Photopheresis kidney transplantation

Moscow Regional Research and Clinical Institute (MONIKI)
Moscow Regional Research and Clinical Institute (MONIKI) Moscow Regional Research and Clinical Institute (MONIKI)
Трансляционная клеточная иммунотерапия – индуктор тканевой
толерантности при аллогенной
трансплантации почки
(2010 – 2013 гг)
Отдел трансплантологии, нефрологии и хирургической гемокоррекции
Отделение хирургической гемокоррекции и детоксикации
19.05.2014
Проф. Кильдюшевский А.В.
Министерство здравоохранения Московской области
ГБУЗ МО Московский областной научно-исследовательский
клинический институт (ГБУЗ МО МОНИКИ) им.
М.Ф.Владимирского
Отдел оперативной нефрологии и пересадки почки
Отделение хирургической гемокоррекции и детоксикации
ТРАНСЛЯЦИОННАЯ КЛЕТОЧНАЯ ИММУНОТЕРАПИЯ ПРИ
АЛЛОТРАНСПЛАНТАЦИИ ТРУПНОЙ ПОЧКИ У УРОЛОГИЧЕСКИХ
БОЛЬНЫХ
(Проспективное рандомизированное исследование эффективности
комбинированного метода с включением экстракорпорального
фотофереза в программу индукционной иммунодепрессии в сравнении
со стандартным протоколом иммунодепрессивной лекарственной
терапии у больных после аллогенной трансплантации почки)
Протокол исследования
на 2010-2013 гг.
Результаты поисковой НИ программы
Проспективное клиническое исследование эффективности ТКИ в
качестве профилактики острого отторжения у 40 реципиентов
парных почечных трансплантатов
(20 доноров)
Характеристика реципиентов
Основная группа ТКИ
+ ИС (20 чел)
Контрольная группа
ИС (20 чел)
Муж. 12 12
Возр. (лет) 31 - 55 (45) 21 – 55 (35)
Жен. 8 8
Возр. (лет) 27 – 50 (33) 37 – 48 (43)
Индекс
совм.
8 (4;13) 9 (5;13)
Зам. Поч.
Тер. (лет)
2,1 2,4
Характеристика реципиентов
Причины ТХПН
Основная группа
ТКИ + ИС (20 чел)
Контрольная
группа ИС (20 чел)
Хр. пиелонефрит 9 9
Хр. гломерулонефрит 5 5
Поликистоз почек 4 4
Гипертоническая
нефропатия
2 -
Антифосфолипидный
синдром
- 2
2: выделение и сбор
мононуклеарных клеток
4: Реинфузия
3: Мононуклеарные клетки
подвергаются УФ облучению
1: Эксфузия крови в ротор
сеператора клеток
4: Инкубация
Методика проведения ТКИ
Первые 2 недели 2 раза в неделю
Вторые 2 недели 1 раз в неделю
Второй месяц 1 раз в 2 недели
Третий – шестой месяц 1 раз в месяц
Результаты протокольной биопсии
Основная группа
ТКИ + ИС (20 чел)
Контрольная группа
ИС (19 чел)
30 сут 180 сут 30 сут 180 сут
Канальцевый некроз 8 - 3 -
IA Banff - - 1* -
IB Banff - - - 1*
IIA Banff - - - -
IIB Banff - - 1* -
III Banff - - 1** -
Фокально-сегментарный
гломерулосклероз
- - - 1**
Хр. Тр. Нефропатия 1-2
ст.
1 5 - 1
Хр. Тр. Нефропатия 3 ст. - - - 2*
0 200 400 600 800 1000 1200 1400
Дни
60%
70%
80%
90%
100%
CumulativeProportionSurviving
Complete Censored
ТКИ+ИС
ИС
Общая выживаемость (OS) почечного
аллотрансплантата в двух группах
(Kaplan-Meier)
Gehan's Wilcoxon Test p = ,00932
Cox-Mantel Test p = ,00803
Peto & Peto Wilcoxon Test p = ,00837
Log-Rank Test p = ,00816
Трансплантатэктомия в контрольной группе
Острое отторжение -2 (Сарайкин, Ищенко);
ФСГ - 1 (Малышев);
Тромбоз -1(Саидов)
Результаты биопсии ПАТ в двух группах на 30
сутки после трансплантации
биопсия ПАТ реципиента
контрольной группы
биопсия ПАТ реципиента
основной группы
диффузная инфильтрация интерстиция
лимфоцитами с примесью нейтрофилов, многие
канальцы полностью разрушены. В участках
относительно – сохранной паренхимы – тяжелое
повреждение канальцевого эпителия, явления
тубулита (Banff III).
очаговый склероз интерстиция и атрофия
канальцев, занимающие менее 5%
почечной паренхимы. Очаговая
инфильтрация интерстиция лимфоцитами
без явлений тубулита. Остаточные
явлениям ОКН
Бессобытийная продолжительность жизни (без признаков заболевания) (DFS)
после трансплантации почки в двух группах реципиентов (Kaplan-
Meier)
0 100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000 1100
Время наблюдения после трансплантации (дни)
-10%
0%
10%
20%
30%
40%
50%
60%
70%
80%
90%
100%
Долясобытий(%)
Complete CensoredТКИ+ИС
ИС
Grouping variable: Лечение
Total number of valid observations: 38
uncensored: 21 ( 55,26%) censored: 17 ( 44,74%)
Valid observations: Group 1 (ТКИ+ИС ): 19 Group 2
(ИС ): 19
Uncensored: 6 ( 31,58%) 15 ( 78,95%)
Censored: 13 ( 68,42%) 4 ( 21,05%)
Gehan's Wilcoxon Test p = ,00603
Cox's F-Test p = ,00063
Cox-Mantel Test p = ,00120
Peto & Peto Wilcoxon Test p = ,00379
Log-Rank Test p = ,00187
Продолжительность жизни до инфекционного события (DFS) после
трансплантации почки в двух группах реципиентов (Kaplan-Meier)
0 100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000 1100
Time
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
0,7
0,8
0,9
1,0
CumulativeProportionSurviving
Complete Censored
ТКИ+ИС
ИС
Gehan's Wilcoxon Test p = ,00901
Cox-Mantel Test p = ,00114
Log-Rank Test p = ,00166
Основная группа: пиелонефрит трансплантата (Кузьмичев – 10 сутки после трансплантации)
Контрольная группа: пневмония (Шиендо, Сарайкин, Львова, Нистратов, Азаров, Рустамов – смерть)
Пиелонефрит (Чернявская, Малышев)
ЦМВ – Сумская, Степаненко, Куликов)
В
ГКГ Класс II
ТКР
CD80/86
CD28
IL-2
FasL Fas
CD4
ГКГ Класс I
CD8
IL-4
IL-5
ГКГ Класс I/II ГКГ Класс I/II
Перфорин
Гранзим В
CTLA-4
CD80/86
CTLA-4
CD28 ТКР
CD27
CD70
CD3+
CD4+
CD28+
CD27+
CD45RO-
РГЗ
Сравнительный анализ экспрессииСравнительный анализ экспрессии CD28CD28 на наивных хелперных Т-лимфоцитах через 1на наивных хелперных Т-лимфоцитах через 1
месяц после аллогенной трансплантации почки в двух группах: ИС и ИС+ТКИмесяц после аллогенной трансплантации почки в двух группах: ИС и ИС+ТКИ
Относительное количество наивных
CD4+ лимфоцитов,
экспрессирующих CD28
Mean
±SE
±1,96*SE
4 30
Сутки после трансплантации
35
40
45
50
55
60
65
70
%
MFI CD28 на наивных CD4+ лимфоцитах
Mean
±SE
±1,96*SE
4 30
Сутки после трансплантации
14
16
18
20
22
24
26
ед
Относительное количество наивных
CD4+ лимфоцитов,
экспрессирующих CD28
Mean
±SE
±1,96*SE
4 30
Сутки после трансплантации
25
30
35
40
45
50
55
60
65
70
%
MFI CD28 на наивных CD4+ лимфоцитах
Mean
±SE
±1,96*SE
4 30
Сутки после трансплантации
12
14
16
18
20
22
24
26
Контрольная группа ИС Основная группа ИС+ТКИ
Динамика экспрессииДинамика экспрессии CD28CD28 на наивныхна наивных CD4CD4 лимфоцитах у больныхлимфоцитах у больных
после аллогенной трансплантации почек в зависимости от леченияпосле аллогенной трансплантации почек в зависимости от лечения
Иммуносупрессия Иммуносупрессия + ТКИ
3 сутки
30 сутки
MFI – 10,38 ед
MFI - 12, 95 ед
MFI - 28, 2
MFI – 16,1
Динамика экспрессииДинамика экспрессии CD28CD28 на наивныхна наивных CD4CD4 лимфоцитах у больныхлимфоцитах у больных
после аллогенной трансплантации почек в зависимости от леченияпосле аллогенной трансплантации почек в зависимости от лечения
ИММУНОСУПРЕССИЯ ИММУНОСУПРЕССИЯ + ТКИИММУНОСУПРЕССИЯ + ТКИ
3 СУТКИ
30 СУТКИ
MFI – 31,7 ед
MFI - 9,45 ед
MFI - 28, 2
MFI – 12,2
Процесс альтернативного сплайсинга экзонов mРНК, кодирующих
трансмембранный и цитоплазматический домены молекулы CD 28
В
ГКГ Класс II
ТКР
CD80/86
CD28
IL-2
FasL Fas
CD4
ГКГ Класс I
CD8
IL-4
IL-5
ГКГ Класс I/II ГКГ Класс I/II
Перфорин
Гранзим В
CTLA-4
CD80/86
CTLA-4
CD28
ТКР
CD27
CD70
Новая иммуномодулирующая стратегия, которая
использует механизмы индукциитолерантности к
донорским антигенам, через костимуляторные сигналы в
регуляции Т-клеточного ответа, может разрешить
проблемугенетической несовместимости в
трансплантологии.
1 sur 19

Recommandé

экстракорпоральный фотоферез 2 par
экстракорпоральный фотоферез 2экстракорпоральный фотоферез 2
экстракорпоральный фотоферез 2Moscow Regional Research and Clinical Institute (MONIKI)
1K vues57 diapositives
Лекарственные препараты на основе стволовых клеток par
Лекарственные препараты на основе стволовых клетокЛекарственные препараты на основе стволовых клеток
Лекарственные препараты на основе стволовых клетокPHARMADVISOR
1K vues5 diapositives
28421ip par
28421ip28421ip
28421ipivanov156w2w221q
100 vues5 diapositives
5 дыховичная. анестезиологическое обеспечение донорского этапа ртп par
5 дыховичная. анестезиологическое обеспечение донорского этапа ртп5 дыховичная. анестезиологическое обеспечение донорского этапа ртп
5 дыховичная. анестезиологическое обеспечение донорского этапа ртпtaras strypko
344 vues33 diapositives
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ «ЭНОАНТА» ДЛЯ КОРРЕКЦИИ ТОКСИЧЕСКИХ ПРОЯВЛЕНИЙ ПРОТИВООПУХОЛЕВО... par
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ «ЭНОАНТА» ДЛЯ КОРРЕКЦИИ ТОКСИЧЕСКИХ ПРОЯВЛЕНИЙ ПРОТИВООПУХОЛЕВО...ИСПОЛЬЗОВАНИЕ «ЭНОАНТА» ДЛЯ КОРРЕКЦИИ ТОКСИЧЕСКИХ ПРОЯВЛЕНИЙ ПРОТИВООПУХОЛЕВО...
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ «ЭНОАНТА» ДЛЯ КОРРЕКЦИИ ТОКСИЧЕСКИХ ПРОЯВЛЕНИЙ ПРОТИВООПУХОЛЕВО...Александр Ст
234 vues11 diapositives
Абдурахманов Б.А. — ВОЗМОЖНОСТИ ПЕРИТОНЕАЛЬНЫХ ПОРТ-СИСТЕМ В КОРРЕКЦИИ ДИУРЕТ... par
Абдурахманов Б.А. — ВОЗМОЖНОСТИ ПЕРИТОНЕАЛЬНЫХ ПОРТ-СИСТЕМ В КОРРЕКЦИИ ДИУРЕТ...Абдурахманов Б.А. — ВОЗМОЖНОСТИ ПЕРИТОНЕАЛЬНЫХ ПОРТ-СИСТЕМ В КОРРЕКЦИИ ДИУРЕТ...
Абдурахманов Б.А. — ВОЗМОЖНОСТИ ПЕРИТОНЕАЛЬНЫХ ПОРТ-СИСТЕМ В КОРРЕКЦИИ ДИУРЕТ...Pavel Fedotov
901 vues24 diapositives

Contenu connexe

Tendances

Статья ПОМЦ в журнале "Радиология - практика" №5(56) 2016 par
Статья ПОМЦ в журнале "Радиология - практика" №5(56) 2016Статья ПОМЦ в журнале "Радиология - практика" №5(56) 2016
Статья ПОМЦ в журнале "Радиология - практика" №5(56) 2016pomcru
346 vues12 diapositives
Журнал "Злокачественные опухоли №3-2013 (7) par
Журнал "Злокачественные опухоли №3-2013 (7)Журнал "Злокачественные опухоли №3-2013 (7)
Журнал "Злокачественные опухоли №3-2013 (7)oncoportal.net
2.1K vues57 diapositives
патент № 2319458 par
патент № 2319458патент № 2319458
патент № 2319458nizhgma.ru
92 vues2 diapositives
А.А.Сеид-Гусейнов, "Искусственные органы"АМТН par
А.А.Сеид-Гусейнов, "Искусственные органы"АМТНА.А.Сеид-Гусейнов, "Искусственные органы"АМТН
А.А.Сеид-Гусейнов, "Искусственные органы"АМТНPharmcluster
733 vues35 diapositives
презентация на защите par
презентация на защитепрезентация на защите
презентация на защитеYervand Harutyunyan
1.2K vues36 diapositives
Лечение больных МЕЛКОКЛЕТОЧНЫМ РАКОМ ЛЕГКОГО (RUSSCO 2013) par
Лечение больных МЕЛКОКЛЕТОЧНЫМ РАКОМ ЛЕГКОГО (RUSSCO 2013)Лечение больных МЕЛКОКЛЕТОЧНЫМ РАКОМ ЛЕГКОГО (RUSSCO 2013)
Лечение больных МЕЛКОКЛЕТОЧНЫМ РАКОМ ЛЕГКОГО (RUSSCO 2013)oncoportal.net
6K vues5 diapositives

Tendances(19)

Статья ПОМЦ в журнале "Радиология - практика" №5(56) 2016 par pomcru
Статья ПОМЦ в журнале "Радиология - практика" №5(56) 2016Статья ПОМЦ в журнале "Радиология - практика" №5(56) 2016
Статья ПОМЦ в журнале "Радиология - практика" №5(56) 2016
pomcru346 vues
Журнал "Злокачественные опухоли №3-2013 (7) par oncoportal.net
Журнал "Злокачественные опухоли №3-2013 (7)Журнал "Злокачественные опухоли №3-2013 (7)
Журнал "Злокачественные опухоли №3-2013 (7)
oncoportal.net2.1K vues
патент № 2319458 par nizhgma.ru
патент № 2319458патент № 2319458
патент № 2319458
nizhgma.ru92 vues
А.А.Сеид-Гусейнов, "Искусственные органы"АМТН par Pharmcluster
А.А.Сеид-Гусейнов, "Искусственные органы"АМТНА.А.Сеид-Гусейнов, "Искусственные органы"АМТН
А.А.Сеид-Гусейнов, "Искусственные органы"АМТН
Pharmcluster733 vues
Лечение больных МЕЛКОКЛЕТОЧНЫМ РАКОМ ЛЕГКОГО (RUSSCO 2013) par oncoportal.net
Лечение больных МЕЛКОКЛЕТОЧНЫМ РАКОМ ЛЕГКОГО (RUSSCO 2013)Лечение больных МЕЛКОКЛЕТОЧНЫМ РАКОМ ЛЕГКОГО (RUSSCO 2013)
Лечение больных МЕЛКОКЛЕТОЧНЫМ РАКОМ ЛЕГКОГО (RUSSCO 2013)
oncoportal.net6K vues
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ “ЭНОАНТА" ДЛЯ КОРРЕКЦИИ АНЕМИИ У ОНКОЛОГИЧЕСКИХ БОЛЬНЫХ ( КЛИ... par Александр Ст
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ “ЭНОАНТА" ДЛЯ КОРРЕКЦИИ АНЕМИИ У ОНКОЛОГИЧЕСКИХ   БОЛЬНЫХ ( КЛИ...ИСПОЛЬЗОВАНИЕ “ЭНОАНТА" ДЛЯ КОРРЕКЦИИ АНЕМИИ У ОНКОЛОГИЧЕСКИХ   БОЛЬНЫХ ( КЛИ...
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ “ЭНОАНТА" ДЛЯ КОРРЕКЦИИ АНЕМИИ У ОНКОЛОГИЧЕСКИХ БОЛЬНЫХ ( КЛИ...
Желудочно-кишечные кровотечения par kaschenko
Желудочно-кишечные кровотеченияЖелудочно-кишечные кровотечения
Желудочно-кишечные кровотечения
kaschenko3.1K vues
Программа РАРЧ 2016 par cons2013
Программа РАРЧ 2016Программа РАРЧ 2016
Программа РАРЧ 2016
cons20132.9K vues
Лотов А.Н. — Интервенционные методы лечения больных с механической желтухой о... par Pavel Fedotov
Лотов А.Н. — Интервенционные методы лечения больных с механической желтухой о...Лотов А.Н. — Интервенционные методы лечения больных с механической желтухой о...
Лотов А.Н. — Интервенционные методы лечения больных с механической желтухой о...
Pavel Fedotov1.2K vues
Желудочно-кишечные кровотечения как проблема хирургии! ( терапии?! ) par Anton Kiselev
Желудочно-кишечные кровотечения как проблема хирургии! ( терапии?! )Желудочно-кишечные кровотечения как проблема хирургии! ( терапии?! )
Желудочно-кишечные кровотечения как проблема хирургии! ( терапии?! )
Anton Kiselev4.5K vues
Тлеулиева Ж.А. — МРТ диагностика опухоли Клацкина par Pavel Fedotov
Тлеулиева Ж.А. — МРТ диагностика опухоли КлацкинаТлеулиева Ж.А. — МРТ диагностика опухоли Клацкина
Тлеулиева Ж.А. — МРТ диагностика опухоли Клацкина
Pavel Fedotov1K vues
Соноэластография при раке матки par Victor GonDar
Соноэластография при раке маткиСоноэластография при раке матки
Соноэластография при раке матки
Victor GonDar694 vues

Similaire à Photopheresis kidney transplantation

ICG in liver transplantation par
ICG in liver transplantationICG in liver transplantation
ICG in liver transplantationssuser842682
4 vues30 diapositives
Biryukova nl2010p1 par
Biryukova nl2010p1Biryukova nl2010p1
Biryukova nl2010p1Nickolai Smirnov
501 vues26 diapositives
Structure of hospital-acquired infections and resistant pathogens in hospital... par
Structure of hospital-acquired infections and resistant pathogens in hospital...Structure of hospital-acquired infections and resistant pathogens in hospital...
Structure of hospital-acquired infections and resistant pathogens in hospital...THL
206 vues58 diapositives
28648ip par
28648ip28648ip
28648ipivanov1edw2332
103 vues3 diapositives
Оценка эффективности трансплантации клеток par
Оценка эффективности трансплантации клетокОценка эффективности трансплантации клеток
Оценка эффективности трансплантации клетокkulibin
806 vues44 diapositives
Показания и объем операции при МУЗ, ДТЗ и раке ЩЖ par
Показания и объем операции при МУЗ, ДТЗ и раке ЩЖПоказания и объем операции при МУЗ, ДТЗ и раке ЩЖ
Показания и объем операции при МУЗ, ДТЗ и раке ЩЖjslby
1.1K vues36 diapositives

Similaire à Photopheresis kidney transplantation(20)

Structure of hospital-acquired infections and resistant pathogens in hospital... par THL
Structure of hospital-acquired infections and resistant pathogens in hospital...Structure of hospital-acquired infections and resistant pathogens in hospital...
Structure of hospital-acquired infections and resistant pathogens in hospital...
THL206 vues
Оценка эффективности трансплантации клеток par kulibin
Оценка эффективности трансплантации клетокОценка эффективности трансплантации клеток
Оценка эффективности трансплантации клеток
kulibin806 vues
Показания и объем операции при МУЗ, ДТЗ и раке ЩЖ par jslby
Показания и объем операции при МУЗ, ДТЗ и раке ЩЖПоказания и объем операции при МУЗ, ДТЗ и раке ЩЖ
Показания и объем операции при МУЗ, ДТЗ и раке ЩЖ
jslby1.1K vues
4-3. Clinical and histological risk factors for primary IgA nephropathy. Rosa... par KidneyOrgRu
4-3. Clinical and histological risk factors for primary IgA nephropathy. Rosa...4-3. Clinical and histological risk factors for primary IgA nephropathy. Rosa...
4-3. Clinical and histological risk factors for primary IgA nephropathy. Rosa...
KidneyOrgRu1.2K vues
Неходжкинская лимфома с поражением вилочковой железы и надпочечников par tomograph_dp_ua
Неходжкинская лимфома с поражением вилочковой железы и надпочечниковНеходжкинская лимфома с поражением вилочковой железы и надпочечников
Неходжкинская лимфома с поражением вилочковой железы и надпочечников
tomograph_dp_ua1.5K vues
патент № 2319458 par nizhgma.ru
патент № 2319458патент № 2319458
патент № 2319458
nizhgma.ru96 vues
ПЭТ-центры. Роль ПЭТ в ядерной медицине. Лекция 1 par Alex_Zadorin
ПЭТ-центры. Роль ПЭТ в ядерной медицине. Лекция 1ПЭТ-центры. Роль ПЭТ в ядерной медицине. Лекция 1
ПЭТ-центры. Роль ПЭТ в ядерной медицине. Лекция 1
Alex_Zadorin4K vues
ИЗУЧЕНИЕ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ КОМПЕНСАТОРНО-АДАПТАЦИОННЫХ ПРОЦЕССОВ В ПОЧКЕ, ВОЗНИК... par Александр Ст
ИЗУЧЕНИЕ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ КОМПЕНСАТОРНО-АДАПТАЦИОННЫХ ПРОЦЕССОВ В ПОЧКЕ, ВОЗНИК...ИЗУЧЕНИЕ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ КОМПЕНСАТОРНО-АДАПТАЦИОННЫХ ПРОЦЕССОВ В ПОЧКЕ, ВОЗНИК...
ИЗУЧЕНИЕ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ КОМПЕНСАТОРНО-АДАПТАЦИОННЫХ ПРОЦЕССОВ В ПОЧКЕ, ВОЗНИК...
Pankrashkina_Maria_poster presentation_EAFO par EAFO2014
Pankrashkina_Maria_poster presentation_EAFOPankrashkina_Maria_poster presentation_EAFO
Pankrashkina_Maria_poster presentation_EAFO
EAFO2014152 vues
Диагностика и лечение нейроэндокринных опухолей. par Сергей Мосин
Диагностика и лечение нейроэндокринных опухолей. Диагностика и лечение нейроэндокринных опухолей.
Диагностика и лечение нейроэндокринных опухолей.
журнал злокачественные опухоли № 2 (2014) par oncoportal.net
журнал злокачественные опухоли № 2 (2014)журнал злокачественные опухоли № 2 (2014)
журнал злокачественные опухоли № 2 (2014)
oncoportal.net934 vues
"Нутритивный статус у детей, подвергающихся трансплантации гемопоэтических ст... par rnw-aspen
"Нутритивный статус у детей, подвергающихся трансплантации гемопоэтических ст..."Нутритивный статус у детей, подвергающихся трансплантации гемопоэтических ст...
"Нутритивный статус у детей, подвергающихся трансплантации гемопоэтических ст...
rnw-aspen1.8K vues
киселева2 par pasteurorg
киселева2киселева2
киселева2
pasteurorg355 vues
киселева2 par pasteurorg
киселева2киселева2
киселева2
pasteurorg1.5K vues

Photopheresis kidney transplantation

  • 1. Трансляционная клеточная иммунотерапия – индуктор тканевой толерантности при аллогенной трансплантации почки (2010 – 2013 гг) Отдел трансплантологии, нефрологии и хирургической гемокоррекции Отделение хирургической гемокоррекции и детоксикации 19.05.2014 Проф. Кильдюшевский А.В.
  • 2. Министерство здравоохранения Московской области ГБУЗ МО Московский областной научно-исследовательский клинический институт (ГБУЗ МО МОНИКИ) им. М.Ф.Владимирского Отдел оперативной нефрологии и пересадки почки Отделение хирургической гемокоррекции и детоксикации ТРАНСЛЯЦИОННАЯ КЛЕТОЧНАЯ ИММУНОТЕРАПИЯ ПРИ АЛЛОТРАНСПЛАНТАЦИИ ТРУПНОЙ ПОЧКИ У УРОЛОГИЧЕСКИХ БОЛЬНЫХ (Проспективное рандомизированное исследование эффективности комбинированного метода с включением экстракорпорального фотофереза в программу индукционной иммунодепрессии в сравнении со стандартным протоколом иммунодепрессивной лекарственной терапии у больных после аллогенной трансплантации почки) Протокол исследования на 2010-2013 гг.
  • 4. Проспективное клиническое исследование эффективности ТКИ в качестве профилактики острого отторжения у 40 реципиентов парных почечных трансплантатов (20 доноров)
  • 5. Характеристика реципиентов Основная группа ТКИ + ИС (20 чел) Контрольная группа ИС (20 чел) Муж. 12 12 Возр. (лет) 31 - 55 (45) 21 – 55 (35) Жен. 8 8 Возр. (лет) 27 – 50 (33) 37 – 48 (43) Индекс совм. 8 (4;13) 9 (5;13) Зам. Поч. Тер. (лет) 2,1 2,4
  • 6. Характеристика реципиентов Причины ТХПН Основная группа ТКИ + ИС (20 чел) Контрольная группа ИС (20 чел) Хр. пиелонефрит 9 9 Хр. гломерулонефрит 5 5 Поликистоз почек 4 4 Гипертоническая нефропатия 2 - Антифосфолипидный синдром - 2
  • 7. 2: выделение и сбор мононуклеарных клеток 4: Реинфузия 3: Мононуклеарные клетки подвергаются УФ облучению 1: Эксфузия крови в ротор сеператора клеток 4: Инкубация
  • 8. Методика проведения ТКИ Первые 2 недели 2 раза в неделю Вторые 2 недели 1 раз в неделю Второй месяц 1 раз в 2 недели Третий – шестой месяц 1 раз в месяц
  • 9. Результаты протокольной биопсии Основная группа ТКИ + ИС (20 чел) Контрольная группа ИС (19 чел) 30 сут 180 сут 30 сут 180 сут Канальцевый некроз 8 - 3 - IA Banff - - 1* - IB Banff - - - 1* IIA Banff - - - - IIB Banff - - 1* - III Banff - - 1** - Фокально-сегментарный гломерулосклероз - - - 1** Хр. Тр. Нефропатия 1-2 ст. 1 5 - 1 Хр. Тр. Нефропатия 3 ст. - - - 2* 0 200 400 600 800 1000 1200 1400 Дни 60% 70% 80% 90% 100% CumulativeProportionSurviving Complete Censored ТКИ+ИС ИС Общая выживаемость (OS) почечного аллотрансплантата в двух группах (Kaplan-Meier) Gehan's Wilcoxon Test p = ,00932 Cox-Mantel Test p = ,00803 Peto & Peto Wilcoxon Test p = ,00837 Log-Rank Test p = ,00816 Трансплантатэктомия в контрольной группе Острое отторжение -2 (Сарайкин, Ищенко); ФСГ - 1 (Малышев); Тромбоз -1(Саидов)
  • 10. Результаты биопсии ПАТ в двух группах на 30 сутки после трансплантации биопсия ПАТ реципиента контрольной группы биопсия ПАТ реципиента основной группы диффузная инфильтрация интерстиция лимфоцитами с примесью нейтрофилов, многие канальцы полностью разрушены. В участках относительно – сохранной паренхимы – тяжелое повреждение канальцевого эпителия, явления тубулита (Banff III). очаговый склероз интерстиция и атрофия канальцев, занимающие менее 5% почечной паренхимы. Очаговая инфильтрация интерстиция лимфоцитами без явлений тубулита. Остаточные явлениям ОКН
  • 11. Бессобытийная продолжительность жизни (без признаков заболевания) (DFS) после трансплантации почки в двух группах реципиентов (Kaplan- Meier) 0 100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000 1100 Время наблюдения после трансплантации (дни) -10% 0% 10% 20% 30% 40% 50% 60% 70% 80% 90% 100% Долясобытий(%) Complete CensoredТКИ+ИС ИС Grouping variable: Лечение Total number of valid observations: 38 uncensored: 21 ( 55,26%) censored: 17 ( 44,74%) Valid observations: Group 1 (ТКИ+ИС ): 19 Group 2 (ИС ): 19 Uncensored: 6 ( 31,58%) 15 ( 78,95%) Censored: 13 ( 68,42%) 4 ( 21,05%) Gehan's Wilcoxon Test p = ,00603 Cox's F-Test p = ,00063 Cox-Mantel Test p = ,00120 Peto & Peto Wilcoxon Test p = ,00379 Log-Rank Test p = ,00187
  • 12. Продолжительность жизни до инфекционного события (DFS) после трансплантации почки в двух группах реципиентов (Kaplan-Meier) 0 100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000 1100 Time 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1,0 CumulativeProportionSurviving Complete Censored ТКИ+ИС ИС Gehan's Wilcoxon Test p = ,00901 Cox-Mantel Test p = ,00114 Log-Rank Test p = ,00166 Основная группа: пиелонефрит трансплантата (Кузьмичев – 10 сутки после трансплантации) Контрольная группа: пневмония (Шиендо, Сарайкин, Львова, Нистратов, Азаров, Рустамов – смерть) Пиелонефрит (Чернявская, Малышев) ЦМВ – Сумская, Степаненко, Куликов)
  • 13. В ГКГ Класс II ТКР CD80/86 CD28 IL-2 FasL Fas CD4 ГКГ Класс I CD8 IL-4 IL-5 ГКГ Класс I/II ГКГ Класс I/II Перфорин Гранзим В CTLA-4 CD80/86 CTLA-4 CD28 ТКР CD27 CD70 CD3+ CD4+ CD28+ CD27+ CD45RO- РГЗ
  • 14. Сравнительный анализ экспрессииСравнительный анализ экспрессии CD28CD28 на наивных хелперных Т-лимфоцитах через 1на наивных хелперных Т-лимфоцитах через 1 месяц после аллогенной трансплантации почки в двух группах: ИС и ИС+ТКИмесяц после аллогенной трансплантации почки в двух группах: ИС и ИС+ТКИ Относительное количество наивных CD4+ лимфоцитов, экспрессирующих CD28 Mean ±SE ±1,96*SE 4 30 Сутки после трансплантации 35 40 45 50 55 60 65 70 % MFI CD28 на наивных CD4+ лимфоцитах Mean ±SE ±1,96*SE 4 30 Сутки после трансплантации 14 16 18 20 22 24 26 ед Относительное количество наивных CD4+ лимфоцитов, экспрессирующих CD28 Mean ±SE ±1,96*SE 4 30 Сутки после трансплантации 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 % MFI CD28 на наивных CD4+ лимфоцитах Mean ±SE ±1,96*SE 4 30 Сутки после трансплантации 12 14 16 18 20 22 24 26 Контрольная группа ИС Основная группа ИС+ТКИ
  • 15. Динамика экспрессииДинамика экспрессии CD28CD28 на наивныхна наивных CD4CD4 лимфоцитах у больныхлимфоцитах у больных после аллогенной трансплантации почек в зависимости от леченияпосле аллогенной трансплантации почек в зависимости от лечения Иммуносупрессия Иммуносупрессия + ТКИ 3 сутки 30 сутки MFI – 10,38 ед MFI - 12, 95 ед MFI - 28, 2 MFI – 16,1
  • 16. Динамика экспрессииДинамика экспрессии CD28CD28 на наивныхна наивных CD4CD4 лимфоцитах у больныхлимфоцитах у больных после аллогенной трансплантации почек в зависимости от леченияпосле аллогенной трансплантации почек в зависимости от лечения ИММУНОСУПРЕССИЯ ИММУНОСУПРЕССИЯ + ТКИИММУНОСУПРЕССИЯ + ТКИ 3 СУТКИ 30 СУТКИ MFI – 31,7 ед MFI - 9,45 ед MFI - 28, 2 MFI – 12,2
  • 17. Процесс альтернативного сплайсинга экзонов mРНК, кодирующих трансмембранный и цитоплазматический домены молекулы CD 28
  • 18. В ГКГ Класс II ТКР CD80/86 CD28 IL-2 FasL Fas CD4 ГКГ Класс I CD8 IL-4 IL-5 ГКГ Класс I/II ГКГ Класс I/II Перфорин Гранзим В CTLA-4 CD80/86 CTLA-4 CD28 ТКР CD27 CD70
  • 19. Новая иммуномодулирующая стратегия, которая использует механизмы индукциитолерантности к донорским антигенам, через костимуляторные сигналы в регуляции Т-клеточного ответа, может разрешить проблемугенетической несовместимости в трансплантологии.

Notes de l'éditeur

  1. Проблема индукции иммунологической толерантности в трансплантологии на сегодняшний день является наиболее актуальным и перспективным научным направлением. Глобальная иммуносупрессия в трансплантологии способствует существенному сокращению случаев отторжения пересаженных органов, но в то же время ингибирует и регуляторные механизмы, играющие важную роль в поддержании толерантности, в связи с чем, повышается восприимчивость пациентов к различным оппортунистическим инфекциям и злокачественным заболеваниям. Учитывая эти обстоятельства в 2010 году нами был разработан протокол клинического исследования эффективности Трансляционной клеточной иммунотерапии с целью профилактики реакции острого отторжения в ближайшем посттрансплантационном периоде. Протокол был одобрен этическим комитетом и утвержден Ученым Советом института в качестве поисковой научно-исследовательской работы.
  2. Итоги данной работы были доложены на различных научных форумах, в том числе и на 2 заседании рабочей группы по трансплантации солидных органов с применением фотофереза в мае 2013 года в Париже. К нашему сообщению был отмечен выраженный интерес и было принято решение следующее заседание рабочей группы провести в Москве в нашем институте. Кроме этого, в намеченные сроки была защищена кандидатская диссертация по этой теме, которая в последующем была отмечена, как одна из лучших работ среди молодых ученых за 2013 год. На предложенный нами способ профилактики и лечения острого отторжения был получен патент на изобретение. В 2013 году было издано учебное пособие. Материалы данного исследования вошли в главу изданной монографии «Экстракорпоральная фотохимиотерапия и Трансиммунизация».
  3. Целью настоящего исследования явилось изучение формирования механизмов иммунологической толерантности при аллогенной трансплантации почки, которая достигается включением в стандартный протокол иммуносупрессивной терапии трансляционной клеточной иммунотерапии для снижения вероятности эпизодов острого отторжения. С достижения этой цели мы провели сравнительный анализ клинических и иммунологических показателей в 2 группах: 1 – стандартный протокол иммуносупрессии после трансплантации и 2 – иммуносупрессия + ТКИ.
  4. Из представленных слайдов следует, что обе группы больных были вполне репрезентативны.
  5. Выделение мононуклеарных клеток проводили с помощью клеточного сепаратора «HAEMONETICS MCS+» по протоколу RBCP (выделение стволовых клеток). Клеточную суспензию подвергали ультафиолетовому воздействию на аппарате УФО «ЮЛИЯ» при длине волны 320-380 нм. В качестве фотосенсибилизатора применяли отечественный препарат аммифурин (8-Метоксипсорален (8-МОП)).
  6. Методика проведения ТКИ. Первые 2 недели – 2 раза в неделю, вторые 2 недели – 1 раз в неделю, второй месяц – 1 раз в 2 недели, третий – шестой месяц – 1 раз в месяц.
  7. В основной группе, с включением в стандартный протокол иммуносупрессивной терапии курса ТКИ ни у одного из пациентов, при проведении протокольной биопсии ПАТ не было выявлено патологических изменений, свойственных АРО. Морфологические изменения в трансплантате на 30 сутки соответствовали остаточным явлениям острого канальцевого некроза, а на 180 сутки у 5 пациентов - начальные проявления хронической трансплантационной нефропатии 1 -2 стадии. У четверых из двадцати пациентов контрольной группы, в ранние сроки после АТТП при протокольной биопсии диагностировано острое отторжение трансплантата, которое у двух пациентов закончилось трансплантатэктомией в первые 30 дней после трансплантации. Трансплантатэктомия у 1 больного по поводу фокально-сегментарного гломерулосклероза и 1 – Хр. Трансплантационной нефропатии 3 ст.
  8. При анализе инфекционных осложнений было установлено, что в основной группе у 1 больного на 10 сутки после трансплантации развился пиелонефрит. В контрольной группе было отмечено 11 эпизодов инфекционных осложнений, один из которых закончился летально.
  9. Процесс формирования отторжения аллотрансплантата происходит в результате реализации нескольких сигнальных путей. Первый сигнальный путь предусматривает активацию Т-клеточного рецептора путем взаимодействия между ТКР на наивных Т-лимфоцитах и комплексном антигенного пептида с молекулами ГКГ на АП ДК. При этом установлено, что CD4 Т-клетки имеют решающее значение в отторжении. Это обусловлено тем, что в процессе активации наивные CD4 Т-клетки секретируют различные цитокины, такие как ИЛ-2, ИЛ-;, ИЛ-5 и гамма интерферон, которые координируют 3 принципиально важных механизмов почечного отторжения: цитотоксический Т-лимфоцитарный ответ, антител – опосредованный ответ и реакцию гиперчувствительности замедленного типа. Однако ключевым регулятором Т-клеточных ответов является второй – коактивационный сигнальный путь. Этот путь реализуется преимущественно посредством взаимодействия молекул коактивации семейства В-7 (CD80 и CD86) на антиген-презентирующих клетках (АПК), с соответствующими им лигандами - CD28 или CTLA-4 (CD152) на поверхности непраймированных (наивных) CD4+ Т-лимфоцитов. Молекула CD28 при этом является первичным Т-клеточным костимуляторным рецептором, стимулирующий эффект которой обеспечивает положительный сигнал, приводящий к полной активации и пролиферации Т-клеток, усилении продукции IL-2 и других цитокинов, в том числе и антиапоптотических, предотвращая гибель Т-клеток. Молекула CTLA-4, ограничивает Т-клеточную активацию,, терминирует лимфоцитарный ответ,,, и способствует индуции иммуологической толерантности к презентируемым антигенам. Эти обстоятельства послужили для нас основанием для изучения влияния ТКИ на экспрессию молекулы коактивации CD28 на наивных хелперных Т-лимфоцитах в ближайшем посттрансплантационном периоде в сравнении с проспективным контролем и группой здоровых людей. В качестве исходной точки иммунологических исследований был выбран первый день проведения ТКИ, т.е. четвертые сутки после трансплантации. Для объективизации полученных результатов, мы объединили исходные иммунологические параметры двух групп больных (основной и контрольной).
  10. При иммунологическом обследовании было установлено, что в процессе ТКИ происходит достоверное снижение как клеток, экспрессирующих СD28, так и плотности экспрессии рецептора коактивации СD28 на наивных Т-лимфоцитах в отличие от контрольной группы.
  11. В качестве примера приводим два наблюдения.
  12. На основании иммунологических исследований была сформулирована концепция механизма формирования толерантности к антигенам ГКГ донорского органа. В процессе ТКИ молекула 8-МОП, обладая высокой авидностью к пиримидиновым основаниям нуклеиновых кислот, интеркалирует между тимином со стороны информационной ДНК и урацилом со стороны транскрибируемой первичной mРНК тех молекул, которые подвержены наиболее интенсивной транскрипции, в данном случае - CD28 и CD27. В результате воздействия электромагнитного излучения в ультрафиолетовом диапазоне А, происходит образования прочных перекрестных связей, приводящих к прерыванию процесса транскрипции mРНК, с последующим прекращением трансляции соответствующего белка. При недостаточном количестве перекрестных связей для прерывания транскрипции, первичная mРНК может иметь дефект, который проявляется в первую очередь в тех экзонах, которые кодируют трансмембранный домен молекулы CD28 и CD27. В результате уменьшается плотность экспрессии мембранных и синтезируются растворимые (секретируемые) формы sCD28 и sCD27 с делетированным в результате альтернативного сплайсинга трансмембранным доменом.
  13. В последующем, при отсутствии сигнала, генерируемого рецептором CD28, наивные CD4-позитивные Т-лимфоциты формируют фенотип Th1 с негативной регуляцией цитокинов, являющихся медиаторами гуморального ответа. Отсутствие костимуляторного сигнала СD28 приводит к переключению взаимодействия молекул класса В7 (CD80 и СВ86) на CTLA-4. Такое взаимодействие ограничивает Т-клеточную активацию, терминирует лимфоцитарный ответ и способствует индукции иммунологической толерантности к презентируемым антигенам. Учитывая, что исследуемый материал представлял парные почки, а возраст, длительность предтрансплантационного периода, сопоставимость по HLA – антигенам существенно не различались между двумя исследуемыми группами, полученные данные являются наиболее достоверными, убедительно свидетельствующие об индукции иммунологической толерантности к ткани донорского органа. Метод может быть с успехом применен при трансплантации других аллогенных органов и тканей.
  14. Новая иммуномодулирующая стратегия, которая использует механизмы индукции толерантности к донорским антигенам, через костимуляторные сигналы в регуляции Т-клеточного ответа, может разрешить проблему генетической несовместимости в трансплантологии.