1. 17. Smegenų skysčio mikroskopinis
tyrimas. Pleocitozė.
Ląsteliniai elementai randami
smegenų skystyje.
Seminarą paruošė:
Ieva Janulaitytė
LMB 1 k. 2 gr. studentė
2. Likvoro tyrimas
Svarbus CNS ligų diagnostikai ir monitoringui. Encefalitai, meningitai, navikai,
smegenų kraujagyslių ligos, demielinizuojančios ligos, neaiškios kilmės
neuropalotologinė simptomatika – traukuliai, CNS slopinimas sukelia likvoro
rodiklių pokyčius.
Jeigu kraujo vaizdas normalus arba artimas normaliam, tada įtarimą, kad
likvoras užterštas periferiniu krauju, gali sukelti tai, kad eritrocitų ir leukocitų
santykis likvore labai artimas jų santykiui periferiniame kraujyje, t.y., 1
leukocitui tenka apie 700 eritrocitų. Jeigu nėra CNS kraujavimo požymių,
vyraujanti ląstelė likvore yra leukocitas, kraujyje – eritrocitas.
3. Indikacijos smegenų skysčio tyrimui
• Uždegiminiai procesai CNS
• Autoimuniniai susirgimai (IS)
• Subarachnoidinė hemoragija
• Neoplaziniai procesai su infiltracija į CNS
• Idiopatinė epilepsija
• Traumos
Svarbu diferencijuoti ligas!
4. Smegenų skysčio ėminio paėmimas
Stuburo punkcija atliekama steriliomis sąlygomis tarp
liumbalinio 3/4 ar 4/5 slankstelių.
https://www.youtube.com/watch?v=weoY_9tOcJQ
Teisingai perdūrus visus sluoksnius smegenų skystis
ima tekėti per adatą.
Oda ir poodiniai audiniai
Supraspinalinis raištis
Interspinalinis raištis
Geltonasis raištis
Nugarinė epidurinė erdvė
Kietasis dangalas
Subarachnoidinė erdvė
5. • Jei procedūros metu buvo pažeista kraujagyslė ar kitaip sužaloti
aplinkiniai audiniai – smegenų skystis bus raudonas dėl eritrocitų.
• Matuojamas smegenų skysčio spaudimas (padidėja sergant
pūliniu smegenų dangalų uždegimu – meningitu, smegenų
vandene, esant augliui ar dėl smegenų pabrinkimo)
• Pacientas gulimoje padėtyje,
nuskausminta.
• Negalima traukti smegenų
skysčio, nes neigiamas
spaudimas gali sukelti
kraujavimą.
• Smegenų skysčio ėminio tūris
turi būti kiek įmanoma mažesnis
(paprastai užtenka 2-3 ml).
https://www.vetstream.com/images-canis/thumbs/7_4407-thumb.jpg
6. Mėgintuvėliai
Ėminiai imami į tris-keturis sterilius mėgintuvėlius:
1) Cheminei analizei ir serologiniams tyrimams (gali būti užšaldomi)
2) Mikrobiologiniams tyrimams (laikomi kambario temperatūroje)
3) Hematologinei analizei (nėra ląstelių patekusių dėl intervencijos) (g.b.
laikomi šaldytuve)
4) Papildomiems tyrimams (mikrobiologiniams / serologiniams)
Ant mėgintuvėlių užrašomas paciento vardas, pavardė, gimimo metai; paėmimo
data ir laikas, vieta iš kurios buvo paimtas ėminys, mėgintuvėlio identifikacinis
numeris pagal paėmimo eiliškumą.
Transportuojami kuo skubiau (per 1 val.) kambario temperatūroje.
7. Laboratorijoje...
Vertinamos cheminės ir fizikinės savybės. Prieš mikroskopuojant
svarbu įvertinti drumstumą.
Kuo drumstesnis smegenų skystis, tuo leukocitų skaičius
(citozė) ir baltymo kiekis jame didesni.
1) Skaidrus
2) Silpnai drumstas
3) Drumstas
Didelė citozė rodo infekciją,
uždegiminį procesą.
http://image.slidesharecdn.com/csf-140810012740-phpapp01/95/csf-48-638.jpg?cb=1407634153
8. Dažai
Samsono dažai: 30 ml ledinės acto rūgšties + 2 ml fenolio + 2 ml alkoholinio
fuksino tirpalo (1:10) ir pripildyta iki 100 ml ribos dH20
1. Smegenų skystis gerai sumaišomas sukiojant uždarytą indelį ar
mėgintuvėlį tarp delnų.
2. Pastero pipete įlašinama 10 lašų smegenų skysčio ir 1 lašas Samsono
koncentrato.
3. Mėginys homogenizuojamas sukiojant mėgintuvėlį tarp delnų.
4. Inkubuojama 10 – 15 min. kambario temperatūroje.
5. Švelniai, bet gerai sumaišoma Pastero pipete.
6. Fast-Read plokštelė užpildoma nudažytu smegenų skysčiu.
7. Palaukiama ~1 min, kol nusės kraujo forminiai elementai.
8. Laukas apžiūrimas mažuoju padidinimu (x100), mikroskopuojama
didžiuoju padidinimu (x400).
9. Identifikuojamos ir diferencijuojamos ląstelės, skaičiuojamas jų kiekis.
11. Leukocitų skaičiavimas ir jų diferencijavimas yra vienas iš
svarbiausių likvoro tyrimo metodų.
Eritrocitų skaičius pateikiamas n x 109 /l
Leukocitų skaičius pateikiamas n x 106 /l
Leukocitų skaičius mažėja augant
Bei kinta ląstelinė sudėtis
Leukocitai Amžius
0 – 30 x 106 /l 0 – 1 m.
0 – 20 x 106 /l 1 – 4 m.
0 – 10 x 106/l 5 – 18 m.
0 – 5 x 106 /l Suaugusieji
Ląstelės 1 – 30 d. amžiaus 1 mėn ir vyresni
Neutrofilai 0 – 8 % 0 – 6 %
Limfocitai 5 – 35 % 40 – 80 %
Monocitai 50 – 90 % 15 – 45 %
Apirusios ląstelės Nėra Nėra
Pakitusios ląstelės Nėra Nėra
12. Citozė (leukocitų skaičiaus padidėjimas) (1)
Nedidelė citozė randama sergant:
1) Sifiliu (progresuojančiu paralyžiumi)
2) Specifiniu meningitu
3) Arachnoiditu
4) Epilepsija
5) Navikine liga
6) Išsėtine skleroze
7) Encefalitu
Didelė citozė randama esant:
1) Ūmiam pūlingam meningitui
2) Abcesui
13. Citozė (leukocitų skaičiaus padidėjimas) (2)
Limfocitinė citozė atsiranda:
1) Virusinių uždegimų metu
2) Pooperaciniu periodu atliekant neurochirurgines operacijas
3) Lėtinių uždegimų metu (tuberkuliozinis meningitas,
cisticerkinis arachnoiditas)
Limfocitinė nedidelė citozė atsiranda, jei yra
1) gerai lokalizuotas giluminis abcesas
14. Citozė (leukocitų skaičiaus padidėjimas) (3)
Neutrofilinė (segmentinė) citozė su nepakitusiais
neutrofilais būna:
1) Sergant ūminiu bakteriniu meningitu
2) Patekus šviežio kraujo į likvorą
Neutrofilinė (segmentinė) citozė su pakitusiais
neutrofilais randama rimstant smegenų uždegiminiam
procesui.
Neutrofilinė citozė esant kombinuotai pakitusių ir
nepakitusių neutrofilų formai rodo, kad yra ūždegimo
paūmėjimas
15. Ląstelės Klinikinė reikšmė Mikroskopija Vaizdas
Limfocitai Norma
Virusinis, tuberkuliozinis,
grybelinis meningitas
Išsėtinė sklerozė
Visose vystymosi
stadijose
Neutrofilai Bakterinis meningitas
Ankstyvas virusinis,
tuberkuliozinis, grybelinis
meningitas
Smegenų hemoragija
Granulių mažiau
nei kraujo
neutrofiluose,
greičiau yra
Monocitai Norma
Virusinis, tuberkuliozinis,
grybelinis meningitas
Išsėtinė sklerozė
Randama su
limfocitais
16. Ląstelės Klinikinė reikšmė Mikroskopija Vaizdas
Makrofagai Eritrocitai smegenų skystyje
Kontrastinė medžiaga
Fagocitavę
eritrocitai, tuščiomis
vakuolėmis, šešėliai,
hemosiderino
granulės, kristalai
Blastai Ūmi leukemija Limfoblastai,
mieloblastai,
monoblastai
Plazminės
ląstelės
Išsėtinė sklerozė
Limfocitinė reakcija
Tipiškos ląstelės
http://home.kku.ac.th/acamed/kanchana/p67.jpg
17. Ląstelės Klinikinė reikšmė Mikroskopija Vaizdas
Ependiminės,
chorioidinės,
verpstės
formos
ląstelės
Diagnostinės procedūros Ląstelės išsidėstę
grupėmis su ryškiais
branduoliais ir
citoplazma
Piktybinės
ląstelės
Metastatinės karcinomos
Pirminė CNS karcinoma
Ląstelės išsidėstę
grupėmis su
neryškiais
branduoliais ir
citoplazma
Eozinofilai Subarachoidinės
kraujosrūvos
Tuberkuliozė
Toksinis meningitas
Virusinė infekcija
x
http://synapse.koreamed.org/ArticleImage/0191KMJ/kmj-27-79-g002-l.jpg
20. Kitos ląstelės
Diagnozuojant meningitą, daromas pasėlis ir vėliau atliekamas dažymas Gramo būdu
turi prioritetą prieš kitus tyrimo metodus. Po to mikroskopuojamos likvoro ląstelės
(leukocitai, eritrocitai, bakterijos).
21. Meningitas (1)
Tai infekcinis nervų sistemos susirgimas, labiausiai pažeidžiantis minkštuosius
smegenų dangalus ir sąlygojantis jų uždegimą bei smegenų skysčio infekcinius
ir uždegiminius pakitimus. Gali sukelti įvairios etiologijos sukėlėjai - bakterijos
bei virusai.
22. Meningitas (2)
Meningitą sukelia:
• bakterijos (bakterinis meningitas): dažniausiai gali sukelti meningokokas, pneumokokas
(Streptococcus pneumoniae), Haemophilus influenzae, tuberkuliozės mikobakterijos, rečiau – kitos
bakterijos.
• virusai (virusinis meningitas): pūslelinės (Herpes), tymų, epideminio parotito ("kiaulytės"), enterovirusai
(Echo, Koksackie) ir kt.;
• grybeliai;
• riketsijos ir kiti reti infekciniai veiksniai.
Simptomai:
Galvos skausmas
Pykinimas
Bėrimas
Dirglumas
Karščiavimas
Vėmimas
Mieguistumas
Traukuliai
Bendras negalavimas
Kaklo raumenų įtempimas
Tyrimai
Klinikiniai požymiai ir simptomai;
Kraujo tyrime matomas ↑WBC, CRB;
Smegenų skysčio tyrimas -> nustatomas padidėjęs
smegenų skysčio slėgis, o ištyrus laboratorijoje –
ląstelių skaičiaus padidėjimas, esant nedaug
padidėjusiam ar normaliam baltymo kiekiui.
Lemiamą reikšmę meningito diagnozei ir specifinio
gydymo parinkimui turi smegenų skystyje nustatyta
vyraujanti uždegiminių ląstelių rūšis, taip pat
gliukozės kiekis, bakteriologiniai ir imunologiniai
tyrimai.
