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Virologia
Ano Lectivo 2010/11




            Normas e Boas Práticas de
              Segurança Laboratorial
Boas Práticas Laboratoriais
    Os erros humanos e as más técnicas
         podem comprometer os melhores
         laboratórios e as melhores medidas
         de protecção do pessoal de
         laboratório.

    É essencial assegurar uma formação
         contínua in loco sobre medidas de
         segurança.




Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial           2
Boas Práticas Laboratoriais
    Para        sua segurança, procure
         conhecer os perigos oferecidos
         pelos     produtos  químicos e
         biológicos utilizados no seu
         trabalho.

    Estude bem os seus protocolos de
         cada       aula      e      realize.
         Idealmente, antes de começar um
         trabalho, deve saber exactamente o
         que precisa.




Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial           3
Postulados de Koch
        Organism present only in diseased individuals
        Organism cultivated in pure culture from diseased individual




Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
Postulados de Koch
        Organism causes disease when injected into healthy individuals
        Organism re-isolated from infected individual




Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
Postulados de River’s
 Proof of Viral Diseases:
  Isolate virus from diseased hosts.

  Cultivation of virus in host cells.

  Proof of filterability.

  Production of a comparable disease when the cultivated virus is used to infect
      experimental animals.
  Re-isolation of the same virus from the infected experimental animal.

  Detection of a specific immune response to the virus.




Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
Grupos de Risco Biológico




Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
Grupos de Risco Biológico
 Decreto-Lei nº 84/97, de 16 de Abril

        Estabelece prescrições mínimas de protecção da segurança e da saúde dos
         trabalhadores contra os riscos ligados à exposição a agentes biológicos durante o
         trabalho, prevê que a lista dos agentes biológicos classificados nos grupos 2, 3 e 4;

        Só são incluídos na lista os agentes reconhecidamente infecciosos para o ser
         humano, não tendo sido tomados em consideração os microrganismos
         geneticamente modificados.

        A classificação dos agentes biológicos baseia-se nos seus efeitos sobre os
         trabalhadores saudáveis.




Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
Grupos de Risco Biológico
 Agente biológico do grupo 1:

        agente biológico cuja probabilidade de causar doenças no ser humano baixa;




Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
Grupos de Risco Biológico
 Agente biológico do grupo 2:

        agente biológico que pode causar doenças no ser humano e constituir um perigo
         para os trabalhadores, sendo escassa a probabilidade de se propagar na
         colectividade e para o qual existem, em regra, meios eficazes de profilaxia ou
         tratamento;




Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
Grupos de Risco Biológico
 Agente biológico do grupo 3:

        agente biológico que pode causar doenças graves no ser humano e constituir um
         risco grave para os trabalhadores, sendo susceptível de se propagar na
         colectividade, mesmo que existam meios eficazes de profilaxia ou de tratamento;




Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
Grupos de Risco Biológico
 Agente biológico do grupo 4:

        agente biológico que causa doenças graves no ser humano e constitui um risco grave
         para os trabalhadores, sendo susceptível de apresentar um elevado nível de
         propagação na colectividade e para o qual não existem, em regra, meios eficazes de
         profilaxia ou de tratamento.




Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
Tipos de Laboratórios




Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial                       13
Tipos de Laboratórios
   Nível Segurança 1 (Mínima)

    Agentes microbiológicos não
         associados especificamente a
         doenças humanas;

    Riscos minimos para Pessoal e
         Ambiente;

    Não requer equipamentos de
         contenção especial ou laboratórios
         específicos;




Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial                       14
Tipos de Laboratórios
   Nível Segurança 2 (Média)

    Agentes microbiológicos associados
         a risco moderado de doenças
         humanas;

    Acesso condicionado ao laboratório;

    Utilização de Câmaras de Segurança
         Biológica;

    Requer equipamentos de contenção
         sempre que existirem risco de
         formação de aerossóis ou salpicos;




Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial                       15
Tipos de Laboratórios
   Nível Segurança 3 (Alta)

    Agentes microbiológicos associados
         a risco grave de doenças humanas
         por via aérea;

    Equipamento proteção individual
         obrigatório:
         óculos, máscara, batas, luvas;

    Sala de contenção e acesso
         condicionado ao laboratório;

    Sistema de Ventilação fechado com
         filtros HEPA;



Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial                       16
Tipos de Laboratórios
   Nível Segurança 4 (Máxima)
    Agentes microbiológicos com risco grave de doenças humanas que põe a vida em
        risco, transmitidos por via aérea ou desconhecida;
    Laboratório selado
          Pressão negativa
          Filtros HEPA
          Registo entradas/saídas;
          Sala de entrada com Vestiário (Calça e casaco, fato, sapatos, luvas)
          Sala de saída com chuveiro;
    CSB classe III
    Tomadas de emergência
    Treino especializado;



Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
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   Nível Segurança 4 (Máxima)




                                                     A CDC researcher working on a BSL-4            A CDC scientist showers in a
                                                     infectious agent.                     protective suit before leaving a BSL-4
                                                                                                                      laboratory.

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                                                            A câmara divide-se em 3 zonas:
                                                            - zona contaminada
                                                            - zona de trabalho
                                                            - zona limpa



Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial                                    22
Câmaras Segurança Biológica
 Operadores:
  Minimizar os movimentos de entrada e saída da câmara;
  Introduzir previamente todos os materiais necessários, antes de iniciar a manipulação;
  Nunca devem ser introduzidos dentro da câmara quaisquer documentos;


  Colocação do material
  Descontaminar todo o material com álcool a 70% antes de colocar na CSB;
  Descontaminar todo o material com álcool a 70% ao retirar da CSB;


  Lâmpadas ultravioleta
  Descontaminar área de trabalho na CSB antes e depois da utilização;
  15 minutos;



Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
Câmaras Segurança Biológica




Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
Protecção Individual




Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
Protecção Individual
        É obrigatório o uso de bata

        É obrigatório o uso de luvas

        O pessoal de laboratório deve evitar o
         contacto                  com         a
         boca, olhos, cara, cabelos, telemóvel




Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
Protecção Individual




Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
Utilização de Micropipetas
          O operador nunca deve ultrapassar
           o valor mínimo ou máximo de uma
           micropipeta

          Deve sempre procurar uma
           micropipeta adequada para a
           manipulação do volume adequado




Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial            28
Eliminação de Resíduos
 Resíduos do Grupo III: resíduos hospitalares de risco biológico – resíduos
 contaminados, susceptíveis de incineração ou de outro pré-tratamento
 eficaz. Devem ser sempre eliminados no contentor de cor verde



                         Resíduos do Grupo IV: resíduos hospitalares específicos – resíduos de
                         incineração obrigatória. Devem ser sempre eliminados no contentor de
                         cor amarela para incineração directa




 Resíduos líquidos (Risco Biológico/ Risco Tóxico): Devem ser eliminados num recipiente
 apropriado


Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
Virologia
Ano Lectivo 2010/11




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Virologia laboratorial segurança

  • 1. Virologia Ano Lectivo 2010/11 Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
  • 2. Boas Práticas Laboratoriais  Os erros humanos e as más técnicas podem comprometer os melhores laboratórios e as melhores medidas de protecção do pessoal de laboratório.  É essencial assegurar uma formação contínua in loco sobre medidas de segurança. Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial 2
  • 3. Boas Práticas Laboratoriais  Para sua segurança, procure conhecer os perigos oferecidos pelos produtos químicos e biológicos utilizados no seu trabalho.  Estude bem os seus protocolos de cada aula e realize. Idealmente, antes de começar um trabalho, deve saber exactamente o que precisa. Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial 3
  • 4. Postulados de Koch  Organism present only in diseased individuals  Organism cultivated in pure culture from diseased individual Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
  • 5. Postulados de Koch  Organism causes disease when injected into healthy individuals  Organism re-isolated from infected individual Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
  • 6. Postulados de River’s Proof of Viral Diseases:  Isolate virus from diseased hosts.  Cultivation of virus in host cells.  Proof of filterability.  Production of a comparable disease when the cultivated virus is used to infect experimental animals.  Re-isolation of the same virus from the infected experimental animal.  Detection of a specific immune response to the virus. Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
  • 7. Grupos de Risco Biológico Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
  • 8. Grupos de Risco Biológico Decreto-Lei nº 84/97, de 16 de Abril  Estabelece prescrições mínimas de protecção da segurança e da saúde dos trabalhadores contra os riscos ligados à exposição a agentes biológicos durante o trabalho, prevê que a lista dos agentes biológicos classificados nos grupos 2, 3 e 4;  Só são incluídos na lista os agentes reconhecidamente infecciosos para o ser humano, não tendo sido tomados em consideração os microrganismos geneticamente modificados.  A classificação dos agentes biológicos baseia-se nos seus efeitos sobre os trabalhadores saudáveis. Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
  • 9. Grupos de Risco Biológico Agente biológico do grupo 1:  agente biológico cuja probabilidade de causar doenças no ser humano baixa; Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
  • 10. Grupos de Risco Biológico Agente biológico do grupo 2:  agente biológico que pode causar doenças no ser humano e constituir um perigo para os trabalhadores, sendo escassa a probabilidade de se propagar na colectividade e para o qual existem, em regra, meios eficazes de profilaxia ou tratamento; Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
  • 11. Grupos de Risco Biológico Agente biológico do grupo 3:  agente biológico que pode causar doenças graves no ser humano e constituir um risco grave para os trabalhadores, sendo susceptível de se propagar na colectividade, mesmo que existam meios eficazes de profilaxia ou de tratamento; Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
  • 12. Grupos de Risco Biológico Agente biológico do grupo 4:  agente biológico que causa doenças graves no ser humano e constitui um risco grave para os trabalhadores, sendo susceptível de apresentar um elevado nível de propagação na colectividade e para o qual não existem, em regra, meios eficazes de profilaxia ou de tratamento. Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
  • 13. Tipos de Laboratórios Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial 13
  • 14. Tipos de Laboratórios Nível Segurança 1 (Mínima)  Agentes microbiológicos não associados especificamente a doenças humanas;  Riscos minimos para Pessoal e Ambiente;  Não requer equipamentos de contenção especial ou laboratórios específicos; Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial 14
  • 15. Tipos de Laboratórios Nível Segurança 2 (Média)  Agentes microbiológicos associados a risco moderado de doenças humanas;  Acesso condicionado ao laboratório;  Utilização de Câmaras de Segurança Biológica;  Requer equipamentos de contenção sempre que existirem risco de formação de aerossóis ou salpicos; Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial 15
  • 16. Tipos de Laboratórios Nível Segurança 3 (Alta)  Agentes microbiológicos associados a risco grave de doenças humanas por via aérea;  Equipamento proteção individual obrigatório: óculos, máscara, batas, luvas;  Sala de contenção e acesso condicionado ao laboratório;  Sistema de Ventilação fechado com filtros HEPA; Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial 16
  • 17. Tipos de Laboratórios Nível Segurança 4 (Máxima)  Agentes microbiológicos com risco grave de doenças humanas que põe a vida em risco, transmitidos por via aérea ou desconhecida;  Laboratório selado  Pressão negativa  Filtros HEPA  Registo entradas/saídas;  Sala de entrada com Vestiário (Calça e casaco, fato, sapatos, luvas)  Sala de saída com chuveiro;  CSB classe III  Tomadas de emergência  Treino especializado; Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
  • 18. Tipos de Laboratórios Nível Segurança 4 (Máxima) A CDC researcher working on a BSL-4 A CDC scientist showers in a infectious agent. protective suit before leaving a BSL-4 laboratory. Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
  • 19. Tipos de Laboratórios Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
  • 20. Câmaras Segurança Biológica Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
  • 21. Câmaras Segurança Biológica Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
  • 22. Câmaras Segurança Biológica A câmara divide-se em 3 zonas: - zona contaminada - zona de trabalho - zona limpa Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial 22
  • 23. Câmaras Segurança Biológica Operadores:  Minimizar os movimentos de entrada e saída da câmara;  Introduzir previamente todos os materiais necessários, antes de iniciar a manipulação;  Nunca devem ser introduzidos dentro da câmara quaisquer documentos; Colocação do material  Descontaminar todo o material com álcool a 70% antes de colocar na CSB;  Descontaminar todo o material com álcool a 70% ao retirar da CSB; Lâmpadas ultravioleta  Descontaminar área de trabalho na CSB antes e depois da utilização;  15 minutos; Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
  • 24. Câmaras Segurança Biológica Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
  • 25. Protecção Individual Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
  • 26. Protecção Individual  É obrigatório o uso de bata  É obrigatório o uso de luvas  O pessoal de laboratório deve evitar o contacto com a boca, olhos, cara, cabelos, telemóvel Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
  • 27. Protecção Individual Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
  • 28. Utilização de Micropipetas  O operador nunca deve ultrapassar o valor mínimo ou máximo de uma micropipeta  Deve sempre procurar uma micropipeta adequada para a manipulação do volume adequado Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial 28
  • 29. Eliminação de Resíduos Resíduos do Grupo III: resíduos hospitalares de risco biológico – resíduos contaminados, susceptíveis de incineração ou de outro pré-tratamento eficaz. Devem ser sempre eliminados no contentor de cor verde Resíduos do Grupo IV: resíduos hospitalares específicos – resíduos de incineração obrigatória. Devem ser sempre eliminados no contentor de cor amarela para incineração directa Resíduos líquidos (Risco Biológico/ Risco Tóxico): Devem ser eliminados num recipiente apropriado Aula 1 - Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial
  • 30. Virologia Ano Lectivo 2010/11 Normas e Boas Práticas de Segurança Laboratorial