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RECUPERAÇÃO CELULAR NO PROCESSAMENTO DO
SANGUE DE CORDÃO UMBILICAL UTILIZANDO
EQUIPAMENTO AUTOMATIZADO
RECUPERAÇÃO CELULAR NO PROCESSAMENTO DO
SANGUE DE CORDÃO UMBILICAL UTILIZANDO
EQUIPAMENTO AUTOMATIZADO
IntroduçãoIntroduçãoIntroduçãoIntrodução
Forte A¹, Kühn TIBB², Sekiya EJ2, Almeida KA2 , Santucci R2, Alves A²
1CordCell – Células Tronco do Sangue de Cordão Umbilical
2Instituto de Ensino e Pesquisa São Lucas
Forte A¹, Kühn TIBB², Sekiya EJ2, Almeida KA2 , Santucci R2, Alves A²
1CordCell – Células Tronco do Sangue de Cordão Umbilical
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ObjetivoObjetivoObjetivoObjetivo
EstudoEstudo retrospectivoretrospectivo dede FevereiroFevereiro aa JulhoJulho dede 20092009,, dosdos
processamentosprocessamentos dodo sanguesangue dodo cordãocordão umbilicalumbilical efetuadosefetuados pelapela
Material e MétodosMaterial e MétodosMaterial e MétodosMaterial e Métodos
DescreverDescrever asas taxastaxas dede recuperaçãorecuperação celularcelular obtidasobtidas pelapela utilizaçãoutilização
dede equipamentoequipamento automatizadoautomatizado SepaxSepax--BiosafeBiosafe..
AA técnicatécnica dede reduçãoredução dodo volumevolume coletadocoletado dodo sanguesangue dodo cordãocordão
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armazenamentoarmazenamento apresentaapresenta característicascaracterísticas essenciaisessenciais comocomo
diminuiçãodiminuição dada adiçãoadição dede soluçãosolução crioprotetoracrioprotetora ee menormenor riscorisco dede
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processamentosprocessamentos dodo sanguesangue dodo cordãocordão umbilicalumbilical efetuadosefetuados pelapela
CordCellCordCell SãoSão PauloPaulo.. AlíquotasAlíquotas dada bolsabolsa dede coletacoleta foramforam retiradasretiradas
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UCBUCB--HESHES ee oo kitkit CSCS--530530..33.. EmEm casoscasos dede processamentoprocessamento comcom
concentraçãoconcentração dasdas célulascélulas emem bolsabolsa dede 250250 mLmL ((BaxterBaxter®)®) foifoi
utilizadoutilizado oo SterileSterile ConectionConection DeviceDevice dentrodentro dada capelacapela dede fluxofluxo
laminarlaminar parapara conexãoconexão nono KitKit.. AA técnicatécnica automatizadaautomatizada dede reduçãoredução
dede volumevolume comcom buffybuffy--coatcoat dede 4242mLmL (Bolsa(Bolsa 250250 mLmL BaxterBaxter®)®) foifoi
utilizadautilizada emem unidadesunidades comcom concentraçõesconcentrações celularescelulares prépré--
processamentoprocessamento entreentre 66,,55 aa 88,,55 xx101088 ee buffybuffy--coatcoat dede 2525 mLmL emem
concentraçõesconcentrações acimaacima dede 88,,55 xx101088 (bolsa(bolsa BiBi--partidapartida PALL®)PALL®).. NãoNão
houvehouve manipulaçãomanipulação dasdas bolsasbolsas queque apresentaramapresentaram celularidadecelularidade
abaixoabaixo dede 66,,55 xx101088.. ApósApós oo processamento,processamento, foifoi retiradaretirada alíquotaalíquota
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ResultadosResultadosResultadosResultados
OO rendimentorendimento médiomédio foifoi 9090%% quandoquando oo númeronúmero celularcelular inicialinicial eraera
superiorsuperior aa 88,,55 xx101088.. TambémTambém apresentaramapresentaram altaalta taxataxa dede
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ConclusãoConclusãoConclusãoConclusão
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AA técnicatécnica dede reduçãoredução dodo volumevolume coletadocoletado dodo sanguesangue dodo cordãocordão umbilicalumbilical ee placentárioplacentário (SCUP)(SCUP) parapara posteriorposterior criopreservaçãocriopreservação ee armazenamentoarmazenamento apresentaapresenta característicascaracterísticas essenciaisessenciais comocomo diminuiçãodiminuição dada adiçãoadição dede soluçãosolução crioprotetoracrioprotetora ee menormenor riscorisco dede incompatibilidadeincompatibilidade ABO/RhABO/Rh emem transplantestransplantes alogênicosalogênicos,, devidodevido oo baixobaixo volumevolume dede hemáciashemácias nana bolsabolsa armazenadaarmazenada ee uniformidadeuniformidade dodo congelamentocongelamento.. OO grandegrande obstáculoobstáculo emem realizarrealizar aa reduçãoredução dodo volumevolume éé oo índiceíndice dede perdaperda celularcelular durantedurante esseesse processoprocesso.. AA CordCellCordCell CélulasCélulas TroncoTronco dodo CordãoCordão UmbilicalUmbilical investindoinvestindo emem tecnologiatecnologia parapara aprimoramentoaprimoramento dada separaçãoseparação dasdas célulascélulas dodo SCUPSCUP adquiriuadquiriu oo equipamentoequipamento automatizadoautomatizado SEPAXSEPAX-- BiosafeBiosafe.. processamentosprocessamentos dodo sanguesangue dodo cordãocordão umbilicalumbilical efetuadosefetuados pelapela CordCellCordCell SãoSão PauloPaulo.. AlíquotasAlíquotas dada bolsabolsa dede coletacoleta foramforam retiradasretiradas previamentepreviamente aoao inícioinício dada separaçãoseparação ee concentraçãoconcentração dasdas célulascélulas-- troncotronco dodo cordãocordão umbilicalumbilical ee aoao finalfinal dodo processamentoprocessamento parapara contagemcontagem dede célulascélulas nucleadasnucleadas totaistotais.. AA quantificaçãoquantificação celularcelular foifoi realizadarealizada emem contadorcontador automáticoautomático (Mythic(Mythic1818 OrphéeOrphée)) ee confirmadaconfirmada pelapela contagemcontagem emem câmaracâmara dede NeubauerNeubauer.. OO processamentoprocessamento automatizadoautomatizado foifoi realizadorealizado nono equipamentoequipamento SepaxSepax BiosafeBiosafe,, VersãoVersão 170170,, protocoloprotocolo UCBUCB--HESHES ee oo kitkit CSCS--530530..33.. EmEm casoscasos dede processamentoprocessamento comcom concentraçãoconcentração dasdas célulascélulas emem bolsabolsa dede 250250 mLmL ((BaxterBaxter®)®) foifoi utilizadoutilizado oo SterileSterile ConectionConection DeviceDevice dentrodentro dada capelacapela dede fluxofluxo laminarlaminar parapara conexãoconexão nono KitKit.. AA técnicatécnica automatizadaautomatizada dede reduçãoredução dede volumevolume comcom buffybuffy--coatcoat dede 4242mLmL (Bolsa(Bolsa 250250 mLmL BaxterBaxter®)®) foifoi utilizadautilizada emem unidadesunidades comcom concentraçõesconcentrações celularescelulares prépré-- processamentoprocessamento entreentre 66,,55 aa 88,,55 xx101088 ee buffybuffy--coatcoat dede 2525 mLmL emem concentraçõesconcentrações acimaacima dede 88,,55 xx101088 (bolsa(bolsa BiBi--partidapartida PALL®)PALL®).. NãoNão houvehouve manipulaçãomanipulação dasdas bolsasbolsas queque apresentaramapresentaram celularidadecelularidade abaixoabaixo dede 66,,55 xx101088.. ApósApós oo processamento,processamento, foifoi retiradaretirada alíquotaalíquota dodo plasmaplasma parapara controlecontrole microbiano(BACT/ALERTmicrobiano(BACT/ALERT PEDIATRICPEDIATRIC ®)®) ResultadosResultadosResultadosResultados OO rendimentorendimento médiomédio foifoi 9090%% quandoquando oo númeronúmero celularcelular inicialinicial eraera superiorsuperior aa 88,,55 xx101088.. TambémTambém apresentaramapresentaram altaalta taxataxa dede recuperaçãorecuperação celularcelular 9292%% asas amostrasamostras comcom faixafaixa celularcelular entreentre 66,,55-- 88,,55 xx101088 .. NãoNão houvehouve contaminaçãocontaminação microbianamicrobiana emem nenhumnenhum casocaso analisadoanalisado.. ConclusãoConclusãoConclusãoConclusão OO equipamentoequipamento SepaxSepax BiosafeBiosafe éé fundamentalfundamental nana contribuiçãocontribuição dada qualidadequalidade dada separaçãoseparação dasdas célulascélulas--troncotronco contidascontidas nono sanguesangue dodo cordãocordão umbilicalumbilical coletadocoletado devidodevido aa homogeneidadehomogeneidade dasdas recuperaçõesrecuperações celularescelulares apósapós oo estabelecimentoestabelecimento dede faixasfaixas dede celularidadecelularidade iniciaisiniciais.. AtribuirAtribuir faixasfaixas dede celularidadecelularidade permitiupermitiu tambémtambém aa obtençãoobtenção dede taxastaxas dede recuperaçãorecuperação celularcelular muitomuito superioressuperiores (em(em tornotorno dede 9191,,2727%%)) dasdas divulgadasdivulgadas normalmentenormalmente nana literaturaliteratura específicaespecífica.. FOTO FOTO