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Redescripción de Lamanema
chavezi por MO y MEB
ASIGNATURA : Producción de camélidos sudamericanos
DOCENTE : M.Sc Nils Herber Flores Huarco
ALUMNO : Alex Benjamin Huillca Chillihuani
Introducción
Lamanema chavezi ha sido reportada en cuatro países sudamericanos: Perú, Argentina, Chile y Bolivia en
tres especies de camélidos (alpacas, llamas y vicuñas). También ha sido reportada en Nueva Zelanda y
EEUU en los dos especies domésticos (Alpacas y llamas) y en dos roedores silvestres en Argentina.
Presenta un ciclo enterohepático, lugar donde se produce la muda de larvas de tercer a cuarto estadio, esto
lo que contribuye a la presencia de anemia e hipoproteinemia (Chávez et al., 1967; Guerrero et al., 1973).
El nematodo Lamanema chavezi, es el principal componente del complejo de la neumogastroenteritis
verminosa de los CSA, es miembro único de su género.
En los últimos décadas se ha observado un interés creciente por las llamas y alpacas en América del Norte,
Europa y Oceanía, sin embargo, su potencial productivo no se expresa a cabalidad por diversos factores,
esto disminuye su capacidad productiva del animal.
Introducción
Además de la presencia de una vesícula cefálica y la similitud en el tipo bursal afín con la subfamilia
Cooperiinae dentro de Trichostrongylidae, ubicándolo finalmente, dentro de la familia Molineidae basada en
el rayo 4 corto y la estructura de la espícula. En consecuencia, pertenece firmemente a Molineinae debido
a que presenta una bolsa tipo 2-1-2 con tendencia al tipo 3-2 propio de la subfamilia.
En 1977 por Durette- Desset y chabaud elevaron la subfamilia, y transferieron la subfamilia Nematodirinae
de la familia Trichostrongylidae a la Molineideae, colocando, así a Lamanema dentro de la subfamilia
Nematodirinae.
Primera descripción por Becklund (1963) lo asignó a la Familia Trichostrongylidae por la presencia de un
diente dorsal prominente y dos dientes laterales pequeños en la cavidad bucal. Sin embargo no fue
clasificado en ninguna subfamilia debido a la presencia de una membrana bursal accesorio.
Este parásito L. chavezi ha pasado diversos cambios en su clasificación taxonómica.
Materiales y mÉtodos
LOCALIZACIÓN
Se realizó en un camal de
CSA de la provincia de Melgar,
departamento de Puno, Perú
en marzo de 2013.
Se colectaron 8 segmentos
gastrointestinales (duodeno-yeyuno)
de alpacas Suri y Huacaya de 5 a 7
años de edad.
Además, se recolectaron 20
muestras de heces de alpacas
adultas directamente del recto
conservadas a 4°C.
PROCEDIMIENTO
Las muestras fueron procesadas empleando un tamiz
circular para recuperar los estadios adultos de los
parásitos, luego fueron fijados en glutaraldehído al 4%
y analizados mediante MEB.
Asimismo, otro grupo de parásitos adultos fueron
fijados en alcohol al 70% y evaluados mediante MO.
Para la obtención de huevos y larvas de tercer estadio,
fueron sometidas a la técnica de flotación.
Los huevos fueron observados en el estereoscopio,
lavados para ser fijados en glutaraldehído al 4%, y
finalmente fueron evaluados por MEB.
ANIMALES
Materiales Y Métodos
Para la MO
Los tres estadios larvarios del parásito, previamente
conservados en alcohol al 70%, fueron clarificados en una
mezcla de fenol con alcohol etílico 50% y en lactofenol de
Amann.
Se realizó el estudio machos y hembras de L. chavezi en
estadio adulto, con la finalidad de reconocer las
características a nivel del aparato digestivo, reproductor y las
características externas.
Algunas estructuras del parásito se resaltaron con el
colorante carmín acético de Semichon.
Asimismo, se realizaron cortes transversales para describir
algunas estructuras.
Para la MEB
Los huevos, larvas y adultos previamente
fijados, fueron deshidratados en alcoholes
entre 30 al 100%, para luego ser secados por
punto crítico.
Posteriormente, se procedió a un equipo de
recubrimiento por pulverizado-metalizador,
para realizar la toma de imágenes, lectura e
interpretación, utilizando un microscopio
electrónico de barrido con cámara
incorporada.
Extremidades cefálicas
La vesícula cefálica es estrecha,
ligeramente ensanchada en la parte
anterior. (Fig 1).
MEB se observa una abertura bucal
simple triangular, acompañada de un
rudimento de corona foliácea que la
rodea, con seis papilas en el círculo
interno y dos ánfidos (Figs. 7 y 8).
El esófago presenta una formación
neodonta a nivel del extremo
anterior (Fig. 7), mientras que a nivel
posterior es ensanchado y presenta
una glándula esofágica desarrollada.
Formación
Neodonta
Papilas
Rudimento de la
Corona Foliácea
Ánfidos
Papilas etapa
adulta
Vesícula cefálica
Resultados y DISCUSIÓN
Poro excretor
Es pequeño y se abre en
la parte anterior, al nivel o
posterior a la unión
esofágicointestinal.
Los deiridios son muy
pequeños y poco visibles.
Los machos poseen
papilas prebursales
grandes (Fig. 5).
Gubernáculo
Papilas prebursales
Sinlophe
En ambos sexos se inicia a partir
de la terminación de la vesícula
cefálica.
Tanto por MO y MEB se observó
que algunas crestas del sinlophe
están incompletas o interrumpidas
a cualquier nivel del cuerpo (Fig.
10) y que aquellas de la cara
ventral del cuerpo de la parte
anterior al ano disminuyen en
grosor (Fig. 9).
Reducción en el grosor
de las crestas del
sinlophe cerca del ano en
las hembras
Crestas incompletas en
sinlophe
Bolsa copulatriz
Presenta 2 papilas en la cara
dorsal de los lóbulos laterales,
posiblemente de función
sensorial. (Fig. 11).
El borde inferior de los lóbulos
laterales se encuentra finamente
aserrado (Fig. 3) y en la cara
interna llevan pequeñas
elevaciones aplanadas ovales
(Fig. 2).
La presencia del rayo 4 es muy
importante para que Lamanema
sea incluido en la familia
Molineidae y coinciden en la
mayoría con Becklund (1963).
Cara dorsal de la bolsa
copulatríz que muestra
papilas (P) en los lóbulos
laterales
Rayos de la bolsa copulatriz en posición
2-1-2 y lóbulo lateral de borde aserrado
Presencia de
nodulaciones
Espículas
Se encuentran fuertemente
quitinizadas y son huecas.
El extremo proximal se
asemeja a la cabeza del fémur
humano, en donde se insertan
los músculos retractores.
Presentan alas, las cuales se
inician en el tercio anterior y
son de bordes ondulados (Fig.
4).
Espículas mostrando la rama externa (RE)
e interna (RI)
Gubernáculo
Fuertemente quitinizado,
de color marrón, y de forma
navicular en vista frontal
(Fig. 5).
A la MO, se observa que
los machos, en la cara
anterior de la cloaca,
presentan una membrana
bursal accesoria con dos
papilas.
Aparato digestivo
El esófago es claviforme.
El anillo nervioso se
localiza a nivel de la parte
media del cuerpo, siendo
poco visible.
Gubernáculo (G)
Papilas prebursal
Aparato genital femenino
Es didelfo (Fig. 6), presentando dos
ramas uterinas con 18 a 24 huevos
cada una.
Presenta el vestíbulo anterior y el
posterior.
La vagina vera antecede a la vulva.
La vulva presenta labios pequeños.
Los huevos son alargados, de
bordes redondeados y cáscara lisa
(Fig. 13), y presentan
aproximadamente 17 blastómeros.
Larva
La larva L3 presenta dos alas
paralelas en cada campo lateral (Fig.
12) que se extienden a lo largo de la
longitud del cuerpo.
El intestino está formado por 8
células (Fig. 14)
huevo
alargado, bordes
redondeados y cáscara lisa
intestino de larva de tercer
estadio constituido por ocho
células
Alas laterales
Descripción Morfológica
En el presente estudio, la longitud promedio fue de 10.8
y 19.2 mm para machos y hembras, respectivamente
(Cuadro 1).
Tabla
Discusión
Otro carácter importante a ser considerado en el diagnóstico, es la presencia de la doble ala lateral en el estadio larval L3,
diferente de las alas en larvas L3 de otras especies (Audebert y Durette-Desset, 2007).
Especímenes hembra de L. chavezi en roedores silvestres presentaron una variación sensible en el número de crestas del
sinlophe (Digiani y Durette-Desset, 2007), donde los resultados del presente estudio revelan que el número de crestas
varía en diferentes partes del cuerpo del nematodo, debido a las interrupciones de las mismas.
En relación al aparato genital femenino, las medidas obtenidas coinciden con las del infundíbulo, y vagina vera, cola y
apéndice señaladas por Sutton y Durette-Desset (1985); sin embargo, en este trabajo se agregan las medidas del
vestíbulo, la descripción de la vagina vera y la vulva.
La cavidad bucal (Becklund, 1963), en tanto que Sutton y Durette-Desset (1985) la describen como una abertura bucal
redondeada con labios y con ausencia de una corona radiada y sin pétalos libres, en el presente estudio se observó la
presencia de una boca simple triangular acompañada de un rudimento de corona foliácea que rodea la abertura bucal.
Conclusión
Se reportan nuevas estructuras en L. chavezi, y se detallan características de las estructuras
previamente descritas. Por ejemplo, Las papilas ubicadas en la cara dorsal de cada lóbulo
lateral de la bolsa copulatríz son estructuras nunca antes observadas en nematodos.
Se presenta información sobre la morfoanatomía del parásito dentro de un ámbito taxonómico.
Los hallazgos morfo-anatómicos permiten conocer la relación de este nematodo con otros de
su mismo grupo taxonómico, además de su influencia con fines de diagnóstico médico.
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  • 1. Redescripción de Lamanema chavezi por MO y MEB ASIGNATURA : Producción de camélidos sudamericanos DOCENTE : M.Sc Nils Herber Flores Huarco ALUMNO : Alex Benjamin Huillca Chillihuani
  • 2. Introducción Lamanema chavezi ha sido reportada en cuatro países sudamericanos: Perú, Argentina, Chile y Bolivia en tres especies de camélidos (alpacas, llamas y vicuñas). También ha sido reportada en Nueva Zelanda y EEUU en los dos especies domésticos (Alpacas y llamas) y en dos roedores silvestres en Argentina. Presenta un ciclo enterohepático, lugar donde se produce la muda de larvas de tercer a cuarto estadio, esto lo que contribuye a la presencia de anemia e hipoproteinemia (Chávez et al., 1967; Guerrero et al., 1973). El nematodo Lamanema chavezi, es el principal componente del complejo de la neumogastroenteritis verminosa de los CSA, es miembro único de su género. En los últimos décadas se ha observado un interés creciente por las llamas y alpacas en América del Norte, Europa y Oceanía, sin embargo, su potencial productivo no se expresa a cabalidad por diversos factores, esto disminuye su capacidad productiva del animal.
  • 3. Introducción Además de la presencia de una vesícula cefálica y la similitud en el tipo bursal afín con la subfamilia Cooperiinae dentro de Trichostrongylidae, ubicándolo finalmente, dentro de la familia Molineidae basada en el rayo 4 corto y la estructura de la espícula. En consecuencia, pertenece firmemente a Molineinae debido a que presenta una bolsa tipo 2-1-2 con tendencia al tipo 3-2 propio de la subfamilia. En 1977 por Durette- Desset y chabaud elevaron la subfamilia, y transferieron la subfamilia Nematodirinae de la familia Trichostrongylidae a la Molineideae, colocando, así a Lamanema dentro de la subfamilia Nematodirinae. Primera descripción por Becklund (1963) lo asignó a la Familia Trichostrongylidae por la presencia de un diente dorsal prominente y dos dientes laterales pequeños en la cavidad bucal. Sin embargo no fue clasificado en ninguna subfamilia debido a la presencia de una membrana bursal accesorio. Este parásito L. chavezi ha pasado diversos cambios en su clasificación taxonómica.
  • 4. Materiales y mÉtodos LOCALIZACIÓN Se realizó en un camal de CSA de la provincia de Melgar, departamento de Puno, Perú en marzo de 2013. Se colectaron 8 segmentos gastrointestinales (duodeno-yeyuno) de alpacas Suri y Huacaya de 5 a 7 años de edad. Además, se recolectaron 20 muestras de heces de alpacas adultas directamente del recto conservadas a 4°C. PROCEDIMIENTO Las muestras fueron procesadas empleando un tamiz circular para recuperar los estadios adultos de los parásitos, luego fueron fijados en glutaraldehído al 4% y analizados mediante MEB. Asimismo, otro grupo de parásitos adultos fueron fijados en alcohol al 70% y evaluados mediante MO. Para la obtención de huevos y larvas de tercer estadio, fueron sometidas a la técnica de flotación. Los huevos fueron observados en el estereoscopio, lavados para ser fijados en glutaraldehído al 4%, y finalmente fueron evaluados por MEB. ANIMALES
  • 5. Materiales Y Métodos Para la MO Los tres estadios larvarios del parásito, previamente conservados en alcohol al 70%, fueron clarificados en una mezcla de fenol con alcohol etílico 50% y en lactofenol de Amann. Se realizó el estudio machos y hembras de L. chavezi en estadio adulto, con la finalidad de reconocer las características a nivel del aparato digestivo, reproductor y las características externas. Algunas estructuras del parásito se resaltaron con el colorante carmín acético de Semichon. Asimismo, se realizaron cortes transversales para describir algunas estructuras. Para la MEB Los huevos, larvas y adultos previamente fijados, fueron deshidratados en alcoholes entre 30 al 100%, para luego ser secados por punto crítico. Posteriormente, se procedió a un equipo de recubrimiento por pulverizado-metalizador, para realizar la toma de imágenes, lectura e interpretación, utilizando un microscopio electrónico de barrido con cámara incorporada.
  • 6. Extremidades cefálicas La vesícula cefálica es estrecha, ligeramente ensanchada en la parte anterior. (Fig 1). MEB se observa una abertura bucal simple triangular, acompañada de un rudimento de corona foliácea que la rodea, con seis papilas en el círculo interno y dos ánfidos (Figs. 7 y 8). El esófago presenta una formación neodonta a nivel del extremo anterior (Fig. 7), mientras que a nivel posterior es ensanchado y presenta una glándula esofágica desarrollada. Formación Neodonta Papilas Rudimento de la Corona Foliácea Ánfidos Papilas etapa adulta Vesícula cefálica Resultados y DISCUSIÓN
  • 7. Poro excretor Es pequeño y se abre en la parte anterior, al nivel o posterior a la unión esofágicointestinal. Los deiridios son muy pequeños y poco visibles. Los machos poseen papilas prebursales grandes (Fig. 5). Gubernáculo Papilas prebursales
  • 8. Sinlophe En ambos sexos se inicia a partir de la terminación de la vesícula cefálica. Tanto por MO y MEB se observó que algunas crestas del sinlophe están incompletas o interrumpidas a cualquier nivel del cuerpo (Fig. 10) y que aquellas de la cara ventral del cuerpo de la parte anterior al ano disminuyen en grosor (Fig. 9). Reducción en el grosor de las crestas del sinlophe cerca del ano en las hembras Crestas incompletas en sinlophe
  • 9. Bolsa copulatriz Presenta 2 papilas en la cara dorsal de los lóbulos laterales, posiblemente de función sensorial. (Fig. 11). El borde inferior de los lóbulos laterales se encuentra finamente aserrado (Fig. 3) y en la cara interna llevan pequeñas elevaciones aplanadas ovales (Fig. 2). La presencia del rayo 4 es muy importante para que Lamanema sea incluido en la familia Molineidae y coinciden en la mayoría con Becklund (1963). Cara dorsal de la bolsa copulatríz que muestra papilas (P) en los lóbulos laterales Rayos de la bolsa copulatriz en posición 2-1-2 y lóbulo lateral de borde aserrado Presencia de nodulaciones
  • 10. Espículas Se encuentran fuertemente quitinizadas y son huecas. El extremo proximal se asemeja a la cabeza del fémur humano, en donde se insertan los músculos retractores. Presentan alas, las cuales se inician en el tercio anterior y son de bordes ondulados (Fig. 4). Espículas mostrando la rama externa (RE) e interna (RI)
  • 11. Gubernáculo Fuertemente quitinizado, de color marrón, y de forma navicular en vista frontal (Fig. 5). A la MO, se observa que los machos, en la cara anterior de la cloaca, presentan una membrana bursal accesoria con dos papilas. Aparato digestivo El esófago es claviforme. El anillo nervioso se localiza a nivel de la parte media del cuerpo, siendo poco visible. Gubernáculo (G) Papilas prebursal
  • 12. Aparato genital femenino Es didelfo (Fig. 6), presentando dos ramas uterinas con 18 a 24 huevos cada una. Presenta el vestíbulo anterior y el posterior. La vagina vera antecede a la vulva. La vulva presenta labios pequeños. Los huevos son alargados, de bordes redondeados y cáscara lisa (Fig. 13), y presentan aproximadamente 17 blastómeros. Larva La larva L3 presenta dos alas paralelas en cada campo lateral (Fig. 12) que se extienden a lo largo de la longitud del cuerpo. El intestino está formado por 8 células (Fig. 14) huevo alargado, bordes redondeados y cáscara lisa intestino de larva de tercer estadio constituido por ocho células Alas laterales
  • 13. Descripción Morfológica En el presente estudio, la longitud promedio fue de 10.8 y 19.2 mm para machos y hembras, respectivamente (Cuadro 1).
  • 14. Tabla
  • 15. Discusión Otro carácter importante a ser considerado en el diagnóstico, es la presencia de la doble ala lateral en el estadio larval L3, diferente de las alas en larvas L3 de otras especies (Audebert y Durette-Desset, 2007). Especímenes hembra de L. chavezi en roedores silvestres presentaron una variación sensible en el número de crestas del sinlophe (Digiani y Durette-Desset, 2007), donde los resultados del presente estudio revelan que el número de crestas varía en diferentes partes del cuerpo del nematodo, debido a las interrupciones de las mismas. En relación al aparato genital femenino, las medidas obtenidas coinciden con las del infundíbulo, y vagina vera, cola y apéndice señaladas por Sutton y Durette-Desset (1985); sin embargo, en este trabajo se agregan las medidas del vestíbulo, la descripción de la vagina vera y la vulva. La cavidad bucal (Becklund, 1963), en tanto que Sutton y Durette-Desset (1985) la describen como una abertura bucal redondeada con labios y con ausencia de una corona radiada y sin pétalos libres, en el presente estudio se observó la presencia de una boca simple triangular acompañada de un rudimento de corona foliácea que rodea la abertura bucal.
  • 16. Conclusión Se reportan nuevas estructuras en L. chavezi, y se detallan características de las estructuras previamente descritas. Por ejemplo, Las papilas ubicadas en la cara dorsal de cada lóbulo lateral de la bolsa copulatríz son estructuras nunca antes observadas en nematodos. Se presenta información sobre la morfoanatomía del parásito dentro de un ámbito taxonómico. Los hallazgos morfo-anatómicos permiten conocer la relación de este nematodo con otros de su mismo grupo taxonómico, además de su influencia con fines de diagnóstico médico.