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XICACAU E CHOCOLATE
Cacau
s principais componentes do cacau são: açúcares, amido, lipídios (manteiga
de cacau), protídios, teobromina, cafeína, taninos, corantes naturais (anto-
cianinas) e substâncias inorgânicas (sais de potássio e fósforo). As principais
determinações a serem realizadas no cacau são: umidade (012/IV), cinzas
(018/IV), glicidios redutores em glicose (038/IV), glicídios não-redutores em sacarose
(039/IV), lipídios (032/IV), protídios (036/IV) ou (037/IV), fibra alimentar (045/IV e
046/IV) e teobromina (101/IV).
Chocolate e produtos à base de chocolate
Chocolates são produtos à base de cacau contendo açúcar, aromatizantes, estabi-
lizantes e conservadores. As determinações mais usuais são: umidade (012/IV), cinzas
(018/IV), glicídios redutores em glicose (038/IV), glicídios não-redutores em sacarose
(039/IV), fibra alimentar (045/IV e 046/IV), lipídios (032/IV) e protídios (036/IV
ou 037/IV), além da análise cromatográfica em fase gasosa dos lipídios extraídos, para
a pesquisa de gorduras estranhas à manteiga de cacau. Nesta classe de produtos estão
incluídos os bombons, pós ou misturas achocolatadas e doces variados, cujo principal
componente é o cacau. As determinações mais usuais incluem aquelas relacionadas
para os chocolates, além da pesquisa de corantes artificiais (051/IV) que podem estar
presentes.
263/IV Determinação de lipídios com hidrólise prévia
Este método refere-se à determinação dos lipídios em produtos à base de cho-
colate com alto teor de sacarose, tais como: chocolate em pó, mistura achocolatada e
bombons. O princípio do método baseia-se na hidrólise prévia da amostra, extração e
Capítulo XI - Cacau e Chocolate
O
4. Métodos Físico-Químicos para Análise de Alimentos - 4ª Edição
1ª Edição Digital
484 - IAL
quantificação do resíduo obtido após a remoção do solvente.
Material
Chapa elétrica, balança analítica, estufa, dessecador, frasco Erlenmeyer de 250 mL
com boca esmerilhada 24/40, balão de fundo chato de 250 mL com boca esmerilhada
24/40, vidro de relógio, funil, pérolas de vidro ou cacos de porcelana, bastão de vidro,
extrator Soxhlet, condensador de refluxo longo com extremidade inferior 24/40,
condensador de refluxo de bolas adaptável ao Soxhlet, cartucho de extração, papel de
filtro e algodão.
Reagentes
Solução de ácido clorídrico 3 M
Éter de petróleo
Areia diatomácia
Procedimento – Pese 10 g de amostra previamente homogeneizada. Transfira para
um frasco Erlenmeyer de 250 mL com boca esmerilhada 24/40. Adicione 100 mL
da solução de ácido clorídrico 3 M e algumas pérolas de vidro ou cacos de porcelana.
Leve a refluxo por cerca de uma hora sob aquecimento. Resfrie e adicione (1-2) g de
areia diatomácia (auxiliar de filtração). Filtre em papel de filtro duplo, previamente
umedecido. Lave o resíduo com água fria até a obtenção de um filtrado neutro. Observe
se o filtrado não apresenta vestígios de óleos ou gorduras. Coloque o papel de filtro
duplo contendo o resíduo sobre o vidro de relógio e leve à estufa a 50ºC por uma hora.
Transfira para um cartucho de extração, cobrindo-o com um chumaço de algodão.
Tare um balão de fundo chato de 250 mL e acople ao extrator. Coloque o cartucho
no extrator de Soxhlet, adicione éter de petróleo e mantenha sob extração contínua
e aquecimento por seis horas. Retire o cartucho e remova o solvente por destilação.
Seque o resíduo e mantenha o balão com o extrato em estufa a 105ºC por cerca de
duas horas. Esfrie em dessecador e pese. Repita as operações de secagem e pesagem até
peso constante.
Cálculo
N = nº de g de lipídios extraídos
P = nº de g da amostra
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Referência bibliográfica
U.K. FEEDING STUFFS (SAMPLING AND ANALYSIS) REGULATIONS. The
determination of oil in feeding stuffs nº 1119. 1982, appendix I. p. 9-11.
264/IV Pesquisa de gorduras estranhas em chocolate
A composição dos lipídios do chocolate pode indicar a adição de gorduras estra-
nhas à manteiga de cacau. A alteração na composição de ácidos graxos ou a presença de
determinados ácidos graxos, ausentes na manteiga de cacau, pode evidenciar uma adul-
teração. Por exemplo, a presença de ácidos graxos trans pode indicar adição de gordura
vegetal parcialmente hidrogenada ao chocolate. Por este método, parte dos lipídios da
amostra extraídos pelo método de Soxhlet são transformados em ésteres metílicos de
ácidos graxos, preparados conforme os métodos 054/IV, 055/IV ou 056/IV, separados
e quantificados por cromatografia em fase gasosa.
Material
Seringa de capacidade máxima de 10 μL, graduada em 0,1 μL, balões volumétricos de
25 e 100 mL, flaconete (vial) de 1,5 mL, balança analítica, agitador do tipo vortex,
cromatógrafo a gás com detector de ionização de chama, integrador ou computador,
sistemadeinjeçãodotipo split,colunacapilardesílicafundidacomfasesestacionáriasdeciano
propil siloxana ou equivalente (por ex: SP2340 com 60 m de comprimento, diâmetro interno
de 0,25 mm e espessura do filme de 0,25 μm, CP-Sil 88 com (50-100) m de comprimento,
diâmetro interno de 0,25 mm e espessura do filme de 0,20 μm).
Reagentes
Mistura de padrões de ésteres metílicos de ácidos graxos variando de C4 a C24 – Dilua, com
n-hexano, o conteúdo da ampola contendo 100 mg da mistura de padrões, em balão
volumétrico de 25 mL. Distribua em vials de 1,5 mL e armazene em freezer. Esta solu-
ção será utilizada para identificar os ésteres metílicos de ácidos graxos. Determine os fa-
tores de correção da resposta de cada componente no detector de ionização de chama.
n-Hexano, grau CLAE
Gás de arraste para DIC: hidrogênio (pureza 99,999%)
Gases auxiliares para DIC: nitrogênio (pureza 99,999%) e ar seco (livre de
hidrocarbonetos).
Capítulo XI - Cacau e Chocolate
6. Métodos Físico-Químicos para Análise de Alimentos - 4ª Edição
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Procedimento – Extraia os lipídios da amostra de chocolate. Prepare os ésteres me-
tílicos de acordo com um dos métodos 054/IV, 055/IV ou 056/IV. Estabeleça as
seguintes condições cromatográficas: gás de arraste hidrogênio, velocidade linear entre
(15 - 25) mL/min; programação da temperatura da coluna 60ºC (2 minutos), 1ª rampa
de 15ºC/min até 135ºC (1 minuto), 2ª rampa de 3ºC/min até 215ºC (5 minutos);
temperatura do injetor 220ºC; temperatura do detector 220ºC, razão de divisão da
amostra 1:50. Analise uma mistura de padrões de referência de ésteres metílicos de
ácidos graxos de composição conhecida nas mesmas condições empregadas na análise
da amostra e determine o tempo de retenção (ou distância de retenção) para cada éster
metílico. Faça a identificação por comparação dos tempos de retenção da amostra e dos
padrões.
Cálculo
Calcule a porcentagem de área de cada componente, em relação à soma das áreas
de todos os picos. O resultado será expresso como porcentagem de ésteres metílicos
(método de normalização de área ou normalização de área corrigida 343/IV). Verifique
se há gorduras estranhas no chocolate comparando o perfil cromatográfico de ácidos
graxos com o da manteiga de cacau.
AAgi
=área do pico correspondente ao componente
∑A = soma das áreas de todos os picos
Referências bibliográficas
AMERICAN OIL CHEMISTS´ SOCIETY. Official methods and recommended
practices of the American Oil Chemists´ Society. 4th
ed. Champaign, USA, A.O.C.S.,
1995 (A.O.C.S. Official Method Ce 2-66: Preparation of methyl esters of long chain
fatty acids).
AMERICAN OIL CHEMISTS´ SOCIETY. Official methods and recommended
practices of the American Oil Chemists´ Society. 4th
ed. Champaign, USA,
A.O.C.S., 1995 (A.O.C.S. Official Method Ce 1-62: Fatty acid composition by gas
chromatography).
AMERICAN OIL CHEMISTS´ SOCIETY. Official methods and recommended
practices of the American Oil Chemists´ Society. 4th
ed. Champaign, USA, A.O.C.S.,
7. IAL - 487
1995 (A.O.C.S. Official Method Ce 1d-91: Determination of fatty acids in edible oils
and fats by capillary GLC).
AMERICAN OIL CHEMISTS’ SOCIETY. Official methods and recommended
practices of the American Oil Chemists’ Society. 4th
ed. Champaign, USA, A.O.C.S.,
1997 (A.O.C.S. Official Method Ce 1f-96 Determination of cis and trans fatty acids in
hydrogenated and refined oils and fats by capillary GLC).
INSTITUTO ADOLFO LUTZ Normas Analíticas do Instituto Adolfo Lutz. v1:
Métodos Químicos e Físicos para Análise de Alimentos. São Paulo: IMESP, 3. ed., 1985.
p. 177-178.
Capítulo XI - Cacau e Chocolate
Colaboradores
Deise Aparecida Pinatti Marsiglia, Maria Lima Garbelotti, Cláudio de Flora e Sabria Aued
Pimentel
