RE-10-LAB-038 ANALISIS CLINICO I v4.pdf

GUIAS DE PRÁCTICA BIOQUIMICA Y FARMACIA
Código de registro: RE-10-LAB-038 Versión 4.0
UNIVERSIDAD DEL VALE
LABORATORIO DE ANALISIS CLINICO I
Práctica No. 1
NORMA DE SEGURIDAD Y MANEJO DE MUESTRAS BIOLOGICAS, MATERIAL EN EL
LABORATORIO DE ANALISIS CLINICO
1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO. -
NORMAS DE BIOSEGURIDAD
• Mantener el lugar de trabajo en condiciones de higiene y seguridad
• Evitar maquillarse, fumar, comer o beber alimentos en el sitio de trabajo.
• No guardar alimentos en los equipos de refrigeración de sustancias contaminantes o
químicos.
• Manejar a todo paciente como potencialmente infectado.
• Lavarse cuidadosamente las manos antes y después de cada procedimiento.
• Utilizar en forma sistemática guantes plásticos o de látex en procedimientos que
conlleven manipulación de sustancias biológicas y/o cuando maneje instrumental o equipo
contaminado en la atención de los pacientes.
• Abstenerse de tocar con las manos enguantadas alguna parte del cuerpo y de
manipular objetos diferentes a los requeridos durante el procedimiento.
• Emplear mascarilla y protectores oculares durante procedimientos que puedan generar
salpicaduras, gotitas aerosoles de sangre u otros líquidos corporales.
• Usar bata durante la estancia en el laboratorio.
• Mantener sus elementos de protección personal en óptimas condiciones de aseo en un
lugar seguro y de fácil acceso.
• Si usted presenta lesiones exudativas o dermatitis serosas, evitará la atención directa
de pacientes hasta que estas hayan desaparecido.
• Utilizar las técnicas correctas en la realización de todo procedimiento.
• Manejar con estricta precaución los elementos punzocortantes y desechar en los
recipientes indicados a prueba de perforaciones.
• Evitar cambiar elementos punzocortantes de un recipiente a otro.
• Evitar reutilizar el material contaminado, como agujas, jeringas, u hojas de bisturí.
• Realizar desinfección y limpieza a las superficies y equipos de trabajo en caso de
contaminación.
• En caso de rotura del material de vidrio contaminado con sangre u otro líquido corporal,
los trozos de vidrio deberán recogerse con escoba y recogedor, nunca con las manos, y se
depositarán en el contenedor para punzocortantes.
• Los recipientes para transporte de muestras deben ser de material irrompible y cierre
hermético (tapón de rosca).
• Manipular, transportar y enviar las muestras disponiéndolas en recipientes seguros con
tapa y debidamente rotuladas.
• Las gradillas a su vez se transportan en recipientes herméticos, de plástico o acrílico
que retengan fugas o derrames accidentales. Además, deberán ser fácilmente lavables.
• Restringir el ingreso a las áreas de alto riesgo biológico al personal no autorizado, a
quien no utilice los elementos de protección personal y a los niños.

• Disponer el material patógeno en bolsas resistentes de color rojo que se identifiquen
con el símbolo de riesgo biológico.
• Las personas sometidas a tratamiento con inmunosupresores no deberán trabajar en
áreas de riesgo biológico.
MEDIDAS GENERALES DE PROTECCION:
• Lavarse las manos con frecuencia y al quitarse los guantes.
• Usar guantes cuando se manejen líquidos biológicos
• Establecer y respetar áreas sucias y áreas limpias
• No tocar con guantes las áreas no contaminadas.
• No aspirar con la boca sustancias corrosivas a través de la pipeta.
• No maquillarse en el laboratorio.
• No consumir alimentos en las áreas de trabajo.
• No masticar chicle.
• No fumar en las áreas de trabajo.
• No tratar de tapar de nuevo las agujas y depositarlas en los contenedores adecuados.
LAVADO DE MANOS
El lavado de manos es el método más eficaz para prevenir y evitar infecciones. Debe realizarse
cuando:
• Exista contaminación de sangre o líquidos corporales
• Al completar la práctica y antes de abandonar el área de trabajo.
• Después de quitarse los guantes.
• Antes y después de ir al baño.
Método de lavado de manos
▪ Abrir la llave de agua
▪ Usar cantidad generosa de jabón no abrasivo
▪ Tallar bien todas las superficies de las manos, por lo menos durante 10 segundos.
▪ Limpiar bien abajo y alrededor de las uñas. Enjuagarse con sus manos hacia abajo.
▪ Evitar salpicar
▪ Secarse las manos con toallas de papel
▪ Cerrar la llave utilizando una toalla de papel
▪ Botar la toalla en el cesto
▪ Utilizar una crema para evitar resequedad o irritación
MEDIDAS DE SEGURIDAD PARA EL MANEJO DE MUESTRAS BIOLOGICAS
Son muy importantes las medidas de bioseguridad para la persona que toman las muestras
biológicas, ya que existen un gran número de infecciones, como hepatitis y VIH, por mencionar
algunas, que pueden ser transmitidas por el manejo de las mismas. Por este motivo a todo
paciente que se le tome la muestra biológica se le debe considerar potencialmente infectado.
Las normas deben aplicarse para todos los pacientes independientemente del diagnóstico.

Equipo de protección
• Bata. Se debe usar bata de manga larga y de algodón y mantenerla cerrada para
protección de salpicaduras.
• Guantes. Se debe usar guantes durante su práctica los cuales deberán ajustarse bien.
En caso de que se rompan se reemplazarán y desecharán al final de la práctica.
• Cubre bocas. Se debe usar en áreas donde se produzcan salpicaduras o aerosoles.
• Lentes de seguridad. Se deben usar en las áreas donde se produzcan salpicaduras o
aerosoles.
• Limpieza del área y material de trabajo
▪ El área y material de trabajo deberán mantenerse limpios y libres de contaminantes.
▪ El material de desecho se colocará en los contenedores especiales.
▪ En caso de derrames de líquidos biológicos, cubrir el derrame con toallas de papel,
aplicar hipoclorito de sodio 1%, dejar reposar 3 – 5 minutos y desechar en el
contenedor adecuado.
2. COMPETENCIAS. -
Conoce y aplica las normas de Bioseguridad de un laboratorio de análisis clínico para aplicar
en el campo profesional.
3. EQUIPOS, MATERIALES E INSUMOS. -
EQUIPOS y MATERIALES
Ítem DENOMINACIÓN Cantidad Unidad Observaciones
Probetas 1000
Frascos 1 litro
Pipetas 10 ml
Propipetas
15
15
15
15
INSUMOS
Hipoclorito de sodio comercial (5,5 %) 5 Litros
4. TECNICA O PROCEDIMIENTO. -
Hipoclorito comercial al 5,5% y deseamos preparar al 0.5% (5000 ppm).
Es necesario preparar 1 litro = 1000 ml de hipoclorito al 0.5%.
Se agrega 90,90 ml. de hipoclorito de sodio al 5,5 % a 909,1 ml de agua para tener 1000 ml.

5. TIEMPO DE DURACION DE LA PRACTICA. -
El docente debe indicar el tiempo de duración de la práctica desde el inicio de la misma hasta
su culminación.
6. MEDICIÓN, CALCULOS Y GRAFICOS. -
FORMULA:
Vc * Cc = Cd * Vd
Vc=
𝑪𝒅 ∗𝑽𝒅
𝑪𝒄
Vd : Volumen deseado.
Cd: Concentración deseada.
CC. : Concentración conocida
V =
0,5 % 𝑥 1000
5,5 %
V = 90,90 ml.
7. CUESTIONARIO. -
• Indique las principales medidas de Bioseguridad en el manejo de muestras biológicas.
• Indique los cuidados para manejar el material de trabajo

Práctica No. 2
METODOS Y EQUIPOS UTILIZADOS EN EL LABORATORIO CLINICO
El Laboratorio clínico es el lugar donde los profesionales de laboratorio de diagnóstico clínico
realizan análisis clínicos que contribuyen al estudio, prevención, diagnóstico y tratamiento de
los problemas de salud de los pacientes. Así mismo es importante que antes de comenzar la
realización de cualquier práctica de laboratorio los estudiantes conozcan el material y equipos
a utilizar, mantenimiento y calibración.
STAT FAX
• Limpieza
El exterior del instrumento puede ser limpiado con una tela suave remojada en agua. De
ser necesario, un detergente de limpieza suave (no abrasivo) para superficies múltiples
puede ser usado. Una solución del 1.5 % de cloro o alcohol isopropílico del 70 % puede ser
usado como un desinfectante en caso de derrames. Tome cuidado especial para no
derramar cualquier líquido en el orificio de lectura.
• Calibración y Linealidad
Cada instrumento es calibrado durante la fabricación usando estándares que son
detectables por el Instituto Nacional para Estándares y Pruebas. Esta calibración
predeterminada es muy estable. La calibración absoluta puede ser verificada con el uso de
filtros, o por la comparación periódica a un instrumento de referencia que se haya calibrado
a filtros. Aconsejan que se realice una verificación periódica de la linealidad del instrumento.
Ya que la mayor parte de resultados de prueba de laboratorio están basados sobre
estándares en vez de absorbancias absolutas, la linealidad del instrumento es el indicador
más crítico del funcionamiento del instrumento. Con el tiempo, una reducción de la
linealidad puede indicar un deterioro óptico de los filtros. Si esto pasará, se requerirá el
reemplazo de los filtros para una continua operación.
• Uso
El stat fax ha sido diseñado para la investigación de Inmunoensayos de Bioquímica. Para
su uso es esencial verificar:
ara asegurar la seguridad de operador y prolongar la vida del instrumento, siga con cuidado
todas las instrucciones indicadas a continuación.
▪ Lea las instrucciones
▪ Servicio Técnico. Envíe el instrumento a ser revisado por personal calificado y
entrenado de manera periodica.
▪ Lleve puesta la indumentaria protectora incluyendo equipo de protección cuando
este usando este instrumento, ya que se utilizan materiales que son
potencialmente biopeligrosos.

▪ Use el Cordón de Energía adecuado: Use sólo el cordón de energía especificado
para este equipo.
▪ Conecte el producto a Tierra: Este producto está conectado a tierra a través del
conductor del cable de energía.
▪ Observe todas las etiquetas del instrumento: Para evitar fuego o el riesgo de un
corto o choque eléctrico, observe todas las etiquetas del equipo.
▪ Consulte el manual para más información sobre las etiquetas adicionales antes
de conectar el instrumento.
▪ Instalar sobre una superficie capaz de sostener el peso del instrumento (10
kilogramos) para mejor ventilación y seguridad. La superficie deberá ser de al
menos 61 cm de largo y sin vibraciones.
▪ Ventilación Adecuada: El instrumento debe ser rodeado por los espacios a
continuación: 10 cm alrededor de perímetro de la unidad.
▪ Evite Polvo Excesivo: No opere el instrumento en un área con el polvo excesivo.
Los modos de operación son:
▪ Modalidad de Absorbancia Lee absorbancias monocromáticas o bicromáticas
diferenciales en la longitud de onda seleccionada por él operador.
▪ Modalidad de Estándar Reporta concentraciones basadas en la concentración
de un estándar.
▪ Modalidad de Cinética Reporta concentraciones basadas ya sean en ∆
absorbancia por minuto multiplicado por un factor ingresado por el usuario
(Cinética por Factor); o, basado en la ∆ absorbancia por minuto de un estándar
(Cinética por Estándar). Los cálculos en el Modalidad de cinética con tiempo fijo
se basan en la ∆absorbancia sobre un intervalo de tiempo específico.
▪ Modalidad de Factor Reporta concentraciones multiplicando absorbancias por un
factor especifico.
▪ Modalidad de Multi-Puntos Reporta Concentraciones o porcentaje de
absorbancias basado en una conexión punto a punto de hasta siete estándares
ingresados por el operador.
▪ Los parámetros de las pruebas y las curvas estándar son almacenados en la
memoria para una búsqueda futura.
CENTRIFUGA
Las centrífugas son equipos utilizados en los laboratorios para la separación por ejemplo en
análisis clínico para separar el plasma de los otros componentes para poder ser analizado.
• Limpieza
Mantenga la centrífuga limpia de restos de muestras, vidrio o polvo. Utilice un detergente
no abrasivo y un paño suave para limpiar el equipo por dentro y fuera de la tapa. Los tubos
pueden ser desmontados y utilizar la técnica de limpieza y desinfección que se utiliza para
el material de laboratorio.
• Mantenimiento Preventivo del operador
Revise que el mecanismo de seguridad de la puerta funciona correctamente.

Verifique el funcionamiento y exactitud del control de tiempo y velocidad, si los tuviese.
Revise el estado del freno automático o manual, si lo tuviera.
Verifique la alimentación eléctrica del equipo para detectar posibles cortes o degradación
del material aislante.
Verifique que al centrifugar las muestras, no exista vibración excesiva. Si la hay, verifique
las cargas; si estas están bien y la vibración persiste, repórtelo al departamento de
Mantenimiento del establecimiento.
• Uso
▪ Cargado de la Centrífuga
Un procedimiento de cargado correcto, implica el colocar las cargas en el rotor
en forma balanceada.
a) Colocar las cargas de modo que las cargas que tienen la misma masa o
peso queden colocadas de forma opuesta en el rotor. Si tiene un número impar
de muestras para ser cargadas, busque otra muestra de igual peso a modo de
siempre formar pares opuestos de igual peso; nunca coloque un número impar
de muestras dentro de la centrífuga.
b) Además de tener la misma masa (peso), deben tener el mismo centro de
gravedad, es decir: no coloque tubos y recipientes como pares contrapuestos, que
tengan diferente forma, tamaño, espesor, etc.
▪ Cuando esté centrifugando mantenga cerrada la tapadera. Si algo se rompe apague
inmediatamente el equipo y no lo abra hasta que se detenga o el indicador de
apertura de la tapadera lo indique.
▪ Reemplace los recipientes metálicos que estén deformados, pues producen
una presión no uniforme sobre el tubo de muestra.
▪ No utilice equipo de vidrio agrietado y con rajaduras, porque la presión centrífuga
puede producir una ruptura en estos puntos, pulverizando el vidrio y contaminando
las otras muestras.
▪ Cuando se deterioren y/o se rompa un tubo de vidrio, limpie los restos.
▪ Compruebe que la superficie donde tiene el equipo esté perfectamente nivelada, ya
que si sucede lo contrario causaría vibraciones.
Compruebe el funcionamiento del equipo realizando los siguientes pasos:
− Cargue la centrífuga correctamente y ciérrela.
− Asegúrese que la centrífuga esté bien cerrada.
− Accione el interruptor de encendido, fijando previamente la velocidad y/o el
tiempo de centrifugación.
− Observe detenidamente el funcionamiento; si no existiese ningún problema
continúe con su trabajo.
− Si existen problemas de vibración, balancear correctamente los portamuestras.
−Si no funciona el equipo, revisar el cable de conexión eléctrica, carbones o
fusibles.
MICROPIPETAS
Las pipetas son dispositivos que se utilizan para medir o transvasar pequeños volúmenes de
líquido de un recipiente a otro, con gran exactitud. Las pipetas tienen una amplia gama de
modelos, se destacan las pipetas de volumen fijo y las de volumen variable, las cuales en

general disponen de controles mecánicos. También se han introducido recientemente en el
mercado pipetas que disponen de controles de tipo electrónico.
• Limpieza
▪ Verificar cada día que la pipeta se encuentra limpia, en sus superficies interiores y
exteriores. Si se detecta suciedad, la misma debe limpiarse utilizando un solvente
adecuado o una solución jabonosa, seleccionar aquellos solventes que no
produzcan efectos dañinos a la integridad de los componentes.
▪ Esterilizar la pipeta siguiendo las indicaciones de los fabricantes. Algunas pipetas se
pueden esterilizar en una autoclave, utilizando un ciclo de 121 °C y un tiempo
estimado de 20 minutos; algunas requieren ser desensambladas para que el vapor
esté en contacto con sus componentes internos. El desensamble consiste en liberar
o desenroscar el cuerpo central de la pipeta, siguiendo los procedimientos indicados
por los fabricantes. Para desensamblar o ensamblar algunas pipetas, se requiere
utilizar un conjunto de herramientas –llaves– que normalmente proporcionan los
fabricantes, junto con la pipeta en el momento de la venta. La pipeta solo debe
ensamblarse de nuevo, cuando el ciclo de esterilización haya terminado y la
temperatura se haya estabilizado con la del ambiente. En ese momento se verifica
que los componentes se encuentren secos y se procede al ensamble.
• Mantenimiento
▪ Desensamblar la pipeta. Seguir el procedimiento que para el efecto describe el
fabricante,
▪ en el manual de uso y mantenimiento de la pipeta. (El procedimiento varía
dependiendo
▪ de la marca, tipo y modelo). Normalmente, se desensambla el cuerpo principal de la
pipeta
▪ del sistema eyector de puntas, desenroscando el cuerpo de la pipeta del cilindro.
▪ Limpiar los anillos, el émbolo y las paredes interiores del cilindro antes de lubricar.
▪ Si los componentes interiores fueron contaminados accidentalmente, todas las
superficies
▪ deberán ser limpiadas con un detergente y luego con agua destilada.
▪ Lubricar el émbolo y el pistón con grasa siliconada especial para pipetas.
▪ Ensamblar siguiendo un proceso inverso al utilizado para desensamblar.
▪
• Uso
▪ Colocar una punta nueva, ajustada a las especificaciones de la pipeta, en el porta
puntas de la pipeta.
▪ Presionar el émbolo suavemente hasta el primer tope. Hasta este momento la punta
▪ de la pipeta no debe estar sumergida en el líquido.
▪ Sumergir la punta de la pipeta en el líquido.
▪ Liberar el émbolo de forma suave para que la pipeta absorba el líquido.Esperar al
menos dos segundos, antes de retirar la punta de la pipeta del líquido.

▪ Colocar la punta de la pipeta contra la pared del recipiente en el cual será dispensado
el líquido. Verificar que el ángulo formado entre la punta de la pipeta y la pared del
elemento receptor esté entre los 30° y los 45°.
▪ Dispensar el contenido de la pipeta presionando el émbolo de forma suave pero
firme, hasta el primer tope. Mantener en todo momento el contacto entre la punta de
la pipeta y la pared del recipiente receptor.
▪ Liberar suavemente el émbolo hasta la posición límite superior.
▪ Desechar la punta de la pipeta. Para esto accionar el botón del mecanismo de
expulsión
IMPORTANTE:
▪ Verificar que la pipeta se encuentra en posición vertical, cuando se requiera aspirar
un líquido. La posición vertical garantiza que no se presente incertidumbre por
variaciones mínimas en la cabeza del líquido.
▪ Remover, después de llenar la pipeta, cualquier gota que se adhiera a la punta de la
pipeta. El procedimiento que se sigue consiste en tocar, con la punta de la pipeta,
suavemente la pared del recipiente que contiene el líquido aspirado.
▪ Dispensar el líquido contenido en la pipeta tocando con la punta de esta la pared del
recipiente receptor. La punta de la pipeta debe formar un ángulo con la pared del
recipiente que varía entre los 30° y los 45°, y estar ubicada entre 8 y 10 mm sobre
la superficie del líquido contenido.
2. COMPETENCIAS. -
Conoce y aplica las técnicas de mantenimiento, uso y calibración de los equipos de uso
básico para el área de análisis clínico.
Stat fax
Micropipetas 1000 ul
Balanza analítica
Tips
Agua destilada
Frascos plasticos
Hipoclorito al 0.5%
2
15
1
1
5
1
Litro
Litro
Queremos comprobar el estado de las pipetas automáticas del laboratorio. Para ello,
ponemos un bote con agua destilada a la temperatura de 30ºC (nota: la densidad del agua a

esta temperatura es de 0,9956). Con la ayuda de una balanza analítica de precisión
0,001g,realizamos las pesadas.
En base a estos datos, resolveremos las siguientes cuestiones:
Calcular los volúmenes alicuotados por las pipetas.
Calcular la precisión de las pipetas.
Calcular la exactitud de las pipetas.
Utilizando los datos obtenidos, calcula para el volumen nominal si existe diferencia
significativa con un valor de significancia del 95%.
100 minutos
Llenar la siguiente tabla
CALIBRACIÓN DE PIPETAS
Pipeta
Modelo
Volumen
N°
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
7. CUESTIONARIO. -
1. ¿Porque es importante la calibración de material y equipos de laboratorio?
2. ¿Que es precisión?
3. ¿Que es exactitud?

UNIVERSIDAD DEL VALLE
Práctica No. 3
TOMA DE MUESTRA PARA ANALISIS CLINICO Y CONTROL DE CALIDAD EN LA FASE
PREANALITICA
La hematología como el estudio de la sangre y de órganos hematopoyéticos (medula
ósea, bazo sistema linfático), una adecuada extracción y manejo de las muestras
biológicas y en concreto de las muestras de sangre es fundamental para conseguir dicho
objetivo.
La sangre está constituida por una serie de elementos formes o células sanguíneas en
suspensión en un liquido llamado plasma. Se puede por tanto diferenciar:
a) Células sanguíneas o parte sólida (leucocitos, hematíes, plaquetas)
b) Plasma o parte líquida (sin anticoagulante) y suero sin anticoagulante.
2. COMPETENCIAS. -
• Prepara el material necesario para la obtención de muestra sanguínea por punción
venosa y dactilar.
• Obtiene muestras por punción venosa, sobre la recogida y manipulación de muestra
sanguínea a través de la resolución de problemas
• Obtiene sangre por punción capilar para la recogida de muestra sanguínea y el
análisis clínicos del contexto.
• Utiliza correctamente los anticoagulantes de acuerdo a los exámenes que se solicitan,
a través de la resolución de problemas que se presentan en el campo de trabajo del
profesional.
• Realiza los extendidos sanguíneos según normas establecidas, que se establecen en
el proceso de resolución de problemas.
Jeringas 5 ml
Tubos tapa roja
Torniquetes
Algodón
Alcohol 70 %
Curitas
Gradilla para tubos de hemolisis
Portaobjetos
Tubos capilares sin anticoagulante
Tubos con anticoagulante,
Barra de Plastilina.
20
25
5
300 ml
25
7
25
20
20
4

Lancetas descartable estéril
Tubos capilares heparinizados.
20
20
INSUMOS
•
4.1. PUNCION VENOSA
1. Anote y registre los datos del paciente tanto en los cuadernos de registro, como en los
tubos donde se colocará la muestra.
2. Ubicar al paciente en la camilla o en la silla de extracción.
3. Explicar al paciente en lenguaje claro el procedimiento al cual será sometido
4. Colocarse guantes.
5. Localice la vena adecuada para la punción (vena cubital interna y la cefálica, dorso
de la mano, dorso del pie)
6. Ligue unos 7 cm arriba de la fosa antecubital (pliegue del codo)
7. Pida que el paciente cierre la mano
8. Localice la vena palpando y visualizando cual es la más apta
9. Limpie el sitio de la punción con torunda de algodón impregnada de alcohol 70%
u otro antiséptico cutáneo, con movimiento circular desde adentro hacia fuera.
10. Con el dedo índice o el pulgar de la otra mano fije la vena en un lugar
próxima a la punción para evitar que esta se mueva.
11. Introducir la aguja con una inclinación de 45 a 60° respecto a la vena con el bisel
hacia arriba.
12. Aspirar la sangre, ni muy lento (puede coagularse) ni muy rápido (se hemoliza).
13. Extraer la cantidad necesaria.
14. Indique al paciente que abra la mano
15. Aplicar algodón seco estéril y retirar la aguja de la vena.
16. Preferentemente con el brazo extendido, ejercer presión sobre el algodón en el lugar
de la punción por 2 a 5 minutos.
17. Vaciar la muestra retirando la aguja haciendo deslizar suavemente por las
paredes del tubo.
4.2. PUNCION CAPILAR.
1. Realizar la antisepsia del lugar elegido (lóbulo de la oreja, pulpejo del dedo anular,
planta del pie en lactantes (borde externo o interno de la planta del pie, nunca en el centro o
arco plantar)
2. Dejar secar el área.
3. Puncionar con rapidez y firmeza de tal manera que ingrese toda la punta de la lanceta.
4. Descartar la primera gota.

5. Tomar la sangre que fluye libremente, llenando ¾ partes el capilar, una vez
realizado, esto deben ser sellados con plastilina.
6. Realizar hemostasia por compresión.
4.3. CONTROL DE CALIDAD EN LA FASE PRE-ANALITICA
La evaluación se realiza mediante los siguientes puntos:
o Llenado incorrecto de la solicitud
o Utilizacion de contenedor inadecuado
o Volumen de muestra incorrecta
o Hemolisis
o Muestra lipemica
o Muestra coagulada
o Muestra insuficiente
o Muestra no recibida
o Muestra mal identificada
o Muestra deteriorada en laboratorio
o Temperatura de transporte inadecuada
La evaluación de los mismo deben ser expresados en indicadores de calidad.
Cada estudiante debe extraer sangre por punción venosa y capilar según lo solicitado.
CALCULO DE INDICADORES:
𝑁° 𝑑𝑒 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎𝑠 ℎ𝑒𝑚𝑜𝑙𝑖𝑧𝑎𝑑𝑎𝑠
𝑁° 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎𝑠
X 100
7. CUESTIONARIO. -
1. Indique en que otras áreas del organismo se puede realizar punción venosa y cuales
serian los motivos para elegir otras áreas.
2. ¿Cuáles son los cuidados y acciones que se debe realizar cuando el paciente usa
terapia con anticoagulante o enfermos hematológicos?
3. Después de una punción capilar ¿cuál es la primera acción que se realiza y porqué?
4. ¿Qué condición debe cumplir un anticoagulante idóneo?
5. Indique cuál la utilidad de los 4 anticoagulantes conocidos.

Práctica No. 4
CONTROL DE CALIDAD EN LA FASE ANALÍTICA DEL LABORATORIO CLÍNICO
El control de calidad en el laboratorio es un mecanismo diseñado para detectar, reducir, y
corregir posibles deficiencias analíticas internas, antes de emitir un resultado. Tiene por
finalidad aumentar la calidad y confiabilidad de los resultados informados.
El control de calidad es básicamente una medida de precisión, o de que tan bien un sistema
de medición reproduce un mismo resultado a lo largo del tiempo bajo condiciones
operativas diferentes.
Para ello se hace uso de un material de control de calidad sobre el cual se realiza una
serie de determinaciones al comienzo de cada corrida analítica, luego de que un
instrumento recibe servicio técnico, cada vez que se cambia un lote de reactivos, luego de
cada calibración y toda vez que el un resultado parezca inapropiado.
El material de control debe reproducir, lo más aproximadamente posible, la misma matriz
que las muestras analizadas, teniendo en consideración propiedades tales como la
viscosidad, turbidez, composición y color. Debe ser simple de utilizar, y debe tener una
mínima variación entre viales ya que una variabilidad excesiva puede ser malinterpretada
como un error sistemático en el método o en el instrumento. Debe ser estable en el tiempo
y debe estar disponible en cantidades lo suficientemente grandes como para que un mismo
lote dure al menos un año. Son más convenientes los controles líquidos que los liofilizados
debido a que de esta forma se minimizan las variaciones debidas a errores de pipeteo
durante la reconstitución.
Interpretación
La interpretación de los datos de control de calidad involucra tanto métodos gráficos como
estadísticos. Siendo mucho más fácilmente interpretables de manera visual, haciendo uso
por ejemplo de gráficas de Levey-Jenings. En estas gráficas los datos de resultados
obtenidos al analizar el material de control son consignados sobre el eje Y, mientras que el
eje X indica el número de corrida de control; sobre el eje Y también se grafican una serie
de líneas representando la media de la medición y límites para una, dos o tres desviaciones
estándar. Al inspeccionar el patrón de puntos graficados se obtiene una manera simple de
detectar incrementos en el error aleatorio asociado, y desplazamientos o tendencias
asociables a errores sistemáticos en las calibraciones.
Cartas de control
Una carta de control es un enfoque estadístico en el estudio de las variaciones inherentes
a un proceso de manufactura, con el propósito de mejorar la efectividad y la relación de
costos en el mismo. Estos métodos de control se basan en el monitoreo continuo de las
variaciones asociadas a un proceso. Las cartas de control, conocidas también como 'cartas
de Shewhart' o 'carta de desempeño operativo'; son herramientas estadísticas cuya
pretensión es evaluar la naturaleza de la variación en un proceso para facilitar la predicción
de su comportamiento y por lo tanto permitir la gestión de los posibles defectos o errores

que pudieran surgir. Una carta de control es un tipo específico de gráfico de corrida(o
gráfico de ejecución). La gráfica de control es una de los parámetros de calidad entre las
que se incluyen histogramas, diagramas, hojas, diagramas y diagramas de causa y efecto.
Las cartas de control previenen ajustes innecesarios en los procesos; proveen información
acerca de las capacidades del proceso; brindan información diagnóstica y son una técnica
probada para mejorar la productividad.
Gráficos de Levey–Jennings
Artículo principal: Gráfica de Levey-Jennings
Un ejemplo de un gráfico de Levy-Jennings, con límites superiores e inferiores ubicados a
una y dos veces el desvío estándar.
Un gráfico o carta de Levey-Jennings, es un gráfico en el cual los datos de control de calidad
son presentados de manera tal que proveen una indicación visual de que un determinado
proceso se encuentra funcionando de manera adecuada. La distancia de la media se mide
en desvíos estándar(SD).
Sobre el eje X se grafica la fecha y hora, o más habitualmente el número de corrida. Y se
realiza una marca indicando cuanto se aleja cada resultado de la media (la cual es el valor
esperado para el material de control). También se grafican líneas a lo largo del gráfico
indicando la media, uno, dos y a veces tres desvíos estándar a cada lado de la media. Esto
hace fácil de ver cuán lejos del valor esperado se encuentra un resultado.
Sobre las cartas de Levey-Jennings pueden aplicarse reglas de control, tales como las
reglas de Westgard, para determinar cuáles de los resultados obtenidos en cada corrida
analítica sobre la que se ha realizado un control pueden ser informados, o si deben ser
corridos nuevamente luego de aplicar medidas correctivas. La formulación de las reglas de
Westgard se basa en la aplicación de diferentes métodos estadísticos
Reciben este nombre en honor a S. Levey y E. R. Jennings quienes sugirieron en 1950 la
utilización de gráficos de Shewhart en el laboratorio de análisis clínico.
2. COMPETENCIAS. -
Conoce y aplica las normas de Control de calidad de un laboratorio de análisis clínico para
aplicar en el campo profesional.
No se utilizara material de laboratorio

En cada práctica se aplica los controles de calidad
En este seminario se conoce las mediciones y se aplica los cálculos y gráficas en cada
práctica
7. CUESTIONARIO. -
1.- ¿Qué tipo de errores se generan en la realización de una práctica de análisis
clínico
2.- ¿Qué entiende por error sistemático?
3.- ¿Qué entiende por error aleatorio?

Práctica No. 5
DETERMINACION DE GLUCEMIA Y CURVA DE TOLERANCIA A LA GLUCOSA
1.-CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO:
La glucosa se incorpora al organismo con la ingesta, constituye uno de los sustratos
bioenergéticos más importantes del organismo, cuando no se la requiere en ese momento es
almacenada convertida en glucógeno o grasa ante una demanda de glucosa es obtenida de
nuevo del glucógeno mediante glucogenolisis y a partir de loa aminoácidos y otros sustratos
mediante un proceso denominado neoglucogénesis.
La concentración de glucosa en sangre se mueve entre límites estrechos sin ocasionar
sintomatología. Existe una doble regulación de su nivel disminuyendo por acción de la insulina
o cuando está baja aumentando por el glucagón, cortisol, catecolaminas y hormona del
crecimiento, ciertos valores plasmáticos de glucemia requieren una confirmación para saber
si estamos ante un estado prediabético para ello suele utilizarse la curva de tolerancia a la
glucosa a fin de diagnosticar una diabetes y clasificar está de acuerdo a la sintomatología y
demás factores.
2.- COMPETENCIA (S).
- Determina glucemia en suero sanguíneo, en pacientes que presentan problemas
clínicos y permite la solución a través de un tratamiento.
- Relaciona los valores obtenidos con patologías y esto permite la realización de
tratamientos con pacientes diabéticos
- Comprende a cabalidad el metabolismo de la glucosa en el organismo y asume
procedimientos de solución de casos
- Confirma su diagnóstico con la curva de tolerancia a la glucosa para la solución de
problema que se presentan en el campo de trabajo del profesional
3.- MATERIAL Y REACTIVOS.-
Tubos de hemolisis
Gradillas para tubos de hemolisis
Pipetas de 2ml, 5ml
Micro pipetas 10 a 100
microlitros
Micropipetas de 1000 microlitros
Agua destilada
20
4
7
7
7
1000ml

Reactivo enzimático para glucosa
con estándar
Sueros control (normal y
patológico)
Glucosamin en polvo
Jeringas de 5ml
Algodón
Alcohol
Gradillas
Stat fax
Baño maria
Centrifuga
Vortex
500 ml
1 kit
5
150 gramos
9
100 gramos
100 ml
7
2
1
1
2
4.-TECNICA o PROCEDIMIENTO
Marcar tres tubos de ensayo y proceder según el siguiente esquema:
Blanco Estándar Desconocido
Reactivo 2 ml 2 ml 2 ml
Suero ------ ------ 20 ul
Estándar ------ 20 ul -------
Agitar ligeramente e incubar en Baño María a 37 grados centígrados 10 minutos al cabo de
los cuales se lee en el espectrofotómetro a 505 nm las respectivas absorbencias (densidades
ópticas).
Para la determinación de la curva de tolerancia deberá tomarse una muestra en ayunas se le
administra al paciente vía oral 100g de glucosa pura y se proceden a extraer muestras a la
media hora, a la hora, a las dos horas y se determina la concentración de glucosa en cada
muestra de acuerdo al procedimiento anterior.
5. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA
100 Minutos
6. MEDICION CALCULO Y GRAFICOS
Determinar la concentración de glucosa en el suero sanguíneo con la siguiente relación
matemática:

Absorbancia del desconocido
Concentración de glucosa = -------------------------------------- x concentración del
Absorbancia del Estándar Estándar
Para la curva de tolerancia se utiliza la misma fórmula para las distintas muestras y se
procederá a graficar concentración de glucosa en relación con el tiempo para interpretar los
resultados.
CONCLUSIONES
De acuerdo al resultado obtenido a que conclusiones podríamos arribar, explique porqué,
sabiendo que los niveles de glucemia tienen la siguiente interpretación:
NIVEL DE GLUCEMIA
7.- CUESTIONARIO
1) Cuáles son las principales causas de hiperglucemia?
2) Cuáles son las principales causas de hipoglucemia?
3) Que otras pruebas se utilizan para relacionar niveles elevados de glucemia, porqué?
4) Cuáles son las principales vías metabólicas de oxidación de la glucosa?
5) Que es la diabetes y como se clasifica?
6) Cuáles son los síntomas y signos de la diabetes, porqué?
BASAL
<110 110 - 140 >140
Curva de tolerancia
de glucosa a las 2
horas.
<140
NORMAL
140-200
VIGILANCIA
>200
DIABETES

Práctica No. 6
DETERMINACION CUANTITATIVA DE HEMOGLOBINA GLUCOSILADA
1.-CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO:
La hemoglobina glicosilada o glicada con sus siglas HbA1c, da una retrospectiva de los niveles
de glucosa y es considerado el mejor indicador de control en los pacientes diabéticos del tipo
1, 2, debido a que el contacto estrecho de la hemoglobina con glucosa y otros sacáridos dentro
de los eritrocitos provoca la formación de aductos estables de la hemoglobina por
modificaciones post-transduccionales. La velocidad de formación de la HbA1c es directamente
proporcional a la concentración ambiente de glucosa. La hemoglobina glicosilada es una
proteína dentro de los glóbulos rojos que se forma por la unión de la hemoglobina con la
glucosa, es un producto de glicosilación no enzimática, donde la molécula de glucosa se une
a la valina N-terminal de cada cadena ß de la hemoglobina, dependiendo de las
concentraciones crónicas del glúcido, es decir, a mayor cantidad de glucosa por mayor tiempo,
más cantidad de hemoglobina glicosilada. Virtualmente toda la hemoglobina en circulación
está contenida en el eritrocito, el cual tiene un promedio de vida de 120 días. Durante la vida
del eritrocito y debido a la permeabilidad de su membrana a la glucosa, la hemoglobina se
incuba con la glucosa sanguínea. Como ésta es una sustancia reactiva, el resultado es la
glucosilación de los sitios respectivos de los aminoácidos hemoglobínicos. Si se toma en
cuenta el promedio de vida del eritrocito, predominan aquellos que tienen entre 30 y 90 días
de vida y como la glucosilación depende de la concentración integrada de la glucosa en el
tiempo, la información que proporciona la medición de hemoglobina glicosilada es el valor
integrado de las ocho a doce semanas, para evitar las oscilaciones bruscas motivadas por el
ayuno y al horario de la toma de la muestra. Teóricamente, cuatro determinaciones trimestrales
de hemoglobina glicosilada ofrecen una visión mucho más amplia que un sin número de
mediciones de glicemia. Se han desarrollado muchos métodos diferentes para la
determinación de rutina de la hemoglobina glicosilada en los laboratorios de análisis clínicos.
Los métodos difieren considerablemente en lo que se refiere a los componentes glicosilados
medidos, interferencias y rango considerado no diabético. Este examen se utiliza para medir
el control de la glucosa sanguínea en un período prolongado en individuos con diabetes. En
general, cuanto más alto sea el nivel de hemoglobina glicosilada, mayor será el riesgo para el
paciente de desarrollar complicaciones de la diabetes (enfermedad ocular, enfermedad renal,
enfermedad cardíaca y accidente cerebro vascular). El papel de la hemoglobina glicosilada
resulta de gran utilidad en la monitorización del tratamiento de la diabetes mellitus y su papel
en el diagnóstico de la misma ha sido objeto de debate en numerosas ocasiones. El
diagnóstico de diabetes debe establecerse en cifras de glucemia que se asocien con el
desarrollo de complicaciones micros vasculares específicos. Los productos finales de
glucosilación avanzada constituyen un factor patogénico importante (aunque probablemente
no único) en las complicaciones metadiabéticas (retinopatías, nefropatías y neuropatías). La
aplicación del test de hemoglobina glicosilada permite obtener una visión no actual, sino
retrospectiva del control glucémico del paciente diabético, ofreciéndonos como ventajas una
determinación objetiva, ya que su importancia es creciente, puesto que mantener sus valores

dentro de la normalidad constituye un objetivo a alcanzar en el tratamiento del paciente
diabético. Sin embargo, existe evidencia científica que correlaciona las complicaciones a largo
plazo con los niveles elevados de hemoglobina glicosilada y el control de la diabetes mellitus.
La hemoglobina glicosilada es la mejor prueba disponible que refleja el control glucémico del
paciente diabético. Esta prueba ha permitido estratificar a los pacientes en categorías de riesgo
para desarrollar complicaciones microvasculares, por lo que sirve para evaluar y pronosticar
el futuro de los pacientes. La hemoglobina glicosilada puede ayudar a intensificar a tiempo la
terapia de control de la diabetes mellitus (control glucémico), así como a identificar los casos
que requieran atención especial (enfoque de riesgo). Se ha demostrado que es necesario
realizar la hemoglobina glicosilada para valorar la calidad del control metabólico, sobre todo
en pacientes que manejan glicemias en ayunas con valores menores a 180 mg/dl. Sin embargo
en enero 2010 la ADA, basándose en un comité de expertos, admite como cuarto criterio
diagnóstico de diabetes mellitus la Hb A1c. De este modo una Hb A1c ≥ 6,5 % estimada en un
laboratorio que utilice el método certificado por el National Glycohemoglobin Standaritation
Program (NGSP) y estandarizado al Diabetes Control and Complications Trial (DDCT), y al
igual que ocurre con las otras determinaciones, repetida en una segunda ocasión en los días
siguientes, es diagnóstica de diabetes.
Etapas reversibles del proceso de glucosilación:
Base de Schiff:
La base de Schiff inicialmente formada cuando reacciona un azúcar reductor con una proteína
resulta de la adición del grupo amino de la proteína al grupo carbonilo del azúcar; esta
molécula es estable por un corto tiempo, luego del cual se inicia un proceso de reordenamiento
de los enlaces químicos, que da lugar a un producto más estable denominado genéricamente
producto de Amadori. El hecho de que ambas reacciones sean reversibles y consecutivas
determina que de acuerdo al tiempo de evolución del sistema, habrá predominio de la base
de Schiff (horas) o del producto de Amadori (días). La interrupción del contacto de la glucosa
con la proteína en cualquiera de estas etapas produce la reversión completa del efecto.
Formación de productos de glicosilación avanzada
Los productos de Amadori poseen un grupo carbonilo que puede seguir reaccionando con
otros grupos amino. Durante esta etapa se forman también compuestos altamente reactivos
que poseen dos grupos carbonilo y que actúan como propagadores de la reacción. Luego de
varios meses o inclusive años de contacto con la glucosa, las proteínas de bajo recambio (vida
media larga como colágeno), originan los productos de glicosilación avanzada. A diferencia
de la formación de la base de Schiff o del producto de Amadori (reversibles) la formación de
"PGA" es un proceso lento e irreversible. Las proteínas modificadas por los PGA pueden
encontrarse en el plasma, en el compartimiento intracelular así como en la matriz extracelular.
La Hemoglobina Glicosilada (Hb A1c)
Actualmente, el control metabólico no se valora solamente por el control glucémico, sino que
hay otra serie de parámetros, como las denominadas proteínas glicosiladas, entre las que
destaca la Hemoglobina Glicosilada (Hb A 1c), que indican fielmente el grado de control que,
a largo plazo, ha mantenido el diabético.

La hemoglobina glicosilada es una fracción de la hemoglobina Anormal del adulto, que tiene
la propiedad de unir, de forma irreversible, cantidades de Glucosa proporcionales a la
concentración glicémica. Al conjunto de todas ellas se les denomina Hemoglobina A 1 o
Hemoglobina glicosilada, pero, a su vez, dentro de la Hemoglobina A 1 se pueden separar
varias fracciones, que se diferencian por los diferentes azúcares a los que van unidos, siendo
la de mayor interés y la que se encuentra en un porcentaje más elevado la Hb A 1c, que es la
que se encuentra unida a la Glucosa. Entre los factores que condicionan la intensidad de la
glicosilación se destacan: - La concentración (cantidad) de Glucosa sanguínea. - El tiempo
durante el que se mantiene esa cantidad de Glucosa. La vida media (tiempo que tarda en
destruirse) de la proteína glicosilada. - En el caso de la Hemoglobina, y teniendo en cuenta
que la vida media del glóbulo rojo es aproximadamente de 120 días, su determinación nos
servirá para evaluar el control de las cifras medias de Glucosa en sangre que ha mantenido
un diabético durante los 2 a 3 meses precedentes a la realización del análisis. - Falsos
descensos de la Hb A 1c Se pueden presentar en aquellos trastornos y situaciones en los que
se altera la vida media de los glóbulos rojos, como en el caso del embarazo, en algunos tipos
de anemiasy de transfusiones recientes.
Valores de la hemoglobina glicosilada:
2.- COMPETENCIAS
- Determina Hemoglobina glucosilada en suero sanguíneo, en pacientes que presentan
problemas clínicos y permite la solución a través de un tratamiento.
- Relaciona los valores obtenidos con patologías y esto permite la realización de
tratamientos con pacientes diabéticos
- Comprende a cabalidad el metabolismo de la glucosa en el organismo y asume
procedimientos de solución de casos

Micropippetas 1000 ul
Micropippetas 10 ul
tubos de hemolisis
Gradillas
alcohol
Jeringas 5ml
tubos colectores con Edta
torniquete
papel absorbente
Tips
Curitas
agua destilada
EQUIPOS
Stat Fax
Vortex
7
7
7
50
7
100 ml
7
9
5
5
100 ml
2
2
Suero ------ ------ 20 ul
Estándar ------ 20 ul -------

ópticas).
Para la determinación de la curva de tolerancia deberá tomarse una muestra en ayunas se le
administra al paciente vía oral 100g de glucosa pura y se proceden a extraer muestras a la
media hora, a la hora, a las dos horas y se determina la concentración de glucosa en cada
muestra de acuerdo al procedimiento anterior.
100 Minutos
6. MEDICION CALCULO Y GRAFICOS
Determinar la concentración de glucosa en el suero sanguíneo con la siguiente relación
matemática:
Concentración de glucosa = -------------------------------------- x concentración del
Absorbancia del Estándar Estándar
Para la curva de tolerancia se utiliza la misma fórmula para las distintas muestras y se
procederá a graficar concentración de glucosa en relación con el tiempo para interpretar los
resultados.
CONCLUSIONES
sabiendo que los niveles de glucemia tienen la siguiente interpretación:
En esta práctica no se utiliza materiales y reactivos
4.- TECNICA O PROCEDIMIENTO
Al no realizarse la práctica solo se explica teóricamente el procedimiento
5.- TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA
100 minutos
6.- MEDICION, CALCULOS Y GRAFICOS
Se realizan cálculos en base a cuadros clínicos proporcionados por el docente
7.- CUESTIONARIO
1. Cuál la importancia de determinar la hemoglobina glucosilada en un paciente diabético?
2. Cuáles son los valores de referencia de hemoglobina glucosilada?

Práctica No.7
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE UREA
1.-CONOCIMIENTO TEÓRICO REQUERIDO.-
La urea constituye la fracción de nitrógeno no proteico más importante en la mayoría de los
líquidos biológicos. En el hombre es el principal producto final del metabolismo proteico. Se
produce en el hígado y es excretada por la orina a través de los riñones.
La elevación de la concentración sérica de urea se interpreta generalmente como una posible
disfunción renal. Sin embargo, no debe dejarse de lado el hecho de que los valores séricos
de urea se encuentran íntimamente relacionados con la dieta y el metabolismo proteico, por
lo que cualquier alteración en éstas variables se traducirá en un cambio de la concentración
de urea en el suero.
2.- COMPETENCIA(S).-
- Comprende el metabolismo del nitrógeno, en la fracción de nitrógeno no proteico más
importante en la mayoría de los líquidos biológicos.
- Determina la concentración sérica de urea, y permite la interpretación generalmente
como un posible disfunción renal
- Interpreta los resultados y relacionarlos con patologías, a través de la resolución de
problemas
3.- MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS.-
Micropippetas 10 ul
tubos de hemolisis
Gradillas
Tips para micropipetas de 1000 ul y 10 ul
Agua destilada
Reactivo de urea
7
7
50
7
500 ml
1 kit

EQUIPOS
Stat Fax
Vortex
2
2
4.- TÉCNICAO PROCEDIMIENTO
Marcar tres tubos de ensayo como:
Blanco Estándar Desconocido Observaciones
Estándar __________ 20 ul __________
Suero __________ ____________ 20 ul
Ureasa 1 gota 1 gota 1 gota Incubar a 37 C
en BM 5`
Reactivo
1
1 ml 1ml 1 ml
Reactivo
2
1 ml 1 ml 1 ml Incubar a 37 C
en BM 5
Agua
destilada
10 ml 10 ml 10 ml
En esta prueba la Ureasa descompone específicamente la urea produciendo CO2 y
amoníaco, este segundo reacciona con fenol e hipoclorito en medio alcalino produciendo azul
de indofenol que se determina colorimétricamente a 540 nm.
5.-TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA
100 minutos
6.-MEDICION, CALCULOS Y GRAFICOS
Una vez obtenidas las lecturas deberán reemplazarse los datos en la siguiente fórmula para
calcular la concentración de urea en mg/dl.

Concentración de urea = -------------------------------------- x concentración del estándar
. Absorbancia del Estándar
Interpretar los resultados obtenidos, sabiendo que los valores referenciales de uremia son de
20 – 40 mg/dl.
7.- CUESTIONARIO.-
1.- ¿Por qué la uremia es un valor relativo?
2.- ¿Qué indica una uremia elevada y con qué patologías se asocia?
3.- ¿A qué se llama azoemia?
4.- ¿Qué es el BUN?
5.- ¿En qué casos se tiene una uremia baja?
6.- ¿Dibuje el ciclo de formación de la urea

Práctica No. 8
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE CREATININA
La creatinina compuesto sumamente difusible, se elimina del organismo casi exclusivamente
por filtración renal. Su determinación en suero, así como el clearance de creatinina endógena
constituyen parámetros importantes para el diagnóstico de diversas afecciones renales. Sin
embargo debido a los problemas prácticos inherentes a la determinación del clearance
(recolección de orina en niños, etc.) la determinación de creatinina sérica es más utilizada
como índice de funcionalismo renal.
2.- COMPETENCIA (S).-
- Realiza correctamente determinación de creatinina sérica y en orina, a través de la
resolución de problemas.
- Interpreta los resultados y relacionarlos con patologías, en relación con el campo de
trabajo del profesional
- Calcula e interpretar el clearance de creatinina, en relación con el campo de trabajo del
profesional
- Describe correctamente el ciclo de formación de creatinina, en relación con el campo
de trabajo
3.- MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS.-
Micropippetas 10 ul
tubos de hemolisis
Gradillas
Agua destilada
Reactivo de creatinina
EQUIPOS
7
7
50
7
500 ml
1 kit

Stat Fax
Vortex
Cronometros
2
2
4
4.-TÉCNICA O PROCEDIMIENTO
Antes de hacer la prueba se debe desproteinizar el suero colocando en un tubo de centrífuga
0,7 ml de suero y 3,5 ml de ácido pícrico centrifugar 10 minutos a 10.000 r.p.m. y sacar el
sobrenadante. Diluir además la orina 1:50 con agua destilada.
orina
D suero
Desproteinizad
o
______
__
_______
___
_____________
_
3 ml
Estándar ______
___
0,5 ml _____________
_
_______
Orina diluida ______
___
_______
___
0,5 ml _______
_
Agua destilada 1 ml 0,5 ml 0,5 ml _______
_
Ácido pícrico 2 ml 2 ml 2 ml _______
_
Buffer 0,5 ml 0,5 ml 0,5 ml 0,5 ml
La creatinina reacciona con el picrato alcalino en medio tamponado previa desproteinización
con ácido pícrico obteniéndose un cromógeno que se mide a 510 nm.
100 Minutos
Una vez obtenidas las lecturas deberán reemplazarse los datos en la siguiente fórmula para
calcular la concentración de creatinina sérica en mg/dl.

Concentración de crea =-------------------------------------- x concentración del
Para calcular la creatinina en orina reemplazar las lecturas en la siguiente fórmula:
Absorbancia orina
Concentración de crea =-----------------------------x 0,02g/L x 50 x V (L) En orina g/24 hrs
Para el cálculo del clearance de creatinina reemplazar los datos en la siguiente fórmula:
Creatinina en orina g/24 horas
DCE ml/min = --------------------------------- x 694 ml/min
. Creatinina en suero mg/l
Interpretar los resultados obtenidos y relacionarlos con patologías si es pertinente.
7.- CUESTIONARIO.-
1. ¿Cómo se forma la creatinina?
2. ¿En qué casos hay creatinemia elevada?
3. ¿Qué ocurre en casos de creatinemia elevada?
4. ¿Qué es una diálisis?
5. ¿Qué es la insuficiencia renal?

Práctica No. 9
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE ACIDO URICO
El ácido úrico es un metabolito de las purinas, ácidos nucleicos y Nucleoproteínas.
Habitualmente la concentración de ácido úrico en suero varía de un individuo a otro de
acuerdo a diversos factores tales como: sexo, dieta, origen étnico, constitución genética,
embarazo.
Niveles anormales de ácido úrico en suero son índice de desorden en el metabolismo de las
sustancias que lo originan o de defectos en su eliminación.
2.- COMPETENCIA (S).-
- Determina ácido úrico en suero sanguíneo de acuerdo a diversos factores tal cómo:
sexo, dieta, origen étnico, constitución genética, embarazo.
- Relaciona los valores obtenidos con patologías que se presentan en el campo de
trabajo del profesional
- Conoce el ciclo metabólico de formación de ácido úrico relacionado con el metabolismo
de las sustancias que lo origina o de los defectos en su alimentación.
Micropippetas 10 ul
tubos de hemolisis
Gradillas
Agua destilada
Reactivo de acido urico
EQUIPOS
Stat Fax
7
7
50
7
500 ml
1 kit
2

Vortex
2
4.-TÉCNICA O PROCEDIMIENTO
Marcar tres tubos de ensayo y proceder según el siguiente esquema para la determinación
de colesterol
Estándar 50 ul Suero _________ 50 ul
Reactivo de trabajo 2,5 ml 2,5 ml 2,5 ml
Incubar 15 minutos en baño María a 37 grados una vez desarrollado el color leer en el
espectrofotómetro a 505 nm las respectivas absorbancias (densidades ópticas).
El ácido úrico del suero por acción de la uricasa se transforma en alantoína y peróxido de
hidrógeno, en una segunda reacción éste con el reactivo de trabajo forma una quinona rosa.
5.-TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA
100 Minutos
Determinar la concentración de ácido úrico en el suero sanguíneo con la siguiente relación
matemática:
Concentración de Acido úrico = -------------------------------------- x concentración del
Estándar
Absorbancia del Estándar
Conclusiones.- De acuerdo al resultado obtenido a que conclusiones podríamos arribar,
explique porqué, sabiendo que los niveles de ácido úrico tienen valores referenciales entre
4,5 y 6 mg/dl.
7.- CUESTIONARIO.-
1.- ¿Cuales son las principales causas de hiperuricemia?
2.- ¿Qué es la gota?
3. ¿Cuál es el ciclo de formación del ácido úrico?
4.- ¿Cómo se bajan los niveles de ácido úrico?

Práctica No. 10
DETERMINACION DE PROTEINAS TOTALES Y SUS FRACCIONES
1. COCOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO
Existen en el suero humano más de 125 conocidas con múltiples funciones: transportadoras,
pro enzimas, inhibidores enzimáticos, anticuerpos y factores de coagulación. Mediante
electroforesis del suero podemos separar las distintas fracciones de éstas proteínas.
Las proteínas totales están constituidas por dos fracciones fundamentales la albúmina y las
globulinas.
La fracción albúmina es fundamental para la nutrición del organismo es la responsable de la
presión osmótica y actúa como transportadora de múltiples sustancias plasmáticas. La
fracción globulina está formada por varias proteínas entre ellas las inmunoglobulinas.
La determinación de la albúmina y globulinas por electroforesis es de un valor incalculable
para el diagnóstico de patologías relacionadas con la alteración de proteínas en el organismo.
2. COMPETENCIA (S)
- Determina albúmina y globulinas en suero sanguíneo que se presentan en pacientes con
problemas clínicos.
- Relaciona los valores obtenidos con patologías que les presentan en el campo de trabajo
del profesional.
- Conoce las principales globulinas y sus funciones que se relacionan en el campo de trabajo
del profesional.
- Interpreta correctamente un proteinograma para la solución de problemas que se
presentan en el campo de trabajo del profesional
3. MATERIAL Y REACTIVOS.
Micropippetas 20 ul
Micropippetas 10 ul
tubos de hemolisis
Gradillas
7
7
7
70
7

jeringas 5 ml
tubos secos tapa roja
ependorf
Alcohol
Agua destilada
Reactivo de Proteinas totales
Reactivo de Albumina
Torniquete
pipetas 5 ml
frascos de vidrio con hipoclorito al 0,5 %
EQUIPOS
Stat Fax
Vortex
Cronometros
Centrifuga
7
15
15
100 ml
500 ml
1 kit
1 kit
7
15
4
2
2
4
1
4. TECNICA O PROCEDIMIENTO.
Marcar tres tubos de ensayo y proceder según el siguiente esquema para la determinación
de proteínas totales
Reactivo 3,5ml 3,5ml3,5ml
Suero -------- --------- 50 ul
Estándar -------- 50ul ---------
Agitar ligeramente e incubar en Baño Maria a 37 grados centígrados 15 minutos al cabo de
ópticas).

Para la determinación de la fracción de albúmina proceder de la siguiente manera:
Reactivo 2ml 2ml2ml
Suero -------- --------- 20 ul
Estándar -------- 20ul ---------
Incubar a temperatura ambiente por diez minutos al cabo de los cuales cuando se haya
desarrollado el color se leerá en el espectrofotómetro a 630 nm las respectivas absorbancia
(densidades ópticas).
5. TIEMPO DE DURACION DE LA PRACTICA
100 minutos
6. MEDICION,CALCULO Y GRAFICAS
Determinar la concentración de proteínas totales y albúmina en el suero sanguíneo con la
siguiente relación matemática:
Concentración de glucosa = -------------------------------------- x concentración del Estándar
Absorbancia del Estándar
CONCLUSIONES.
sabiendo que los niveles de proteínas tienen la siguiente interpretación.
Proteínas totales = 7 – 8 g/dl, aunque los pacientes en cama más de dos semanas presentan
valores de aproximadamente un gramo menos.
Albúmina = 3,5 – 5,5 g/dl
Globulinas = 1,5 – 3 g/dl
En el proteinograma la relación es la siguiente:
Albúmina 45 – 55%
Globulina alfa 1 5 – 8 %
Globulina alfa 2 8 – 13%
Globulina beta 11-17 %
Globulina gamma 15 – 25%
7. CUESTIONARIO.

1. Cuáles son las principales causas de hiperproteinemia?
2. Cuáles son las principales causas de hipoproteinemia?
3. Que otras pruebas se utilizan para relacionar niveles elevados de proteínas, porqué?
4. Cuáles son las principales globulinas y sus respectivas funciones?
5. Cuándo se presenta edema y porqué?
6. Cuáles son los síntomas y signos de la desnutrición, porqué?

Práctica No. 11
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE PROTEINAS EN ORINA DE 24 HRS. Y
DEPURACION DE CREATININA
1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO.
La determinación cuantitativa de la proteinuria es muy importante mucho mas que una prueba
cualitativa ya que esta nos proporciona el dato exacto que ayudara en el diagnostico y
tratamiento de diversas patologías renales.
La función del riñón es regular el equilibrio ácido básico, excretar productos de desecho del
metabolismo proteico hormonal como también formar orina.
La función de excretar depurar los líquidos extracelulares corporales es de relativa
importancia , ya que un pequeño volumen de plasma se filtra por la membrana glomerular
pasa por los tubos y es resorbido hacia la sangre quedando en los tubulos renales las
sustancias de desecho.
La funcionalidad del riñón puede determinarse con las pruebas de depuración siendo la más
determinada la de Creatinina.
2. COMPETENCIA (S).
• Realiza la cuantificación de proteínas en una muestra de orina de 24 hrs., ya que
proporciona datos exactos que ayudaran en el diagnóstico y tratamiento de pacientes
clínicos.
• Realiza la cuantificación en relación a un estándar conocido, a través de la resolución
de problema que se presentan en el campo de trabajo
• Relaciona los resultados con las diferentes patologías renales, en problemas clínicos
y asume tratamientos de diversas patologías renales.
• Determina de la depuración de la Creatinina, que se presenta en el campo de trabajo
del profesional
• Determina de la depuración de la Creatinina en una persona sana, a través de
diagnóstico y detección de posibles problemas.
• Determina de la depuración de la cretinina en un enfermo en función de excretar
depurar los líquidos extracelulares corporales es de relativa importancia, ya que un
pequeño volumen de plasma se filtra por la membrana glomerular pasa por los tubos
• Relaciona en ambos casos, para la solución de problemas que se presentan en el
campo de trabajo del profesional.

3.- MATERIAL ,REACTIVOS Y EQUIPOS.-
Micropippetas 10 ul
tubos de hemolisis
Gradillas
Agua destilada
Reactivo de creatinina
Reactivo Proteinuria
Probetas 1000 ml
Probetas 100 ml
EQUIPOS
Stat Fax
Vortex
Cronometro
7
7
70
7
500 ml
1 kit
1 kit
7
7
2
2
4
proteinuria
Suero ------ ------ 20 ul
Estándar ------ 20 ul -------

ópticas).
4.-TECNICA O PROCEDIMIENTO : depuración de creatinina
La Creatinina reacciona con el picrato alcalino obteniéndose un color amarillo anaranjado
que se lee a 510 nm.
Emplearemos el método cinético donde la velocidad de esta reacción ,bajo condiciones
controladas se comporta como una reacción cinética de primer orden, esta reacción mejora
su especificidad notablemente debido a que entre 0 y 20 segundos reaccionan los
compuestos de jaffe positivos rápidos ( ácido ascórbico, piruvato, acetonas, glucosa ácido
úrico) entre 20 y 80 segundos reacciona la Creatinina y pasado este tiempo reaccionan los
Jaffe positivos lentos como las proteínas totales , acido acético antibióticos. De esta manera
mejora la especificidad de la reacción de Jaffe y tiene la ventaja de no desproteinizar.
En pacientes diabéticos en coma ácido cetosico no es recomendable por que junto a la
Creatinina reacciona el piruvato , alfa cetoglutarico, ácido acetoacetico y oxaloacetato.
DEPURACIÓN DE LA CREATINA.
a)Calculo de la superficie corporal.
– Pesar y medir al paciente.
– Interpolar en el nomograma o calcular la superficie corporal del
paciente aplicando la formula
a) Procedimiento.
- Mezclar la orina y medir el volumen.
- Diluir la orina con agua destilada de acuerdo a instrucciones del reactivo.
- Determinar la Creatinina en orina y en suero.
- Calcular la concentración en mg/l en suero y orina teniendo en cuenta en esta ultima
multiplicar por la dilución.
100 Minutos
6.- MEDICION, CALCULOS Y GRAFICOS.- Se debe interpolar o realizar el cálculo
multiplicando por un factor.
Concentración st ------------------------------- factor.
Dost
Factor x DOm
Valores de referencia:

Proteinuria hasta 20 mg/dl.
Proteinuria 24 hrs hasta 300 mg/día.
DEPURACION DE CREATININA
Si las muestras tienen valores superiores a 250 mg/dl se las debe diluir y multiplicar el
resultado por la dilución.
.
Elaborar el informe de acuerdo a los resultados obtenidos.
Se debe informa el resultado de creatina en orina de 24 hrs (mg/ml)
Volumen de la orina = ml/ min calculado a partir de los ml de diuresis en 24 hrs dividido en
l440 los minutos en 24 hrs.
Creatinina en suero = mg/dl 1.73 valor de la superficie corporal en m2 para 70 kg de peso
corporal y la superficie real del paciente S .
Creatina de 24 hrs x volumen de orina x 1.73
---------------------------------------------- --------
Creatina serica S
Otra forma de calculos:
DCE ml/min = Creatina en orina de g/24 hrs x 694 ml/min.
-------------------------------------- -----------------
Creatinina en suero mg/l
Donde:
694 ml/min = g/24 hrs x 1000 mg x 1000 ml = 1000.000 ml
------------- ---------------------- -------------------
mg/l 1mg x 1440 min 1440 min.
VALORES DE REFERENCIA 80- 140 ml/nin
7.- CUESTIONARIO
1. ¿Qué utilidad tiene realizar una proteinuria de 24 horas?
2. ¿Que patologías se pueden diagnosticar con la proteinuria de 24 horas?

Práctica No. 12
EXAMEN GENERAL DE ORINA
(FISICO Y QUIMICO)
El examen general de orina constituye un paso de primordial importancia en las patología
renales. Ayudando en el diagnostico con una variedad de datos referentes a enfermedades
renales como metabólicas o sistémicas El examen general de orina comprende:
- Examen Físico.
- Examen químico.
- Examen microscópico del sedimento urinario
2. COMPETENCIA (S).
- Realiza el examen físico de orina: volumen, color, olor, aspecto, pH, densidad,
espuma.
- Define el aspecto de la orina.
- Enumera la terminología común empleada para informar el aspecto y el color
- Reconoce volúmenes urinarios diarios normales y anormales.
- Define la densidad e indicar su importancia.
- Determina el pH. A través de la resolución de problemas que se presentan en el campo
de trabajo del profesional
3. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS.
Tubos de conicos 13 ml para orinas
probetas 100 ml
Gradillas grandes
papel tornasol
urodensimetro
Tiras de orina
Portaobjetos
Cubreobjetos
20
20
7
1 kit
15
20
50
50

frasco p descho material biologico 1 litro
frascos de orina
Micropipetas 20 ul
EQUIPOS
Centrifuga
Microscopio Olimpus
5
10
7
1
15
4. TÉCNICA O PROCEDIMIENTO.
Recolección de la muestra:
- Preferencia la primera micción de la mañana, previo aseo de los genitales, en un volumen
de por lo menos 50 ml.
- Recipiente perfectamente limpio, seco y transparente .en el caso de niños la muestra se
obtienen con colector de plástico volumen suficiente 2 ml.
- Identificar la muestra colocando una etiqueta que mencione el nombre del paciente, sexo
y fecha.
- Procesar lo más pronto posible y las determinaciones se deben realizar dentro de las 2
primeras horas.
EXAMEN FISICO.
Se efectúa de forma visual de la orina teniendo en cuenta los siguientes parámetros.
- Volumen: expresar en mililitros, vaciar la muestra mezclada a una probeta de 500 a
1000, medir el volumen
- Espuma: mezclar la muestra, haciendo movimiento circular y observar durante 30 seg.
durante 30 seg. a 1 minuto la formación y la persistencia de la espuma.
- Olor: abrir el frasco y percibir el olor.
- Aspecto y color: observar ambos parámetros en la muestra que está en la probeta.
- Densidad: calibrar el urodensímetro, este viene calibrado para una temperatura de 15
grados C, si al temperatura es mayor a 15 grados C sumar 0.001 a la lectura leída
por cada 3 grados y restas la misma cantidad cuando está por debajo. de esta
temperatura.
- Medir la densidad de la orina en la probeta. Introduciendo el urodensímetro, realizar la
lectura en el menisco inferior que forma el urodensímetro en contacto con la orina,
este no debe chocar la paredes ni el fondo de la probeta.

- pH medir con papel tornasol observando en cambio de color comparando con la escala
de colores que lleva este papel.
RECOMENDACIONES.
- El parámetro de la espuma no es muy exacto.
- Informarse si en paciente no está usando algún medicamento o esta menstruando para
así evitar cualquier confusión con el examen físico.
100 minutos
6.- MEDICION, CALCULOS Y GRAFICOS.
Informar en un formulario de dicho análisis. Relacionar los resultados obtenidos con el
diagnostico clínico en normalidad y patología.
7.- CUESTIONARIO
1. Indique las desventajas de la recolección de muestras de bolsas colectoras
2. Qué tipo de informe se emite del examen físico de orina?
EXAMEN QUÍMICO: Tiras Reactivas
El estudio químico comprende un estudio de los caracteres normalmente presentes y la
investigación y dosificación de elementos generalmente ausentes o presentes en pequeñas
cantidades.
Su determinación implica el manejo de las tiras reactivas, constituyendo un método rápido
cualitativo y semi cuantitativo con la finalidad de realizar un diagnostico precoz, aunque
requiera confirmación por métodos clásicos de laboratorio.
2. COMPETENCIA (S)
- Realiza el examen de orina, a través del estudio químico de los caracteres presentes
en la dosificación de elementos generalmente ausentes
- Realiza el examen físico, a través de la resolución de problemas que se presentan en
el campo de trabajo del profesional
- Realiza el examen químico con las tiras reactivas, en la realiza con de un examen físico
de situaciones que se presentan en el campo de trabajo del profesional.

probetas 100 ml
Gradillas grandes
papel tornasol
urodensimetro
Tiras de orina
Portaobjetos
Cubreobjetos
frascos de orina
Micropipetas 20 ul
EQUIPOS
Centrifuga
Microscopio Olimpus
20
20
7
1 kit
15
20
50
50
5
10
7
1
15
4. TÉCNICA O PROCEDIMIENTO
a) Examen físico. Realizar como en anteriores prácticas.
b) Examen químico.
- Sumergir completamente la tira reactiva en la orina.
- Retirar la tira en forma inmediata, no tocar las áreas reactivas.
- Comparar las áreas reactivas con la carta de colores del envase.
100 Minutos
7.- MEDICION CALCULOS Y GRAFICOS.
Los resultados obtenidos se informan de acuerdo a las especificaciones del fabricante.

Reportar los resultados obtenidos en formulario adjunto.
INTERPRETACIÓN.
Relacionar la clínica con los resultados del laboratorio en condiciones normales y
patológicas, al mismo tiempo correlacionando el examen físico con el químico.
LABORATORIO CLINICO “UNIVALLE”
Nombre.......................................................................................................................
……………...
Medico
Solicitante............................................................................................................................
Fecha de Solicitud:......................................................................
……………………………………..
UROANALISIS
Examen
físico………………………………………………………………………………………Normal.
Color: ..................................................................................................................... Amarillo
Ámbar
Olor: ..............................................................................................................................Sui
géneris.
Aspecto..............................................................................................................................
Límpido.
Reacción: ........................................................................................
pH..........................................
Densidad........................................................................................................................1012-
1020.
EXAMEN QUÍMICO.
Proteínas....................................................................................... No contiene.
Sangre............................................................................................ No contiene.
Glucosa......................................................................................... No contiene.

Acetona...........................................................................................No contiene.
Urobilinógeno.................................................................................0.1 – 1 U.Erlich/ 100 ml.
Bilirrubina...................................................................................... No contiene
Nitritos.......................................................................................... No contiene
EXAMEN MICROSCOPICO.
Células epiteliales........................................................................ x
campo.
Leucocitos……………………………………………………………..x campo
Piocitos........................................................................................x campo.
Eritrocitos.....................................................................................x campo.
Cantidad de bacterias..................................................................
Cristales....................................................................................
Cilindros...................................................................................
Otros....................................................................................
OBSERVACIONES...............................................................
7.- CUESTIONARIO
1.- ¿Que parámetros miden las tiras reactivas?
2.- ¿Qué importancia tiene realizar un examen químico de orina?
EXAMEN QUÍMICO: Métodos Clásicos

Estos métodos tienen la misma finalidad que las tiras reactivas constituyendo un método de
confirmación y de control de calidad de las mismas.
2. COMPETENCIA (S)
- Conoce la importancia de los métodos clásico de laboratorio en el diagnostico de las
enfermedades renales.
- Realiza los métodos clásicos para la determinación de glucosa y proteína, pigmentos
biliares, ácidos biliares, sangre y acetona.
- Correlaciona los resultados del examen físico y químico, a través de la resolución de
problemas que se presentan en el campo de trabajo del profesional
probetas 100 ml
Gradillas grandes
papel tornasol
urodensimetro
Tiras de orina
Portaobjetos
Cubreobjetos
frascos de orina
Micropipetas 20 ul
EQUIPOS
Centrifuga
Microscopio Olimpus
20
20
7
1 kit
15
20
50
50
5
10
7
1
15

EXAMEN FISICO.
- Realizar como en la anterior práctica.
EXAMEN QUIMICO
a) Determinación Cualitativa glucosa urinaria.
- En un tubo de ensayo colocar l ml del reactivo A de Fehling y l ml del reactivo Fehling
B. - Añadir o.5 ml de orina filtrada.
- Calentar a ebullición en un mechero.
- Observar cambio de color de azul- verde –rojo ladrillo. - Informar por cruces.
b) Determinación cualitativa de proteínas .Método de Purdy.
- Colocar en un tubo de ensayo 10 ml de orina filtrada.
- Agregar 5-8 gts de ácido acético al 30%.
- Mezclar y calentar la mitad superior del tubo a la llama del mechero.
- Enturbiamiento significa positivo. Informar por cruces.
c) Determinación Cualitativa de Pigmentos biliares: Método de Grimbert.
- Colocar en un tubo de ensayo 10 ml de orina y 5 ml de cloruro de Bario al 10%.
- Agitar y filtrar.
- Lavar el precipitado con 1ml de agua destilada.
- Pasar el embudo a un tubo de ensayo limpio , romper el papel y arrastrar el precipitado
con 5 ml de solución alcohólica de HCL al 5% , llevar a baño Maria hirviente durante
un minuto.
- Si existe pigmentos biliares al ebullir aparecerá un color verde.
- Si se obtiene coloración parda, agregar 2 gts de agua oxigenada y calentar
nuevamente a baño Maria.
d) Determinación cualitativa de ácidos biliares. Método de hay.
- Colocar orina en un vaso d precipitado y espolvorear flor de azufre. - Si existen
ácidos biliares el azufre cae rápidamente al fondo.
e) Determinación cualitativa de Sangre. Método de Piramidon al 1%.
- Colocar 3 gts de agua oxigenada y 3 gts de ácido acético glacial en un tubo de ensayo.
- Añadir 0.5 ml de orina y 5 gotas de piramidon al 1%.
- Si tiene sangre aparecerá color violeta.
f) Determinación Cualitativa de acetona. Método de Imbert.

- Colocar 5 ml de orina en un tubo de ensayo.
- Añadir 10 a 20 gotas del reactivo de Imbert ( 5 g de nitroprusiato de sodio disueltos en
100 de ácido acético al 50%).
- Mezclar y añadir por la paredes amoniaco de modo que se forme una capa sobre la
orina.
- Si es positivo para acetona se formara un anillo rojo violáceo.
5. TIEMPO DE DURACION DE LA PRACTICA
100 minutos
6.- MEDICION CALCULOS Y GRAFICOS.
Reportar los obtenidos en el formulario modelo.
INTERPRETACIÓN: Correlacionar el examen químico y físico.
7.- CUESTIONARIO
1.- ¿Qué importancia tiene realizar el examen químico?
2.-¿Que patologías se pueden detectar con el análisis químico de orina?

Práctica No. 13
EXAMEN GENERAL DE ORINA (SEDIMENTO)
La orina contiene elementos insolubles que incluyen: eritrocitos, leucocitos, cilindros, células
epiteliales, bacterias y levaduras, parásitos, moco, espermatozoides, cristales, algunos de
ellos tienen significado clínico y otros se consideran normales a menos que se encuentren
en cantidades elevadas.
Este examen debe incluir identificación y cuantificación de los elementos presentes, ya que
se encuentran en suspensión (células, cristales, etc.). Estos elementos se concentran por
centrifugación y se investigan en una gota de sedimento al microscopio en orinas recién
emitidas y procesadas sin demora.
3. COMPETENCIA (S)
• Realiza el examen microscópico de orina, que contiene elementos insolubles que
incluyen leucocitos, cilindros, células epiteliales, bacterias y levaduras, parásitos,
moco, espermatozoides, cristales, algunos de ellos tienen significado clínico y
otros se consideran normales a menos que se encuentren en cantidades
elevadas.
• Realiza el examen físico, para la resolución de problemas que se presentan en relación
con el campo de trabajo del profesional
• Realiza el examen químico, donde debe incluir identificación y cuantificación de los
elementos presentes en la suspensión de células, cristales y otros elementos.
• Realiza el examen microscópico de sedimento, a través de la resolución de problema
que se presentan en el campo de trabajo del profesional.
• Reconoce los diferentes elementos químicos que se presentan en el análisis de la
orina.
Tubos de conicos 13 ml para orinas 20

probetas 100 ml
Gradillas grandes
papel tornasol
urodensimetro
Tiras de orina
Portaobjetos
Cubreobjetos
frascos de orina
Micropipetas 20 ul
EQUIPOS
Centrifuga
Microscopio Olimpus
20
7
1 kit
15
20
50
50
5
10
7
1
15
Examen Microscópico del sedimento.
- Mezclar la muestra y colocar aproximadamente 5 a 10 ml de orina en un tubo de
centrífuga.
- Centrifugar 2000 rpm durante 5 minutos.
- Desechar el sobrenadante y resuspender con la gotitas de las paredes del tubo.
- Dar golpecitos en la pete inferior del tubo para mezclar.
- Colocar una gota del sedimento en un portaobjeto limpio y cubrir con un cubreobjetos.
- Observar al microscopio primero con menor aumento (10X) y luego cambiar a un
aumento mayor (40 X).
Se observara cilindros, cristales y otros dando una estimación de su numero por campo
observado.
Los eritrocitos, leucocitos y células epiteliales se cuentan con el de mayor aumento y se
informa el número promedio de 10 a 15 campos leídos.

5.- TIEMPO DE DURACION DELA PRACTICA
100 Minutos
6.- MEDICION. CALCULOS Y GRAFICOS
Elaborar el informa en función con los resultados obtenidos en la practica.
Relacionar la clínica y el laboratorio
INTERPRETACIÓN.
Relacionar la clínica con los resultados del laboratorio en condiciones normales y
patológicas, al mismo tiempo correlacionando el examen físico con el químico.
LABORATORIO CLINICO “UNIVALLE”
Nombre.......................................................................................................................
Medico
Solicitante............................................................................................................................
Fecha de Solicitud:......................................................................
……………………………………..
UROANALISIS
Examen
físico………………………………………………………………………………………Normal.
Color: ..................................................................................................................... Amarillo
Ámbar
Olor: ..............................................................................................................................Sui
géneris.
Aspecto..............................................................................................................................
Límpido.
Reacción: ........................................................................................
pH..........................................

Densidad........................................................................................................................1012-
1020.
EXAMEN QUÍMICO.
Proteínas....................................................................................... No contiene.
Sangre............................................................................................ No contiene.
Glucosa......................................................................................... No contiene.
Acetona...........................................................................................No contiene.
Urobilinógeno.................................................................................0.1 – 1 U.Erlich/ 100 ml.
Bilirrubina...................................................................................... No contiene
Nitritos.......................................................................................... No contiene
EXAMEN MICROSCOPICO.
Células epiteliales........................................................................ x
campo.
Leucocitos……………………………………………………………..x campo
Piocitos........................................................................................x campo.
Eritrocitos.....................................................................................x campo.
Cantidad de bacterias..................................................................
Cristales....................................................................................
Cilindros...................................................................................
Otros....................................................................................
OBSERVACIONES...............................................................
7.- CUESTIONARIO

1.- ¿Qué importancia tiene realizar el examen microscópico de orina?
2.- ¿Como se relaciona el examen microscópico con el examen físico y químico?

Práctica No. 14
ANALISIS CITOQUIMICO DE LIQUIDO CEFALORRAQUIDEO
I. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO. El Liquido Cefalorraquídeo es el tercer líquido
mas importante del cuerpo y proporciona un sistema fisiológico para abastecer de nutrientes
al tejido nervioso, eliminar los desechos metabólicos, y producir una barrera mecánica que
amortigua al cerebro, y medula espinal contra traumatismos.
La barrera hematoencefalica con su sistema de membranas entre vasos sanguíneos y el
LCR , impide el paso de bacterias y toxinas a este.
El análisis del LCR es importante para la investigación de las patologías y por obtener
resu7ltados que ayudaran ene l diagnostico de lasmiasmas. El análisis del LCR comprende:
a) Físico.
b) Químico.
c) Citológico.
d) Bacteriológico
Estos exámenes se deben realizar dentro del tiempo de 1 hora especialmente el citológico.
2. COMPETENCIA (S).
- Efectúa el análisis del LCR. A través de la resolución de problemas que se presentan en
el campo de trabajo del profesional
- Efectúa el análisis físico de LCR. en la resolución de problemas que se presentan en el
campo de trabajo del profesional
- Efectúa el análisis químico, en la determinación del líquido cefalorraquídeo en el
resolución de problemas clínicos
- Efectúa el análisis citológico, en la resolución de problemas
- Relaciona con las diferentes patologías con los resultados obtenidos.
3. MATERIAL, REACTIVOS Y EQUIPOS.
Tubos de stat fax
Gradillas para tubos pequeños
Tips
Tiras de orina
Portaobjetos
70
7
30
50

Cubreobjetos
Camara de NewBauer
frasco para desecho material biologico 1
litro
Micropipetas 20 ul
Micropipetas 10 ul
Micropipetas 1000 ul
REACTIVOS
Reactivo de GLUCOSA
Reactivo de Proteinas en orina
Reactivo de Proteinas totales
Reactivo de LDH
Reactivo de turk
Agua destilada
Solución fisiologica
EQUIPOS
Centrifuga
Microscopio Olimpus
Stat Fax
Vortex
Cronometros
50
7
2
7
2
7
1 kit
1 kit
1 kit
1 kit
1000 ml
100 ml
1
10
3
1
2
4. TECNICA O PROCEDIMIENTO

1.- Toma de muestra.- Realizada por el médico 2.-
Procesamiento de la muestra.
a) Examen Físico. Mediante observación determinar:
• Aspecto.
• Color
• Volumen
.
b) Examen químico.-
Determinación cualitativa de las globulinas.-La elevación de la otra fracción proteica las
globulinas se considera patológica que se puede detectar mediante reacciones cualitativas
Ninguna de las reacciones que se citaran son aplicables a líquidos que tienen sangre. La
contaminación bacteriana intensa puede dar reacciones positivas falsas.
Reacción de Nonne Apelt Shumm.-
Reactivo.- Sulfato de amonio p.a 85 g. Se disuelve en 100 ml de agua destilada caliente, se
deja enfriar y se filtra, este debe ser claro y transparente.
Técnica.-
En un tubo se mide 0.5 ml de LCR, se añade igual volumen de reactivo mezclar un minuto,
dejar en reposo 3 minutos y leer la reacción sobre fondo oscuro para evitar la producción de
burbujas
Interpretación según la opalescencia se da la lectura.
Preparación del Reactivo
Pandy.-
- 10 g de fenol cristalizado
- H2O destilada hasta completar a 100 ml agitar enérgicamente y mantener en
la estufa durante 2 a 3 días a 37 grados con un pipeta tomar el sobrenadante.
Técnica-.En un tubo se coloca 1 ml del reactivo y una gota de LCR se mezcla .Se lee a los
3 minutos .Los líquidos normales no producen enturbiamiento o sola ligera turbiedad mientras
que los líquidos anormales presentan grados de turbiedad lechosa..
Determinación cuantitativa de proteínas.-
a) Método Turbidimetrico.-

Fundamento.- La concentración de proteína en LCR se mide con ácido sulfosalicilico
a 640 nm.
Procedimiento.-
- Pipetear 1.5 ml del reactivo en dos tubos de ensayo.
- Adicionar 0.5 ml del sobrenadante de LCR centrifugado a un tubo y al otro nada
(blanco).
- Dejar a temperatura ambiente 5 minutos.
- Medir la absorbancia a 640 nm contra blanco.
Cálculos.-
Preparar una curva de calibración como en la técnica de orina e interpolar las absorbancia
de las muestras en esta curva. Expresar los resultados como mg /dl.
Valores de referencia. 10.0 – 45.0 mg/dl.
Determinación cuantitativa de glucosa.-
Método enzimático. Según técnica del reactivo comercial.
Valores de referencia: 45- 72 mg/dl.
c) EXAMEN CITOLOGICO.- Leucocitos.
Recuento celular.- Se debe efectuar dentro de la primera hora de extracción se debe
emplear la muestra con anticoagulante .Para el recuento se emplea cámara de Fush
Rosenthal, la de Nageotte y la cámara de Neubauer.
Reactivo. Liquido de dilución:
Cristal violeta 0.2 g
Ácido acético glacial 10 ml
H2O destilada 90 ml
Una vez disuelto se debe filtra.
Técnica.- Se homogeniza el LCR por agitación y con una pipeta de glóbulos blancos se
aspira hasta la marca 1 con el líquido de dilución y luego con el LCR hasta 11 se mezcla
bien ,se carga a la cámara , se deja en reposo unos minutos y se realiza el recuento con
débil aumento.

Calculo. Se cuenta todas las células contenidas en los 9 cuadrados grandes; el número de
células se divide por 9 y el resultado se multiplica por 10 para obtener el valor en l mm3.
Recuento diferencial.-
Técnica.- se centrífuga una muestra reciente se vierte el liquido sobrenadante y se hace
extendidos sobre un portaobjetos se deja al aire y se colorea se cuenta linfocitos, granulositos
neutrófilos, segmentados células endoteliales.
100 minutos
Elaborar un informe con los resultados obtenidos.
7.- CUESTIONARIO
1.- En que patologías se realiza el examen de Liquido Cefalorraquídeo?
2.- Como se debe emitir un informe de Liquido Cefalorraquídeo?

Práctica No. 16
ANALISIS CITOQUIMICO DE LIQUIDOS BIOLOGICOS
Llamado también líquido articular, es un liquido viscoso presente en los espacios articulares.
Se forma como un ultra filtrado del plasma a través de la membrana sinovial
Hacia el cual es secretado un muco polisacárido que contiene ácido hialuronico y una
pequeña cantidad de proteína, secretada por las células de la membrana sinovial
El estudio del liquido sinovial constituye uno de los exámenes del laboratorio más
importantes en el diagnostico de las enfermedades articulares Comprende.
a) Examen Físico.
b) Examen químico.
c) Examen microscópico.
2. COMPETENCIA (S).
• Efectúa el examen cito químico del líquido sinovial, a través de la resolución de problemas
que se presentan en el campo de trabajo del profesional
• Realiza el estudio físico del líquido sinovial, en la resolución de casos
• Realiza el estudio químico del líquido articular, es un líquido viscoso presente en los
espacios articulares. Se forma como un ultra filtrado del plasma a través de la membrana
sinovial
• Realiza el estudio microscópico, del estudio del líquido sinovial constituye uno de los
exámenes del laboratorio más importantes en el diagnóstico de las enfermedades
articulares
• Relaciona los diferentes estudios con las diferentes patologías y asume procedimientos de
resolución de casos.
3.-MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS
Tubos de stat fax
Gradillas para tubos pequeños
Tips
Tiras de orina
Portaobjetos
70
7
30
50

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