Este documento proporciona información sobre los procedimientos para la identificación de bacterias gramnegativas, incluyendo la obtención de cultivos puros, exámenes microscópicos, observación de colonias, pruebas de orientación, clasificación bacteriana, pruebas de metabolismo y antibiogramas. El objetivo principal es identificar correctamente las bacterias y probar su sensibilidad a los antibióticos para guiar el tratamiento adecuado.
patologia de robbins capitulo 4 Lesion celular.pdf
Identificación y resistencia de gram negativos
1.
2. Identificación de gérmenes
gram negativos
Obtener cultivo puro
Agar sangre
Agar nutritivo
Importante trabajar
sobre colonias
aisladas
Agar
diferencial
Agar chocolate
Levin
Clerd
SS
3. Examen microscópico
Se tiene en cuenta:
coco
Morfología
bacilo
otro
cadena
Agrupación
grupo
otro
Reacción al gram
Negativa Positiva
Sistema de graduación
Murray y Washington
Células PMN x
epitelial CBP
es x
CBP
Grupo 1 >25
<10
Grupo 2 25
10-25
Grupo 3 25
25
Grupo 4 10-25
25
Grupo 5 <10
>25
13. ATB
-Es definido como la evaluación de
la capacidad de un fármaco
antibacteriano para inhibir in vitro el
desarrollo bacteriano
*Método de dilución en caldo
*Método de difusión (kirby bauer)
14. ∗
∗
∗
Objetivo del montaje del
ATB
Conocer probabilidad de éxito clínico
Detecta mecanismos de resistencia
Coadyuvante en la identificación
Se fundamenta en:
1. Suspensión bacteriana
2. Discos de papel impregnados
3. Incubación
4. Medición de diámetros (S, I, R)
Punto de
Corte
Piperaciclin
a
tazobactam
PTZ
Enterobacterias
R
I
S
< o = 17
18-20
> o = 21
15. Medio de cultivo: Mueller
Hilton
*
*
*
*
*
*
*
Medio poroso (permite difusión del antibiótico)
Adecuado crecimiento de la mayoría de bacterias
patógenas
Control electrolítico (Ca 2+, Mg 2+)
Altura del agar 3-5 mm (ideal 4 mm)
pH: 7.2 -7.4
peachimetro
Humedad controlada
Control de calidad: incubar lotes preparados a
35ºC x 24 horas
16. Sensidiscos
Discos de papel absorbente de 6 mm, con cantidades
exactas de antibióticos o de otros agentes
quimioterapeùticos.
GM: gentamicina
GM 10 10: 10 µg
Control de calidad de discos
Test de screen
Test de confirmación
K. pneumoniae ATCC 700603
K. pneumoniae ATCC 700603
E. coli ATCC 25922
E. coli ATCC 25822
19. Factores que
en el resultado
*
*
*
*
*
*
influyen
del ATB
Grosor del agar
pH del agar
Densidad óptica de la suspensión bacteriana
(0.5 McF)
Atmósfera de incubación (usualmente aire)
Habilidad para la lectura de las zonas de
inhibición
Actualización anual de los puntos de corte
21. RESISTENCIA INTRINSECA
Microorganismo
Antibióticos
Pseudomona aeruginosa
Ampicilina, Amoxicilina y Ac
Clavulanico, Cefalosporinas (I,
II),CTX, CRO, Acido nalidixico
Salmonella y Shiguella
Stenotrophomonas
Klebsiella
Cefalosporinas I, II y
Aminoglucosidos
Todos los betalactamicos,
Aminoglucosidos
Ampicilina, Amoxicilina
Proteus
Nitrofurantoina, Ampicilina,
Amoxicilina
Acinetobacter
Ampicilina, Nitrofurantoina,
cefalosporinas I y II
22. Betalactamasas
Clasificación según Bush.
Betalactamasas que son inhibidas por ácido
Clavulanico, Sulbactam y Tazobactam.
2. Betalactamasas de amplio espectro,
generalmente inhibidas por la acción del
ácido clavulanico.
1.
23. Betalactamasas
Clasificación según Bush.
3. Metalo-betalactamasas que actúan sobre
Penicilinas, Cefalosporinas y
Carbapenicos no inhibidas por el ácido
clavulanico e inhibidas por el EDTA.
4. Betalactamasas que no son inhibidas por el
ácido clavulanico.
24. Expresión de
betalactamasas
∗
Constitutiva: producción enzimática, es
independiente de un agente inductor.
∗
Inducible: la producción enzimática se
manifiesta cuando la bacteria fuera
expuesta al agente inductor
(betalactamico).
25. Betalactamasas de
espectro extendido
(Blees)
Enzimas mediadas por genes plasmidicos, no
inducibles, capaces de hidrolizar la cadena
oximino-betalactamica.
Espectro de acción:
Ceftazidima
Cefotaxima
Ceftriaxona
Aztreonam
37. Selección de
antimicrobianos
* Conocimientos de resistencias naturales
* Propiedades farmacológicas, incluso
toxicidad, unión de proteínas, distribución,
absorción y excreción
* Experiencia clínica previa de eficiencia
* Naturaleza del proceso patológico
* El estado inmune del paciente
48. Conclusione
La evolución de la resistencia bacterianas un
s
reto permanente para los laboratorios de
microbiología, los cuales deberán:
∗Sospechar nuevos mecanismos de resistencia.
∗Tamizar apropiadamente para vigilar los mas
prevalentes.
∗Reportar con criterio microbiológico y clínico al
medico.