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A/S
La rétraction du caillotDosage spécifique des facteurs
de la voie de formation de la
prothrombinase endogène
Par : S/Abdessemed
A/S
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Il s’agit des facteurs XΙІ, XΙ, ІX, VIII c
 Principe :
Il est basé sur la mesure du TCK d’un
plasma à tester en présence d’un
substrat qui apporte tous les facteurs
sauf celui à doser.
A/S
A/S
1. Dosage du facteur anti-
hémophilique A ou facteur VIII c
1) Réactifs :
• Plasma à tester (pauvre en plaquettes).
• Plasma témoin.
• Substrat : c’est du plasma déficient en
facteur VIII c ; il est obtenu après
vieillissement du plasma normal ou à partir de
sang d’hémophile A sévère dont le taux de
facteur VIII c est inférieur à 1%.
• Céphaline kaolin.
• CaCl2 à 0,025 M.
• Tampon d’owren –koller.
A/S
A/S
2) Mode opératoire :
Tous les dosages doivent se faire à
37°c.les réactifs sont maintenus au bain
marie à 37°c sauf les substrats et les
plasmas à tester et témoin qui sont
maintenus dans de la glace fondante.
Le plasma est également dilué au 1/10 et à
partir de celui-ci sept autres dilutions
sont obtenues, allant jusqu’au 1/1280.
Le plasma à tester est dilué jusqu’à la
quatrième dilution soit au 1/80.
A/S
A/S
réactifs Tubes au BM à37°c
Plasma à tester et plasma témoin à différentes
dilutions
0,1 ml
Substrat : déficient en F VIII c 0,1 ml
Céphaline-kaolin 0,1 ml
Incubation à 37°c 2 mn
CaCl2 à 0,025 M 0,1 ml
Mélanger et déclencher le chronomètre ; noter le temps de coagulation
A/S
A/S
3) Expression des résultats :
 Comme pour les facteurs du complexe
prothrombinique,on portera les temps en
ordonnée et les concentrations ou
dilutions du plasma témoin en abscisse.
Le taux du facteur VIII c du plasma à
tester est obtenu par interpolation,après
avoir joint tous les points pour obtenir la
droite d’étalonnage.
A/S
A/S
4) Résultats :
 Les valeurs normales sont comprises
entre 54 et 110% d’activité.
A/S
A/S
2. Dosage du facteur anti –
hémophilique B ou facteur ІX
 Il faut procéder comme pour le facteur
VIII c en remplaçant le substrat
déficient en facteur VIII c par le
plasma déficient en facteur ІX.
Résultats :
 Les valeurs normales selon notre série
de témoins sont comprises entre 55 et
115 % d’activité.
A/S
A/S
3. Dosage des facteurs contacts
XΙ et XІΙ
Le dosage des facteurs Hageman (F.
XІΙ) et Rosenthal (F. XΙ) se fait
exactement comme celui des facteurs
anti-hémophiliques A et B .le plasma
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  • 1. A/S La rétraction du caillotDosage spécifique des facteurs de la voie de formation de la prothrombinase endogène Par : S/Abdessemed
  • 2. A/S A/S Il s’agit des facteurs XΙІ, XΙ, ІX, VIII c  Principe : Il est basé sur la mesure du TCK d’un plasma à tester en présence d’un substrat qui apporte tous les facteurs sauf celui à doser.
  • 3. A/S A/S 1. Dosage du facteur anti- hémophilique A ou facteur VIII c 1) Réactifs : • Plasma à tester (pauvre en plaquettes). • Plasma témoin. • Substrat : c’est du plasma déficient en facteur VIII c ; il est obtenu après vieillissement du plasma normal ou à partir de sang d’hémophile A sévère dont le taux de facteur VIII c est inférieur à 1%. • Céphaline kaolin. • CaCl2 à 0,025 M. • Tampon d’owren –koller.
  • 4. A/S A/S 2) Mode opératoire : Tous les dosages doivent se faire à 37°c.les réactifs sont maintenus au bain marie à 37°c sauf les substrats et les plasmas à tester et témoin qui sont maintenus dans de la glace fondante. Le plasma est également dilué au 1/10 et à partir de celui-ci sept autres dilutions sont obtenues, allant jusqu’au 1/1280. Le plasma à tester est dilué jusqu’à la quatrième dilution soit au 1/80.
  • 5. A/S A/S réactifs Tubes au BM à37°c Plasma à tester et plasma témoin à différentes dilutions 0,1 ml Substrat : déficient en F VIII c 0,1 ml Céphaline-kaolin 0,1 ml Incubation à 37°c 2 mn CaCl2 à 0,025 M 0,1 ml Mélanger et déclencher le chronomètre ; noter le temps de coagulation
  • 6. A/S A/S 3) Expression des résultats :  Comme pour les facteurs du complexe prothrombinique,on portera les temps en ordonnée et les concentrations ou dilutions du plasma témoin en abscisse. Le taux du facteur VIII c du plasma à tester est obtenu par interpolation,après avoir joint tous les points pour obtenir la droite d’étalonnage.
  • 7. A/S A/S 4) Résultats :  Les valeurs normales sont comprises entre 54 et 110% d’activité.
  • 8. A/S A/S 2. Dosage du facteur anti – hémophilique B ou facteur ІX  Il faut procéder comme pour le facteur VIII c en remplaçant le substrat déficient en facteur VIII c par le plasma déficient en facteur ІX. Résultats :  Les valeurs normales selon notre série de témoins sont comprises entre 55 et 115 % d’activité.
  • 9. A/S A/S 3. Dosage des facteurs contacts XΙ et XІΙ Le dosage des facteurs Hageman (F. XІΙ) et Rosenthal (F. XΙ) se fait exactement comme celui des facteurs anti-hémophiliques A et B .le plasma substrat sera déficient en facteur XІ ou en facteur XΙΙ selon le facteur à doser.
  • 10. A/S