرٌة ونظرا لحركة المادة التً
ّ ّ
ٌجري تحلٌلها بسرعات مختلفة ٌتم فصلها .
• تستخدم هذه التقنٌة فً العدٌد من المجاالت كتحدٌد ُ
مكونات األحماض األمٌنٌة فً البول ، ومراقبة التفاعالت
ّ
العضوٌة، والكشف عن المبٌدات الحشرٌة فً الغذاء
ّ ّ
والشراب ، وتحلٌل مكونات الصباغات فً األلٌاف الذي
ّ
ٌلزم فً الطب الشرعً والتعرف على مكونات مادة ما .
ّ
4. اختبار البول بواسطة الكروماتوجرافٌا
ذات الطبقه الرقٌقه
• الوضع الطبٌعً فً اإلنسان السلٌم ٌنعدم وجود
األحماض األمٌنٌة فً البول والبالزما.
• ماهو األٌض ؟
• األٌض/ هو عملٌة تحوٌل الغذاء إلى طاقة واستخدامها.
• والمعروف ان الجسم ٌقوم بحرق الجزء األكبر من الوحدات
الحرارٌة دون القٌام بالتحرك.
5. وعند القٌام ٌتحرٌك العضالت والقٌام بمجهود عضلً •
وتمارٌن رٌاضٌة فإن األجسام تحتاج إلـــى طاقة
إضافٌة
وتختلف كمٌة هذه الطاقة بإختالف درجة النشاط. •
ٌحتاج الجسم إلى الطاقة للقٌام بالوظائفه األساسٌة •
ٌحرق الكائن الحً الطاقة مع كل مع كل حركة ٌقوم •
بها
وإن السرعة التً ٌحرق بها الجسم الطاقة من •
أجل القٌام بالوظائف الحٌوٌة األساسٌة هً
ماٌسمى(باألٌض األساسً).
6. إهم العوامل المؤثرة على سرعة األٌض؟
هناك عوامل كثٌرة تحدد من خاللها سرعة األٌض, ومن هذه
العوامل التالٌة:
1. حجم الجسم وحجم العضالت فٌه.
2. العمر.
3. الجنس
4. مستوى النشاط.
5. حرارة الجسم والنخاع.
وغالٌا ماٌكون األٌض األساسً أسرع لدى الشباب منه
لدى المتقدمٌن فً السن.
6. وعلى األشخاص الذٌن ٌمارسون الرٌاضة أكثر من
األشخاص الذٌن الٌمارسون الرٌاضة
7. إذا فإن ارتفاع األحماض األمٌنٌة فً البول والبالزما دلٌل •
على وجود حاالت مرضٌة .
امثلة على بعض األمراض الناتجة :- •
1- فٌنٌل كٌتوٌورٌا: ناتج عن ارتفاع الحمض األمٌنً •
فٌنٌل األنٌن.
2- سٌستٌن ٌورٌا :ناتج عن الحمض األمٌنً سٌستٌن. •
وسوف تجرى تجرى التجربة عن المرضٌن السابقٌن فً •
عٌنة بول لشخص مرٌض عن طرٌق الكشف عن
األحماض األمٌنٌة بواسطة الكروماتوجرافً.
8. • Maple syrup urine disease
• هو خلل وراثً فً الجٌنات فالجسم ال ٌستطٌع تحلل أجزاء
عدٌدة من البروتٌن أثناء عملٌة األٌض.
• إن الشخص المصاب بهذا المرض ال ٌستطٌع استخدام مكونات
من البروتٌن ( أحماض امٌنٌة) وهً اللٌوسٌن واالٌزولٌوسٌن
والفالٌن وهذه األحماض هامة للنمو والتطور ولكن تناوله
بكثرة ٌمكن أن ٌحدث تراكم هذه المواد الكٌمٌائٌة فً الدم.
• فً أغلب الحاالت الحادة من هذا المرض ٌمكن أن ٌحدث ضرر
للدماغ أثناء حدوث إجهاد للدماغ. مثل االلتهابات وارتفاع
درجة الحرارة، أو عدم األكل لوقت طوٌل.
• وهو مرض ٌهدد حٌاة الشخص إن لم ٌعالج.
9. • أعراضه :
• تبدأ األعراض فً الظهور للموالٌد بعد الوالدة ب3 إلى 4 أٌام. ومن أعراضه
االمتناع عن الطعام، الغٌبوبة، صعوبة فً تناول الطعام والصرع، رائحة
الٌورٌا مثل رائحة ممٌزة والتقٌوء، والخمول.
• مضاعفات محتملة :
• الغٌبوبة ، الوفاة ، ضرر فً األعصاب
• التشخٌص واالختبارات:
• Plasma amino acid test
• amino acid test
• ظهور الكٌتون فً البول و حموضة فً الدم ( ارتفاع مستواه فً الدم)
• العالج:
1. تحدٌد المتناول من األحماض االمٌنٌة الثالثة المحددة فً كل األطعمة
والمشروبات ، استخدام أغذٌة لألطفال الرضع الخاصة بهم.
10. 2. إذا كان المستوى من هذه األحماض االمٌنٌة مرتفع ٌجب
التعامل فً هذه الحالة ببعض المحالٌل الورٌدٌة الطبٌة
الخاصة.
3. اخذ الكفاٌة من الطاقة الناتجة من الكربوهٌدرات والدهون
4. تناول كمٌات قلٌلة من الحلٌب الحتوائه على هذه األحماض
ومنع تناول البٌض و اللحوم والمكسرات ومنتجات األلبان.
الوقاٌة:
بعمل التحالٌل الخاصة بهذا المرض للموالٌد الجدد إن وجد تارٌخ
عائلً باإلصابة بهذا المرض.
11. • أهمٌة النشاط البدنً فً عملٌة تسرٌع األٌض؟
ٌلعب النشاط البدنً ( ومن ضمنه جمٌع انواع
الرٌاضة) دورا فعاال ومهما فً عملٌة تسرٌع األٌض.
فعند القٌام بالنشاط البدنً فإنه ٌؤدي إلى زٌادة
استهالك السعرات الحرارٌة
• ٌجب القٌام برٌاضة المشً لمدة نصف ساعة ٌومٌا
مع تناول الغذاء المتوازن وتناول الوجبات الصغٌرة
من 5 إلى 7 وجبات ٌومٌا بدال من ثالث وجبات، مع
شرب 8 أكواب من السوائل.
13. الكروماتوجرافي
الوسط المتحرك الوسط الثابت
Mobile phase ()stationary phase
غرفة الكروماتوجرافً عبارة عن لوح زجاجً مغطاة
المحتوٌة على المذٌب بطبقة رقٌقة من السلٌكاجل
تستخدم للفصل
14. تتحرك المواد المراد فصلها (المذاب ) بأتجاه حركة •
المذٌب (الوسط المتحرك) الى أعلى بواسطة الخاصٌة
الشعرٌة.
العوامل المؤثرة على الفصل بواسطة الكروماتوجرافً •
1-درجة الذوبان (:)solubilityتتجزأ المادة المراد •
الكشف عنها بٌن وسط ثابت ووسط متحرك.
المادة المراد فصلها تتحرك باتجاه حركة المذٌب •
(كلما زاد ذوبان الماده المراد فصلها فً المذٌب زادت
سرعة الفصل) ← (وهذه عالقة طردٌة).
15. 2. تأثٌر التبادل األٌونً ()ion exchange effect
•تؤدي األٌونات فً الوسط الثابت الى أرتباط بٌن الشحنات المختلفة
فً المادة المراد فصلها وذلك ٌؤدي الى تقلٌل من سرعة الفصل ←
(عالقة عكسٌة).
3. درجة الحرارة ( :)temperatureدرجة ذوبان بعض
المواد تزداد بازدٌاد درجة الحرارة أي ان الحرارة عامل
مهم ٌتحكم فً ذوبانٌة بعض المواد.
4. الوزن الجزٌئً (:(molecular weight
• الوزن الجزٌئً للمادة المراد فصلها ٌؤثر على عملٌة
الفصل فكلما زاد الوزن الجزٌئً قلت سرعة الفصل.
16. 5. االدمصاص (:)adsorption
زٌادة درجة ادمصاص المادة المراد فصلها للوسط
الثابت ٌؤدي الى ان حركة المذٌب سوف تعاق
بالتالً ستقل سرعة فصل المادة المراد فصلها
6. مكونات المذٌب:
بعض المواد تكون درجة وابانها فً بع المذٌبات
أكبر من األخرى وعلٌه فالخلٌط المذٌب المستخدم له
تأثٌر على عملٌة الفصل.
17. طرٌقة العمل
ٌرسم بواسطة القلم الرصاص خط ٌبعد 1.
2 سم عن القاعدة (ٌرسم الخط بحذر
حتى ال ٌخدش السطح)
ٌحدد على الخط 4 نقاط المسافة بٌنهما 2.
بالتساوي
تضع العٌنات بواسطة األنبوبة الشعرٌة 3.
بحث تكون كل عٌنة على النقطة
المحددة لها بحٌث ال ٌتجاوز قطر العٌنة
2 ملم
ٌوضع اللوح فً حجرة الكروماتجرافً 4.
لمدة من 03إلى 06 دقٌقة.
ٌخرج اللوح من حجرة الكروماتوجرافً 5.
18. 6. ٌوضع خط لتحدٌد نهاٌة سرٌان المذٌب
7. ٌترك لتجف
(← نٌنهٌدرٌن بكاشف 8. ٌرش
(Ninhydrinالذي ٌعطً لونا بنفسجٌا.
9. ٌترك لتجف
01. ٌوضع فً الفرن درجة حرارته 011°م
لمدة خمس دقائق
11. تظهر األحماض األمٌنٌة كبقع ملونه
• عند انتهاء حركة العٌنات على اللوح
ٌقاس ماٌسمى بالسرٌان النسبً RF
(. )relative flow
