1. PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD
GUIA DE INVESTIGACION PRACTICA - GIP # 6
TEMA: FISIOLOGÍA SANGUÍNEA.
TITULO: TINCION DE EXTENDIDOS DE SANGRE
FECHA DE ENTREGA:
FECHA DE EVALUACIÓN:
FUNDAMENTACIÓN TEÓRICA
Las extensiones de sangre se deben colorear con la
finalidad de poder observar mejor los elementos que se
encuentran en el mismo.
Permite realizar recuentos de elementos formes y
observar sus características propias.
El frotis sanguíneo una vez seco, se somete, si es
necesario, a un proceso de fijación y posteriormente a una
tinción mediante un colorante adecuado. En la mayoría de
laboratorios, los colorantes más empleados para la tinción
hematológica se basan en el de Romanowsky ya que
puede obtenerse mayor información a partir del examen de
un frotis de sangre periférica bien teñido.
Una tinción de Romanowsky consiste en azul de
metileno y sus productos de oxidación, así como eosina Y.
La acción combinada de estos colorantes produce el efecto
de Romanowsky y da una coloración purpúrica a los
núcleos de los leucocitos y a los gránulos neutrófilos y de
color rosado a los eritrocitos. Los componentes principales
causantes de este efecto son el azul B (un producto de
oxidación del azul de metileno) y la eosina Y. La amplia
variación en los colores y sombras observadas con la

2. tinción de Romanowsky permiten distinciones sutiles de las
características celulares.
La naturaleza ácida o básica de las estructuras
celulares determina su avidez por los componentes del
colorante de Wright; es así como los ácidos nucleicos se
tiñen con azul B que es el básico y la hemoglobina con la
eosina Y que es ácida. Otras estructuras se tiñen por una
combinación de ambos y se denominan neutrófilas.
La técnica de Giemsa está formada por varios
colorantes: los tintes neutros utilizados combinan el azul de
metileno como tinte básico y la eosina como tinte ácido.
PRÁCTICA
OBJETIVOS
Adiestrar a los estudiantes en las técnicas de tinción
que existen, para los extendidos de sangre.
MATERIAL
1.- Jeringas desechables.
2.- Ligadura
3.- Torundas de algodón
4.- Alcohol
5.- Tubos de ensayo
6.- Anticoagulante
7.- Tinción de Wrigth
8.- Tinción de Giemsa
9.- Agua tamponada de pH 6.4 o agua destilada
10.- Bandeja y puente para tinción
11.- Aceite de inmersión
12.- Microscopio
MÉTODOS Y PROCEDIMIENTOS
1.- Obtener una muestra de sangre según técnica ya
descrita.

3. 2.- Depositar la misma en tubo de ensayo preparado
con anticoagulante.
3.- Realizar el extendido de acuerdo a técnica descrita
anteriormente.
4.- Dejar secar el extendido.
5.- Realizar la fijación del extendido caso sea
necesario:
Fijación con alcohol etílico durante 10 minutos
Fijación con alcohol metilico durante 2 minutos
6.- Añadir el colorante de Giemsa, dejar durante 1 a 3
minutos.
7.- Lavar preparación con agua destilada o tampón de
10-15 minutos
8.- Lave en el grifo y seque al aire. Observe al
microscopio.
- Si se realiza con la tinción de Wrigth se siguen los
mismos pasos hasta el número 5 y luego:
6.-Colocar el colorante de Wrigth y dejar actuar 1 -2
minutos
7.-Lave con agua o la solución tampón durante 3-5
minutos
8.- Lave en el grifo, secar y observar.
RESULTADOS Y CONCLUSIONES:
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CUESTIONARIO:
1.- ¿Cuálesson las tres partes que debe tener un
extendido de sangre?
2.- ¿Señale dos de todas las técnicas que se utilizan
para la tinción de extendidos
de sangre?
3.- ¿Qué se observa en el extendido de sangre ya con
la tinción?
4.- ¿Que tipo de glóbulos blancos se observan en un frotis y cuál de
ellos es más frecuente encontrar?