291290430-Cuestionario-de-Laboratorio-Grupo-BB12A.docx

UNIVERSIDAD AUTÓNOMA METROPOLITANA
Unidad Xochimilco
División de Ciencias Biológicas y de la Salud
Tronco Común Divisional
Módulo: Procesos Celulares Fundamentales
EXAMEN DE LABORATORIO.
Por: Alberto Aráoz Vásquez
Matricula: 2152028961
Lic. En Medicina Veterinaria y Zootecnia
Docente:
Dr. Jorge Antonio Amézquita Landeros
Grupo: BB12A

CUESTIONARIO.
1. Explica el fundamento de los diferentes métodos físicos y químicos de
esterilización.
R= medios físicos:
-Vapor saturado a presión: autoclave: es el medio más específico y efectivo de
menor costo para esterilizar la mayoría de los objetos de uso hospitalario
-Calor seco: pupinel: este sistema elimina microorganismos por coagulación de las
proteínas de estos. Su efectividad depende de la cantidad de calor, la cantidad de
calor disponible y los niveles de perdida de calor, requiere largos periodos de
exposición.
Medios químicos:
-Óxido de etileno: este es un producto químico con un alto poder desinfectante, su
presencia está en forma líquida y se volatiza formando un compuesto gaseoso que
elimina microorganismos por cualquier alquilación de la pared celular del
microorganismo.
-Peróxido de hidrogeno: es un agente químico que se ha utilizado como
desinfectante de alto nivel y esterilizante por inmersión, esteriliza a baja
temperatura por medio de plasma de peróxido de hidrogeno
-Ácido paracetico: esterilizante de alto nivel, es esporicida, por lo tanto esteriliza
en tiempos menores al glutaraldehido, hay dos formas por este agente: líquido y
plasma.
2. Explica las ventajas y desventajas de los métodos de la pregunta anterior e
indica cuando es recomendable utilizar cada uno de estos.
R= Físicos: ventajas: más efectivo y de bajo costo, eleva la temperatura tiempo
corto y no deja residuos tóxicos.
Desventajas: su efectividad depende de la cantidad de calor disponible, largos
periodos.
Químicos: ventajas: alto poder desinfectante.
Desventajas: alto costo, largos periodos de esterilización y alto nivel de
infraestructura.

3. Indica los principales agentes desinfectantes y antisépticos utilizados en la
desinfección.
R=Antisépticos: alcoholes, tintura de yodo, povidona yodada, clorhexidina,
triclosan.
Desinfectantes: glutaraldehido, hipoclorito de sodio1%
4. ¿Qué tipo de sustancias suele utilizarse continuamente para desinfectar
superficies?
R= para las superficies muy comúnmente es usado el cloro y productos a base de
cloro, incluidas los compuestos de hipocloruro, yodoforos, amonio, ácidos y álcalis
fuerte, fenol, agentes gaseosos.
5. Explica cuál es el objetivo de utilizar el mechero para preparar la zona estéril
para el trabajo microbiológico y señala que factores influyen en la creación de la
zona estéril.
R=el mechero te ayuda a crear corrientes de aire caliente que arrastran partículas
de polvo y microorganismos dispersos en el área que rodea tu área de trabajo, es
decir el aire caliente que genera la flama arrastra hacia afuera toda partícula y
microorganismo.
6. Menciona otros métodos usados en la industria y en los laboratorios de
investigación para crear zonas de trabajo estéril.
R= se pueden realizar limpiezas con agua jabonosa, se limpian con una compresa
impregnada de alcohol al 70%
Limpieza de la cabina, desinfección de todo el material que se vaya a introducir a
la cabina sumergiéndola en un baño de alcohol.
7. Explica los riesgos que puede correr si no recoges el frasco, los tubos y las
pipetas después de concluir cada sesión.
R= los riesgos que se corren son primero que el material pueda caerse y por lo
tanto romperse, también puede quedar sucio y contaminarse al hacerse una nueva
técnica.
8. Explica los riesgos que puedes correr si no lavas y desinfectas la mesa de
trabajo después de concluir cada sesión.
R= al no lavar los materiales de laboratorio corremos el riesgo que queden sucios
y por lo tanto después se contaminen o se infecten o algún virus se quede ahí.

9. Realiza el diagrama del microscopio describe cada una de sus partes e indica
su intención.
10. Explica que tipo de bacterias pueden aislarse en el agua.
R= se han encontrado bacterias como por ejemplo Vibrio, e-coli, pseudomonas.
11. Explica cuál es el objetivo de sembrar diluciones del agua.
R=su principal propósito es disminuir la concentración bacteriana de una muestra
especifica.
12. Explica el fundamento del aislamiento por estría cruzada.
R= es la técnica más utilizada, para aislar los microorganismos en un placa de
agar, se colocan muestras y se realiza un barrido con una asa inoculada hasta
lograr separar colonias individuales de la cepa de interés.
13. Explica que tipo de bacterias pueden aislarse en agar MacConkey.
R= este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos gram negativos de fácil
desarrollo aerobios y anaerobios facultativos.
14. Explica que se le llama medio de cultivo bacteriológico.
R= son una mezcla de nutrientes que en concentraciones adecuadas y
condiciones físicas optimas, permite el crecimiento de microorganismos.

15. Explica que es un medio de cultivo enriquecido.
R= son aquellos que además de las sustancias nutritivas normales, incorporan
una serie de factores, indispensables para el crecimiento de microorganismos
exigentes. Este enriquecimiento se hace por medio de adición de sangre u otros
tipos biológicos.
16. Explica que es un medio de cultivo selectivo.
R= son medios utilizados para favorecer el crecimiento de ciertas bacterias
contenidas en una población poli microbiana. El fundamento de estos medios
consiste en facilitar nutricionalmente el crecimiento de una población microbiana
específica.
17. Describe las características de la pared celular de las bacterias grampositivas
y gram negativas, resaltando las diferencias.
R= bacterias gram positivas: pared celular interna y una pared de peptiduglucano
que es un exoesqueleto que da consistencia y forma esencial para replicación y
supervivencia de la batería, no tiene membrana externa, no tiene espacio peri
plasmático.
Bacterias gram negativas: pose una pared celular más compleja , pared celular
interna, pared de peptiduglucano, bicapa lípida externa, membrana externa,
espacio peri plasmático.
18. ¿Cómo se diferencia las bacterias coliformes?
R= las bacterias del grupo coliformes totales que son capaces de fermentar
lactosa a 44-45° se conocen como coliformes termo tolerantes.
19. ¿Qué indica la presencia de bacterias coliformes en el agua?
R= lo que indica es que el agua está contaminada y por lo tanto no puede ser
consumida por el ser humano.
20. ¿Cuál es la importancia clínica de las bacterias coliformes?
R=su importancia se debe que al ser analizadas se pueden crear procesos y
tratamientos para el agua y así lograr que el agua esté libre de e-coli.
21. ¿Todas las bacterias coliformes son de origen fecal?
R= todas están y se considera que el Escheria coli es el índice de contaminación
fecal más adecuado.

22. ¿Qué implicaciones epidemiológicas tienen la presencia de enterobacterias en
la muestra de agua que colectaste?
R= puede contener parásitos en el agua y así desencadenar unan posible
contaminación y un riesgo de una suma importancia de la salud humana.
23. ¿Qué enfermedades gastrointestinales pueden transmitirse en el agua
contaminada con materia fecal?
R= Shigellae dysenteriae, Salmonella, Fiebre tifoidea, Salmonella ssp, Vibrio,
Escheria Colli.
24. ¿Qué significan las siglas IMViC?
I: Indol, M: rojo de metilo, V: V-P (Voges- Proskauer), iC: citrato de Simons
25. ¿Cuál es el objetivo de realizar las pruebas de identificación IMViC?
R= se utiliza en la biología para identificar bacterias. El resultado de test expresa
mediante símbolos de positivo o negativo (+,-) según el resultado de cada prueba
siguiendo siempre el orden establecido por las iniciales del método.
26. ¿Por qué razón no es recomendable utilizar el asa bacteriológica para realizar
la prueba de la oxidasa?
R= para las pruebas de oxidasa, se utiliza un reactivo llamado Kovacs, el cual está
compuesto de alcohol osaomílico, p-dimetilamino- benzaldehído, y ácido
clorhídrico. El ácido puede reaccionar con el metal y darles falsos positivos.
27. Determina el número de bacterias que hay en una colonia después de 24
horas de incubación. Recuerda que una colonia de enterobacterias se origina a
partir de una sola bacteria (UFC) y estas de dividen en un promedio de 30
minutos.
R= el número de bacterias resultante depende mucho del tipo de muestra pero lo
aproximado es que se generen alrededor de unas 4 a 6 bacterias.

Unidad Xochimilco
Por: Alicia Maribel Curiel Rojo
Lic. en Estomatologia
Docente:

Grupo: BB12A
1.- Explica el fundamento de los diferentes métodos físicos y químicos de
esterilización.
Garantizan la destrucción total de los microorganismos presentes en sustancias o
materiales. De esta forma se asegura que los microorganismos detectados en
alguna experimentación provengan de las muestras estudiadas y no de alguna
contaminación del ambiente o de la persona.
Dentro de los métodos físicos se pueden encontrar:
Calor: Todos los microorganismos son susceptibles en distinto grado a la acción
del calor, el cual provoca una desnaturalización de proteínas, fusión
desorganización de las membranas en los microorganismos.
Radiaciones: se atribuye a la absorción por DNA, existen uniones covalentes entre
residuos de primigenia pertenecientes a la misma cadena, se distorsiona el DNA y
se inhibe la síntesis del DNA, por tanto también el crecimiento y respiración de los
microorganismos. Su uso principal es para esterilizar el aire y superficies.
Dentro de los métodos químicos: Pueden ser Gaseosos (óxido de etileno) o no
Gaseosos (Aldehídos, ácido peracético y peróxido de hidrógeno)
Los antisépticos son considerados venenos que al actuar sobre gérmenes, estos
son destruidos. Algunos de ellos ejercen su acción nociva sobre todas las células
y otros actúan sobre algunas especies bacterianas en específico. Es óptimo para
la antisepsia de las manos del experimentador, mesas de trabajo, material, etc.
2.- Explica las ventajas y desventajas de los métodos de la pregunta anterior
e indica cuándo es recomendable utilizar cada uno de éstos.
Métodos físicos:

Ventajas: Rápido calentamiento y penetración, destrucción de bacterias en un
periodo corto, no hay residuos tóxicos, además de que no es corrosivo.
Entre sus desventajas se encuentra que: En algunas ocasiones el material a
esterilizar no soporta altas temperaturas y pueden sufrir algún daño o simplemente
el material a esterilizar puede ser inflamable. En cuanto a las radiaciones, no
penetran en sólidos y pobremente en líquidos.
Métodos químicos:
Ventajas: el ciclo de esterilización dura de 54-75 minutos, el material sometido a
estos procesos no precisa de aireación.
Desventajas: se necesita un mayor tiempo, las sustancias son inflamables, tóxicas
y de muy alto costo.
3.- Indica los principales agentes desinfectantes y antisépticos utilizados en
la desinfección.
Los desinfectantes son productos químicos que matan a los microorganismos y se
utilizan sobre objetos inanimados. Como: Glutaraldehído, hipoclorito de sodio
Los antisépticos son sustancias químicas que matan o inhiben el crecimiento de
los microorganismos y no son lo suficientemente tóxicos para ser aplicados a los
tejidos vivos. Como: Alcoholes, tintura de Yodo,
4.- ¿Qué tipo de sustancias suelen utilizarse comúnmente para desinfectar
superficies?
*Hipoclorito de sodio al 10%
*Solución de benzal diluido 1:10
5.- Explica cuál es el objetivo de utilizar el mechero para preparar la zona
estéril para el trabajo microbiológico y señala qué factores influyen en la
creación de la zona estéril.

Ayudan a mantener un ambiente de esterilidad, a través del calor, cuando se
trabaja con siembra de microorganismos.
Factores que influyen en la zona estéril: Una manipulación correcta de las
muestras y del material, evitar contaminar a través de microorganismos propios
del experimentador, aire externo, al igual que material no esterilizado previamente
a su uso.
6.- Menciona otros métodos usados en la industria y en los laboratorios de
investigación para crear zonas de trabajo estériles.
Desinfectantes: son productos químicos que matan a los microorganismos y se
utilizan sobre objetos inanimados
Antisépticos: sustancias químicas que matan o inhiben el crecimiento de los
microorganismos y no son lo suficientemente tóxicos para ser aplicados a los
tejidos vivos
El calor es el método más utilizado para la esterilización y puede emplearse calor
seco con hornos con una temperatura de 170°C por una hora o como calor
húmedo con autoclaves con una temperatura de 121°C a 15 libras de presión por
pulgada durante 20minutos.
7.- Explica los riesgos que puedes correr si no recoges el frasco, los tubos y
las pipetas después de concluir la sesión.
Primero que nada se corre el riesgo de la ruptura de alguno de los materiales lo
que puede causar algún accidente además de que es importante recoger el
material y desinfectarlo para evitar la contaminación bacteriológica en especial si
los materiales serán usados después.
8.- Explica los riesgos que puedes correr si no lavas y desinfectas la mesa
de trabajo después de concluir cada sesión.
De no limpiar la mesa se propaga la contaminación, hay que tratar de mantener el
campo estéril. Además que hay que tener el mayor cuidado en la limpieza para el
manejo de las muestras y evitar alteraciones en los resultados.
10.- Explica que tipos de bacterias pueden aislarse en el agua.

Enterobacterias como Shigella, Salmonella, Yersina pestis y algunas
pertenecientes a la flora oportunista como Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae
y Proteus mirabilis.
11.- Explica cuál es el objetico de sembrar diluciones de agua.
Las diluciones son recomendadas debido al alto contenido de bacterias ya que
permiten trabajar con un número apropiado de células para realizar cuentas
viables así como el aislamiento adecuado de las colonias. Es importante no
trabajar con una dilución tan grande ya que el número de bacterias sería tan bajo
que podría impedir el detectar las colonias.
El objetivo es obtener, a partir de elevado número de bacterias, un número
reducido de ellas distribuidas individualmente sobre la superficie de la placa. Al
incubar esta, cada una de las bacterias originara una colonia.
13. Explica que tipos de bacterias pueden aislarse en agar macconkey.
Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de fácil
desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos. Permite diferenciar bacterias que
utilizan o no, lactosa en muestras clínicas, de agua y alimentos. Todas las
especies de la familia Enterobacteriaceae desarrollan en el mismo.
Microorganismos Colonias
Escherichia coli ATCC 25922 Rojas con halo turbio
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Rosadas mucosas
Salmonella typhimurium ATCC 14028 Incoloras, transparentes
Shigella flexneri ATCC 12022 Incoloras, transparentes
Proteus mirabilis ATCC 43071 Incoloras, transparentes
Enterococcus faecalis ATCC 29212 Diminutas, incoloras, opacas
14. Explica a qué se le llama medio de cultivo bacteriológico.

Un cultivo es un método para la multiplicación de microorganismos, tales como
bacterias, hongos y parásitos, en el que se prepara un medio óptimo para
favorecer el proceso deseado. Un cultivo es empleado como un método
fundamental para el estudio de las bacterias y otros microorganismos que causan
enfermedades en medicina humana y veterinaria.
El enriquecimiento es una técnica que utiliza un medio selectivo líquido para
permitir el desarrollo de un microorganismo a partir de una muestra que contiene
una gran variedad de microorganismos. Así, aquellos microorganismos para los
que el ambiente sea más favorable crecerán más que los otros y finalmente serán
predominantes
Son aquellos que, además de las sustancias nutritivas normales, incorporan una
serie de factores indispensables para el crecimiento de microorganismos
exigentes. Este enriquecimiento se hace por adición de sangre u otros productos
biológicos que aportan dichos factores. En ocasiones es posible añadir
suplementos artificiales a los medios para producir un enriquecimiento del mismo.
El gonococo, por ejemplo, necesita cistina y cisteína para su crecimiento. Estas
sustancias son aportadas por la sangre calentada adicionada al medio de cultivo
(agar chocolate).
Son medios utilizados para favorecer el crecimiento de ciertas bacterias
contenidas en una población polimicrobiana. El fundamento de estos medios
consiste en facilitar nutricionalmente el crecimiento de una población microbiana
específica. Un ejemplo de medio selectivo es el caldo selenito, que se utiliza para
favorecer el crecimiento de salmonellas y frenar el del resto de enterobacterias.
17.- Describe las características de la pared celular de las bacterias
grampositivas y gramnegativas, resaltando sus diferencias.
Bacteria Gram Positiva:
a) Su envoltura celular comprende:
1. La membrana citoplasmática
2. La pared celular.

b) La pared celular está compuesta por una gruesa capa de peptidoglicano o
mureína (polímero de N-acetil-2-D-glucosamina, unido en orientación ß-1,4
con N-acetil murámico), su grosor le confiere una gran resistencia, las
protege de una ruptura osmótica en ambientes acuáticos, les confiere forma
y es la responsable de retener el tinte azul oscuro o violeta durante la
tinción de Gram.
c) Presentan sólo una membrana lipídica (membrana citoplasmática) y la capa
gruesa de peptidoglicano.
 Posee dos clases de ácidos teicoicos: ácido lipoteicoico (ácido teicoico
unido a un lípido) y ácido teicoico. Son polisacáridos que se unen al ácido
N-acetil murámico del peptidoglicano.
 La pared celular se une a la membrana citoplasmática mediante moléculas
de ácido lipoteicoico.
 Ciertas bacterias Gram-positivas, cuando se someten a un régimen de
limitación de fosfato son incapaces de sintetizar ácidos teicoicos, pero en su
lugar producen ácidos teicurónicos. Los teicurónicos consisten en polímeros
aniónicos formados por la alternancia de ácidos urónicos (que tienen
grupos -COOH libres) y aminozúcares como la N-acetil-galactosamina.
d) Pueden presentar una capa superficial cristalina denominada capa S o
capa superficial (es la parte más externa de la envoltura celular bacteriana)
unida a la capa de peptidoglicano.
e) No existe presencia de endotoxinas.
Bacteria Gram Negativa:
a) Conformada por 4 zonas:
1. La membrana citoplasmática.
2. El espacio periplasmático, ubicado entre la membrana citoplasmática y el
peptidoglicano.
3. Una fina capa de peptidoglicano.
4. Membrana externa que contiene fosfolípidos, el lipopolisacárido (LPS) y
proteínas (proteínas de membrana 6 externa). Esta capa está
estrechamente unida al peptidoglicano y se la considera un componente de
la pared celular.
b) Su estructura didérmica, es decir, de doble membrana celular (una externa
y la otra citoplasmática) está íntimamente ligada al color rosado tenue que
presentan ante la tinción de Gram.
c) Presentan dos membranas lipídicas (membrana citoplasmática y membrana
externa) entre la fina pared celular de peptidoglicano

 Entre la membrana citoplasmática interna y la membrana externa que
recubre la pared celular se localiza el espacio periplásmico, relleno de una
sustancia denominada periplasma, la cual contiene enzimas importantes
para la nutrición en estas bacterias. Retienen la safranina.
 La membrana externa contiene diversas proteínas; entre ellas, las porinas o
canales proteicos que permiten el paso de ciertas sustancias, además de
los lipopolisacáridos (LPS), formados por tres regiones: el polisacárido O
(antígeno O), una estructura polisacárida central (KDO) y el lípido A
(endotoxina).
d) Pueden presentar una capa S que se apoya directamente sobre la
membrana externa.
e) Presencia de endotoxinas: el lipopolisacárido (LPS)
18.- ¿Cómo se definen a las bacterias coliformes?
Se definen como coliformes totales a aquellas bacterias entéricas en forma de
bacilos cortos que se caracterizan por tener las siguientes propiedades
bioquímicas:
 Ser aerobias o anaerobias facultativas
 Ser bacilos Gram negativos;
 No ser esporógenas; (Si es Gram negativo NO esporula)
 Fermentan la lactosa a 35°C en menos 48 horas
 Con producción de ácido y gas
Incluye los géneros: Escherichia, Enterobacter, Klebsiella y Citrobacter. Durante
mucho tiempo se consideraron evidencia de contaminación fecal, pero se ha
demostrado que muchos de ellos pueden vivir e incluso crecer en el suelo, el agua
y otros ambientes. Actualmente se consideran un excelente indicador de la
eficiencia de los procesos de sanitización y desinfección, así como de calidad
sanitaria en agua, vegetales y diversos productos procesados. Su determinación
se basa generalmente en la capacidad de fermentar lactosa. Se pueden utilizar los
métodos del número más probable (NMP ó MPN por sus siglas en inglés) que es
un método estadístico en tres etapas y permite el hallazgo de cantidades muy
bajas de coliformes. También se pueden detectar por cuenta en placa utilizando
agar bilis-rojo violeta (ABRV ó RVBA por sus siglas en inglés) en el cual las
colonias fermentadoras de lactosa causan el vire del indicador; pueden detectarse
por filtración en membrana (Millipore) e incubación en medios adecuados, por
métodos rápidos como Petrifilm y reacciones cromogénicas o fluorogénicas.

Coliformes fecales: dentro del grupo coliforme, los de origen fecal son capaces
de fermentar la lactosa también a 44.5 °C; se consideran el indicador más
adecuado de contaminación con heces de animales y humanos, por ejemplo en
pescados y mariscos, carnes, leche, alimentos RTE, entre otros. La determinación
se hace a partir de la segunda etapa (confirmativa) del método de NMP, cultivando
en caldo lactosado con incubación a 44.5 °C. Generalmente se combinan las
determinaciones, según se requiere.
Escherichia coli: se considera indicador de contaminación fecal reciente, humana
o animal en productos como agua embotellada, leche y jugos, alimentos infantiles,
y alimentos procesados, en general. Se caracteriza por ser coliforme
termotolerante (fermenta lactosa a 44.5°C) que produce indol a partir de triptofano
y produce β-glucuronidasa, características que se usan para su identificación en
laboratorio, generalmente en la etapa final del NMP o de alguno de los otros
métodos, incluyendo Petrifilm.
19.- ¿Qué indica la presencia de bacterias coliformes en el agua?
La presencia de coliformes en el suministro de agua es un indicio de que el
suministro de agua puede estar contaminado, ya sea con aguas negras u otro tipo
de desechos en descomposición. Generalmente, las bacterias coliformes se
encuentran en mayor abundancia en la capa superficial del agua o en los
sedimentos del fondo.
20.- ¿Cuál es la importancia clínica de las bacterias coliformes?
La determinación de la calidad bacteriológica reviste gran importancia en el ámbito
de la salud pública ya que permite garantizar la inocuidad (incapacidad para hacer
daño) del agua destinada al consumo, evitando así epidemias gastrointestinales, y
además de descubrir enfermedades que son comunes al hombre y animales.
21.- ¿Todas las bacterias coliformes son de origen fecal?
No todas las bacterias coliformes son de origen fecal, por lo que se hizo necesario
desarrollar pruebas para diferenciarlos a efectos de emplearlos como indicadores
de contaminación. Dentro del grupo de los coliformes totales (que comprende la
totalidad del grupo) existe un subgrupo que es el de los coliformes fecales (los de
origen fecal).
Véase pregunta número 18.
22.- ¿Qué implicaciones epidemiológicas tienen la presencia de
enterobacterias en la muestra de agua que colectaste?

Las complicaciones pueden ser que venga una epidemia de E.coli así como
también de Salmonella y muy graves que no se puedan controlar.
23.- ¿Qué enfermedades gastrointestinales pueden transmitirse en el agua
* Enf. trasmitidas por el agua: Cólera, Fiebre Tifoidea y Paratifoidea, Disenterías,
Poliomelitis, Hepatitis, Salmonelosis, Cryptosporidiosis, Gastroenteritis.
* Enf. con base en el agua: Ascariasis, Clonorquiasis, Dracunculosis,
Paraginimiasis, Esquistosomiasis.
* Enf. vectoriales relacionadas con el agua: Dengue, Filariasis, Paludismo,
Oncocercosis, Fiebre del Valle del Rift (FVR).
24.- ¿Qué significan las siglas IMViC?
I: Indol M: Rojo de metilo V: V-P (Voges-Proskauer) i C: Citrato de Simmons
25.- ¿Cuál es el objetivo de realizar las pruebas de identificación IMViC?
Las bacterias pertenecientes a la familia enterobacteriaceae, pueden identificarse
a través de una serie de pruebas bioquímicas, que permiten determinar la
presencia o ausencia de ciertas enzimas y a veces incluso permiten determinar la
existencia de una secuencia metabólica. Con este fin se han desarrollado diversos
esquemas de clasificación, uno de los más conocidos y utilizados corresponde al
IMVIC que se desarrolló para clasificar especies de la familia antes mencionada y
correspondientes al grupo de bacterias coliformes (bacterias aeróbicas o
anaeróbicas facultativas, Gram (-), bacilares, no esporógenas que producen ácido
y gas durante la fermentación de la lactosa).
26.- ¿Por qué razón no es recomendable utilizar el asa bacteriológica para
realizar la prueba de la oxidasa?
Ya que la prueba tiene como fundamento demostrara la presencia de un sistema
citocromooxidasa que activa la oxidación del citocromo, que es reducido por el
oxígeno molecular que produce agua o peróxido de hidrógeno según la especie
bacteriana.

Los metales pueden interferir de manera oxidativa ya que las enzimas están
íntimamente relacionadas a la cadena de transporte de electrones.
27. Determina el número de bacterias que hay en una colonia después de 24
horas de incubación. Recuerda que una colonia de enterobacterias se
origina a partir de una sola bacteria (UFC) y estas se dividen en un tiempo
promedio de 30 minutos.
El número de bacterias totales según su fusión binaria es de 281, 474, 976,
710, 656.

Unidad Xochimilco
Cuestionario de Laboratorio.
Por: Carlos Martínez Martínez
Lic. en Medicina Veterinaria y Zootecnia
Docente:
Grupo: BB12A

Métodos básicos para el aislamiento e identificación de enterobacterias del agua.
Cuestionario de Laboratorio.
1. Explica el fundamento de los diferentes métodos físicos y químicos de
esterilización.
Depende de factores como tiempo, exposición y temperatura. El calor se puede
aplicar como agente esterilizante de dos formas: El calor húmedo el cual destruye
a los microorganismos por oxidación de sus componentes celulares. El calor es
considerado como el método de esterilización por excelencia siempre y cuando el
material a esterilizar soporte altas temperaturas sin sufrir algún daño.
indica cuándo es recomendable utilizar cada una de estas.
Métodos físicos:
-Ventajas
 No es corrosivo para metales e instrumentos.
 Permite la esterilización de sustancias en polvo y no acuosas y sustancias
viscosas no volátiles.
-Desventajas
 Requiere de mayor tiempo de esterilización, respecto al calor húmedo
debido a la baja penetración del calor.
Métodos químicos:
-Ventajas
 No deja ningún residuo tóxico.
 Se convierte en agua y oxígeno al final del proceso.
 El material no precisa aeración.
 El ciclo de esterilización dura entre 54 y 75 min.
-Desventajas
 No se pueden esterilizar objetos que contengan celulosa. Algodón, líquidos,
humedad o instrumental con lúmenes largos y estrechos.

 Es el método de esterilización más caro.
desinfección.
Desinfectantes: Cloro y compuestos clorados, aldehídos, óxido de etileno,
compuestos fenólicos, ácidos y colorantes.
Antisépticos: Alcoholes, Iodo, agentes catiónicos y anfóteros.
4. ¿Qué tipo de sustancias suelen utilizarse comúnmente para desinfectar
superficies?
Hipoclorito de sodio o solución benzal.
5. Explica cuál es el objetivo de utilizar el mechero para preparar la zona
Crea corrientes de aire caliente que arrastran partículas de polvo y
microorganismos dispersos en el aire que rodea el área de trabajo, es decir el aire
caliente que genera la flama arrastra hacia fuera toda partícula y microorganismos.
(convención de masas de aire).
6. Menciona métodos usados en la industria y en laboratorios de investigación
para crear zonas de trabajo estériles.
El uso de bata, guantes y cubrebocas con la finalidad de evitar contaminación.
Lavar con hipoclorito de sodio al 10% la mesa de trabajo.
7. Explica los riesgos que puedes correr si no recoges el frasco, los tubos y
Se corre el riesgo de sufrir intoxicaciones o accidentes de contaminación así como
romperse dicho material de vidrio y cortarse.

trabajo.
Se puede provocar un foco de infección.
9. Realiza el diagrama de un microscopio y describe cada una de las partes y
su función.

Brazo: Es la parte donde se debe sujetar.
Base o pie: Proporciona estabilidad y sirve de soporte a todas las partes del
microoscopio.
Platina: Tiene en su centro una cobertura circular por la que pasará la luz.
Macrométrico: Permite hacer un movimiento rápido hacia arriba o hacia abajo del
tubo para localizar la imagen a observar.
Micrométrico: Permite colocar en posición cualquiera de los objetivos que se
encuentran en él.
Tubo: Proporciona sostén a los oculares y los objetivos.
Ocular: Lentes que captan y amplian la imagen formada para los objetivos.
Objetivos: Pequeños cilindros colocados en el revolver quue proporciona poder de
resolución del microscopio.
Fuente de luz: Foco de energía eléctrica que dirige sus rayos luminosos hacia el
sistema condesador.
10. Explica qué tipo de bacterias pueden aislarse en el agua.
Enterobacterias como Shigella, Salmnoella, Yersina pestis.
11.Explica cuál es el objetivo de sembrar diluciones del agua.
Trabajar con un número apropiado de células para realizar cuentas viables, así
como aislamiento adecuado de colonias.
12.Explica el fundamento del aislamiento por estría cruzada.
El objetivo es obtener a partir de un número elevado de bacterias, uno más
reducido de ellas, distribuidas individualmente sobre la superficie de la placa. Al
incubar ésta, cada una de las bacterias originará una colonia.

13.Explica qué tipos de bacterias pueden aislarse en agar MacConkey.
En un medio diferencial para la selección y recuperación de enterobacterias y
bacilos gram negativas entéricas relacionadas.
14.Explica a qué se le llama medio de cultivo bacteriológico.
Sustancias que pueden ser líquidas o sólidas que contienen los nutrientes
necesarios para que una bacteria pueda crecer y desarrollarse.
15.Explica a qué se llama medio de cultivo enriquecido.
Están compuestos de un medio base como apoyo del crecimiento al cual se le
puede agregar un gran exceso de nutrientes como suplementos nutritivos. Ej.
sangre, suero, líquidos etcétera. Se utiliza para microorganismos que tienen
grandes exigencias nutricionales.
16. Explica qué es un medio de cultivo selectivo.
Son sólidos en los que la selectividad se consigue alterando las condiciones
físicas del medio añadiendo o suprimiendo componentes químicos específicos con
el fin de inhibir el crecimiento de especies químicos cuyo crecimiento no interesa.
17.Describe las características de la pared celular de las bacterias gram+ y
gram-, resaltando sus diferencias.
Gram-positivas:
 Se tiñen de azul oscuro o violeta.
 Membrana citoplasmática.
 Capa gruesa de peptidoglicano.
 Ácidos teicóicos y lipoteicóicos, que sirven como agentes quelantes y en
ciertos tipos de adherencia.
 Polisacáridos de la cápsula.
Gram-negativas:
 Se tiñen de un color rosado oscuro.
 Pobre membrana celular (externa y citoplasmática)
 Membrana externa.

Tanto las bacterias gram+ como las gram- pueden presentar una capa
superficial cristalina denominada capa S; en las gram- la capa S está unida
directamente a la membrana externa. Mientras que en las gram+, la capa S
está unida a la capa peptidoglicano.
18.¿Cómo se definen a las bacterias coliformes?
Coliforme signifca con forma de coli, refiriéndose a la bacteria del grupo, la
Escheriachia Coli. Pero en sí consta de un grupo homogéneo de bacterias que se
encuentran normalmente y en abundancia en el intenstino humano. Se utiliza
cómo índice de contaminación de las aguas y por lo general están desprovistas de
peligrosidad.
19.¿Qué indica la presencia de bacterias coliformes en el agua?
Su presencia se interpreta como una indicación de que los organismos patógenos
pueden estar presentes y su ausencia indica que el agua se halla exenta de
organismos productores de enfermedades.
20.¿Cuál es la importancia clínica de las bacterias coliformes?
La determinación de la calidad bacteriológica resiste gran importancia en el ámbito
de la salud pública ya que permite garantizar la inocuidad del agua destinada al
consumo evitando así epidemias gastrointestinales.
21.¿Todas las bacterias coliformes son de origen fecal?
No, también están las coliformes totales que se encuentran en aguas
contaminadas (aguas negras y otro tipo de desechos en descomposición).
22.¿Qué implicaciones epidemiológicas tienen la presencia de entero-bacterias
en la muestra de agua que se colectó?
Cuando se tiene un nivel alto con presencia de entero-bacterias en el agua
pueden contener todo tipo de microorganismos tales como parásitos, bacterias y
virus causantes de enfermedades como infecciones urinarias, pulmonía,

septicemia o sobreinfecciones, en especial en inmunosuprimidos, en el uso de
ciertos antibióticos, desnutrición, étc.
23.¿Qué enfermedades gastrointestinales pueden transmitirse en el agua
 Fiebre tifoidea (Sallmonella typhi)
 Disentería bacilar (Shigella dysenteriae)
 Gastroenteritis infantil (Escherichia Coli)
 Peste (Yersinia pestis)
24.¿Qué significa las siglas IMViC?
Se emplea en biología para la identificación de bacterias. I = Indo, M = Rojo de
Metilo, V = V-P (Voges –Proskquer) y iC = Citrato de Simons.
25.¿Cuál es el objeto de realizar las pruebas de IMViC?
Para la identificación de enterobacterias (bacilos gram-, anareobios facultativos
con metabolismo fermentado).
26.¿Por qué razón no es recomendable utilizar el asa bacteriológica para
realizar las pruebas de oxidasa?
Porque se utiliza un reactivo llamado Kovacs, el cual está compuesto de alcohol y
ácido clorhídrico. El ácido puede reaccionar con el metal y dar falsos-positivos.
27.Determina el número de bacterias que hay en una colonia después de 24
hrs. de incubación.
281, 474, 976, 710, 656 (apróx. 290, 00

Unidad Xochimilco
Tema. Cuestionario sobre los métodos básicos
para el aislamiento e identificación de
enterobacterias del agua
Por: Delfina García Betanzo
Médico Cirujano
Docente:
Grupo: BB12A

Cuestionario Laboratorio
esterilización
Garantiza la destrucción total de microorganismos presentes en sustancias o
alguna muestra provenga de la experimentación y no de alguna contaminación.
Físicos:
a) Calor: Todos los microorganismos son susceptibles en distinto grado a la acción
del calor, el cual provoca una desnaturalización de proteínas, fusión y
desorganización de membranas de los microorganismos.
b) Radiaciones: Se atribuye a la absorción por DNA, existen uniones covalentes
entre residuos de pirimidina perteneciente a la misma cadena, distorsiona el DNA e
inhibe su síntesis por tanto el crecimiento. Su uso principal es para esterilizar aire y
superficies.
Químicos:
a) Gaseosos: Los antisépticos son considerados venenos que destruyen gérmenes,
algunos ejercen su acción nociva sobre toda célula y otros sobre algunas, son mas
específicos. Óptimos para antisepsia y en mesas de trabajo; como el óxido de
etileno.
b) No gaseosos: Se encuentran los aldehídos, ácido peracético y peróxido de
hidrógeno.

a) Físicos:
Ventajas: Son de rápido calentamiento y penetración, destruyen bacterias en un
periodo corto, no hay residuos tóxicos y no son corrosivos.
Desventajas: El material a veces no soporta altas temperaturas y pueden sufrir daño
o incluso puede ser inflamable. Las radiaciones no penetran sólidos y de manera
muy pobre a los líquidos.
la desinfección
-Desinfectantes: Productos químicos que matan a los microorganismos y se utilizan
sobre objetos inanimados; como el glutaraldehído, hipoclorito de sodio.
-Antisépticos: Sustancias químicas que matan o inhiben el crecimiento de los
microorganismos y no son lo suficientemente tóxicos para ser aplicados a los tejidos
vivos; como los alcoholes, tintura de yodo.
superficies?
Hipoclorito de sodio al 10%
 Solución de Benzal diluida 1:10
5.- Explica cual es el objetivo de utilizar el mechero para preparar la zona
estéril para el trabajo microbiológico y señala que factores influyen en la

Ayuda a mantener un ambiente de esterilidad, a través del calor, cuando se trabaja
con siembra de microorganismos. Los factores que influyen: una manipulación
correcta de la muestra y material ayudan a no contaminar, además de evitar la
contaminación por medio del aire externo o agentes provenientes del mismo
experimentador. De igual forma interviene aquel material que no es previamente
esterilizado para su uso.
investigación para crear zonas de trabajo estériles
El uso de desinfectantes, antisépticos y empleo de calor, tanto seco, como húmedo,
el uso de una estufa y de un autoclave.
También se pueden emplear rayos infrarrojos, filtración, el método de tindalización
(autoclave que se purga) y radiaciones ionizantes.
7.- Explica los riesgos que puedes correr si no recoges en frasco, los tubos y
las pipetas después de concluir la sesión
Se corre el riesgo de la ruptura del material ¡Causa un accidente” Es importante
recoger el material y desinfectarlo para evitar la contaminación bacteriológica
8.- Explica los riesgos que puedes correr si no lavas y desinfectas la mesa de
trabajo después de concluir cada sesión
Se propaga la contaminación y genera una alteración en los resultados
9.- Realiza el diagrama de un microscopio, describe cada una de sus partes e
indica su función.

10.- Explica que tipos de bacterias puedes aislarse en el agua
Enterobacterias, como: Shigella, Salmonella, E.Coli, klebsiellla pneumoniae, etc.
11.- Explica cuál es el objetivo de sembrar diluciones del agua
Se recomiendan debido al alto contenido de bacteria, ya que permite trabajar con
un número apropiado de células para realizar cuentas viables asi como el
aislamiento adecuado de las colonias
12.- Explica el fundamento de aislamiento por estría cruzada

El objetivo es obtener a partir de un número elevado de bacterias, un número
reducido de ellas, distribuidas individualmente sobre la superficie de la placa. Al
incubarla, cada una de las bacterias originará una colonia (UFC) Y además puede
estimarse la cantidad relativa de microorganismos en la muestra original.
13.- Explica que tipo de bacterias pueden aislarse en agar MacConkey
Se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram (-) de fácil desarrollo, aerobios y
anaerobios facultativos. Permite diferenciar bacterias que utilizan o no lactosa en
muestras clínicas, de agua y alimentos. Se pueden aislar en este tipo de agar, todas
aquellas bacterias que pertenecen a la familia de las enterobacterias.
14.- Explica a qué se le llama medio de cultivo bacteriológico
Al proceso de crecimiento de microorganismos mediante la toma de bacteria de un
sitio de invención (in vivo) por métodos de recolección de muestra y crecimiento en
un ambiente artificial (in Vitro)
15.- Explica qué es un medio de cultivo enriquecido
Contiene nutrientes específicos requeridos para el desarrollo de determinados
patógenos; el enriquecimiento se hace por adición de sangre y otros productos
biológicos que aportan factores nutritivos al medio de cultivo y por tanto a las
bacterias.
16.- Explica qué es un medio de cultivo selectivo

Son aquellos medios que son utilizados para favorecer el crecimiento de ciertas
bacterias; facilitan nutricionalmente el crecimiento de una población microbiana
específica.
17.- Describe las características de la pared celular de las bacterias Gram+ y
Gram-, resaltando sus diferencias
a) Gram (+) Tienen una capa gruesa de peptidoglucanos, presentan una gran
resistencia debido a esta capa que posee ácidos lipoteicoicos y se tiñen de color
azul-púrpura.
b) Gram (-) Poseen una capa de peptidoglucanos sin embargo es mas delgada, su
membrana externa contiene lipopolisacáridos, fosfolípidos y proteínas. Este tipo de
bacterias se tiñen de color rojo.
Se definen como indicadores de contaminación fecal en el agua, que se encuentran
en el intestino del humano y animales homeotermos. Son bacterias entéricas en
forma de bacilos cortos, Gram (-), aerobios o anaerobios facultativos, no es
pirógenos, fermentan lactosa y producen ácido y gas.
Indican que el agua esta contaminada, con aguas negras o de otro tipo de desechos
en descomposición.
20.- ¿Cuál es la importancia clínica de las bacterias coliformes?

Permite garantizar la inocuidad (incapacidad para hacer daño) del agua destinada
al consumo, evitando así epidemias, enfermedades gastrointestinales y
enfermedades de tipo diarreicas muy fuertes, que inclusive pudieran ser mortales.
21.- ¿Todas las bacterias coliformes son de origen fecal?
No, ya que las coliformes fecales, se encuentran en las coliformes totales.
22.- ¿Qué implicaciones epidemiológicas tienen la presencia de
enterobacterias en la muestra de agua que recolectaste?
Una posible epidemia si es que esta agua se encuentra destinad apara el consumo
humano, epidemia de E. Coli, Salmonella, enfermedades diarreicas y disentería.
23.- ¿Qué enfermedades gastrointestinales pueden transmitirse en el agua
contaminada con material fecal?
Transmitidas por el agua: Cólera, fiebre, tifoidea, paratifoidea, disenterías, polio,
hepatitis, salmonelosis.
Con base en el agua: Ascariasis, paragonimiasis.
Vectoriales relacionadas con el agua: Dengue, filariasis, paludismo
24.- ¿Qué significan las siglas IMViC?
I= Indol
M= Rojo de metilo
V= Vogues-Proskawer
iC= Citrato de Simmons.

25.- ¿Cuál es el objetivo de realizar las pruebas de identificación IMViC?
Las bacterias pertenecientes a la familia de enterobacterias pueden identificarse a
través de una serie de pruebas bioquímicas, que permiten notar la presencia o
ausencia de ciertas enzimas y la existencia de una secuencia metabólica. Por lo
tanto el IMViC sirve para clasificar especies de la familia de las enterobacterias y
dependiendo los resultados arrojados por dichas pruebas, saber de que bacteria se
trata.
26.- ¿Por qué razón no es recomendable utilizar el asa bacteriológica para
realizar la prueba de la oxidasa?
Porque los metales pueden inferir de manera oxidativa, ya que las enzimas están
íntimamente relacionadas a la cadena de transporte de electrones. La prueba tiene
como objetivo demostrar la presencia de un sistema citocromooxidasa que activa la
oxidación del citocromo, el cual es reducido por el oxígeno molecular que produce
agua o peróxido de hidrógeno, según la especie bacteriana.
27.- Determina el número de bacterias que hay en una colonia después de las
24 horas de incubación. Recuerda que una colonia de enterobacterias se
origina a partir de una sola bacteria (UFC) y éstas se dividen en un tiempo
281,474,976,710,656 bacterias en 24 horas.

Unidad Xochimilco
CUESTIONARIO DE LABORATORIO
MÉTODOS BÁSICOS PARA EL AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DE
ENTEROBACTERIAS DEL AGUA.
Alumna: Ventura Maqueda Diana
Docente:
Grupo: BB12A

esterilización.
Agentes fisicos: el calor se puede aplicar como agente esterilizante de dos formas:
el calor humedo el cual destruye a los microorganismos por desnaturalizacion de
las proteínas y el calor seco que destruye a los microorganismos por oxidación de
sus componentes celulares.
La radiación, la emisión y propagación de la energía puede ser utilizada como
agente para la eliminación de microorganismos
Radiaciones ionizantes se pueden utilizar para esterilizar materiales platicos y la luz
uv para áreas cerradas
Quimicos: capaces de dañar los componentes célulares (proteínas, membranas,
etc)
Gaseosos-----> oxido de etileno
No gaseosos ---------> alheidos ej: glutaraldehido Ácido paracético y peroxido de
hidrógeno
indica cuándo es recomendable utilizar cada uno de éstos.
La elección del método, va a depender de las características del elementos que se
va a esterilizar, tiempo, costo, que tan peligrosos son, consecuencias secundaria,
entre otros factores.
Calor Húmedo
VENTAJAS
 Rápido calentamiento y penetración.
 Destrucción de bacterias y esporas en poco tiempo.
 No deja residuos tóxicos.
 Bajo deterioro del material expuesto.
 Económico.
DESVENTAJAS
 No se permite para emulsiones con agua.

 Es corrosivo sobre algunos metales.
Calor Seco
VENTAJAS
 No es corrosivo para metales e instrumentos.
 Permiten esterilización de sustancias en polvo y no acuosas y de viscosas
no volátiles.
DESVENTAJAS
 Mayor tiempo esterilización.
 Baja penetración del calor.
 Radiaciones de acuerdo al tiempo de radiación, tiempo exposición y dosis
QUIMICOS (Oxido de Etileno)
VENTAJAS
 Esteriliza material termosensible, equipos electrónicos, bombas
cardiorrespiratorias, metal etc.
DESVENTAJAS
 Peligroso por ser altamente inflamable y explosivo, ademas cancerígeno.
Aldehídos
VENTAJAS
 Método rápido y único esterilizanrte frío.
DESVENTAJAS
 No se pueden esterilizar algunos objetos con celulosa, algodón,, líquidos,
humedad, madera, etc
Gas-Plasma de Peróxido de Hidrógeno
VENTAJAS
 No deja ningún residuo toxico.
 Se convierte en agua y oxigeno al final del proceso.

 Material sin aireación.
 Ciclo dura entre 54 y 75 min.
DESVENTAJAS
 Método mas costoso.
desinfección.
Desinfectantes y esterilizantes: Alcohol (60-85% etanol o isopropanol en agua).
Detergentes catiónicos (compuestos de amonio cuaternario)
hipoclorito sódio 1%
cloroxilenol
Formaldehído.
Glutaraldehído.
Peróxido de hidrógeno.
Dicloruro de mercurio.
Antisépticos:
Alcohol (60-85% etanol o isopropanol en agua).
Tintura de Yodo
Providona yodada
Clorhexidina
Triclosán
3. ¿Qué tipo de sustancias suelen utilizarse comúnmente para desifenctar
superficies?
bactericidas, fungicidas,fungistatica y virusidas

4. Explica cuál es el objetivo de utilizar el mechero para preparar la zona estéril
para el trabajo microbiológico y señala que factores influyen en la creación
de la zona estéril.
Al Trabajar cerca del mechero se crea una corriente de aire cálido que no permite
que las bacterias entren a la zona de trabajo.
5. Menciona otros métodos usados en la industria y en la industria y en los
laboratorios de investigación para crear zonas de trabajo estériles.
El uso de equipo para evitar contaminación (bata, guantes y cubrebocas) así
como el
lavado del area de trabajo con hipoclorito de sodio al 10% o benzal diluido además
del uso del mechero.
6. Explica los riesgos que puedes correr si no recoges el frasco, los tubos y las
pipetas después de concluir la sesión.
Se puede sufrir intoxicaciones y/o accidentes de contaminacion.
Riesgo de contaminación (foco de infección.)
8. Realiza el diagrama de un microscopio, describe cada una de sus partes e
indica su función.

PARTE FUNCION
BRAZO Es la parte de donde se debe sujetar,
las pinzas el carro el tubo del
microscopio y el revólver. Además
sirve para trasladar el microscopio de
un lugar a otro
BASE O PIE Es una pieza que proporciona
estabilidad y sirve de soporte a todas
las partes del microscopio

PLATINA Es una pieza metálica, cuadrada, que
tiene en su centro una abertura circular
por la que pasará la luz del sistema de
iluminación. Aquí se coloca el
portaobjetos con la muestra a
observar
PINZAS DE SUJECION Parte mecánica que sirve para sujetar
la preparación. La mayoría de los
microscopios modernos tienen las
pinzas adosadas a un carro con dos
tornillos, que permiten un avance
longitudinal y transversal de la
preparación.
TORNILLO MACROMETRICO Permite hacer un movimiento rápido
hacia arriba o hacia abajo del tubo o la
platina, y se utiliza para localizar la
imagen a observar.
TORNILLO MICROMETRICO Parte mecánica de movimiento
giratorio que nos permite colocar en
posición cualquiera de los objetivos
que se encuentran en él
TUBO Parte mecánica que proporciona
sostén a los oculares y objetivos.
OCULAR Se localiza en la parte superior del tubo
ocular y son las lentes que Capta y
amplia la imagen formada en los
objetivos. Los primeros microscopios
eran monoculares, es decir, poseían
una sola lente. Los microscopios
actuales poseen dos oculares, uno
para cada ojo y se les llama
binoculares.
OBJETIVOS Se encuentran incrustados en el
revólver Son unos pequeños cilindros
colocados en el revólver que
proporciona el poder de resolución del

microscopio y determinan la cantidad
total de aumento.
DIAFRAGMA Existe un diafragma en el
condensador, que elimina el exceso de
luminosidad para tener una buena
iluminación del objeto a observar
FUENTE DE LUZ Para observar la muestra microscópica
es necesario que ésta se ilumine con
algún tipo de luz y nuestros
microscopios cuentan con un foco que
da energía eléctrica que dirige sus
rayos luminosos hacia el sistema
condensador
9. Explica qué tipos de bacterias pueden aislarse en el agua.
Las enterobacteriaceae
10.Explica cual es el objetivo de sembrar diluciones de agua.
como un aislamiento adecuado de colonias.
Proceso semicuantitativo.Técnica que se utliza para obtener apartir de un elevado
núero de bacterias un número reducido de ellas distribuidas individualmente, cada
una originará una colonia.
12.Explica qué tipo de bacterias pueden aislarse en agar MacConkey.

El agar MacConkey es un medio diferencial para la selección y recuperación de
Enterobacteriaceae y bacilos gramnegativos entéricos relacionados. Contiene sales
biliares y cristal violeta que inhibe el crecimiento de bacterias grampositivas y de
algunas gramnegativas exigentes. Contiene lactosa como única fuente de carbono.
Identificando con un color rojo las bacterias fermentadoras de lactosa.
13.Explica a que se llama medio de cultivo bacteriológico.
Cualquier sustancia que puede ser usada para el cultivo de microorganismos,
14.Explica qué es un medio enriquecido.
Aquellos medios que han sido complementados con líquidos corporales, vitaminas
específicas, aminoácidos, proteínas y otros nutrientes claramente definidos como
tales. Se utilizan para favorecer el crecimiento de ciertas especies bacterianas al
mismo tiempo que inhibe el desarrollo de microorganismos no deseados.
15.Explica qué es un medio de cultivo selectivo.
Favorecen el crecimiento específico de un microorganismo particular (o grupo de
microorganismos). Es de gran utilidad para el aislamiento de microorganismos a
partir de una población microbiana mixta.
16.Describe las características de la pared celular de las bacterias grampositivas
y gramnegativas, resaltando sus diferencias.
BACTERIAS GRAM POSITIVAS
*Poseen una pared celular interna y una pared de peptidoglucano.
*No tiene membrana externa
* No tiene espacio periplasmático

* La red de mureína está muy desarrollada y llega a tener hasta 40 capas
* La penicilina mata a las gram positivas, ya que bloquea la formación de enlaces
peptídicos entre las diferentes cadenas del peptidoglucano
* No contiene LPS
* En la tinción de Gram, retienen la tinción azul
* Conservan el complejo yodocolorante
* Son esporulantes y no esporulantes, como Streptococcus, Cisteria, Frankia.
* Poseen otros componentes: ácidos teicoicos y lipoteicoicos, y polisacáridos
complejos.
BACTERIAS GRAM NEGATIVAS
° Poseen una pared celular más compleja:
-pared celular interna
-pared de peptidoglucano
- bicapa lipídica externa
° Membrana externa: forma un saco rígido alrededor de la bacteria, mantiene
estructura y es barrera impermeable a macromoléculas, ofrece protección en
condiciones adversas
° Espacio periplasmático: espacio entre la superficie externa de la membrana
citoplasmática y la interna de la membrana externa.
° La red de mureína presenta una sola capa
° La penicilina no mata a las Gram negativas, a causa de la capa de
lipopolisacáridos situada en la parte externa de la pared celular.
° Contiene LPS: estimulador de respuestas inmunes: activa células B, liberación de
IL, FNT, IL 6 por macrófagos.
°En la tinción son rosas
°Pierden el complejo yodocolorante
° Pueden ser anaerobios o aerobios

° Poseen proteínas con concentraciones elevadas.
Son un grupo de bacterias que se comparten caracteristicas bioquimicas en comun
y son utiles microorganismos indicadores de sanidad de alimentos y agua en el que
se encuentran las enterobacterias
presencia de una gran cantidad de heces y otros materiales orgánicos
Tiene gran importancia en el ámbito de la salud pública ya que permite saber la
calidad del agua destinada al consumo humano evitando así epidemias
gastrointestinales.
No, también existen coliformes de vida libre.
21.¿Qué implicaciones epidemiológicas tienen la presencia de enterobacterias
en la muestra de agua que colectaste?
Pueden sucitarse enfermedades leves como las infecciones agudas del oído, hasta
otras más graves como la fiebre tifoidea y la hepatitis.
Salmonelosis, Fiebre paratifoidea, shiguelosis, Colera

23.¿Qué significan las siglas IMViC?
es una prueba utilizada en biología para la identificación bacterias. Se compone de
cuatro pruebas: Indol, Rojo de metilo, Voges-Proskauer y Citrato.
24.¿Cuál es el objetivo de realizar las pruebas de identificación IMViC?
Se emplean fundamentalmente para la identificación de las Enterobacterias (bacilos
Gram negativos, anaerobios facultativos con metabolismo fermentador).
horas de incubación. Recuerda que una colonia de enterobacterias se orgina
a partir de una sola bacteria (UFC) y éstas se dividen en un tiempo promedio
de 30 minutos.
24hrs=281 474 976 710 656

Unidad Xochimilco
CUESTIONARIO PRÁCTICA
MÉTODOS BÁSICOS PARA EL AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN
DE ENTEROBACTERIAS DEL AGUA
Por: Eduardo Jerónimo Hernández
Lic. Médico Cirujano
Docente:
Grupo: BB12A

1.-Explica el fundamento de los diferentes métodos físicos y químicos de
esterilización.
Métodos físicos
Depende de factores como tiempo, exposición y temperatura. El calor se puede
aplicar como agente esterilizante de dos formas: el calor húmedo el cual destruye
a los microorganismos por desnaturalización de las proteínas y el calor seco que
destruye a los microorganismos por oxidación de sus componentes celulares. El
calor es considerado como el método de esterilización por excelencia siempre y
cuando el material a esterilizar soporte altas temperaturas sin sufrir ningún tipo de
daño.
Métodos químicos
Algunas sustancias químicas pueden ser usadas como agentes esterilizantes
porque tienen la capacidad de promover una o más reacciones químicas capaces
de dañar los componentes celulares de los microorganismos (proteínas,
membranas, etc.)
Método Métodos Físicos
Calor húmedo Ventajas Desventajas
Rápido, no deja residuos
tóxicos, bajo deterioro del
material expuesto,
económico
No se permite para
emulsiones con agua, es
corrosivo sobre algunos
metales
Calor seco No es corrosivo para
metales e instrumentos,
Mayor tiempo de
esterilización. Baja

permite esterilización de
sustancias en polvo
penetración del calor.
Radiaciones de acuerdo al
tiempo de radiación.
Ionizantes RUV Esterilizan superficies Escasamente penetrantes
Filtración Esteriliza aceites, pomadas,
soluciones oftálmicas
No retienen virus ni
microplasma.

desinfección.
Detergentes catiónicos (compuestos de amonio cuaternario) Gas cloro.
Compuestos clorados (cloraminas, hipoclorito sódico, dióxido de cloro) Sulfato de
cobre. Óxido de etileno (gas). Formaldehído. Glutaraldehído. Peróxido de
hidrógeno. Compuestos yodóforos que contienen yodo en solución. Dicloruro de
mercurio. Ozono. Ácido peracético. Compuestos fenólicos.
Antisépticos: Alcohol (60-85% etanol o isopropanol en agua). Compuestos que
contienen fenol (hexaclorofeno, triclosan, cloroxilenol, clorhexidina). Detergentes
Método Métodos Químicos
Ventajas Desventajas
Óxido de
Etileno
Esteriliza material que es
termosensible, como
equipos electrónicos, et.
Peligroso por ser altmente
inflamable y explosivo,
adem+ás de ser cancerígeno
Aldehidos Método rápido y único
esterilizante frío.
No se puede estrilizar objetos
con celulosa, algodón,
líquidos, humedad, madera,
etc.
Gas-Plasma de
Peróxido de
Hidrógeno
No deja ningún residuo
tóxico, se convierte en agua
y oxígeno al final del
proceso, material sin
aireación, dura
aproximadamente entre una
hora y hora y media.
Muy costoso.

catiónicos, especiamente compuestos de amonio cuaternario (cloruro de
benzalconio). Peróxido de hidrógeno (solución al 3%). compuestos yodorosos que
contienen yodo en solución. Nitrato de Plata.
3. ¿Qué tipo de sustancias suelen utilizarse comúnmente para desifenctar
superficies?
Los desinfectantes como lo son bacterisidas, fungisidas y virusidas
4. Explica cuál es el objetivo de utilizar el mechero para preparar la zona
estéril para el trabajo microbiológico y señala que factores influyen en la
Trabajar cerca del mechero (radio de 20 centímetros aproximadamente) crea
corriente de aire cálido que impide la entrada a esta zona de bacterias
contaminantes esto creando un inoculo más puro del microorganismo a trabajar.
5. Menciona otros métodos usados en la industria y en la industria y en los
Uso de bata, guantes y cubrebocas con la finalidad de evitar contaminación.
Lavado del area de trabajo con hipoclorito de sodio al 10% o benzal diluido 1:10.
El uso del mechero.
6. Explica los riesgos que puedes correr si no recoges el frasco, los tubos y
Se corre el riesgo de sufrir intoxicaciones y/o accidentes de contaminacion.

8. Realiza el diagrama de un microscopio, describe cada una de sus partes e
indica su función.
PARTE FUNCION

un lugar a otro
tiene en su centro una abertura
circular por la que pasará la luz del
sistema de iluminación. Aquí se
coloca el portaobjetos con la muestra
a observar
PINZAS DE SUJECION Parte mecánica que sirve para
sujetar la preparación. La mayoría de
los microscopios modernos tienen las
preparación.
hacia arriba o hacia abajo del tubo o
la platina, y se utiliza para localizar la
imagen a observar.
CREMALLERA Permite que el movimiento de los
tornillos macro y micrométrico sea de
mayor o de menor amplitud.
OCULAR Se localiza en la parte superior del
tubo ocular y son las lentes que Capta
y amplia la imagen formada en los

binoculares.
total de aumento.
condensador, que elimina el exceso
de luminosidad para tener una buena
FUENTE DE LUZ Para observar la muestra
microscópica es necesario que ésta
se ilumine con algún tipo de luz y
nuestros microscopios cuentan con un
foco que da energía eléctrica que
dirige sus rayos luminosos hacia el
sistema condensador
9. Explica qué tipos de bacterias pueden aislarse en el agua.

La técnica de estría cruzada es un procedimiento semicuantitativo.
Es una técnica que se utiliza para obtener a partir de un elevado número de
bacterias, unnúmero reducido de ellas distribuidas individualmente sobre la
superficie de la placa. Al incubar ésta, cada una de las bacterias originará una
colonia.
Enterobacteriaceae y bacilos gramnegativos entéricos relacionados. Contiene
sales biliares y cristal violeta que inhibe el crecimiento de bacterias grampositivas
y de algunas gramnegativas exigentes. Contiene lactosa como única fuente de
carbono. Identificando con un color rojo las bacterias fermentadoras de lactosa.

Son aquellos que favorecen el crecimiento específico de un microorganismo
particular (o grupo de microorganismos). Es de gran utilidad para el aislamiento de
microorganismos a partir de una población microbiana mixta.
16.Describe las características de la pared celular de las bacterias
BACTERIAS GRAM POSITIVAS BACTERIAS GRAM NEGATIVAS
Poseen una pared celular interna y una
pared de peptidoglucano.
*Peptidoglucano: es un exoesqueleto
que da consistencia y forma esencial
para replicación y supervivencia de la
bacteria.
Poseen una pared celular más
compleja:
-pared celular interna
-pared de peptidoglucano
- bicapa lipídica externa
No tiene membrana externa Membrana externa: forma un saco
rígido alrededor de la bacteria,
mantiene estructura y es barrera
impermeable a macromoléculas,
ofrece protección en condiciones
adversas
No tiene espacio periplasmático
Espacio periplasmático: espacio entre
la superficie externa de la membrana
citoplasmática y la interna de la
membrana externa.
La red de mureína está muy
desarrollada y llega a tener hasta 40
capas
La red de mureína presenta una sola
capa

La penicilina mata a las gram positivas,
ya que bloquea la formación de
enlaces peptídicos entre las diferentes
cadenas del peptidoglucano
La penicilina no mata a las Gram
negativas, a causa de la capa de
lipopolisacáridos situada en la parte
externa de la pared celular.
No contiene LPS
Contiene LPS: estimulador de
respuestas inmunes: activa células B,
liberación de IL, FNT, IL 6 por
macrófagos.
En la tinción de Gram, retienen la
tinción azul
Quedan decoloradas.
Conservan el complejo yodocolorante Pierden el complejo yodocolorante
Son esporulantes y no esporulantes,
como Streptococcus, Cisteria, Frankia.
Pueden ser anaerobios o aerobios
Poseen otros componentes: ácidos
teicoicos y lipoteicoicos, y
polisacáridos complejos.
Poseen proteínas con concentraciones
elevadas.
Los coliformes son un grupo de bacterias que comparten características
bioquímicas en común y son útiles como microorganismos indicadores de sanidad
de alimentos y agua. Entre los coliformes se encuentran las enterobacterias.
Poseen morfología bacilar, pueden ser aerobias o anaerobias facultativas. No
forman endosporas, son gramnegativas, fermentan la lactosa produciendo ácido y
gas en 24 a 38 horas a 36 ºC.

Indican la presencia de una gran cantidad de heces y otros materiales orgánicos
sin tratar, que pueden tener un alto impacto en el ambiente. Indican la sanidad de
alimentos y agua. Es un indicador de calidad de los alimentos.
de
la salud pública ya que permite garantizar la inocuidad del agua destinada al
consumo
evitando así epidemias gastrointestinales.
Las bacterias coliformes fecales pueden tener efectos graves en la salud pública.
Los volúmenes de agua con altos niveles de esta bacteria pueden contener una
amplia gama de parásitos, bacterias y virus causantes de enfermedades, las
cuales pueden variar desde condiciones leves como las infecciones agudas del
oído, hasta otras más graves que amenazan la vida tales como la fiebre tifoidea y
la hepatitis. Los gusanos parásitos y los patógenos bacterianos tales como
Salmonella, también se encuentran comúnmente en el agua que da positivo en la
prueba que busca altos niveles de bacterias coliformes fecales.

IMVIC es una prueba utilizada en biología para la identificación bacterias. Se
compone de cuatro pruebas: Indol, Rojo de metilo, Voges-Proskauer y Citrato.
Se emplean fundamentalmente para la identificación de las Enterobacterias
(bacilos Gram negativos, anaerobios facultativos con metabolismo fermentador).
horas de incubación. Recuerda que una colonia de enterobacterias se
orgina a partir de una sola bacteria (UFC) y éstas se dividen en un tiempo
24hrs=281 474 976 710 656

Unidad Xochimilco
Por: Dimas Guzmán Cristian.
Lic. Médico cirujano.
Docente:
Grupo: BB12A

26.Explica el fundamento de los diferentes métodos físicos y químicos de
esterilización.

El calor se puede aplicar como agente esterilizante de dos formas: el calor húmedo
el cual destruye a los microorganismos por desnaturalización de las proteínas y el
calor seco que destruye a los microorganismos por oxidación de sus componentes
celulares.
El calor es considerado como el método de esterilización por excelencia siempre y
cuando el material a esterilizar soporte altas temperaturas sin sufrir ningún tipo de
daño.
Algunas sustancias químicas pueden ser usadas como agentes esterilizantes
porque tienen la capacidad de promover una o más reacciones químicas capaces
de dañar los componentes celulares de los microorganismos (proteínas,
membranas, etc.)
27.Explica las ventajas y desventajas de los métodos de la pregunta anterior e
MÉTODOS FÍSICOS.
Calor húmedo.
Ventajas: Rápido, no deja residuos tóxicos, bajo deterioro del material expuesto,
económico.
Desventajas: No se permite para emulsiones con agua, es corrosivo sobre algunos
metales.
Calor seco.
Ventajas: No es corrosivo para metales e instrumentos, permite esterilización de
sustancias en polvo.
Desventajas: Mayor tiempo de esterilización. Baja penetración del calor.
Radiaciones de acuerdo al tiempo de radiación.
Ionizantes RUV.
Ventajas: Esterilizan superficies.

Desventajas: Escasamente penetrantes.
Filtración.
Ventajas: Esteriliza aceites, pomadas, soluciones oftálmicas.
Desventajas: No retienen virus ni microplasma.
MÉTODOS QUÍMICOS.
Óxido de Etileno.
Ventajas: Esteriliza material que es termo sensible, como equipos electrónicos, etc.
Desventajas: Peligroso por ser altamente inflamable y explosivo, además de ser
cancerígeno.
Aldehídos.
Ventajas: Método rápido y único esterilizante frío.
Desventajas: No se puede estrilizar objetos con celulosa, algodón, líquidos,
humedad, madera, etc.
Gas-Plasma de Peróxido de Hidrógeno.
Ventajas: No deja ningún residuo tóxico, se convierte en agua y oxígeno al final del
proceso, material sin aireación, dura aproximadamente entre una hora y hora y
media.
Desventajas: Muy costoso.
28.Indica los principales agentes desinfectantes y antisépticos utilizados en la
desinfección.
Detergentes catiónicos (compuestos de amonio cuaternario) Gas cloro.
Compuestos clorados (cloraminas, hipoclorito sódico, dióxido de cloro) Sulfato de
cobre. Óxido de etileno (gas). Formaldehído. Glutaraldehído. Peróxido de
hidrógeno. Compuestos yodóforos que contienen yodo en solución. Dicloruro de
mercurio. Ozono. Ácido peracético. Compuestos fenólicos.

Antisépticos: Alcohol (60-85% etanol o isopropanol en agua). Compuestos que
contienen fenol (hexaclorofeno, triclosan, cloroxilenol, clorhexidina). Detergentes
catiónicos, especiamente compuestos de amonio cuaternario (cloruro de
benzalconio). Peróxido de hidrógeno (solución al 3%). compuestos yodorosos que
contienen yodo en solución. Nitrato de Plata.
29.¿Qué tipo de sustancias suelen utilizarse comúnmente para desifenctar
superficies?
Los desinfectantes como lo son bacterisidas, fungisidas y virusidas
30.Explica cuál es el objetivo de utilizar el mechero para preparar la zona estéril
para el trabajo microbiológico y señala que factores influyen en la creación
de la zona estéril.
Trabajar cerca del mechero (radio de 20 centímetros aproximadamente) crea
corriente de aire cálido que impide la entrada a esta zona de bacterias
contaminantes esto creando un inoculo más puro del microorganismo a trabajar.
31.Menciona otros métodos usados en la industria y en la industria y en los
Uso de bata, guantes y cubrebocas con la finalidad de evitar contaminación. Lavado
del area de trabajo con hipoclorito de sodio al 10% o benzal diluido 1:10. El uso del
mechero.
32.Explica los riesgos que puedes correr si no recoges el frasco, los tubos y las
pipetas después de concluir la sesión.
Se corre el riesgo de sufrir intoxicaciones y/o accidentes de contaminacion.
33.Explica los riesgos que puedes correr si no lavas y desinfectas la mesa de

34.Realiza el diagrama de un microscopio, describe cada una de sus partes e
indica su función.

PARTE FUNCION
un lugar a otro
tiene en su centro una abertura circular
por la que pasará la luz del sistema de
iluminación. Aquí se coloca el
portaobjetos con la muestra a
observar
PINZAS DE SUJECION Parte mecánica que sirve para sujetar
la preparación. La mayoría de los
microscopios modernos tienen las
preparación.
hacia arriba o hacia abajo del tubo o la
platina, y se utiliza para localizar la
imagen a observar.

CREMALLERA Permite que el movimiento de los
tornillos macro y micrométrico sea de
mayor o de menor amplitud.
OCULAR Se localiza en la parte superior del tubo
ocular y son las lentes que Capta y
amplia la imagen formada en los
binoculares.
total de aumento.
condensador, que elimina el exceso de
luminosidad para tener una buena
FUENTE DE LUZ Para observar la muestra microscópica
es necesario que ésta se ilumine con
algún tipo de luz y nuestros
microscopios cuentan con un foco que
da energía eléctrica que dirige sus
rayos luminosos hacia el sistema
condensador

35.Explica qué tipos de bacterias pueden aislarse en el agua.
La técnica de estría cruzada es un procedimiento semicuantitativo.
Es una técnica que se utiliza para obtener a partir de un elevado número de
bacterias, unnúmero reducido de ellas distribuidas individualmente sobre la
superficie de la placa. Al incubar ésta, cada una de las bacterias originará una
colonia.
Enterobacteriaceae y bacilos gramnegativos entéricos relacionados. Contiene sales
biliares y cristal violeta que inhibe el crecimiento de bacterias grampositivas y de
algunas gramnegativas exigentes. Contiene lactosa como única fuente de carbono.
Identificando con un color rojo las bacterias fermentadoras de lactosa.

Son aquellos que favorecen el crecimiento específico de un microorganismo
particular (o grupo de microorganismos). Es de gran utilidad para el aislamiento de
microorganismos a partir de una población microbiana mixta.
42.Describe las características de la pared celular de las bacterias grampositivas
y gramnegativas, resaltando sus diferencias.
Bacterias Gram positivas.
1. Poseen una pared celular interna y una pared de peptidoglucano.
Peptidoglucano: es un exoesqueleto que da consistencia y forma esencial
para replicación y supervivencia de la bacteria.
2. No tiene membrana externa.
3. No tiene espacio periplasmático
4. La red de mureína está muy desarrollada y llega a tener hasta 40 capas.
5. La penicilina mata a las gram positivas, ya que bloquea la formación de
enlaces peptídicos entre las diferentes cadenas del peptidoglucano.
6. No contiene LPS.
7. En la tinción de Gram, retienen la tinción azul.
8. Conservan el complejo yodocolorante.
9. Son esporulantes y no esporulantes, como Streptococcus, Cisteria, Frankia.
10.Poseen otros componentes: ácidos teicoicos y lipoteicoicos, y polisacáridos
complejos.
Bacterias Gram negativas.
1. Poseen una pared celular más compleja:
Pared celular interna
Pared de peptidoglucano bicapa lipídica externa
2. Membrana externa: forma un saco rígido alrededor de la bacteria, mantiene
estructura y es barrera impermeable a macromoléculas, ofrece protección en
condiciones adversas.

3. Espacio periplasmático: espacio entre la superficie externa de la membrana
citoplasmática y la interna de la membrana externa.
4. La red de mureína presenta una sola capa.
5. La penicilina no mata a las Gram negativas, a causa de la capa de
lipopolisacáridos situada en la parte externa de la pared celular.
6. Contiene LPS: estimulador de respuestas inmunes: activa células B,
liberación de IL, FNT, IL 6 por macrófagos.
7. Quedan decoloradas.
8. Pierden el complejo yodocolorante.
9. Pueden ser anaerobios o aerobios.
10.Poseen proteínas con concentraciones elevadas.
Los coliformes son un grupo de bacterias que comparten características
bioquímicas en común y son útiles como microorganismos indicadores de sanidad
de alimentos y agua. Entre los coliformes se encuentran las enterobacterias.
Poseen morfología bacilar, pueden ser aerobias o anaerobias facultativas. No
forman endosporas, son gramnegativas, fermentan la lactosa produciendo ácido y
gas en 24 a 38 horas a 36 ºC.
Indican la presencia de una gran cantidad de heces y otros materiales orgánicos sin
tratar, que pueden tener un alto impacto en el ambiente. Indican la sanidad de
alimentos y agua. Es un indicador de calidad de los alimentos.
de
la salud pública ya que permite garantizar la inocuidad del agua destinada al
consumo
evitando así epidemias gastrointestinales.

Las bacterias coliformes fecales pueden tener efectos graves en la salud pública.
Los volúmenes de agua con altos niveles de esta bacteria pueden contener una
amplia gama de parásitos, bacterias y virus causantes de enfermedades, las cuales
pueden variar desde condiciones leves como las infecciones agudas del oído, hasta
otras más graves que amenazan la vida tales como la fiebre tifoidea y la hepatitis.
IMVIC es una prueba utilizada en biología para la identificación bacterias. Se
compone de cuatro pruebas: Indol, Rojo de metilo, Voges-Proskauer y Citrato.
Se emplean fundamentalmente para la identificación de las Enterobacterias
(bacilos Gram negativos, anaerobios facultativos con metabolismo fermentador).
51.-Determina el número de bacterias que hay en una colonia después de 24 horas
de incubación. Recuerda que una colonia de enterobacterias se orgina a partir de
una sola bacteria (UFC) y éstas se dividen en un tiempo promedio de 30 minutos.
24hrs=281 474 976 710 656

Unidad Xochimilco
Por: Melina Trejo Lara
Lic. en Enfermería
Docente:
Grupo: BB12A

esterilización.
Garantizan la destrucción total de los microorganismos presentes en sustancias o
alguna experimentación provengan de las muestras estudiadas y no de alguna
contaminación del ambiente o de la persona.
Dentro de los métodos físicos se pueden encontrar:
Calor: Todos los microorganismos son susceptibles en distinto grado a la acción del
calor, el cual provoca una desnaturalización de proteínas, fusión desorganización
de las membranas en los microorganismos.
Radiaciones: se atribuye a la absorción por DNA, existen uniones covalentes entre
residuos de primigenia pertenecientes a la misma cadena, se distorsiona el DNA y
se inhibe la síntesis del DNA, por tanto también el crecimiento y respiración de los
microorganismos. Su uso principal es para esterilizar el aire y superficies.
Dentro de los métodos químicos: Pueden ser Gaseosos (óxido de etileno) o no
Gaseosos (Aldehídos, ácido peracético y peróxido de hidrógeno)
Los antisépticos son considerados venenos que al actuar sobre gérmenes, estos
son destruidos. Algunos de ellos ejercen su acción nociva sobre todas las células y
otros actúan sobre algunas especies bacterianas en específico. Es óptimo para la
antisepsia de las manos del experimentador, mesas de trabajo, material, etc.
Métodos físicos:
Ventajas: Rápido calentamiento y penetración, destrucción de bacterias en un
periodo corto, no hay residuos tóxicos, además de que no es corrosivo.
Entre sus desventajas se encuentra que: En algunas ocasiones el material a
esterilizar no soporta altas temperaturas y pueden sufrir algún daño o simplemente
el material a esterilizar puede ser inflamable. En cuanto a las radiaciones, no
penetran en sólidos y pobremente en líquidos.

Métodos químicos:
Ventajas: el ciclo de esterilización dura de 54-75 minutos, el material sometido a
estos procesos no precisa de aireación.
Desventajas: se necesita un mayor tiempo, las sustancias son inflamables, tóxicas
y de muy alto costo.
la desinfección.
Los desinfectantes son productos químicos que matan a los microorganismos y se
utilizan sobre objetos inanimados. Como: Glutaraldehído, hipoclorito de sodio
Los antisépticos son sustancias químicas que matan o inhiben el crecimiento de los
vivos. Como: Alcoholes, tintura de Yodo,
superficies?
*Hipoclorito de sodio al 10%
*Solución de benzal diluido 1:10
5.- Explica cuál es el objetivo de utilizar el mechero para preparar la zona
Ayudan a mantener un ambiente de esterilidad, a través del calor, cuando se trabaja
con siembra de microorganismos.
Factores que influyen en la zona estéril: Una manipulación correcta de las muestras
y del material, evitar contaminar a través de microorganismos propios del
experimentador, aire externo, al igual que material no esterilizado previamente a su
uso.
investigación para crear zonas de trabajo estériles.
Desinfectantes: son productos químicos que matan a los microorganismos y se
utilizan sobre objetos inanimados

Antisépticos: sustancias químicas que matan o inhiben el crecimiento de los
vivos
El calor es el método más utilizado para la esterilización y puede emplearse calor
seco con hornos con una temperatura de 170°C por una hora o como calor húmedo
con autoclaves con una temperatura de 121°C a 15 libras de presión por pulgada
durante 20minutos.
7.- Explica los riesgos que puedes correr si no recoges el frasco, los tubos y
Primero que nada se corre el riesgo de la ruptura de alguno de los materiales lo que
puede causar algún accidente además de que es importante recoger el material y
desinfectarlo para evitar la contaminación bacteriológica en especial si los
materiales serán usados después.
8.- Explica los riesgos que puedes correr si no lavas y desinfectas la mesa de
De no limpiar la mesa se propaga la contaminación, hay que tratar de mantener el
campo estéril. Además que hay que tener el mayor cuidado en la limpieza para el
manejo de las muestras y evitar alteraciones en los resultados.
10.- Explica que tipos de bacterias pueden aislarse en el agua.
Enterobacterias como Shigella, Salmonella, Yersina pestis y algunas pertenecientes
a la flora oportunista como Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae y Proteus
mirabilis.
11.- Explica cuál es el objetico de sembrar diluciones de agua.
Las diluciones son recomendadas debido al alto contenido de bacterias ya que
permiten trabajar con un número apropiado de células para realizar cuentas viables
así como el aislamiento adecuado de las colonias. Es importante no trabajar con
una dilución tan grande ya que el número de bacterias sería tan bajo que podría
impedir el detectar las colonias.

El objetivo es obtener, a partir de elevado número de bacterias, un número reducido
de ellas distribuidas individualmente sobre la superficie de la placa. Al incubar esta,
cada una de las bacterias originara una colonia.
13. Explica que tipos de bacterias pueden aislarse en agar macconkey.
Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de fácil
desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos. Permite diferenciar bacterias que
utilizan o no, lactosa en muestras clínicas, de agua y alimentos. Todas las especies
de la familia Enterobacteriaceae desarrollan en el mismo.
Microorganismos Colonias
Escherichia coli ATCC 25922 Rojas con halo turbio
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Rosadas mucosas
Salmonella typhimurium ATCC 14028 Incoloras, transparentes
Shigella flexneri ATCC 12022 Incoloras, transparentes
Proteus mirabilis ATCC 43071 Incoloras, transparentes
Enterococcus faecalis ATCC 29212 Diminutas, incoloras, opacas
14. Explica a qué se le llama medio de cultivo bacteriológico.
Un cultivo es un método para la multiplicación de microorganismos, tales como
bacterias, hongos y parásitos, en el que se prepara un medio óptimo para favorecer
el proceso deseado. Un cultivo es empleado como un método fundamental para el
estudio de las bacterias y otros microorganismos que causan enfermedades en
medicina humana y veterinaria.
El enriquecimiento es una técnica que utiliza un medio selectivo líquido para permitir
el desarrollo de un microorganismo a partir de una muestra que contiene una gran
variedad de microorganismos. Así, aquellos microorganismos para los que el

ambiente sea más favorable crecerán más que los otros y finalmente serán
predominantes
Son aquellos que, además de las sustancias nutritivas normales, incorporan una
serie de factores indispensables para el crecimiento de microorganismos exigentes.
Este enriquecimiento se hace por adición de sangre u otros productos biológicos
que aportan dichos factores. En ocasiones es posible añadir suplementos artificiales
a los medios para producir un enriquecimiento del mismo. El gonococo, por ejemplo,
necesita cistina y cisteína para su crecimiento. Estas sustancias son aportadas por
la sangre calentada adicionada al medio de cultivo (agar chocolate).
Son medios utilizados para favorecer el crecimiento de ciertas bacterias contenidas
en una población polimicrobiana. El fundamento de estos medios consiste en
facilitar nutricionalmente el crecimiento de una población microbiana específica. Un
ejemplo de medio selectivo es el caldo selenito, que se utiliza para favorecer el
crecimiento de salmonellas y frenar el del resto de enterobacterias.
17.- Describe las características de la pared celular de las bacterias
Bacteria Gram Positiva:
d) Su envoltura celular comprende:
1. La membrana citoplasmática
2. La pared celular.
e) La pared celular está compuesta por una gruesa capa de peptidoglicano o
mureína (polímero de N-acetil-2-D-glucosamina, unido en orientación ß-1,4
con N-acetil murámico), su grosor le confiere una gran resistencia, las
protege de una ruptura osmótica en ambientes acuáticos, les confiere forma
y es la responsable de retener el tinte azul oscuro o violeta durante la tinción
de Gram.
f) Presentan sólo una membrana lipídica (membrana citoplasmática) y la capa
gruesa de peptidoglicano.
 Posee dos clases de ácidos teicoicos: ácido lipoteicoico (ácido teicoico unido
a un lípido) y ácido teicoico. Son polisacáridos que se unen al ácido N-acetil
murámico del peptidoglicano.

 La pared celular se une a la membrana citoplasmática mediante moléculas
de ácido lipoteicoico.
 Ciertas bacterias Gram-positivas, cuando se someten a un régimen de
limitación de fosfato son incapaces de sintetizar ácidos teicoicos, pero en su
lugar producen ácidos teicurónicos. Los teicurónicos consisten en polímeros
aniónicos formados por la alternancia de ácidos urónicos (que tienen grupos
-COOH libres) y aminozúcares como la N-acetil-galactosamina.
f) Pueden presentar una capa superficial cristalina denominada capa S o capa
superficial (es la parte más externa de la envoltura celular bacteriana) unida
a la capa de peptidoglicano.
g) No existe presencia de endotoxinas.
Bacteria Gram Negativa:
f) Conformada por 4 zonas:
1. La membrana citoplasmática.
2. El espacio periplasmático, ubicado entre la membrana citoplasmática y el
peptidoglicano.
3. Una fina capa de peptidoglicano.
4. Membrana externa que contiene fosfolípidos, el lipopolisacárido (LPS) y
proteínas (proteínas de membrana 6 externa). Esta capa está estrechamente
unida al peptidoglicano y se la considera un componente de la pared celular.
g) Su estructura didérmica, es decir, de doble membrana celular (una externa y
la otra citoplasmática) está íntimamente ligada al color rosado tenue que
presentan ante la tinción de Gram.
h) Presentan dos membranas lipídicas (membrana citoplasmática y membrana
externa) entre la fina pared celular de peptidoglicano
 Entre la membrana citoplasmática interna y la membrana externa que
recubre la pared celular se localiza el espacio periplásmico, relleno de una
sustancia denominada periplasma, la cual contiene enzimas importantes
para la nutrición en estas bacterias. Retienen la safranina.
 La membrana externa contiene diversas proteínas; entre ellas, las porinas o
canales proteicos que permiten el paso de ciertas sustancias, además de los
lipopolisacáridos (LPS), formados por tres regiones: el polisacárido O
(antígeno O), una estructura polisacárida central (KDO) y el lípido A
(endotoxina).
i) Pueden presentar una capa S que se apoya directamente sobre la
membrana externa.
j) Presencia de endotoxinas: el lipopolisacárido (LPS)

Se definen como coliformes totales a aquellas bacterias entéricas en forma de
bacilos cortos que se caracterizan por tener las siguientes propiedades bioquímicas:
 Ser aerobias o anaerobias facultativas
 Ser bacilos Gram negativos;
 No ser esporógenas; (Si es Gram negativo NO esporula)
 Fermentan la lactosa a 35°C en menos 48 horas
 Con producción de ácido y gas
Incluye los géneros: Escherichia, Enterobacter, Klebsiella y Citrobacter. Durante
mucho tiempo se consideraron evidencia de contaminación fecal, pero se ha
demostrado que muchos de ellos pueden vivir e incluso crecer en el suelo, el agua
y otros ambientes. Actualmente se consideran un excelente indicador de la
eficiencia de los procesos de sanitización y desinfección, así como de calidad
sanitaria en agua, vegetales y diversos productos procesados. Su determinación
se basa generalmente en la capacidad de fermentar lactosa. Se pueden utilizar los
métodos del número más probable (NMP ó MPN por sus siglas en inglés) que es un
método estadístico en tres etapas y permite el hallazgo de cantidades muy bajas de
coliformes. También se pueden detectar por cuenta en placa utilizando agar bilis-
rojo violeta (ABRV ó RVBA por sus siglas en inglés) en el cual las colonias
fermentadoras de lactosa causan el vire del indicador; pueden detectarse por
filtración en membrana (Millipore) e incubación en medios adecuados, por métodos
rápidos como Petrifilm y reacciones cromogénicas o fluorogénicas.
Coliformes fecales: dentro del grupo coliforme, los de origen fecal son capaces de
fermentar la lactosa también a 44.5 °C; se consideran el indicador más adecuado
de contaminación con heces de animales y humanos, por ejemplo en pescados y
mariscos, carnes, leche, alimentos RTE, entre otros. La determinación se hace a
partir de la segunda etapa (confirmativa) del método de NMP, cultivando en caldo
lactosado con incubación a 44.5 °C. Generalmente se combinan las
determinaciones, según se requiere.
Escherichia coli: se considera indicador de contaminación fecal reciente, humana
o animal en productos como agua embotellada, leche y jugos, alimentos infantiles,
y alimentos procesados, en general. Se caracteriza por ser coliforme termotolerante
(fermenta lactosa a 44.5°C) que produce indol a partir de triptofano y produce β-
glucuronidasa, características que se usan para su identificación en laboratorio,
generalmente en la etapa final del NMP o de alguno de los otros métodos,
incluyendo Petrifilm.

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