La cromatografía es un método de separación física que separa los componentes de una mezcla entre dos fases, una fase estacionaria inmóvil y una fase móvil. Los componentes se mueven a través de la fase estacionaria a diferentes velocidades debido a las diferencias en cómo interactúan con las dos fases, lo que permite su separación. Existen varios tipos de cromatografía como cromatografía en papel, cromatografía en columna, cromatografía de gases y cromatografía de líqu

1. Benemérita Universidad
Autónoma de Puebla
Facultad De Ciencias Químicas
Lab. Química Orgánica I
Emmanuel Del Rosal Zamora
Ana Karen González Hernández
Cromatografía

2. OBJETIVO
Dar a conocer los diferentes tipos de cromatografía, identificar sus
componentes, su elaboración y que se espera como resultado de cada una. Así
como la discusión y aclaración de las dudas que surjan.

3. Fase móvil: consiste en un fluido (gas, líquido o fluido supercrítico).
Fase estacionaria: se trata de un sólido o un líquido fijado en un sólido.
Los componentes de la mezcla interaccionan en forma diferente con la fase
estacionaria y con la fase móvil.
Los componentes atraviesan la fase estacionaria a distintas velocidades y se van
separando.
Conceptos generales

4. Cromatografía plana: La fase estacionaria se sitúa sobre una placa plana o sobre
un papel. Las principales técnicas son: Cromatografía en papel y Cromatografía en
capa fina
Cromatografía en columna.
Cromatografía de líquidos.
Cromatografía de gases.
Cromatografía de fluidos supercríticos.
Tipos de Cromatografía

5. La cromatografía es esencialmente un método
físico de separación en el que los componentes a
separar se distribuyen entre dos fases, una
inmóvil, y otra móvil la cual percola a través de la
primera. El proceso cromatografico se da como
resultado de repetidos procesos de sorcion-
desorción durante el movimiento de los
componentes de la mezcla arrastrados por la fase
móvil a lo largo del lecho estacionario(elución),
produciéndose la separación debido a las
diferencias en las constantes de distribución de
los componentes de la mezcla entre la fase
estacionaria y la móvil. A la distribución final de
los componentes en función de su posición sobre
el lecho estacionario, o del tiempo en que eluyen
se le denomina cromatograma.
Cromatografía

6. Se realiza sobre papel u otro material sólido. Suele llamarse “en capa fina” o “en capa
delgada” porque la fase estacionaria recubre un soporte plano y rígido. Cromatografía
ascendente en capa fina
Cromatografía plana
Cromatografía ascendente en capa fina:
colocación de una muestra (con 3
componentes), desarrollo de la
cromatografía y revelado del
cromatograma.
Rf es el factor de retardo o retraso, que
mide la movilidad relativa de cada
componente con respecto al máximo
posible, la distancia recorrida por el frente
de fase móvil.
Componente 1: Rf = a / D
Componente 2: Rf = b / D
Componente 3: Rf = c / D

7. Disposiciones experimentales para realizar una cromatografía en papel descendente
(izqda.) y ascendente (dcha.).

8. 1: Aplicación de la muestra
2: Se sumerge el extremo inferior en la fase móvil
3 a 5: La fase móvil asciende por capilaridad y se va produciendo la
separación de los componentes
6: Se marca el frente de avance del disolvente y se deja secar la placa
7: Revelado de los componentes ya separados y medida de su avance

9. F.M. líquida, F.E. sólida: columnas de varios mm de
diámetro y varios cm de longitud.
F.M. gas, F.E. sólida: columnas de unos 5 mm de diámetro
y 1-20 m de longitud.
F.M. gas, F.E. líquida: columnas “capilares”, con menor
diámetro y 30-100 m (incluso más) de longitud.
Cromatografía en columna

10. Funcionamiento de una columna, mostrando la carga de la muestra y diversos
momentos a lo largo de la elución:
1.Muestra depositada sobre el lecho cromatográfico
2.La muestra penetra en el lecho
3.Se añade fase móvil
4.Comienza la separación de los componentes de la muestra
7.Eluye el primer componente
9.Eluye el segundo componente

11. Cromatografía en columna Cromatografía plana (papel o capa fina)
1.- Preparación del soporte y fase estacionaria. 1.- Preparación del soporte y fase estacionaria.
1.1.- Equilibrado de la columna.
2.- Aplicación de la muestra.
2.- Aplicación de la muestra.
Secado.
3.- Elución:
a) Lavado de componentes no retenidos.
b) Liberación, desplazamiento o elución propiamente
dicha de los componentes retenidos.
3.- Desarrollo de la cromatografía.
4.- Recolección de fracciones o análisis del efluente en
continuo.
4.- Secado de la placa.
5.- Análisis, cuantificación o revelado. 5.- Revelado y cuantificación en su caso.
6.- Regeneración de la fase estacionaria.
Etapas en la realización de una cromatografía

12. http://biomodel.uah.es/tecnicas/crom/inicio.htm
ANÁLISIS QUÍMICO. F. Rouessac, A. Rouessac, 2003, Mc Graw Hill.QUÍMICA
ANALÍTICA
CONTEMPORANEA. J.F. Rubinson, K.A. Rubinson,2000, Pearson Education.
Bibliografia