1. MICROSCOPIO OPTICO (MO)
MICROSCOPIO DE LUZ (ML)
MICROSCOPIO FOTONICO (MF)

2. EL MICROSCOPIO OPTICO
 El instrumento que fue empleado por los primeros
biólogos para estudiar la célula y los tejidos, es el
microscopio.
 El nombre deriva etimológicamente de dos raíces
griegas: mikrós, que significa pequeño y skopéoo, que
significa observar.
 Es decir, el microscopio es un instrumento que sirve
para observar objetos o estructuras pequeñas.

3. EL MICROSCOPIO OPTICO
 Existen dos tipos de microscopios que emplean la luz
como fuente de energía para formar imágenes
aumentadas y detalladas de objetos que a simple vista
no es posible observar:
 a) Microscopio fotónico simple o lupa.
 b) Microscopio fotónico compuesto.

4. EL MICROSCOPIO OPTICO
 El microscopio simple o lupa es un instrumento de
amplificación de imágenes que consiste en la utilización
de una o más lentes convergentes en un solo sistema
óptico. Dependiendo de la curvatura de la superficie de
la(s) lente(s) las lupas pueden ampliar las imágenes de
los objetos desde 5, 8,10, 12, 20 y hasta 50 veces. Forman
una imagen de mayor tamaño, derecha y virtual.

5. EL MICROSCOPIO OPTICO
 Los microscopios fotónicos compuestos que
se emplean actualmente tienen sus
antecesores en los instrumentos ópticos
desarrollados, en el periodo comprendido
entre 1590 y 1610, por Hans (padre) y Zacarías
(hijo) Janssen; quienes mediante el tallado
cuidadoso de lentes biconvexas construyeron
los primeros microscopios compuestos (fig.
microsc. 1).

6. EL MICROSCOPIO OPTICO
 Se denominan compuestos porque la imagen se forma
mediante tres sistemas de lentes, lentes convergentes y
divergentes.
 Los sistemas de lentes son el condensador, los
objetivos y los oculares.
 El (MF) es un instrumento de uso cotidiano en los
laboratorios de investigación y de diagnóstico así
como en las aulas de enseñanza de
Biología, Embriología, Histología, Microbiología
y Patología.

7. EL MICROSCOPIO OPTICO: COMPONENTES
 El microscopio fotónico compuesto esta
integrado por tres tipos de componentes:
 a) COMPONENTES MECÁNICOS
 b) COMPONENTES OPTICOS
 c) COMPONENTES DE ILUMMINACION

8. EL MICROSCOPIO OPTICO:
COMPONENTES MECANICOS
: Son aquellos que sirven de sostén, movimiento y sujeción de los
sistemas ópticos y de iluminación así como de los objetos que se
van a observar. Éstos se muestran en la imagen del microscopio
de la figura microsc. 2:
 Base o pié: soporte
 Brazo, estativo o columna: transporte
 Platina. Superficie plana de posición horizontal que posee una
perforación circular central. En ella se apoya la preparación
(lámina portaobjetos que contiene a la muestra que se va a
examinar) que se sujeta a la platina mediante pinzas o con un
carrito o charriot que, mediante mandos especiales facilitan el
movimiento de la preparación de derecha a izquierda y de
adelante hacia atrás.

9. EL MICROSCOPIO OPTICO:
COMPONENTES MECANICOS

 Tubo óptico. Cilindro metálico que mide 160mm o 170 mm de
longitud el cual en un extremo, está conectado al revolver o
portaobjetivos y en el otro se relaciona con el (los) ocular(es).
 Revolver o portaobjetivos. Es un componente que gira
alrededor de un eje con la finalidad que los objetivos que
sostiene coincidan de manera perpendicular con la perforación
central de la platina. En su superficie inferior posee varios
agujeros donde se atornillan los objetivos.
 Tornillos macrométrico y micrométrico. Generalmente están
situados en la parte inferior del brazo o columna.

10. EL MICROSCOPIO OPTICO:
COMPONENTES MECANICOS
 Engranajes y cremallera. Constituyen
mecanismos de desplazamientos de las diferentes
partes del microscopio.
 Cabezal. Es un componente situado en relación con
el tubo del microscopio que alberga principalmente
prismas o espejos

11. EL MICROSCOPIO OPTICO:
COMPONENTES OPTICOS
Son:
los objetivos,
los oculares,
el condensador y
los prismas.
Los tres primeros están constituidos por sistemas de
lentes
positivos y negativos.

12. EL MICROSCOPIO OPTICO
COMPONENTES OPTICOS: EL CONDENSADOR
Condensador: Es el componente óptico que tiene como
función principal concentrar y regular los rayos luminosos
que provienen de la fuente luminosa (fig. micros. 3).

13. EL MICROSCOPIO OPTICO
COMPONENTES OPTICOS: EL CONDENSADOR
Está formado por una o dos lentes convergentes que reúnen los rayos luminosos y los
orientan hacia la abertura central de la platina. Mediante un mecanismo de
cremallera se acerca o aleja de la platina. Tiene incorporado un diafragma iris que
regula la entrada de luz La mayoría de los condensadores de los microscopios actuales
también poseen una apertura numérica que indica la cantidad de luz que puede
captar y luego enviar hacia la preparación.

14. EL MICROSCOPIO OPTICO:
COMPONENTES OPTICOS
Objetivos. Los objetivos están considerados los elementos
más importantes en la formación de la imagen
microscópica, ya que estos sistemas de lentes establecen la
calidad de la imagen en cuanto a su nitidez y la capacidad
que tiene para captar los detalles de la misma (poder de
resolución).
Están constituidos también por un juego de lentes, en este
caso, convergente y divergente, para eliminar, en la medida
de lo posible, una serie de aberraciones que afectarían la
calidad de las imágenes formadas.

15. EL MICROSCOPIO OPTICO. COMPONENTES
OPTICOS: LOS OBJETIVOS
Son los objetivos, los oculares, el condensador y
los prismas. Los tres primeros están constituidos
por sistemas de lentes positivos y negativos.
Condensador: Es el componente óptico que tiene
como función principal concentrar y regular los
rayos luminosos que provienen de la fuente
luminosa

16. EL MICROSCOPIO OPTICO. COMPONENTES
OPTICOS: LOS OBJETIVOS
Los objetivos se fabrican para ampliar las imágenes de los
objetos observados en diversos aumentos; así se tienen
objetivos con aumentos propios de 3.5
x, 4x, 10x, 25x, 40x, 65x y 100x. Algunos objetivos tienen
alrededor de ellos una línea coloreada que indica a simple
vista el aumento propio.

17. EL MICROSCOPIO OPTICO. COMPONENTES
OPTICOS: LOS OBJETIVOS
 Se clasifican en: secos o de inmersión.
 Los secos entre el objeto observado y el objetivo
solamente existe el aire.
 Los de inmersión son aquellos que requieren se
coloque una sustancia líquida, que puede ser
agua, glicerina o un “aceite de inmersión.

18. EL MICROSCOPIO OPTICO. COMPONENTES
OPTICOS: LOS OBJETIVOS
 Otra clasificación se refiere al tipo de aberraciones que
corrigen en las lentes, como las aberraciones
cromática, de curvatura de campo, astigmatismo y de
esfericidad. De acuerdo a esto, los objetivos pueden
ser:

19. EL MICROSCOPIO OPTICO. COMPONENTES OPTICOS:
LOS OBJETIVOS
 Acromáticos. Estos objetivos corrigen los rayos luminosos azules y rojos.
 Los objetivos de los microscopios “de estudiante” son acromáticos.
 Semiapocromáticos. Se les conoce también como objetivos de “fluorita”, corrigen los
colores periféricos secundarios, dando como resultado imágenes de bordes más nítidos.
Por la alta capacidad que tienen para transmitir las radiaciones luminosas de onda
corta, se les considera como los objetivos ideales para microscopía de fluorescencia.

20. EL MICROSCOPIO OPTICO. COMPONENTES OPTICOS:
LOS OBJETIVOS
Apocromáticos. En estos objetivos se hacen coincidir en un solo
plano los rayos luminosos azules, rojos y verdes, obteniendo así
una imagen de bordes sumamente nítidos.
Pero la corrección de esta aberración trae consigo la acentuación
de otra, que es la de curvatura de campo, pues la superficie
focal de la imagen es ligeramente curva, dando como resultado
que, al observar la imagen y tratar de enfocarla en la zona central
del campo microscópico se desenfoca la zona periférica y
viceversa.

21. EL MICROSCOPIO OPTICO.
COMPONENTES OPTICOS: OBJETIVOS
Planapocromáticos. Son los objetivos en los cuales se han
corregido la mayor cantidad de aberraciones como la
cromática, curvatura de campo, de esfericidad y de
astigmatismo; por lo tanto se obtienen imágenes
sumamente nítidas y el campo microscópico aparece
totalmente plano, enfocado en toda su extensión. Son los
objetivos que generan imágenes con mejor resolución, es
preferible usarlos cuando se desea obtener imágenes
fotográficas ( fotomicrografía).

22. EL MICROSCOPIO OPTICO:
PODER DE RESOLUCION
La capacidad que tienen los objetivos de formar imágenes en donde se
distingan más detalles del objeto examinado depende de una serie de
factores como los que se mencionan a continuación:
Índice de refracción: Se denomina así a la relación existente entre la
velocidad de la luz en el aire y su velocidad en el medio transparente
utilizado.

23. EL MICROSCOPIO OPTICO.
COMPONENTES OPTICOS: OBJETIVOS
 La velocidad de la luz es de 300,000 Km/sg en el aire. Al atravesar
un medio transparente como el vidrio del cual están fabricados
las lentes de los microscopios, su velocidad se reduce a 200, 000
km./sg. Por lo tanto el vidrio tendrá un índice de refracción de
1.5; pues el índice de refracción de un objeto o una sustancia
transparente se expresa mediante la fórmula:
Velocidad de la luz en el aire
IR =
Velocidad de la luz en el medio

24. EL MICROSCOPIO OPTICO:
INDICES DE REFRACCIÓN
A continuación se muestran los índices de refracción de una serie de
sustancias transparentes que se emplean en microscopía para construir
lentes o como sustancias de inmersión:
Aire = 1.0000
Agua = 1.3300
Aceite de inmersión = 1.5150
Fluorita = 1.4340
Vidrio (crown) = 1.5200
Flint = 1.6600

25. EL MICROSCOPIO OPTICO: APERTURA
NUMERICA (NA)
 Apertura numérica (NA): Es una medida que indica la capacidad
del objetivo de poder captar los rayos refractados por las
estructuras finas de las cuales está constituido el objeto que se
observa.
 Esta capacidad se traduce en el poder del microscopio de formar
imágenes que muestren al observador una serie de detalles del objeto
que se está examinando.
 Cuanto mayor sea la apertura numérica de un objetivo, éste tendrá una
mayor capacidad de mostrar detalles finos en la imagen que forma. La
apertura numérica de un objetivo se calcula empleando la fórmula
matemática siguiente:
NA = n x sen α
Donde n representa el índice de refracción de la interfase que
separa el cubreobjeto de la muestra examinada y la lente
frontal del objetivo y α es la mitad del ángulo de apertura.

26. EL MICROSCOPIO OPTICO:
APERTURA NUMÉRICA (AN)
 La apertura numérica de un objetivo guarda una relación
directamente proporcional con el aumento propio del
objetivo y también con la capacidad que tiene de
mostrar mayores detalles. Por ejemplo en la relación
de objetivos que se muestran se puede comprobar lo
afirmado referente al aumento del microscopio:

27. EL MICROSCOPIO OPTICO:
(AN)
 Aumento del objetivo Apertura numérica
3.2x 0.07
4x 0.10
10x 0.22
10x 0.25
25x 0.45
40x 0.65
63x 0.80
100x 1.25oil

28. EL MICROSCOPIO OPTICO:
PODER DE RESOLUCIÓN
 Poder de resolución.
 Se define así la capacidad de un objetivo de poder
distinguir la distancia mínima que debe existir entre dos
puntos del objeto para que se puedan visualizar como dos
puntos separados.
 La calidad de una imagen, en la que se observe la
claridad, nitidez y la riqueza de detalles, depende del poder
de resolución del objetivo.
 El poder de resolución (PR) de un objetivo depende de la
longitud de onda ( λ) del rayo luminoso utilizado y la
apertura numérica del sistema óptico del objetivo.

29. EL MICROSCOPIO OPTICO:
PODER DE RESOLUCIÓN
 En la figura los rayos que emergen del objeto, al llegar a esta
interfase constituida por aire se refractan por lo que al llegar a la
lente frontal del objetivo se reflejan en la superficie y no son
captados por la lente.
 En la figura (b) el índice de refracción del aceite de inmersión
(1.52) es similar al del vidrio (portaobjetos, cubreobjetos y la lente
frontal del objetivo) por lo tanto los rayos luminosos periféricos
que emergen del objeto no se desvían y pueden ser aceptados por
el objetivo, incrementándose de esa manera la cantidad de rayos
luminosos que penetran al microscopio.

30. EL MICROSCOPIO OPTICO:
PODER DE RESOLUCIÓN
 Trayectoria de los haces luminosos en un objetivo de
inmersión. A la mitad del ángulo de apertura se le
denomina alfa (α ), por ejemplo si el ángulo de apertura de
un objetivo es de 50º, su valor alfa será de 25º. Este valor es
importante pues permitirá calcular un factor que tiene que
ver directamente con la capacidad del objetivo para formar
imágenes que muestren más detalles, es decir mejor
resueltas.