biok

1. Curso:
BIOLOGIA CELULAR
Y MOLECULAR
Docente :
Msc. Halder Santiago Isla Peche
Pimentel – Perú
AÑO 2023
PRACTICA N° 01

2.  PRÁCTICA No 1: BIOSEGURIDAD
 PRÀCTICA No 2 :RECONOCIMIENTO DE MATERIALES Y EQUIPOS DE
LABORATORIO
 PRÁCTICA No 3: VALORACIÓN PHMÉTRICA
 PRÁCTICA No 4: DENTIFICACIÓN CUALITATIVA DE BIOMOLÉCULAS:
CARBOHIDRATOS
 PRÁCTICA No 5: IDENTIFICACIÓN CUALITATIVA DE BIOMOLÉCULAS:
LÍPIDOS
 PRÁCTICA No 6: IDENTIFICACIÓN CUALITATIVA DE BIOMOLÉCULAS:
PROTEÍNAS
 PRÁCTICA No 7: ACTIVIDAD ENZIMÁTICA 1.
 PRÁCTICA No 8: MICROSCOPÍA ÓPTICA: CONSTRUCCIÓN, MANEJO Y
FORMACIÓN DE IMÁGENES
 PRÁCTICA No 9: TECNICAS DE COLORACIÓN: OBSERVACIÓN DE
CÉLULAS PROCARIOTAS Y EUCARIOTAS
 PRÁCTICA No 10: TRANSPORTE A TRAVÉS DE MEMBRANA:
FRAGILIDAD OSMÓTICA
 PRÁCTICA No 11: REPRODUCCIÓN CELULAR: MITOSIS EN CÉLULAS
VEGETALES
 PRÁCTICA No 12: CONSTRUCCIÓN DEL CARIOTIPO HUMANO

3. NORMAS, RECOMENDACIONES Y
PRECAUCIONES
I.- NORMAS PERSONALES
 Seguir las instrucciones y recomendaciones dadas por el docente para
cada sesión práctica
 Ingresar al laboratorio ala hora señalada, y dentro del tiempo de
tolerancia.
 Ingresar con el guardapolvo puesto y con el material de trabajo
previamente solicitado.
 Si se tiene el cabello largo, es conveniente llevarlo recogido
 Durante su permanencia en el laboratorio aproveche y use
adecuadamente el tiempo, materiales de trabajo, agua, corriente
eléctrica, gas, mobiliario y espacio.
 No arroje desechos a los lavaderos ni al piso, colocarlos en los tachos
correspondientes para que sean descartados una vez finalizada la
práctica.

4. NORMAS, RECOMENDACIONES Y
PRECAUCIONES
 Está estrictamente prohibido comer, beber y fumar dentro del
laboratorio.
 Sobre la mesa de trabajo debe de tener solamente el material
solicitado y libreta de apuntes.
 Coloque las carteras, mochilas, libros y otros en los casilleros.
 Durante el desarrollo de la práctica observe y grafique con detalle
los diversos experimentos, protocolos o vistas microscópicas;
intercambie conceptos, ideas y puntos de vista con sus
compañeros y profesor.
 Al término de la práctica el estudiante debe limpiar su mesa de
trabajo, lavar el material de vidrio utilizado, lavarse
cuidadosamente las manos, despojarse del guardapolvo y
retirarse ordenadamente.

5. II. NORMAS DE UTILIZACIÓN DE
PRODUCTOS QUÍMICOS
 Antes de utilizar un compuesto químico, asegurarse de que es el
que se necesita.
 No devolver a los frascos de origen los sobrantes de los productos
químicos o medios de cultivo. Si existiese , desecharlo.
 No tocar con las manos y menos con la boca, los productos
químicos, para medición o transvase de líquidos utilizar peras de
succión o pipeteadores manuales.
 Los ácidos requieren un cuidado especial, cuando haya que
diluirlos, nunca echar agua sobre ellos; por el contrario, se debe
agregar el ácido sobre agua.
 Los productos inflamables (gases, alcohol, éter, etc.) no deben
estar cerca de fuentes de calor. Si hay que calentar tubos con
estos productos, se hará al baño maría, nunca directamente a la
llama

6.  Si se vierte sobre la piel cualquier ácido o producto corrosivo,
lavarse inmediatamente con abundante agua y avisar al encargado
del laboratorio.
 Si se preparan soluciones químicas, éstas deben colocarse en un
frasco limpio y seco y rotulado convenientemente.
III.- NORMAS DE UTILIZACIÓN DEL MATERIAL DE VIDRIO
 Tener cuidado con los bordes y puntas cortantes de los tubos u
objetos de vidrio.
 El vidrio caliente no se diferencia a simple vista del vidrio frio. Para
evitar quemaduras, dejarlo enfriar antes de tocarlo.
 Las pipetas usadas deben colocarse en recipientes que contienen
una solución desinfectante (mezcla sulfocrómica o bicloruro de
mercurio). De la misma manera se procede para tubos de ensayo,
láminas cubreobjetos y laminillas.

7. III.- NORMAS DE UTILIZACIÓN DEL MATERIAL DE VIDRIO
Si se tiene que calentar a la llama el contenido de un tubo
de ensayo, debe considerarse lo siguiente:
 La boca del tubo de ensayo no debe apuntar a ningún
compañero de trabajo ni así mismo. Puede hervir el
líquido y salir disparado, ocasionando un accidente.
 El tubo de ensayo debe calentarse por la parte lateral,
nunca por el fondo, agitando suavemente.
 Todos los que trabajan en el laboratorio, deben saber
dónde está el botiquín, las botellas de agua para
irrigación de los ojos, y los extintores de incendio

9. Símbolo de bioseguridad

11. BIOSEGURIDAD
Conjunto de medidas preventivas reconocidas
internacionalmente orientadas a proteger la salud y la
seguridad del personal y su entorno.
Complementariamente se incluyen normas contra
riesgos producidos por agentes biológicos, físicos,
químicos y mecánicos.

13. Desde cuándo se incrementaron las
medidas de bioseguridad?

14. Las medidas de control administrativas son de bajo
costo y las más importantes, dado que las otras dos
medidas por si solas no tienen impacto.

15. Es responsabilidad de los Directores y jefes de
Establecimientos de Salud garantizar las
adecuadas condiciones de Bioseguridad en sus
laboratorios.
BIOSEGURIDAD

16. 16
Seguridad
de la vida o asegurarse
la vida
INDIVIDUO COMUNIDAD
MEDIO
AMBIENTE
Es el conjunto de normas
diseñadas para la PROTECCION del:
Del contacto accidental con agentes potencialmente nocivos

17. Bioseguridad en Laboratorio
Conceptos generales
•constituyen medio ambientes de trabajo especiales.
•Presentan riesgos de enfermedades infecciosas.

18. Términos y definiciones
Bioseguridad (biosafety)
Describe los principios de contención, las
tecnologías y las prácticas que se aplican
para prevenir la exposición no intencional
a los agentes biológicos y las toxinas, o
su exposición accidental.
Agente biológico (biological
agent)
Cualquier microorganismo incluyendo
OVM, cultivos celulares y endoparásitos,
que pueden poder provocar cualquier
infección, alergia o toxicidad en seres
humanos, animales o plantas.

19. Términos y definiciones
Bioprotección (biosecurity)
Describe las acciones de protección, control
y responsabilidad para el manejo de los
agentes biológicos y las toxinas dentro de los
laboratorios, para prevenir su pérdida, hurto,
uso erróneo, el acceso desautorizado o la
exposición intencional no autorizada.
Biocontención
(biocontainment)
Sistemas de ingeniería para la
contención de microorganismos u
organismos dentro de un espacio
definido.

20. Términos y definiciones
Biopeligro (biohazard)
Fuente potencial de daño causada
por los agentes biológicos o las
toxinas.
Bioriesgo (biorisk)
Probabilidad de la ocurrencia
del daño y la severidad de ese
daño en donde el origen del
daño es un agente biológico o
una toxina

21. Bioseguridad
Prácticas Microbiológicas
Estándar

22. Principios de la Bioseguridad
Tiene tres pilares que sustentan y dan origen a las
Precauciones Universales.
Universalidad
Barreras
de protección
Medidas de
eliminación

23. PRINCIPIOS DE
BIOSEGURIDAD
UNIVERSALIDAD
Aplicadas para TODAS las
personas, independientemente
de presentar o no patologías.
Todo el personal debe seguir las
precauciones estándares para
prevenir la exposición de la piel y
de las membranas mucosas, en
todas las situaciones que puedan
dar origen a accidentes, estando
o no previsto el contacto
cualquier fluido

24. Sangre
y / o semen
leche materna
Cualquier otro líquido contaminado con sangre
secreción vaginal
Líquidos considerados
potencialmente
infectantes

25. Líquidos considerados
potencialmente
infectantes
líquido
cefalorraquídeo
líquido
amniótico
líquido
sinovial
Cualquier otro líquido contaminado con sangre

26. USO DE BARRERAS
Comprende el
concepto de evitar la
exposición directa a
sangre y otros fluidos
orgánicos
potencialmente
contaminantes,
mediante la
utilización de
materiales adecuados
que se interpongan al
contacto de los
mismos.

28. • Examen médico antes de inicio de
labores y una vez al año.
• Personal del laboratorio debe
someterse a un examen de Rayos X
una vez al año
• Personal nuevo para realizar
actividades y compartir el área física
debe ser tuberculino +
• No tránsito de personas extrañas, en
zonas de procesamiento de muestras.
 Inmunización
 Tétanos y difteria.
 PPD.
 Hepatitis viral B.
 Antirrábica.
 Fiebre amarilla.

29. •Ventilación e iluminación adecuados.
• Servicios básicos: Agua, luz, gas.
• Cámaras de bioseguridad, lámparas
ultravioleta, equipos de protección al
personal
•Las paredes y pisos deben ser lisos
facilita limpieza .
•Al desagüe solo debe eliminarse agentes
biológicos o químicos previamente
descontaminados, neutralizados o
inactivados con fenol al 5% durante 30
minutos
 Determinación de áreas
contaminadas
 Mesas de trabajo material que
permita , adecuada limpieza
 asignación de materiales a
áreas contaminadas
 Los pisos limpios todos los
días con soluciones
desinfectantes, al final de la
jornada de trabajo.

30. Mandiles limpios de mangas
largas.
No circular con mandil en
áreas limpias.
Zonas restringidas uso de
mandilones y equipos
especiales.
 Cabello recogido o
corto.
 No uso de joyas y
adornos.
 Zapatos deben cubrir
completamente los
pies

31. RIESGO BIOLOGICO
Las puertas de todos los laboratorios deben
Estar obligatoriamente colocada la señal de
Riesgo biológico.

32. Usar mascarillas y guantes.
Nunca tomar muestras usando sólo
aguja. Eliminación de agujas
correcta.
 No comer, beber, fumar, guardar
alimentos, ni aplicarse
cosméticos.
 Las manos deben lavarse con
abundante agua y jabón cada
vez que se interrumpa el trabajo
Toallas descartables.
Toda muestra debe ser manejada como altamente contagiosa.

35. REGLAS BÁSICAS DE BIOSEGURIDAD
EN EL LABORATORIO CLÍNICO

38. Actúan como barrera para
reducir al mínimo el riesgo
de exposición a aerosoles,
salpicaduras e inoculación
accidental.
Las prendas de vestir y el
equipo que se seleccionen
dependen de la naturaleza
del trabajo que se realice.

39. Los equipos de protección individual pueden clasificarse, considerando la
parte del cuerpo que protejan, en los siguientes grupos:
Protección de la piel
(manos)

40. Mandiles

41. Los aerosoles son coloides de partículas liquidas o
sólidas suspendidas en un gas.
Por lo general todas las actividades de laboratorio
originan aerosoles.
Se sabe que los aerosoles propagan agentes infecciosos
a través del laboratorio y algunas veces en todo el
establecimiento.
Es necesario controlar los aerosoles.

42. Aire del ambiente
Aire contaminado
Aire filtrado (HEPA)
Positive pressure
contaminated air
Los pisos deben limpiarse todos los días
con Soluciones desinfectantes (cresol)
No se debe barrer el piso en seco, ni
encerarlo.

43. Una CBS es básicamente una caja hermética que
contiene filtros HEPA y un sistema motor / compresor
para proporcionar un movimiento de aire controlado a
través de la caja y los filtros.

44. Protección personal.
Protección del producto.
Protección del medio ambiente.

45. Cabinas de Bioseguridad
Esquema del Flujo de Aire

46. Nunca pipetear muestras.
Identificación clara de material
contaminado.

47. TIPOS DE AGENTES DE RIESGO
• Agentes biológicos.
Agentes físicos y mecánicos.
Agentes químicos.
Advertencia sobre Riesgo Biológico.
Advertencia sobre Productos Radioactivos.
Advertencia sobre Productos Inflamables.

48. Determinar cuáles son los procedimientos del
laboratorio que involucran el manejo de material
infeccioso o potencialmente infeccioso.
CONOCER ESTOS AGENTES NOS PERMITEN:
Ayudan a asignar el nivel de Bioseguridad.
 El conocimiento sobre los agentes de riesgo nos
permite reducir la probabilidad de exposición al
ambiente de éstos agentes.

49. NIVELES DE CONTENCIÓN Y
DE RIESGO

50. Agentes Biológicos
• Niveles de
Riesgo
II
Moderado
III
Elevado
IV
Alto
I
Leve
Escaso
riesgo para
el individuo
y para la
comunidad.
Riesgo
individual
moderado, pero
limitado para la
comunidad.
Riesgo
individual
elevado, pero
limitado para
la comunidad.
Alto
riesgo para
el individuo
y para la
comunidad.

51.  Bacillus subtilis.
 Plasmodium.
Naegleria gruberi
 Escherichia coli (no enteropatogénica)
 Protozoarios y helmintos intestinales
 y otros.
 Escherichia coli (enteropatógenas).
 Pseudomonas aeruginosa.
 Listeria monocytogenes.
 Vibrio cholerae.
 Neisseria gonorroheae.
 Haemophylus influenzae.
 Candida albicans.
I
Leve
II
Moderado

52.  Mycobacterium tuberculosis.
 Trypanosoma cruzi.
 Yersinia pestis.
 Otros microorganismos que provocan
enfermedades graves en el hombre,
pero que de ordinario no se propague
una persona a otra.
 Virus de las fiebres hemorrágicas de
Marburg.
 Ébola.
 Otros.
III
Elevado
IV
Alto

54. Confiable para trabajar con
agentes que no causan
enfermedad en el humano y
de mínimo riesgo potencial
para el personal del
laboratorio y la comunidad.
I
NIVEL
Prácticas estándares:
Lavado de manos.
Uso de mandil, guantes.
Uso de recipientes para descarte.
Prácticas especiales:
NINGUNA
Bacillus subtilis
Plasmodium
Naegleria gruberi
Escherichia coli
Protozoarios y helmintos
intestinales
Clasificación de niveles

55. Confiable para el trabajo
con agentes de moderado
peligro potencial para el
personal y la comunidad.
II
NIVEL
Prácticas estándares:
NBS - 1.
Inmunización/tratamiento antibiótico.
Acceso limitado o restringido.
Prohibir comer, beber y fumar.
Manual de Bioseguridad.
 Virus Sarampión, VIH
 Salmonella spp., VHB
 Toxoplasma spp.
 Candida spp.

56. Trabajo con agentes
infecciosos que causen
enfermedades serias o
potencialmente letales como
resultado de la exposición,
principalmente por vía
inhalatoria.
III
NIVEL
.
• Mycobacterium tuberculosis.
• Trypanosoma cruzi.
• Yersinia pestis.
• Otros microorganismos que
provocan enfermedades graves.
Prácticas especiales:
Como en NBS - 2, más:
Descontaminar
rápidamente los
derrames.
III
NIVEL

57. Trabajo con agentes
peligrosos y exóticos, con
alto riesgo individual de
infecciones transmitidas
por aerosoles.
IV
NIVEL
.
• Virus de las fiebres
hemorrágicas de Marburg.
• Ébola.
• Otros.
Prácticas Estandar:
Idem niveles anteriores
Prácticas especiales:
- Máxima contención.
- Sistemas de apoyo exclusivo.
- Barreras de contención para
proteger al personal y a la
comunidad.

58. El elemento mas importante de la contención es el
cumplimiento estricto de las practicas y técnicas
microbiológicas estándar de procesamiento de las
muestras de laboratorio.

59. CONTENCIÓN PRIMARIA: Es la protección del personal y
del medio ambiente haciendo uso de las buenas practicas
microbiológicas (Vestimenta, guantes, mascarillas, etc. )
CONTENCIÓN SECUNDARIA: Es la combinación entre las
características de las edificaciones y practicas operacionales. Las
magnitudes dependerá del tipo de agentes infecciosos que se
manipule en el laboratorio.

60. • CONTENCION PRIMARIA:

62. • CONTENCION PRIMARIA:

64. MANEJO DE DESECHOS
DE LABORATORIO

65. •Reducir el volumen
• Hacer que el aspecto sea menos desagradable
Consiste en la desinfección o inactivación
de los desechos infecciosos
A fin de:
Disminuir el riesgo de exposición a
gérmenes patógenos
Adicionalmente:

66. Inactivación de
los desechos
Infecciosos
Incineración a
altas
temperaturas
TRATAMIENTO DE DESECHOS INFECCIOSOS
Autoclave
Microondas
Calor Seco
Radiación
Desinfección
Química

67. Transporte y eliminación
Residuos Bolsas
Biocontaminados
Químicos
Comunes
Rojo
Amarillo
Negro
Las envolturas consisten en bolsas de polietileno con
capacidad del 20% superior al volumen del recipiente.

68. Buenas Prácticas Microbiológicas

69. No consumir alimentos en el laboratorio, usar guantes,
Mandiles, mascarillas N95, etc.

70. Reducción del tránsito en área de trabajo.

71. Lavarse las manos continuamente.
Alejar las manos de la cara y cabello.
Uso de EPP.

72. LAVADO DE MANOS
• DURACIÓN:
– 15 A 20 SEGUNDOS.
– LAVAR TODAS LAS ÁREAS DE LA MANO.
• EL SECADO DE MANOS DEBE SER RÁPIDO.

73. Uso de cabinas de seguridad, LUV u otro equipo o
accesorio.

74. Puertas de los laboratorios el signo universal de
Bioseguridad.
Desinfectar el área de trabajo antes y después de
cada procedimiento.

75. Bioseguridad
Prácticas Microbiológicas Estándar
Precauciones con agujas y objetos cortantes
 No toque los vidrios rotos con las manos.

77. Bioseguridad
Prácticas Microbiológicas Estándar
Precauciones con agujas y objetos cortantes:
Utilice recipientes para elementos cortantes.
No rompa ni reutilice jeringas y agujas.

78. Bioseguridad
Prácticas Microbiológicas Estándar

79. SEÑALES DE SEGURIDAD
(PICTOGRAMAS)
 DE PROHIBICIÓN: Redondas, con pictograma de
color negro sobre fondo blanco, con bordes y banda
transversal de izquierda a derecha

80. SEÑALES DE SEGURIDAD
(PICTOGRAMAS)
DE ADVERTENCIA: Triangulares, con pictogramas
de color negro y fondo amarillo o naranja.

81. SEÑALES DE SEGURIDAD
(PICTOGRAMAS)
DE SEGURIDAD: Rectangulares o cuadrangulares, con
pictogramas de color blanco y fondo verde

82. SEÑALES DE SEGURIDAD
(PICTOGRAMAS)
DE OBLIGATORIEDAD: Circulares y con pictogramas
de color blanco con fondo azul.

83. G1

84. G1

85. F-1

87. F-2

89. F-3

91. G-2

93. G-3