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BENEMÉRITA UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE PUEBLA
      FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS
 LICENCIATURA EN QUÍMICO FRAMACOBIOLOGO

     LABORATORIO DE QUÍMICA CLÍNICA III

CREATININA Y TASA DE FILTRACIÓN GLOMERULAR

               PRESENTAN:
        ACOCAL GONZÁLEZ VERÓNICA
     ALEXANDER DANIEL CHÁVEZ MATEOS

              PROFESOR:
        EDUARDO VELASCO SÁNCHEZ
Creatinina: Importancia diagnóstica
• La creatinina se produce de forma endógena a partir de la
  creatina y el creatinfosfato como resultado de los procesos
  metabólicos musculares.

• Se elimina por riñón mediante filtración glomerular.

• La determinación de la creatinina en suero sirve para el
  diagnóstico y el control de enfermedades renales agudas y
  crónicas así como para la estimación del filtrado glomerular.

• La concentración de creatinina en orina puede emplearse
  como una magnitud de referencia de la excreción de analitos.
Elección y conservación de las muestras




                                      La heparina
                        Los           como sal de          Al utilizar       Para la
                 anticoagulantes      amonio debe           métodos      determinación
La muestra de     como heparina      evitarse en los   enzimáticos no     de creatinina
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    suero.       interfieren en la    enzimáticos         la sangre a
                determinación de                                         requiere orina
                                       que miden         temperatura        de 24 h.
                    creatinina.      producción de         ambiente.
                                         amonio.
Métodos para determinar creatinina

      Colorimétricos   Enzimáticos



         Punto final



          Cinéticos
MÉTODOS COLORIMÉTRICOS
• Se basan en la reacción de Jaffé. La creatinina reacciona con el
  ácido pícrico en medio alcalino formando un complejo de color rojo
  a una longitud de onda entre 510- 520 nm.




• Existen interferentes positivos, entre ellos las proteínas, glucosa,
  acetoacetato, ácido ascórbico y ácido úrico, e interferentes
  negativos, y de ellos el más importante es la bilirrubina.
Punto final
• Con o sin desproteinización.

• La desproteinización es útil para eliminar la interferencia por
  proteínas, utilizando como desproteinizante el ácido tricloroacético
  (TCA) al 10%

• Con el método de punto final, aún incorporando la
  desproteinización, no se eliminan los otros interferentes positivos, ni
  los negativos.
Cinéticos
• Útiles para minimizar las interferencias positivas. Al efectuar la
  lectura en autoanalizadores, se permiten múltiples puntos de
  lectura.

• En cuanto a los tiempos de lectura a realizar, lo importante es
  efectuar no sólo la lectura al principio pues reaccionarían solo los
  interferentes de reacción rápida, sin reaccionar la creatinina. Ni
  tampoco realizar un único punto al final porque se leerían tanto
  creatinina como interferentes.

• El método de Jaffé cinético con compensación y con blanco de
  muestra, resultaría comparable al método enzimático si se tienen en
  cuenta las siguientes limitaciones:

   – pacientes neonatos (bilirrubina y hemoglobina fetal),
   – Pacientes bajo tratamientos con cefalosporinas
Métodos enzimáticos
• Actualmente, se está tendiendo a usar métodos enzimáticos porque
  son los de mayor especificidad, exactitud y precisión.

• Existen diferentes métodos enzimáticos adaptables a autoanalizadores:

1)
2)




3)
Métodos de Referencia
• El método de referencia es la Cromatografía
  Gaseosa (GC) asociada a la Espectrofotometría de
  Masa por Dilución Isotópica (IDMS),

• Es un método laborioso y requiere de un paso
  previo a la GC, en el cual, por un intercambio
  catiónico, se hace una derivatización previa de la
  creatina a creatinina.

• Es el método de mayor especificidad y con el
  menor coeficiente de variación (CV < 0,3%).
Métodos de Referencia
• Hay una tendencia a nominar como método
  de referencia a la Cromatografía Líquida (LC)
  asociada a Espectrofotometría de Masa por
  Dilución Isotópica (IDMS).

• No necesita el paso de la derivatización.

• Presenta excelente especificidad y bajo sesgo
  (< 0,2%)
Métodos de Referencia
• Existen otros tipos de métodos que hacen reacciones
  múltiples de sucesivas espectrofotometrías de masa, y
  finalmente se acoplan a una cromatografía líquida.

• Estos también son métodos considerados de
  referencia, con una excelente exactitud y precisión.

• Triple-Cuádruple Espectrofotometría de Masa
  (TANDEM-MS) (Múltiples reacciones de monitoreo) –
  Cromatografía-Líquida (LC-MS-MS)
VALORES  DE   REFERENCIA    DE   CREATININA
PROPUESTOS LUEGO DE LA ESTANDARIZACIÓN
Índice de Filtrado Glomerular
• La medición real del IFG es aceptada como el mejor método para
  evaluar la función renal. Los valores de referencia, relacionados a
  edad, sexo y superficie corporal (SC), son aproximadamente 130 y
  120 mL/min/1,73 m2 SC en el hombre y en la mujer, jóvenes,
  respectivamente.

• Las condiciones que debe reunir una sustancia para medir el IFG,
  son:
   –   debe ser biológicamente inerte
   –   Filtrarse libremente por el glomérulo
   –   ser pequeña
   –   no estar unida a proteínas ni cargada
   –   no debe ser reabsorbida ni secretada por los túbulos renales
   –   no debe ser tóxica ni alterar la función renal
   –   debe ser fácil de dosar en plasma y orina
• El IFG se mide a través de la depuración de
  un marcador exógeno, considerándose a la
  inulina el marcador de referencia.

• Este procedimiento es complejo,
  reservándose sólo para investigación. Por
  ese motivo, a nivel asistencial, se ha utilizado
  la depuración de un marcador endógeno,
  comúnmente la creatinina (Cr), sérica.

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Creatinina y TFG

  • 1. BENEMÉRITA UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE PUEBLA FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS LICENCIATURA EN QUÍMICO FRAMACOBIOLOGO LABORATORIO DE QUÍMICA CLÍNICA III CREATININA Y TASA DE FILTRACIÓN GLOMERULAR PRESENTAN: ACOCAL GONZÁLEZ VERÓNICA ALEXANDER DANIEL CHÁVEZ MATEOS PROFESOR: EDUARDO VELASCO SÁNCHEZ
  • 2. Creatinina: Importancia diagnóstica • La creatinina se produce de forma endógena a partir de la creatina y el creatinfosfato como resultado de los procesos metabólicos musculares. • Se elimina por riñón mediante filtración glomerular. • La determinación de la creatinina en suero sirve para el diagnóstico y el control de enfermedades renales agudas y crónicas así como para la estimación del filtrado glomerular. • La concentración de creatinina en orina puede emplearse como una magnitud de referencia de la excreción de analitos.
  • 3. Elección y conservación de las muestras La heparina Los como sal de Al utilizar Para la anticoagulantes amonio debe métodos determinación La muestra de como heparina evitarse en los enzimáticos no de creatinina elección es sódica y EDTA no métodos se debe dejar en orina se suero. interfieren en la enzimáticos la sangre a determinación de requiere orina que miden temperatura de 24 h. creatinina. producción de ambiente. amonio.
  • 4. Métodos para determinar creatinina Colorimétricos Enzimáticos Punto final Cinéticos
  • 5. MÉTODOS COLORIMÉTRICOS • Se basan en la reacción de Jaffé. La creatinina reacciona con el ácido pícrico en medio alcalino formando un complejo de color rojo a una longitud de onda entre 510- 520 nm. • Existen interferentes positivos, entre ellos las proteínas, glucosa, acetoacetato, ácido ascórbico y ácido úrico, e interferentes negativos, y de ellos el más importante es la bilirrubina.
  • 6. Punto final • Con o sin desproteinización. • La desproteinización es útil para eliminar la interferencia por proteínas, utilizando como desproteinizante el ácido tricloroacético (TCA) al 10% • Con el método de punto final, aún incorporando la desproteinización, no se eliminan los otros interferentes positivos, ni los negativos.
  • 7. Cinéticos • Útiles para minimizar las interferencias positivas. Al efectuar la lectura en autoanalizadores, se permiten múltiples puntos de lectura. • En cuanto a los tiempos de lectura a realizar, lo importante es efectuar no sólo la lectura al principio pues reaccionarían solo los interferentes de reacción rápida, sin reaccionar la creatinina. Ni tampoco realizar un único punto al final porque se leerían tanto creatinina como interferentes. • El método de Jaffé cinético con compensación y con blanco de muestra, resultaría comparable al método enzimático si se tienen en cuenta las siguientes limitaciones: – pacientes neonatos (bilirrubina y hemoglobina fetal), – Pacientes bajo tratamientos con cefalosporinas
  • 8. Métodos enzimáticos • Actualmente, se está tendiendo a usar métodos enzimáticos porque son los de mayor especificidad, exactitud y precisión. • Existen diferentes métodos enzimáticos adaptables a autoanalizadores: 1)
  • 10. Métodos de Referencia • El método de referencia es la Cromatografía Gaseosa (GC) asociada a la Espectrofotometría de Masa por Dilución Isotópica (IDMS), • Es un método laborioso y requiere de un paso previo a la GC, en el cual, por un intercambio catiónico, se hace una derivatización previa de la creatina a creatinina. • Es el método de mayor especificidad y con el menor coeficiente de variación (CV < 0,3%).
  • 11. Métodos de Referencia • Hay una tendencia a nominar como método de referencia a la Cromatografía Líquida (LC) asociada a Espectrofotometría de Masa por Dilución Isotópica (IDMS). • No necesita el paso de la derivatización. • Presenta excelente especificidad y bajo sesgo (< 0,2%)
  • 12. Métodos de Referencia • Existen otros tipos de métodos que hacen reacciones múltiples de sucesivas espectrofotometrías de masa, y finalmente se acoplan a una cromatografía líquida. • Estos también son métodos considerados de referencia, con una excelente exactitud y precisión. • Triple-Cuádruple Espectrofotometría de Masa (TANDEM-MS) (Múltiples reacciones de monitoreo) – Cromatografía-Líquida (LC-MS-MS)
  • 13. VALORES DE REFERENCIA DE CREATININA PROPUESTOS LUEGO DE LA ESTANDARIZACIÓN
  • 14. Índice de Filtrado Glomerular • La medición real del IFG es aceptada como el mejor método para evaluar la función renal. Los valores de referencia, relacionados a edad, sexo y superficie corporal (SC), son aproximadamente 130 y 120 mL/min/1,73 m2 SC en el hombre y en la mujer, jóvenes, respectivamente. • Las condiciones que debe reunir una sustancia para medir el IFG, son: – debe ser biológicamente inerte – Filtrarse libremente por el glomérulo – ser pequeña – no estar unida a proteínas ni cargada – no debe ser reabsorbida ni secretada por los túbulos renales – no debe ser tóxica ni alterar la función renal – debe ser fácil de dosar en plasma y orina
  • 15. • El IFG se mide a través de la depuración de un marcador exógeno, considerándose a la inulina el marcador de referencia. • Este procedimiento es complejo, reservándose sólo para investigación. Por ese motivo, a nivel asistencial, se ha utilizado la depuración de un marcador endógeno, comúnmente la creatinina (Cr), sérica.