Artigo publicado nos anais do Congresso Brasileiro de Macaúba, em 2013.

1. CALOGÊNSE A PARTIR DE EXPLANTES FOLIARES JOVENS DE MACAÚBA1
CULTIVADOS IN VITRO.2
ANA PAULA DE SOUZA ANDRADE1
, THAIS ROSELI CORRÊA2
, MANUELA MARIA3
CAVALCANTE GRANJA2
, DÉBORA DURSO NEVES CAETANO3
E SÉRGIO YOSHIMITSU4
MOTOIKE4
5
6
INTRODUÇÃO7
8
Apesar do reconhecido potencial econômico da palmeira macaúba (Acrocomia aculeata9
(Jacq.) Lood. Ex Martius), sua exploração ainda ocorre de forma extrativista em populações nativas,10
atividade esta cercada de limitações que impossibilita o fornecimento adequado de matéria prima o11
que denota a necessidade de plantios racionais e o desenvolvimento de tecnologias associadas ao12
sistema de cultivo.13
A cultura de tecidos vegetais, como biotecnologia, apresenta vários benefícios para14
agricultura e mais especificamente, para os programas de melhoramento genético de plantas, tendo15
diferentes aplicações práticas como a clonagem de genótipos superiores (CARVALHO &16
ARAÚJO, 2007).17
Para clonagem de plantas e obtenção de plantas idênticas à planta matriz, o processo a ser18
utilizado é a embriogênese somática, técnica esta que constitui ferramenta de grande importância19
para espécies que não apresentam propagação vegetativa como a macaúba (Acrocomia aculeata20
(Jacq.) Lood. ex Mart.), pois viabiliza a propagação de plantas elite in vitro em larga escala com a21
utilização de pequeno espaço físico.22
Em macaúba, como para muitas monocotiledôneas, a calogênese é pré-requisito para o23
início do processo de embriogênese somática, e requer a presença de reguladores de crescimento no24
meio de cultura. Dentre os reguladores de crescimento, as auxinas são requeridas para a iniciação25
dos calos enquanto as citocininas estão envolvidas no processo de diferenciação e continuidade dos26
eventos morfogenéticos que darão origem aos embriões somáticos (STEINMACHER et al., 2007;27
KAPARAKIS & ALDERSON, 2008).28
Este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito da auxina Picloram na indução da29
calogênese para o processo da embriogênese somática em macaúba.30
31
1
Doutoranda do programa de Fitotecnia - UFV/ Viçosa. e-mail: anapaula_souzaandrade@yahoo.com.br
2
Doutorandas do programa de Genética e Melhoramento – UFV/Viçosa. Email: thaisroselicorrea@hotmail; manuela.granja@ufv.br
3
Graduanda em Ciências Biológicas – UFV/ Viçosa. e-mail: ddncaetano@gmail.com
4
Professor Adjunto do Departamento de Fitotecnia – UFV/ Viçosa. e-mail: motoike@ufv,br
1

2. MATERIAL E MÉTODOS32
Folhas imaturas foram extraídas de planta de macaúba (Acesso 26) de aproximadamente33
quatro anos de idade, pertencente ao Banco de Germoplasma instalado no Município de34
Araponga/MG. Os explantes foram submetidos à solução asséptica (1% de hipoclorito de sódio,35
NaOCl) durante 10 minutos e em seguida enxaguadas oito vezes com água destilada estéril em36
câmara de fluxo laminar.37
Após a desinfestação, as folhas imaturas foram seccionadas transversalmente em segmentos38
de 1 cm e inoculadas em meio de cultura básicos com sais e vitaminas Y3 (Eeuwens, 1978), 30 g L-
39
1
de sacarose, 3,0 g L-1
de carvão ativado e 2,5 g L-1
de Phytagel®
para a solidificação. A auxina40
Picloram, capaz de induzir o processo de embriogênese foi testada em cinco concentrações: 90 µM,41
180 µM, 270 µM, 360 µM e 450µM. Após a inoculação dos explantes as placas foram seladas com42
filme PVC (Rolopac®) e as culturas foram mantidas em sala de crescimento, à temperatura de 27 ±43
1 °C na ausência de luminosidade. Foram utilizadas quarenta repetições por tratamento, sendo cada44
repetição composta por uma placa de petri com quatro explantes.45
Avaliações de contaminantes biológicos e oxidação foram realizadas após 10 dias da46
inoculação. Aos 120 dias de indução o material foi avaliado quanto à responsividade ao meio de47
cultivo (% de explantes com a presença de calos).48
49
RESULTADOS E DISCUSSÃO50
Não foram observadas contaminações biológicas dos explantes de A. aculeata,51
demonstrando eficiência no método de desinfestação superficial dos explantes.52
Aos 120 dias de cultivo, foi possível observar o calejamento dos explantes foliares de A.53
aculeata (Figura 1A) e em concentrações mais elevadas da auxina Picloram (360 µM e 450 µM)54
observou-se a oxidação dos explantes (Figura 1B).55
56
57
Figura 1. Resposta morfogênica de explantes foliares de A. aculeata cultivados in vitro após 120 dias de58
indução. A - Formação calo nodular com estruturas globulares em explantes cultivados em meio Y359
acrescido de 90 µM de Picloram; (B) Explante oxidado quando cultivado em meio de cultura suplementado60
com 360 µM ou 450 µM de Picloram.61
2

3. A auxina Picloram aplicada na concentração de 90 μM induziu maior número de explantes a62
formar calos (15 %), porém com o aumento da concentração deste regulador de crescimento, foi63
possível observar uma diminuição na porcentagem de explantes calejados (Figura 2). Em64
Arecaceae, altas concentrações de auxinas associadas ao uso do carvão ativado, são usuais na65
indução da embriogênese somática (CARVALHO, 2008; SCHERWINSKI-PEREIRA et al., 2010 e66
2012; balzon, 2013). Com relação ao tipo de auxina, há relatos na literatura da eficiência do uso da67
auxina Picloram na formação de calogênese em Areca catechu (KARUN et al., 2004), Bactris68
gasipaes (STEINMACHER et al., 2007), Elaeis guineensis Jacq. (SCHERWINSKI-PEREIRA et69
al., 2010; BALZON et al., 2013; SILVA et al., 2013) e Phoenix canariensis (HUONG et al., 1999).70
O tipo de auxina utilizada tem grande importância na competência embriogênica sendo que71
em palmáceas, o Picloram é considerado um regulador potencial ao processo de embriogênese72
somática, pois induz a transição de células somáticas em células embriogênicas (BALZON, 2013).73
Elevada concentração da auxina Picloram (450 µM) em meio de cultura acrescido de carvão ativado74
mostrou-se eficiente na indução de calos embriogênicos em Elaeis guineensis Jacq.75
(SCHERWINSKI-PEREIRA et al., 2010; BALZON, 2013) e de calos primários em Euterpe76
oleracea (SCHERWINSKI-PEREIRA et al., 2012), contrapondo ao resultado obtido no presente77
trabalho. Sugere-se que para a palmeira macaúba, a indução de calos a partir de explantes foliares78
requer baixa concentração de auxina na presença de carvão ativado.79
80
81
82
Figura 2. Porcentagem de explantes foliares de A. aculeata calejados após 120 dias de cultivo em meio de83
cultura Y3 + carvão ativado em diferentes concentrações da auxina Picloram.84
85
CONCLUSÃO86
Para a palmeira macaúba, a indução de calos a partir de explantes foliares requer baixa87
concentração da auxina Picloram na presença de carvão ativado.88
89
AGRADECIMENTOS90
3

4. À Petrobrás e à FAPEMIG pelo auxílio financeiro à pesquisa e a CAPES e CNPq pela91
concessão das bolsas de estudo.92
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS93
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