Este documento describe el método de coloración de Ziehl-Neelsen, el cual se utiliza para identificar bacterias ácido alcohol resistentes como Mycobacterium tuberculosis. Explica los materiales necesarios, el procedimiento que incluye la fijación de la muestra, teñirla con fucsina fenicada y decolorarla con alcohol ácido antes de contrateñir con azul de metileno, y cómo observar la muestra bajo el microscopio para determinar resultados positivos o negativos.

1. ZIEHL NEELSEN

2. MARCO TEÓRICO
• Explicamos la razón de este método.
Técnica utilizada para la identificación de bacterias Bacilus ácido alcohol resistente,
dentro de ellas tenemos a :
✓Mycobacterium Tuberculoso.
✓Mycobacterium Leprae.
✓Nocardia.

3. MATERIALES
• Muestra de esputo.
• Asa de simbra.
• Lamina portaobjeto.
• Mechero de alcohol.
• Puente de coloración.
• Microscopio.
• Bajalengua.
• Aceite de inmersión.
• Pipetas Pasteur.
• Encendedor.
• Fenol al 5%.
• Acido Clorhídrico 96%.
• Azul de metileno.
• Fucsina Fenicada.

4. MÉTODO
SE UTILIZA COLORACIÓN DE ZIEHL NELSEEN.
• Destapar la muestra junto al mechero
para evitar contaminación.
• Colocar la muestra en el portaobjeto y extender
hasta que este homogéneo y no debe estar al
borde de la lámina
PREPARACIÓN

5. • Dejar secar y pasar por el mechero para
fijar.
• Cubrir la muestra con Fucsina fenicada

6. • Calentar hasta que la muestra emita vapor,
no debe hervir, dejar enfriar y repetir el
proceso 3 veces.
• Lavar con agua corriente para eliminar el
colorante.

7. • Colocar alcohol ácido para decolorar hasta
que la muestra tenga coloración rosa.(10-
15 seg)
• Lavar nuevamente la muestra.

8. • Cubrir la muestra con Azul de metileno
por 30-60 seg.
• Lavar la lámina y dejar secar.

9. • Observar la muestra ya procesada
por el microscopio a 100x, con ayuda
del aceite de inmersión.

10. RESULTADOS
Negativo (-) : No se encuentra BAAR en 100 campos.
Positivo 1+ : Menos de un BAAR por campo (10-99 BAAR)
Positivo 2+ : De 1 a 10 BAAR por campo en 50 campos.
Positivo 3+ : Más de 10 BAAR por campo en 20 campos.
* Si un resultado es repetitivo en encontrar de 1 a 9 BAAR en 100 campos , realizar otro extendió
de la misma muestra e informar.
Ejem: 7 BAAR EN 100 campos.

11. CONCLUSIÓN
➢ La coloración e Zeihl Nelseen nos facilita la detección del Bacilo teñido de rojo con forma
de baston.
➢ El Mycobacterium Tuberculoso quien es causante de la Tuberculisis, ataca a los
púlmones el cual se manifiesta por signos y síntomas generales que van aumentando
progresivamente, los que incluyen pérdida de peso y de apetito, tos persistente y fiebre
nocturna, entre otras.