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EPIDEMIOLOGIE
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Valérie ANDRIANTSOANIRINA Atelier Paludisme
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Exemple 2: Madagascar
• Mutation pfcrt K76T par PCR/RFLP : grande
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ವ D P « O L R U D W L R Q G H V W U D W « J L H V G H G « S L V W D J H
ವ D S S U « F L D W L R Q G H O ಬ H I I L F D F L W « G H V P H V X U H V G H S U « Y H Q W L R Q
ವ ' L P L Q X W L R Q « F K H F W K « U D S H X W L T X H
Conclusion et perspectives
Références
• Greenwood B. The molecular epidemiology of malaria. Tropical Medicine
and International Health, 2000 volume 7 (12); 1012–1021.
• Djimdé A et al. A molecular marker of chloroquine-resistant falciparum
malaria. N Engl J Med, Vol. 344 (4) January 25, 2001.
• Djimdé et al. Application of a molecular marker for surveillance of
chloroquine-resistant falciparum malaria. The lancet, Vol. 358 (9285); 890-
891, 2001.
• Abel. Apport de l’épidémiologie génétique pour l’étude de la
susceptibilité/résistance au paludisme dans les populations humaines, Paris
1999.
• Schulte A. A conceptual and historical framework for molecular
epidemiology. In : Schulte A.P et Perera P.F. Molecular epidemiology :
principles and practices. London: academic press, 1993; 4-19
• Randrianarivelojosia et al. First evidence of pfcrt mutant Plasmodium
falciparum in Madagascar. Trans R Soc Trop Med H, 2006
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Epidémiologie moléculaire

  • 1. EPIDEMIOLOGIE MOLECULAIRE DU PALUDISME Ex : suivi de la chloroquino-resistance Valérie ANDRIANTSOANIRINA Atelier Paludisme -IPM- EVALUATION par les FACILITATEURS
  • 2. PLANPLAN • avant la biologie moléculaire • avec la biologie moléculaire • exemple: suivi de la résistance à la chloroquine (pfcrt) • avantages et limites • conclusion
  • 3. Définition : étude de la répartition et des déterminants des évènements de santé dans les populations Définition du sujet : Surveillance par méthode moléculaire des phénomènes épidémiologiques dont principalement l’apparition des résistances aux médicaments INTRODUCTIONINTRODUCTION
  • 4. Avantages : pas d’extrapolation sur autres espèces et expériences en labo Inconvénients : • contraintes éthiques imposées par expérimentation humaine • Protocole lourd – temps – argent • Comparaison inter études (standardisation) In vivo : essai direct sur l’homme In vitro : culture cellulaire Epidémiologie avant la biologieEpidémiologie avant la biologie moléculairemoléculaire
  • 5. suivi de la chloroquinosuivi de la chloroquino--resistanceresistance dans le mondedans le monde OMSOMS
  • 6. Définition : mettre en relation les données recueillies avec la recherche des causes d’une maladie sur le plan moléculaire « Mutant = résistant » suivi d’une résistance suivi mutation associée à une résistance. Epidémiologie avec la biologie moléculaire
  • 7. Suivi de résistance à la CQ (Pfcrt T76) Marqueur moléculaire Pfcrt 76 : substitution de la: substitution de la Lysine K à la position 76 (K76) en thréonine TLysine K à la position 76 (K76) en thréonine T (Chromosome 7)(Chromosome 7) PrPréésents chez les isolats rsents chez les isolats réésistants et non chezsistants et non chez les sensiblesles sensibles DjimdDjimdéé et al., 2001 : association entre leet al., 2001 : association entre le PfcrtPfcrt T76T76 et det dééveloppement de rveloppement de réésistancesistance àà la CQ pendant lela CQ pendant le traitement.traitement. (Djimdé et al., 2001)
  • 8. Djimdé et al., 2001Djimdé et al., 2001 SSéélection pour la T76 in vivolection pour la T76 in vivo AprAprèès traitement seuls les mutants rs traitement seuls les mutants réésistentsistent
  • 9. Pourquoi ce choix ?Pourquoi ce choix ? • déterminant essentiel de la résistance à la chloroquine Djimdé, 2001; Fidock et al., 2001 • Djimdé et al., 2001 : association entre le Pfcrt T76 et développement de résistance à la CQ pendant le traitement. • outil de surveillance à la résistance à la chloroquine
  • 10. CI50delaCQCI50delaCQ ! ! " "! # #! ! !! $ $! % %! & &! ' '! '! '! !! % %'! % %!! & &'! & &!! ' '!! ' '!! '! !! $ $'! $ $!! # #'! ()*%%
  • 11. Exemple 2: Madagascar • Mutation pfcrt K76T par PCR/RFLP : grande première à Madagascar. • 3,3% : 6/183 sur isolats de Plasmodium falciparum étudiés • Génotypage du pfcrt est un outil utile pour la surveillance de la résistance à la CQ Randrianarivelojosia et al., 2006Randrianarivelojosia et al., 2006
  • 12. Intérêts et limites • Intérêts : + , - ( + . ( ) + / ( ( ( Limites:Limites: 00 * 0 12 ( ) 3 (
  • 13. Djimdé et al., 2001Djimdé et al., 2001 Exemple 2 : suivi de résistance à Mali 1424 patients, 1997-1999, la prévalence de pfcrt T76 est mesurée et comparée avec la parasite
  • 14. • L’approche d’épidémiologie moléculaire : perspectives d’interventions stratégiques ciblant des facteurs de virulence du parasite • Connaissance mutation connaissance résistance changement de lutte ವ D P « O L R U D W L R Q G H V W U D W « J L H V G H G « S L V W D J H ವ D S S U « F L D W L R Q G H O ಬ H I I L F D F L W « G H V P H V X U H V G H S U « Y H Q W L R Q ವ ' L P L Q X W L R Q « F K H F W K « U D S H X W L T X H Conclusion et perspectives
  • 15. Références • Greenwood B. The molecular epidemiology of malaria. Tropical Medicine and International Health, 2000 volume 7 (12); 1012–1021. • Djimdé A et al. A molecular marker of chloroquine-resistant falciparum malaria. N Engl J Med, Vol. 344 (4) January 25, 2001. • Djimdé et al. Application of a molecular marker for surveillance of chloroquine-resistant falciparum malaria. The lancet, Vol. 358 (9285); 890- 891, 2001. • Abel. Apport de l’épidémiologie génétique pour l’étude de la susceptibilité/résistance au paludisme dans les populations humaines, Paris 1999. • Schulte A. A conceptual and historical framework for molecular epidemiology. In : Schulte A.P et Perera P.F. Molecular epidemiology : principles and practices. London: academic press, 1993; 4-19 • Randrianarivelojosia et al. First evidence of pfcrt mutant Plasmodium falciparum in Madagascar. Trans R Soc Trop Med H, 2006
  • 16. • Détection de la résistance aux médicaments • Détection de la résistance à l’insecticide • Différenciation entre rechute et réinfection • Cytokines, TNF… • Analyse de l’origine du repas de sang • Recherche de marqueurs génétiques de virulence • HLA cl I et II • Etude de la corrélation génétique entre populations de moustiques • Etude de la multiplicité de l’infection • Malformation des GR • Différenciation d’espèces et sous-espèces • Détection d’infections mixtes• Hémoglobinopathies VecteurParasiteHôte Applications de la biologie moléculaire à l’épidémiologie