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VOL.4 NO. 1 REVISTA CIENTIFICA
EDICION ESPDCiAL
INSTITUTO DE TNVESTIGACiONES QUíMICAS Y BIOLÓGICAS
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y FARMACIA
UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE CUATEMAI-A
ACTIVIDAD MICOBACTERICIDA DD 1.I EXTRACTOS DE PLANTAS
MESOAMERICANAS UTILIZADAS POPULARMENTE EN INFECCIONES
PULMONARXS
Quiñónez Sq Saaayoa M. c¿rcía V Cáceres A. Matta V
Escuela de Química Biológica, Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia, Universidad de S¡¡ C¡rlos de cuatemala.
RESUMEN
La lüberculosis pulmonar es una e¡femedad inlecciosa, provocada en la mayor par'le de casos pot Mrcobacteiun
¡¡¡¡¿z,l¿,rir, ln cu¿1 se trasmite pdncipalmente pü contacto interpersonal íniimo a tmvés de la inh¡l¡ción de ai¡e con
p¿nículas infectadas, rara vez se adquiere por ingestión o hendas cutáneas. Su comienzo suele ser insidioso. manifesrando
síntomas inespecíftcos como malestar general. pérdida de peso. tos y sudoración noc¡uma. El diag¡óstico se basa en tas
manifest¡ciones cltuicas, radiológicas y de ¿na¡omíapa¡ológic¡ las que son muy inespecíficas y en la confirmación medianre
téc¡icas b¿cteriológicas y se¡oklgicas. Su tratamien¡o se fundamenta en la asociación de los tármacos para evit¿r la selección
de resistencia y la necesidad de fatamientos prolongador p ¿ poder matar a todos 1os bacilos en sus diferentes fases de
En este estudio se determinó 1a actividad micobactericida de cato¡ce plantas uriliz3das popul¡mente en i¡lecciones
pulmonares. Los extractos et¿nó1icos xtilizados fueror Cecrapia obrusífolia B¿folini (gu¿rumo), Br¡r era sinanba (pala
jiote), Gltdzuna ulnifolia (cavlote), Brtnnína crussí¡otia (nance), Hruenaed coutbail (gnapi1ol), Sida tha biiotia
(escobillo) S¿¡¿¿to rdltsrus (cltilca), Sohnun tonum /1aaptatos), Dotenia confn¡ena (coaÍahterba), Baüsai útrea
slrr¿ (bouga¡viile¿). S.r,'? bucus nerica aPlesl. Gaúco).Acacid.f.¡mesía awiÍd. (stúin), Litsea suatem¿l¿r.!¿r Mez (taurel)
y Liquidambar sdrdtifluü L. (liquidámb¿r).
La evaluación se realizó por medio del bioensayo cokJrimétrico de b¡omuro 3 (4.5 dinerilriaz o1-2-y l) 2,5 difenil
tetrazolio 64TT), en el cual el canbio de coloración de los pozos permite establecer la prese¡cia de la acrividad micobactencida
dE los extractos. asícomo laconcentración en la que sepresenta. Se determinó queninguna de 1¿s plantas evaluadas presenró
actividad contra M. tuherculosís ATCC H31R¡ en u¡ rango de concenhación de 100 frg/ml a 6.52 ttgtmt. B. sinantba
prcsentó una concentración rnlnim¿ inhibitoria de 50 J-¡g/ml y lor extractos de S. me'icana, C.ob¡usibtiü, A.fanesiand, L.
Euatewile sis r L sryruciflua de 25 pglnl contra M. smegDatis ATCC 60'7.
INTRODUCCION
La ruberculosis es una e¡fermedad infeccios¿,
transmisible que es provocada por la bácteri¿
Mlcoboctetíum tuberculosis. Este es un bacib ácido
alcohol resiste¡te, aerobio. no esporulador de crecimie¡to
lenro y
'e.i"relre
rl Fío. coDgelacron ) Je.ec,,cidr. mu)
sensible:i cálor, Iuz sola¡ y ulúaüoleta. La ví¿p.incipal
de infección es l¡ inhalación de aire con partícul¡s
i¡fec¡adas que alcanz¿n la vía a&ea teminal, donde so¡
ingeridos por los macrófagos alveola¡es, los b¿cilos
comienzan a multiplicarse y destruyen las células
fagocíticas. Su sintomatología es inespecífic¡ por 10 que
no permite tomar 1as medidas necesarias iniciales p¿ra su
tratamiento (1-4).
El diagnóstico es bacteriológico y se basa
principalmente e¡ la baciloscopía y en casos nrás difíciles
es elcultivo. Son inpotantes 1os sig¡os caractefsticos de
la tubercülosis como la hemop¡isis y dolor toráxico y se
complementa con exámenes de gabinet€ como las
radiogafías que muesta lesiones en placas. principalnente
en zonas apicales posieriores (s-8).
La tuberculosis es una de las principales
enlermedades crónicas y opo¡tunisrás en Guatemala, según
la Orsanización Mundial de la Salud (OMS). Esta infección.
es 1a segu¡d¿ causa de morbilidad en la población
guatemalteca. E1 trat¿miento de la tüberculosis se
fundamenta en dos grandes bases bacteriológicas. la
asocíación de Io; fárm¿cos para evit¡r 1á selección de
I
VOL. 4 NO, I REVISTA CIENTÍF]CA
EDICTON ESPECIAL
INSTI'|UTO DE INVESTIGACIONES QUíMiCAS Y BIOLóGICAS
FACULTAD DE CIENCIAS QUfMICAS Y FARMACIA
IINIVF,RSIDAD DF, SAN CARLOS DE CUA'IEMALA
resistenciayla necesidadde trdamientos prolongados p¿r¿
poder m¿lar a todos los bacilos en sus diferentes fáses de
crecimienro. Los fá¡macos de p¡imera ]ínea para el
||ararxenro de Lr ruDerculo.i..on i.,n.¿,/id¿. Fh¡¡p,. in:r.
pirazinamida. et¡mbütol y eslreptomici¡a, los cu¿les se
administran duranre 6 a 8 meses (10,1 l).
El objelivo de este es cu¡ar la infecció¡, para 1{r cual
seprescriben dosis or¿1es dianas dedrogas núltiples hasta
que 1os resullados de los coltivos y 1as pruebas de
susceptibilidad a]'uden a orientar la selección de las drogas
a utiliz¿r ya que el uso de na únic¿ &oga €s de baj¿
prescripción, aumentando el aparecimiento de cepas
mutantes multiresistentes (1,2). La resistencia bacte¡iana a
uno o más de los medicamenlos aDtilxbercuiosos co¡stituye
un lacto¡ limita¡te para obtener la curación de cada pacie¡te
individualmente y por e¡de pa¡a er¿dicar la enfemedad
de l¡ comunid¿d: en 1óminos plácticos, este facror debe
ser consider¿do e¡ rehción con otros, que intervengan en
la eradicación de l¿ enfernedad con el objetivo de
deten¡inar su importancia relaliva y la mag¡itud de rccursos
neceiiarios pararesolver el problema (12).
La incidenci¿ y r¿pidez de1 surgimie¡to de cep¿s
mufttuesistentes a &ogas especialmente a 1a isoniazid¿ y
rifanpicina ha c¡eado una emergencia codr¿ la tuberculosis
a niel muldidl ) Lrge romJr 'r' nedid:r' nece'd ac parJ
'ra.J- lo,.doc de ruber.Jlo.. ) eir1r que qigJ
propagá¡dose 1a vari¿nte firmacoresistent. de esta
enternedad ( l3).
Debido la impo¡ta¡cia de esta entermedad se han
bü$cado tatamientos altemativos como la fitoterapia por
Io que se han repo¡tado varios estudios sobre nuevas
altemativas fitoterapéuticas. En Guatemala, Mánrique y
cols. en 1992 determi¡a¡on la acción antimicobacteriana
in ritto pot el mé¡odo de proporción de seis plantas
nedicinales concluyendo que ninguna de las seis plantas
mostraba una ¿ctividad micobac¡ericida i,¡ vir¡¿, sin
embargo estadísticamenre S¡da acuta B]uIn f., Eucabptus
slobulus L^bi1l. y AchiLlea nilleJolium L. presentaron
actiüdad b¿cteriostática l,1 rir¡{t a una concentración de
400 mg/ml. Figueroa en 2000, deteflni¡ó Ia actividad
antimicobactedana de extraclos de v¿.ias plantas.
concluyeDdo qre Pipü autítüm IfBK. Stachyratpheta
caJennetlsis F.ich. y EntenLobiun .Jcloscarpun I aca. so¡,
capaces de i¡¡ibir el crecimiento de cepas multiresisrenres
deM.t berc losis ínúrro ¿una concentracón de 2 mg/lnl.
10
Maza¡iegos y cols. en 2004 determinaron la actividad
micobactericida t¿ rr¡o por el micrometódo MTT de las
pla¡tas o,¿¡¿Lr crasifoLía Humb & Bonp]. y ¿
cwlascaryum con]úa M. tubeü:ulDsis con concentación
mínima i¡hibitori¿ de 25 pg/ml y 50 p"g/nr] respectivanente
(14 l6).
E1 presenie esludio i¡vesligó la actividad
aicobacte¡icida de los 14 ertactos etanólicos de los plantas
mesoaméricanas que son utilizadas popularmente en
infeccio¡es pulmonar€s frente al creciniento de M.
tubeL-ulasis y M. rn€gna¡ir. Esta evaluación se fealizó
por medio de nn bioensayo para delerminar su acrividad trl
rrr4 con base a la concentración inhibitoria mín;na (ClMl,
para Io cüal se ulilizó el reactlvo cromóforo 3-
(4.5dimetilti¡zo1-2-yl)-2,5 diferil blomuro de tetrazolio
(MTT) cotnoindicador de actividad contaestas baciedas.
Siendo el propósito principal el de encontrar altemaiivas
terapéuricas accesibles, seguras y eficaces para combatir
la tuberculosis, ya que 1os extractos de las plantas qüe
Fesenten una nenor CIM podrán ser de i¡terés pam r€alíza¡
futuros estudios químicos ¿fin de dilucidarlos compuestos
responsables de la rcrividad contr¿ éstas micob¿cte.i¡s.
Materiales y Métodos.
Por conve¡iencia se seleccionaron las pla¡tas B
simatuba, G. ulnifotia, B. crussilolia, H. couñaril, S
rhonbilolia, S. salignus, S. torvun, D. contrujena, B.
glabra, S. m¿icana P]esl., C o,¡tr¡folia Bartolini, ,4.
JamesianaNilld., L guatu alensis Me1 y L. stJraciflua
L. qüe son utiüzadas popularmente en el l¡atamiento de
infecciones respiratori¡s según encuesta existente en el
Dcpafamento de Citohistología de la Facultad de Ciencias
Químicas y Famacia de la Universidad de S¿¡ C¿rlos de
Guatemal¿ (T¿bla i).
Se l1evó ¡ cabo la colecta. secado, extncción y
concentración por rotavapor. del extracto etanólico de l¿
flor de B. sldrr.a y las hoj as de S. mexícana, C. obtusifolia,
A. fameliana, L. Suatenal¿tsir, mientras los oiros exa¿ctos
fueron proporcionados por el Departamento de
Citohistología.
Los extractos fueron preparados por medio de
ertracción con etanol al 957o posteriormente se realizó un
proceso de conce¡t¡ación en el rotavapor y por ultimo la
'OL,,I No. I REVISTA CIENTÍFICA
FDICION ESPEClAL
]NS'|TTUTO DE INVESTICACIONES QUÍI{ICAS Y BIOLóGICAS
FACULT¡D DE CIENCIAS QÜÍMICAS Y FARNIACIA
UNIVERSf)AD DE SAN CARLOS DE GU,TEMALA
Tabla 1. Plantas usadá¡ en el estudio Figura l. Distribución de los r€activo dentro de las
t t"hr.'s tn?.i.a nd Ptesl
t. nú ¡a o h tu if. L ¡ a ts aío nnl
ft^¿r R n¡na¡¿n
^
M.ez.
Lia ui¿a,ú ¿ t sdto¿iltud L
Se utilizó el micrométodo colo¡imétrico MTT par¡
determinar la actividad bactericida de M. tubetulosís
H3TRVydeM rrre8,¡d¡ts ATCC60T La lecturá se real izó
de m¿nerr visual. definiéndose 1á CIM como la me¡or
concentración del exlraclo do¡de el susrrato no cambio de
color y cuya intensidad fue igualo menor ala obtenida en
El tipo de estudio fue expe¡iment¡l con diseño ¡l azar'
La variable a estu{tíar fue la iúibición del crecimiento de
M. tubeftulosis y M. sme gh¿a¡tr producido por los exractos
deplantasusadas adistintasconcentraciones (100. 50,25'
12.5 y 6.25 pgnl). De acuerdo ¿la tabl¡ de la función de
dislribución acumulada de 1a probabilidad binomial. el
númerc mínimo de répücas realizadas debe ser 5 pa'a un
nivel a= 0.05 con cada concenlración de ambas bacle¡ias.
compamDdo 1os rcsült¡dos con un conrrol que no conlendrá
ningrn ripo de e -¡cro ) un corr'o de ihnor.rr¡
Resultados
E¡ el estudio se realizó la evalu¡ción in ritro de la
activjdad de extractos etaDólicos de l¿s planlas en contla
las cepas de M. ¡¡,¡.¡.¿l¿str H37Rv y M. r-¿gn ¡¡r ATCC
641.
Las cinco repeticiones de 1os ensayos co¡ M lró¿r'.¡/.rstr
y de M- sne Snatis y cadavn¿ de los extractos, se incubaron
cinco y siete días respectivamenie, obteniendo la misma
repetibiljdad en los resnltados, para luego consolidarlos v
obtener un tilrico resultado (Fig 1l.
Esúndd de MacFdlaDd
Se de¡erninó la CIM p¡ra M rn¿8¿¡¿¡r¡.r en do¡de se
encontró qre B. sinatuba I S úonbiiblia preseúato11
rni al4 de r0 Lp'n. I't. er-d.to dr S. ¿"ctr,".
C.obtLtsifotiLt, A.lar esian.t, L guatenale sis r L
r4,¡a.ül ¿ presentaron una CIM de 25 pg/ml En 1os demás
ext.¡ctos no se encontró aclividad con respecto al
crecimiento de rU. sr1€g'r¿rftr, como se puede obsefla e¡
la rabla 2.
Posteriormente. se determinó la CIM para M.
tu¡¿l¿¿lostr H3?R( no se observó inhibición en los
exÍaclos eD ri¡guna de las co¡centraciones de 100. 50'
25, 12.5 y 6.25 Pg/nrl.
La validación del método se realizó analizando los
resultados a úavés de un estudio de p¡neba binomial en
don{le se determinó qnelos extractos prcsentan ulra p < 0.5
.o¡ trn a = 0.05. dando un resultado confiable de los
extractos contra M ¡r¡€¡c¡rlor¡ yM st¡eg,?d¡¡r' Al mismo
tiempo. la rifampicina que fue el control posltivo' no
presentó crccimiento bacteriano mie¡tras que en elconrrol
negativo si presentó crecimienrc bacteri¡Do mostrando el
mismo comportamiento en las ciDco repeticiones
Por ú1limo, se comparó la actividad bactericida de
lo errJcr'^ld.p.11r¿.enesluJi^conrrc 14 nPtno'i' J
M. tubeftulosis, enconÍando que los resultados oblenidos
no conelacionaron ett¡e sj p¡ra ambas micobacterias.
11
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EDICION ESPECIAL
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES QUíMICAS Y BIOLÓGICAS
FACULTAD DE CIENCIAS QUfMICAS Y FARMACIA
UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE CUAIEMALA
Tabla 2. Concentración Mnima lnhibitoúa para M smegrñatis ATCC 607
Corcenfación Pg/nrl
P1¡¡ta 100 25
50 t2.5 6.25 Rifampi Medio +
Burseru sinaruba
GM.üma ulnífolia
Byrsonina crussifolía
Hrmenaea couñatil
Boltgaín,,ilLa gklbft1
Senetio salignus
Solanun toNun
Dorsrenid co trujena
Sida úonbiíolia
Litsea guatemalens¡s
Sanbucus neri':ana
Cecmpia obtusífotía
Liquuanbar !rync¡Jlua
Acatia ÍarnesiatuI
+
+
+
+
+
+
+
+
Füente: datos experimentales C) = No hubo crecimiento bacteriano (+) = Creciniento bactetiano
DISCUSION
Existen factores que han favorecido el iDcremento
{te la prcvalenci¿ de tuberculosis e¡ el mundol como el
aümen¡o de la pobreza en p¿íses en vfa de des¡rollo.
crecimiento de los nivel es de desnutrición, la falta de apego
¡l tatamiento, el descuido de la vigilancia epidemiológica.
la escasez de recursos humanos y económicos para su
control, el surgimiento del Síndrone de Inmunodeficienci¿
Adquirida (SIDA) y de cepas multiresistenles a las drogas.
Es clara la necesidad de contar con metodologlas que
pe¡mitan Ealizar estudios que deterñtinen la sensibilidad o
resislencia a las drogas antituberculosas, para evit¿r 1¿
instauración de ratamientos empíricos que quizás no sólo
¡esulten inefecrivos sino que, tal vez, favorezc¿n la
prop¿gación de cepas resistentes a las drogas.
El género Mrcobacteri m ti€ne un¿ pared celul¿r
compleja, rica en llpidos y ün esqueleto de peptidoglucano
coD molécu1as de arabinogalacranimicolalo, 1() que le da
12
una gran resistencia a muchos de los antibióricos, por 10
qüe es necesario utiliz u¡ régimen óptirno de trataniento
para cepas M. tubercutos¡t no rcsistent€s, el cual consiste
en un coctel de lres, cuafo o cinco ¿gentes de primer¿ lfnea,
segrín la categofa c]ínica, radiológica y bacte¡iológica del
paclente. Entre las que se encue¡t.an rifampiciná (RlF),
isoniazida (INH). pir¡zinamida (PZA), etalnbutol (ETB) v
esrrepronicrod,sMr Jdruoi5rt¿d¿. d.arillmenre por.ei'
meses hasta un año o más, dependiendo de la gravedad del
paciente. combinación generalnente efectiva, aún si la
micobacteria es resistente a üna de las drogas usadas.
Es impoÍante mencionar que ¿ excepción de la RIF.
inhibidor de la ARN polimerasa procariótica, y SM'
inhibidor de 1a sí¡tesis de protelnas, 1os demás
quimioterapéuticos usados actúan sobre la síntesis de 1os
ácidos grasos complejos de las micobacteriás. Los
mecanisnos de¡esistencia a estas drogas involucran genes
cromosomáles, porlo que su deteminación Do es ta¡ fácil,
yaque se re¿lizapor métodos molecülares y depende de Ia
VOL. .1NO. 1 REVISTA CIENTíFICA
FT)ICTON FSPFCIAI.
INSTITUTO DE TNVESTiGACiONES QUÍMICAS Y BIOLÓGICAS
FACULTAD DE CIENC]AS QUÍMICAS Y FARMACIA
IINTVFRSTDAI) T)F, S N CARI OS DF GIIATFMAI A
cantidad de genes cromosomales implicados y de la
comprensión del ro1ce1ular de los nisnos (17,18).
En la población guatemalteca el uso de plantas
medicinales es una práclic¿ popul¿r y muy común. por 1(r
que es necesario validar científicamen¡e el uso de estos
-cfrr^. nrrur¡le( alrerna.ivos para
enadicar las enfermedades.
Es por ello que sc re¡lizó el prEsente estudio,
eligie¡do pla¡tas que so¡ populnmente utilizadas par¿ el
rlatamiento de las afecciones respiratorias en Guatenrala,
siendo estas B. rt'naru¡a G. utnifolía, B. crussífolia, H.
courbaril, S. rhombifolía, S.,'atis,1us, S. ton,un, D.
conrrajena, B. slabr¡/, S. mexícatla, C. obtusiÍolia, B.
obht:i¡olia, A. farnesiaflr', L. suarennlens¡sJ L. strraciflua
con el fin de encontrar tatamientos alte arivos conta la
tubercuiosis y a)'udar en un hrturo a los pacienres que
padecen de es¡a enfermedad (19 23).
Al dete¡minar la concentación llúnima i¡hibitoria
de los ertractos con M. s,r¿gn rts ATCC 607 se observó
q]¡e B. sinldtuba y S. úohtb¿l¿ltd poseen una i¡hibición de
50 p.glÍtL y S. nexicana, C obrusif.nia, A. .fanesiana, L.
guatenalen,tis y L rD'/¿.¡lü¿ la Fesen¿an a 25 ilg/ml-
como se obseNá e! I¿tlbla 2.
S. thonbifolia en infusión se usa pam aliviar
amigdalitis. gripe, tos, c¡tmo yB. stn¿¡,r¿, segrln estudios
etnobotánicos, es utilizadx en Cuba para at'ecciones
respi¡ato¡ias como el catano. lo cu co¡stitüye u¡ vaüoso
apoÍe ( 10). En Repúblic¿ Domi¡ica¡a el estudio sobre el
análisis firoquímico sobre algunas pla¡tas most ó qüe B.
sr'¡dr'rbd posee in¡ibición solamente en ¡lgunos bacilos
G¡am-positivo y en Guatemal¡ la decocción de la cofeza
y las hojas se usa p¿ra trat¿r ¡fecciones respirato¡ias. El
efecto bactericid¡ most¡ado por esta pla¡t¿ posiblemente
se debió a Ia sustaDci¿ ¡ctiva que posee, aunque puede no
depender de una estructur.t en con1ún, ya que hay que
considerar que las drogas ¡ntituberculosas nsadas
comercial mente constituye¡ un grupo heterogóneo por süs
principios ¿ctivos (19,2:l 25).
Ningu¡o de los extractos evaluados presentaron
activid¿d inhibitori¿ conlra M. tuber.ulo!¡s }j3lRv
pudiéndose deber a que es una b¡cteria con estr-uctura
conpleja que contiene ácido micólico que le confiere la
fomación de bane¡¿s impermeables inpidiendo el acceso
de sustancias hidroflicas y fámacos y a 1a resistencia a
diferentes drosas debido a las mutilaciones al azar (26 27).
Se ha obse ado en estudios anteriores. que algunos
de los ex¡ractos estudiados más efectivos que ha¡
presentado aclividad conrra micobacterias son 1os obtenidos
con el diluyente mela¡ol, sin dejar atás a 1os clorofónnicos.
hexá¡icos y etanólicos, para extraer los comporentes
qrlmicos preseDtes en las plantas. slendo esios
principalmente aicaloides. cumainas. flavonoides 1os
cu¿1es se encontraron en 1¿s plantas esrudiadas (28.29). AI
no utilizar en esta investigación, otros disolventes.
solamente eranol. limila la extracción completa de estos
compueslos químicos. pesentes en baj a cantidad en algunds
de las plantas estudiadas. Así mismo el estudio de otras de
lJ, pflfle, de la. plJn,r,. lJ. cuJ'ec pueden er nJ r icrs e
Se concluye en es¡e esrudio que ninguno de los
erftactos et¿nólicos evalu¿dos evidenció efecto i¡libirorio
significarivo contra M. trb¿lcrlosts. Mieúas que para M
sñegmahs, B. simatubd y S. ,'¡r¿¡¡lbl¡d presenraron una
i¡hibición en las cinco repericiones a una CIM de 50 L!s/
mL  S. nericona, C obtusifoli.¡, A. fatnesiana, L.
Euatemalensí' y L. sratdüa la presentaron a 25 pg/Inl-
por lo qLe
'i rierer efecro inhib.rurio.igniric¿,ivo coo un
t=0.05 y üna confiabilidad d¿I95Ca (26).
Se validó el micrométodo colo¡imétrico de MTT
empleando cepas ATCC para sn ntiliación en posteriores
estudios, p¡ra ello se obtuvo el mislno resultado en las cinco
repeticiones. Se ulilizó el control positivo de rifampicin¿
a una conceniración de I mg/nn con 100¿/, de i¡hibjción
debrdo:rquee unade ld.drogas md. efecr;tu. trere4e
la ¿p¿rición de cepas eme¡gentes resistentes y tiene una
acción bactericida en todas las fases del crecimiento. Al
mismo tiempo que es la droga de elección en Guatemda
paIa el tlatamienio de la tuberculosis. En el conrol neg¿tivo
no se observónncambio de color debido al crecinie¡to de
las micobacterias (i0).
A1 comparar los resulhdos obtenidos con M.
sneq atis r M. /¡ió¿lcrlasis no se correlacionan entre sí
por 1o que M. snegmatis no podría sustituir ¿ M.
¡uberc losis en poslet ores estudios para obtene. resultados
de manera más rápida.
Se recomiend¿ seguir realizando estudios t¡1 r¡t para
¡
13
VOL. 4 NO. 1 REVIST CIENTfFICA
EDICION ESPECIAL
]NS'|ITUTO DE INVESTIGACIONES QUfMICAS Y BJOLóGICAS
FACULTAD DE CIENCIAS QUfMICAS Y FARMACIA
UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA
deteminár 1¿ actividad i¡iibito¡i¿ de extractos de pla¡tas
utilizados por la población guatemalteca para tratar las
in-ec. one. re'pirJroria'. Asrc.no rdenlilicd el p-i1,
'pro
activo para utilizar dicha planta en tratamientos alternativos
e inhibición de otras bacterias. AdeÍüis. sería convenien¡e
realizar extraclos de 1as mism¿s plantas que se utilicen en
enfermed¿des respi¡atorias, utilizando difercntes solve¡tes
Al Laboratorio de Bioensayos del Depafamento de
Citohistología y ¡l Depa¡t¿mento de Microbiología de la
Facultad de Ciencias Químicas y Fam¡tcia, USAC ESte
tabajo se realizó denho del marco del Sübprograma Xi
Qüímica Farm¿céutica. Proyecro X.1l Búsqueda v
evaluación de agentes naturltles antitube¡culosis
(PIBATUB) del CYTED.
RXFERENCIAS
I caminero JA. r¡ ¿1. Tratamienlo de la tube¡culosis
Parisi UICTER. 2002. 1250 1258
2. Ministerio de Salud Pública y Asiste¡cia Socidl
Marual de récdcas y p¡ocedinie¡tos de b¡cte¡iologla
de la tuberculosis. 2ed. Guatemals. 2001
3. Murray B ¿r dl Microbiología Médica Editonal
Mosby-Doyma S.A. Esp3ña l99Z, 218'225
4. Clancy E. Tr¡nsmisibilidad de la tuberculosj s. Boletí¡
de I¡ Unión Intemacio¡tál conrra la Tuberculosis v
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¡tiasnóstico y tatamie¡to de la tuberculosis infantil
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j¿l,4MG
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Mrcobacteriun tübeftul¿r¡t Temas de Actualidad'
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flJp¿¡icü¡n species from Turkey South Af¡ica¡ Joumal
of Bot¡¡y 2002,68:90-93
14
VOL.4 NO. 1 REVISTA CIENTfFICA
EDICION ESPECIAI,
INSTITUTO DE INVESTIGAC¡ONES QUfMICAS Y BIOLóGICAS
FACULTAD DE CIENC]AS QUÍM]CÁS Y FARMACIA
UNIERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA
21.
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tratamiento previo en dos centros mayores de
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Guatemala, 1998. Revista de RECCAVIR 2002t 14-20
Gorocica P. e¡ ¿]¿ Componentes glicosilados de la
envoltura d€ Mycobacretiüm tuh.ttulosis EJe
i¡te ienen en la patogénesis de la tuberculosis. Rev.
Insl. Nal Resp Mex 2005 l8:142-153
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B¿uer C. Velo, A. Rodrigue, E. A prelim¡nar)
phytochemical analysis of Gudí¡tcun olficinale,
28.
25
I
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  • 1. VOL.4 NO. 1 REVISTA CIENTIFICA EDICION ESPDCiAL INSTITUTO DE TNVESTIGACiONES QUíMICAS Y BIOLÓGICAS FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y FARMACIA UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE CUATEMAI-A ACTIVIDAD MICOBACTERICIDA DD 1.I EXTRACTOS DE PLANTAS MESOAMERICANAS UTILIZADAS POPULARMENTE EN INFECCIONES PULMONARXS Quiñónez Sq Saaayoa M. c¿rcía V Cáceres A. Matta V Escuela de Química Biológica, Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia, Universidad de S¡¡ C¡rlos de cuatemala. RESUMEN La lüberculosis pulmonar es una e¡femedad inlecciosa, provocada en la mayor par'le de casos pot Mrcobacteiun ¡¡¡¡¿z,l¿,rir, ln cu¿1 se trasmite pdncipalmente pü contacto interpersonal íniimo a tmvés de la inh¡l¡ción de ai¡e con p¿nículas infectadas, rara vez se adquiere por ingestión o hendas cutáneas. Su comienzo suele ser insidioso. manifesrando síntomas inespecíftcos como malestar general. pérdida de peso. tos y sudoración noc¡uma. El diag¡óstico se basa en tas manifest¡ciones cltuicas, radiológicas y de ¿na¡omíapa¡ológic¡ las que son muy inespecíficas y en la confirmación medianre téc¡icas b¿cteriológicas y se¡oklgicas. Su tratamien¡o se fundamenta en la asociación de los tármacos para evit¿r la selección de resistencia y la necesidad de fatamientos prolongador p ¿ poder matar a todos 1os bacilos en sus diferentes fases de En este estudio se determinó 1a actividad micobactericida de cato¡ce plantas uriliz3das popul¡mente en i¡lecciones pulmonares. Los extractos et¿nó1icos xtilizados fueror Cecrapia obrusífolia B¿folini (gu¿rumo), Br¡r era sinanba (pala jiote), Gltdzuna ulnifolia (cavlote), Brtnnína crussí¡otia (nance), Hruenaed coutbail (gnapi1ol), Sida tha biiotia (escobillo) S¿¡¿¿to rdltsrus (cltilca), Sohnun tonum /1aaptatos), Dotenia confn¡ena (coaÍahterba), Baüsai útrea slrr¿ (bouga¡viile¿). S.r,'? bucus nerica aPlesl. Gaúco).Acacid.f.¡mesía awiÍd. (stúin), Litsea suatem¿l¿r.!¿r Mez (taurel) y Liquidambar sdrdtifluü L. (liquidámb¿r). La evaluación se realizó por medio del bioensayo cokJrimétrico de b¡omuro 3 (4.5 dinerilriaz o1-2-y l) 2,5 difenil tetrazolio 64TT), en el cual el canbio de coloración de los pozos permite establecer la prese¡cia de la acrividad micobactencida dE los extractos. asícomo laconcentración en la que sepresenta. Se determinó queninguna de 1¿s plantas evaluadas presenró actividad contra M. tuherculosís ATCC H31R¡ en u¡ rango de concenhación de 100 frg/ml a 6.52 ttgtmt. B. sinantba prcsentó una concentración rnlnim¿ inhibitoria de 50 J-¡g/ml y lor extractos de S. me'icana, C.ob¡usibtiü, A.fanesiand, L. Euatewile sis r L sryruciflua de 25 pglnl contra M. smegDatis ATCC 60'7. INTRODUCCION La ruberculosis es una e¡fermedad infeccios¿, transmisible que es provocada por la bácteri¿ Mlcoboctetíum tuberculosis. Este es un bacib ácido alcohol resiste¡te, aerobio. no esporulador de crecimie¡to lenro y 'e.i"relre rl Fío. coDgelacron ) Je.ec,,cidr. mu) sensible:i cálor, Iuz sola¡ y ulúaüoleta. La ví¿p.incipal de infección es l¡ inhalación de aire con partícul¡s i¡fec¡adas que alcanz¿n la vía a&ea teminal, donde so¡ ingeridos por los macrófagos alveola¡es, los b¿cilos comienzan a multiplicarse y destruyen las células fagocíticas. Su sintomatología es inespecífic¡ por 10 que no permite tomar 1as medidas necesarias iniciales p¿ra su tratamiento (1-4). El diagnóstico es bacteriológico y se basa principalmente e¡ la baciloscopía y en casos nrás difíciles es elcultivo. Son inpotantes 1os sig¡os caractefsticos de la tubercülosis como la hemop¡isis y dolor toráxico y se complementa con exámenes de gabinet€ como las radiogafías que muesta lesiones en placas. principalnente en zonas apicales posieriores (s-8). La tuberculosis es una de las principales enlermedades crónicas y opo¡tunisrás en Guatemala, según la Orsanización Mundial de la Salud (OMS). Esta infección. es 1a segu¡d¿ causa de morbilidad en la población guatemalteca. E1 trat¿miento de la tüberculosis se fundamenta en dos grandes bases bacteriológicas. la asocíación de Io; fárm¿cos para evit¡r 1á selección de I
  • 2. VOL. 4 NO, I REVISTA CIENTÍF]CA EDICTON ESPECIAL INSTI'|UTO DE INVESTIGACIONES QUíMiCAS Y BIOLóGICAS FACULTAD DE CIENCIAS QUfMICAS Y FARMACIA IINIVF,RSIDAD DF, SAN CARLOS DE CUA'IEMALA resistenciayla necesidadde trdamientos prolongados p¿r¿ poder m¿lar a todos los bacilos en sus diferentes fáses de crecimienro. Los fá¡macos de p¡imera ]ínea para el ||ararxenro de Lr ruDerculo.i..on i.,n.¿,/id¿. Fh¡¡p,. in:r. pirazinamida. et¡mbütol y eslreptomici¡a, los cu¿les se administran duranre 6 a 8 meses (10,1 l). El objelivo de este es cu¡ar la infecció¡, para 1{r cual seprescriben dosis or¿1es dianas dedrogas núltiples hasta que 1os resullados de los coltivos y 1as pruebas de susceptibilidad a]'uden a orientar la selección de las drogas a utiliz¿r ya que el uso de na únic¿ &oga €s de baj¿ prescripción, aumentando el aparecimiento de cepas mutantes multiresistentes (1,2). La resistencia bacte¡iana a uno o más de los medicamenlos aDtilxbercuiosos co¡stituye un lacto¡ limita¡te para obtener la curación de cada pacie¡te individualmente y por e¡de pa¡a er¿dicar la enfemedad de l¡ comunid¿d: en 1óminos plácticos, este facror debe ser consider¿do e¡ rehción con otros, que intervengan en la eradicación de l¿ enfernedad con el objetivo de deten¡inar su importancia relaliva y la mag¡itud de rccursos neceiiarios pararesolver el problema (12). La incidenci¿ y r¿pidez de1 surgimie¡to de cep¿s mufttuesistentes a &ogas especialmente a 1a isoniazid¿ y rifanpicina ha c¡eado una emergencia codr¿ la tuberculosis a niel muldidl ) Lrge romJr 'r' nedid:r' nece'd ac parJ 'ra.J- lo,.doc de ruber.Jlo.. ) eir1r que qigJ propagá¡dose 1a vari¿nte firmacoresistent. de esta enternedad ( l3). Debido la impo¡ta¡cia de esta entermedad se han bü$cado tatamientos altemativos como la fitoterapia por Io que se han repo¡tado varios estudios sobre nuevas altemativas fitoterapéuticas. En Guatemala, Mánrique y cols. en 1992 determi¡a¡on la acción antimicobacteriana in ritto pot el mé¡odo de proporción de seis plantas nedicinales concluyendo que ninguna de las seis plantas mostraba una ¿ctividad micobac¡ericida i,¡ vir¡¿, sin embargo estadísticamenre S¡da acuta B]uIn f., Eucabptus slobulus L^bi1l. y AchiLlea nilleJolium L. presentaron actiüdad b¿cteriostática l,1 rir¡{t a una concentración de 400 mg/ml. Figueroa en 2000, deteflni¡ó Ia actividad antimicobactedana de extraclos de v¿.ias plantas. concluyeDdo qre Pipü autítüm IfBK. Stachyratpheta caJennetlsis F.ich. y EntenLobiun .Jcloscarpun I aca. so¡, capaces de i¡¡ibir el crecimiento de cepas multiresisrenres deM.t berc losis ínúrro ¿una concentracón de 2 mg/lnl. 10 Maza¡iegos y cols. en 2004 determinaron la actividad micobactericida t¿ rr¡o por el micrometódo MTT de las pla¡tas o,¿¡¿Lr crasifoLía Humb & Bonp]. y ¿ cwlascaryum con]úa M. tubeü:ulDsis con concentación mínima i¡hibitori¿ de 25 pg/ml y 50 p"g/nr] respectivanente (14 l6). E1 presenie esludio i¡vesligó la actividad aicobacte¡icida de los 14 ertactos etanólicos de los plantas mesoaméricanas que son utilizadas popularmente en infeccio¡es pulmonar€s frente al creciniento de M. tubeL-ulasis y M. rn€gna¡ir. Esta evaluación se fealizó por medio de nn bioensayo para delerminar su acrividad trl rrr4 con base a la concentración inhibitoria mín;na (ClMl, para Io cüal se ulilizó el reactlvo cromóforo 3- (4.5dimetilti¡zo1-2-yl)-2,5 diferil blomuro de tetrazolio (MTT) cotnoindicador de actividad contaestas baciedas. Siendo el propósito principal el de encontrar altemaiivas terapéuricas accesibles, seguras y eficaces para combatir la tuberculosis, ya que 1os extractos de las plantas qüe Fesenten una nenor CIM podrán ser de i¡terés pam r€alíza¡ futuros estudios químicos ¿fin de dilucidarlos compuestos responsables de la rcrividad contr¿ éstas micob¿cte.i¡s. Materiales y Métodos. Por conve¡iencia se seleccionaron las pla¡tas B simatuba, G. ulnifotia, B. crussilolia, H. couñaril, S rhonbilolia, S. salignus, S. torvun, D. contrujena, B. glabra, S. m¿icana P]esl., C o,¡tr¡folia Bartolini, ,4. JamesianaNilld., L guatu alensis Me1 y L. stJraciflua L. qüe son utiüzadas popularmente en el l¡atamiento de infecciones respiratori¡s según encuesta existente en el Dcpafamento de Citohistología de la Facultad de Ciencias Químicas y Famacia de la Universidad de S¿¡ C¿rlos de Guatemal¿ (T¿bla i). Se l1evó ¡ cabo la colecta. secado, extncción y concentración por rotavapor. del extracto etanólico de l¿ flor de B. sldrr.a y las hoj as de S. mexícana, C. obtusifolia, A. fameliana, L. Suatenal¿tsir, mientras los oiros exa¿ctos fueron proporcionados por el Departamento de Citohistología. Los extractos fueron preparados por medio de ertracción con etanol al 957o posteriormente se realizó un proceso de conce¡t¡ación en el rotavapor y por ultimo la
  • 3. 'OL,,I No. I REVISTA CIENTÍFICA FDICION ESPEClAL ]NS'|TTUTO DE INVESTICACIONES QUÍI{ICAS Y BIOLóGICAS FACULT¡D DE CIENCIAS QÜÍMICAS Y FARNIACIA UNIVERSf)AD DE SAN CARLOS DE GU,TEMALA Tabla 1. Plantas usadá¡ en el estudio Figura l. Distribución de los r€activo dentro de las t t"hr.'s tn?.i.a nd Ptesl t. nú ¡a o h tu if. L ¡ a ts aío nnl ft^¿r R n¡na¡¿n ^ M.ez. Lia ui¿a,ú ¿ t sdto¿iltud L Se utilizó el micrométodo colo¡imétrico MTT par¡ determinar la actividad bactericida de M. tubetulosís H3TRVydeM rrre8,¡d¡ts ATCC60T La lecturá se real izó de m¿nerr visual. definiéndose 1á CIM como la me¡or concentración del exlraclo do¡de el susrrato no cambio de color y cuya intensidad fue igualo menor ala obtenida en El tipo de estudio fue expe¡iment¡l con diseño ¡l azar' La variable a estu{tíar fue la iúibición del crecimiento de M. tubeftulosis y M. sme gh¿a¡tr producido por los exractos deplantasusadas adistintasconcentraciones (100. 50,25' 12.5 y 6.25 pgnl). De acuerdo ¿la tabl¡ de la función de dislribución acumulada de 1a probabilidad binomial. el númerc mínimo de répücas realizadas debe ser 5 pa'a un nivel a= 0.05 con cada concenlración de ambas bacle¡ias. compamDdo 1os rcsült¡dos con un conrrol que no conlendrá ningrn ripo de e -¡cro ) un corr'o de ihnor.rr¡ Resultados E¡ el estudio se realizó la evalu¡ción in ritro de la activjdad de extractos etaDólicos de l¿s planlas en contla las cepas de M. ¡¡,¡.¡.¿l¿str H37Rv y M. r-¿gn ¡¡r ATCC 641. Las cinco repeticiones de 1os ensayos co¡ M lró¿r'.¡/.rstr y de M- sne Snatis y cadavn¿ de los extractos, se incubaron cinco y siete días respectivamenie, obteniendo la misma repetibiljdad en los resnltados, para luego consolidarlos v obtener un tilrico resultado (Fig 1l. Esúndd de MacFdlaDd Se de¡erninó la CIM p¡ra M rn¿8¿¡¿¡r¡.r en do¡de se encontró qre B. sinatuba I S úonbiiblia preseúato11 rni al4 de r0 Lp'n. I't. er-d.to dr S. ¿"ctr,". C.obtLtsifotiLt, A.lar esian.t, L guatenale sis r L r4,¡a.ül ¿ presentaron una CIM de 25 pg/ml En 1os demás ext.¡ctos no se encontró aclividad con respecto al crecimiento de rU. sr1€g'r¿rftr, como se puede obsefla e¡ la rabla 2. Posteriormente. se determinó la CIM para M. tu¡¿l¿¿lostr H3?R( no se observó inhibición en los exÍaclos eD ri¡guna de las co¡centraciones de 100. 50' 25, 12.5 y 6.25 Pg/nrl. La validación del método se realizó analizando los resultados a úavés de un estudio de p¡neba binomial en don{le se determinó qnelos extractos prcsentan ulra p < 0.5 .o¡ trn a = 0.05. dando un resultado confiable de los extractos contra M ¡r¡€¡c¡rlor¡ yM st¡eg,?d¡¡r' Al mismo tiempo. la rifampicina que fue el control posltivo' no presentó crccimiento bacteriano mie¡tras que en elconrrol negativo si presentó crecimienrc bacteri¡Do mostrando el mismo comportamiento en las ciDco repeticiones Por ú1limo, se comparó la actividad bactericida de lo errJcr'^ld.p.11r¿.enesluJi^conrrc 14 nPtno'i' J M. tubeftulosis, enconÍando que los resultados oblenidos no conelacionaron ett¡e sj p¡ra ambas micobacterias. 11 COI,TJMNAS 1 2 3 4 5 6 7 I 9 10 1l t2 ,% , '//4//, c r-T- .,W D ./,1:z t..,, E F (i H a Cl¡ve d€ la FiqüÉ No. I Ccldás co 200Ég¡¡1 de agna loqg;I dc eai¡cto + 1o(}tg/nl dc úedio +
  • 4. /OI, ,1NO ] REVISTA CIENTÍFICA EDICION ESPECIAL INSTITUTO DE INVESTIGACIONES QUíMICAS Y BIOLÓGICAS FACULTAD DE CIENCIAS QUfMICAS Y FARMACIA UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE CUAIEMALA Tabla 2. Concentración Mnima lnhibitoúa para M smegrñatis ATCC 607 Corcenfación Pg/nrl P1¡¡ta 100 25 50 t2.5 6.25 Rifampi Medio + Burseru sinaruba GM.üma ulnífolia Byrsonina crussifolía Hrmenaea couñatil Boltgaín,,ilLa gklbft1 Senetio salignus Solanun toNun Dorsrenid co trujena Sida úonbiíolia Litsea guatemalens¡s Sanbucus neri':ana Cecmpia obtusífotía Liquuanbar !rync¡Jlua Acatia ÍarnesiatuI + + + + + + + + Füente: datos experimentales C) = No hubo crecimiento bacteriano (+) = Creciniento bactetiano DISCUSION Existen factores que han favorecido el iDcremento {te la prcvalenci¿ de tuberculosis e¡ el mundol como el aümen¡o de la pobreza en p¿íses en vfa de des¡rollo. crecimiento de los nivel es de desnutrición, la falta de apego ¡l tatamiento, el descuido de la vigilancia epidemiológica. la escasez de recursos humanos y económicos para su control, el surgimiento del Síndrone de Inmunodeficienci¿ Adquirida (SIDA) y de cepas multiresistenles a las drogas. Es clara la necesidad de contar con metodologlas que pe¡mitan Ealizar estudios que deterñtinen la sensibilidad o resislencia a las drogas antituberculosas, para evit¿r 1¿ instauración de ratamientos empíricos que quizás no sólo ¡esulten inefecrivos sino que, tal vez, favorezc¿n la prop¿gación de cepas resistentes a las drogas. El género Mrcobacteri m ti€ne un¿ pared celul¿r compleja, rica en llpidos y ün esqueleto de peptidoglucano coD molécu1as de arabinogalacranimicolalo, 1() que le da 12 una gran resistencia a muchos de los antibióricos, por 10 qüe es necesario utiliz u¡ régimen óptirno de trataniento para cepas M. tubercutos¡t no rcsistent€s, el cual consiste en un coctel de lres, cuafo o cinco ¿gentes de primer¿ lfnea, segrín la categofa c]ínica, radiológica y bacte¡iológica del paclente. Entre las que se encue¡t.an rifampiciná (RlF), isoniazida (INH). pir¡zinamida (PZA), etalnbutol (ETB) v esrrepronicrod,sMr Jdruoi5rt¿d¿. d.arillmenre por.ei' meses hasta un año o más, dependiendo de la gravedad del paciente. combinación generalnente efectiva, aún si la micobacteria es resistente a üna de las drogas usadas. Es impoÍante mencionar que ¿ excepción de la RIF. inhibidor de la ARN polimerasa procariótica, y SM' inhibidor de 1a sí¡tesis de protelnas, 1os demás quimioterapéuticos usados actúan sobre la síntesis de 1os ácidos grasos complejos de las micobacteriás. Los mecanisnos de¡esistencia a estas drogas involucran genes cromosomáles, porlo que su deteminación Do es ta¡ fácil, yaque se re¿lizapor métodos molecülares y depende de Ia
  • 5. VOL. .1NO. 1 REVISTA CIENTíFICA FT)ICTON FSPFCIAI. INSTITUTO DE TNVESTiGACiONES QUÍMICAS Y BIOLÓGICAS FACULTAD DE CIENC]AS QUÍMICAS Y FARMACIA IINTVFRSTDAI) T)F, S N CARI OS DF GIIATFMAI A cantidad de genes cromosomales implicados y de la comprensión del ro1ce1ular de los nisnos (17,18). En la población guatemalteca el uso de plantas medicinales es una práclic¿ popul¿r y muy común. por 1(r que es necesario validar científicamen¡e el uso de estos -cfrr^. nrrur¡le( alrerna.ivos para enadicar las enfermedades. Es por ello que sc re¡lizó el prEsente estudio, eligie¡do pla¡tas que so¡ populnmente utilizadas par¿ el rlatamiento de las afecciones respiratorias en Guatenrala, siendo estas B. rt'naru¡a G. utnifolía, B. crussífolia, H. courbaril, S. rhombifolía, S.,'atis,1us, S. ton,un, D. conrrajena, B. slabr¡/, S. mexícatla, C. obtusiÍolia, B. obht:i¡olia, A. farnesiaflr', L. suarennlens¡sJ L. strraciflua con el fin de encontrar tatamientos alte arivos conta la tubercuiosis y a)'udar en un hrturo a los pacienres que padecen de es¡a enfermedad (19 23). Al dete¡minar la concentación llúnima i¡hibitoria de los ertractos con M. s,r¿gn rts ATCC 607 se observó q]¡e B. sinldtuba y S. úohtb¿l¿ltd poseen una i¡hibición de 50 p.glÍtL y S. nexicana, C obrusif.nia, A. .fanesiana, L. guatenalen,tis y L rD'/¿.¡lü¿ la Fesen¿an a 25 ilg/ml- como se obseNá e! I¿tlbla 2. S. thonbifolia en infusión se usa pam aliviar amigdalitis. gripe, tos, c¡tmo yB. stn¿¡,r¿, segrln estudios etnobotánicos, es utilizadx en Cuba para at'ecciones respi¡ato¡ias como el catano. lo cu co¡stitüye u¡ vaüoso apoÍe ( 10). En Repúblic¿ Domi¡ica¡a el estudio sobre el análisis firoquímico sobre algunas pla¡tas most ó qüe B. sr'¡dr'rbd posee in¡ibición solamente en ¡lgunos bacilos G¡am-positivo y en Guatemal¡ la decocción de la cofeza y las hojas se usa p¿ra trat¿r ¡fecciones respirato¡ias. El efecto bactericid¡ most¡ado por esta pla¡t¿ posiblemente se debió a Ia sustaDci¿ ¡ctiva que posee, aunque puede no depender de una estructur.t en con1ún, ya que hay que considerar que las drogas ¡ntituberculosas nsadas comercial mente constituye¡ un grupo heterogóneo por süs principios ¿ctivos (19,2:l 25). Ningu¡o de los extractos evaluados presentaron activid¿d inhibitori¿ conlra M. tuber.ulo!¡s }j3lRv pudiéndose deber a que es una b¡cteria con estr-uctura conpleja que contiene ácido micólico que le confiere la fomación de bane¡¿s impermeables inpidiendo el acceso de sustancias hidroflicas y fámacos y a 1a resistencia a diferentes drosas debido a las mutilaciones al azar (26 27). Se ha obse ado en estudios anteriores. que algunos de los ex¡ractos estudiados más efectivos que ha¡ presentado aclividad conrra micobacterias son 1os obtenidos con el diluyente mela¡ol, sin dejar atás a 1os clorofónnicos. hexá¡icos y etanólicos, para extraer los comporentes qrlmicos preseDtes en las plantas. slendo esios principalmente aicaloides. cumainas. flavonoides 1os cu¿1es se encontraron en 1¿s plantas esrudiadas (28.29). AI no utilizar en esta investigación, otros disolventes. solamente eranol. limila la extracción completa de estos compueslos químicos. pesentes en baj a cantidad en algunds de las plantas estudiadas. Así mismo el estudio de otras de lJ, pflfle, de la. plJn,r,. lJ. cuJ'ec pueden er nJ r icrs e Se concluye en es¡e esrudio que ninguno de los erftactos et¿nólicos evalu¿dos evidenció efecto i¡libirorio significarivo contra M. trb¿lcrlosts. Mieúas que para M sñegmahs, B. simatubd y S. ,'¡r¿¡¡lbl¡d presenraron una i¡hibición en las cinco repericiones a una CIM de 50 L!s/ mL S. nericona, C obtusifoli.¡, A. fatnesiana, L. Euatemalensí' y L. sratdüa la presentaron a 25 pg/Inl- por lo qLe 'i rierer efecro inhib.rurio.igniric¿,ivo coo un t=0.05 y üna confiabilidad d¿I95Ca (26). Se validó el micrométodo colo¡imétrico de MTT empleando cepas ATCC para sn ntiliación en posteriores estudios, p¡ra ello se obtuvo el mislno resultado en las cinco repeticiones. Se ulilizó el control positivo de rifampicin¿ a una conceniración de I mg/nn con 100¿/, de i¡hibjción debrdo:rquee unade ld.drogas md. efecr;tu. trere4e la ¿p¿rición de cepas eme¡gentes resistentes y tiene una acción bactericida en todas las fases del crecimiento. Al mismo tiempo que es la droga de elección en Guatemda paIa el tlatamienio de la tuberculosis. En el conrol neg¿tivo no se observónncambio de color debido al crecinie¡to de las micobacterias (i0). A1 comparar los resulhdos obtenidos con M. sneq atis r M. /¡ió¿lcrlasis no se correlacionan entre sí por 1o que M. snegmatis no podría sustituir ¿ M. ¡uberc losis en poslet ores estudios para obtene. resultados de manera más rápida. Se recomiend¿ seguir realizando estudios t¡1 r¡t para ¡ 13
  • 6. VOL. 4 NO. 1 REVIST CIENTfFICA EDICION ESPECIAL ]NS'|ITUTO DE INVESTIGACIONES QUfMICAS Y BJOLóGICAS FACULTAD DE CIENCIAS QUfMICAS Y FARMACIA UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA deteminár 1¿ actividad i¡iibito¡i¿ de extractos de pla¡tas utilizados por la población guatemalteca para tratar las in-ec. one. re'pirJroria'. Asrc.no rdenlilicd el p-i1, 'pro activo para utilizar dicha planta en tratamientos alternativos e inhibición de otras bacterias. AdeÍüis. sería convenien¡e realizar extraclos de 1as mism¿s plantas que se utilicen en enfermed¿des respi¡atorias, utilizando difercntes solve¡tes Al Laboratorio de Bioensayos del Depafamento de Citohistología y ¡l Depa¡t¿mento de Microbiología de la Facultad de Ciencias Químicas y Fam¡tcia, USAC ESte tabajo se realizó denho del marco del Sübprograma Xi Qüímica Farm¿céutica. Proyecro X.1l Búsqueda v evaluación de agentes naturltles antitube¡culosis (PIBATUB) del CYTED. RXFERENCIAS I caminero JA. r¡ ¿1. Tratamienlo de la tube¡culosis Parisi UICTER. 2002. 1250 1258 2. Ministerio de Salud Pública y Asiste¡cia Socidl Marual de récdcas y p¡ocedinie¡tos de b¡cte¡iologla de la tuberculosis. 2ed. Guatemals. 2001 3. Murray B ¿r dl Microbiología Médica Editonal Mosby-Doyma S.A. Esp3ña l99Z, 218'225 4. Clancy E. Tr¡nsmisibilidad de la tuberculosj s. Boletí¡ de I¡ Unión Intemacio¡tál conrra la Tuberculosis v Enfemedades Respirato¡i¿s. 1 990 5. Comité Nacional de Neunología Criterios de ¡tiasnóstico y tatamie¡to de la tuberculosis infantil 2002 159 1',18 6. Anas A. Lepra. Rev Med IMSS 1998i42(4):343- j¿l,4MG 7. A¡¡ison P, ¿¡ dl. P.jncipios de l{edicina Inrerna 16 ed. Chile 2006. ppl062-1068 8. PetersdorfN, ¿¡rt ftincipios demedicln¿intema 6ed' 1982- 1419 1425 9. Men{tez A. ¿¡ dl. Co¡trolling multidrug-resistant tuberculosis .rnd access to expensive drugs: a rational framework 2002. 489-4'19 10. Koklik WK. Willey HP y Amos DN. Zinsser Microbiología. 17" ed Buenos Aires, Argentina: Editorial Médica P¡namericana. 1983 685-7i7 11. C¡nisueral S, Vila R La Fitoterapia mcional. 4¡ Ed- Barcelon¿ 2003:15-27. 12. Grange J. Resistencia ¿ drogas y eliminación de la tuberculosis. Bolelín de la Unión tnteúacional conrra 1a tube¡culosis y E¡ferm¿dades respirato¡ias. 1990, 65163 66. 13. Blomberg B. ¿t dl. The rationsle for reco¡rmendhs fixed dose combination tablets for treatment of tuberculosis. Bulletin of the Wor]d Healih Organizalion. 200I, 79(1)i6l -67 14. Manrique S. Acción a¡timicobacteriana i¿ ri¡r'o de seis pla¡tas medicinales usadas en el tratamiento de luberculosis. Guatemsla: Univ€rsidad de San Carlos' (Tesis de graduació¡, Faculrad de Ciencias Químicas y Fannacia) 1992 42p. (P.14 20) 15. Figueroa L. Dererminación de la actividad coDtra Mrcobacterium smegmaris y Mfcoh"t'rúIú1 tu¡¿r'¿rl¿tir de exfactos de planlas de uso medicinal en Gu¿temala. Guatemala: Universidad de San Carlos, (Tesis de graduació¡, Faculrad de Ciencias Quimicas y Farmacja) 2000 56P. (34-40) 16. Maz¿riegos A.. e¡ ¿1. Actividad micobacte cida de extractos de plántas popularmente usados para infecciones pulmonares en Güatemala Gratem¿ia: Universid¿d de San Carlos, (Informe final de curso de Investis¡rción, Facultad de Cienci¿s Químicas v Fannacja) 2004 22p. l?. Quiroz. E. Bases moleculares de resisteDcia de Mrcobacteriun tübeftul¿r¡t Temas de Actualidad' Madrid. Revista Diagnóstico BiolóSico 2001.50:4 18. Dulger, B. €¡ ¿1. Antimicrobial studies on three flJp¿¡icü¡n species from Turkey South Af¡ica¡ Joumal of Bot¡¡y 2002,68:90-93 14
  • 7. VOL.4 NO. 1 REVISTA CIENTfFICA EDICION ESPECIAI, INSTITUTO DE INVESTIGAC¡ONES QUfMICAS Y BIOLóGICAS FACULTAD DE CIENC]AS QUÍM]CÁS Y FARMACIA UNIERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA 21. 23. 24. 19. 21. 29. Argueta Y ¿f ¿1. Atlas de las plantas de la medicina mexicana tradicioñal. Instituto Nacional Indigenista México ¡994;3:9 10. Cáceres A. Plantas de uso medicinal en cuatemal¿. Ed. Universitaria. Gua¡em¿la 1999 191-193.280 281. Standley PC, Steyermark JA. Flora of cuatemala. Fieldiana: Bo¡any 1946 A:5t531, 6'7 0 Guaiacum sanctun (Zygophyllaceae), and Burserq sinr¡¡Tba (Burser¿ceae). J. Ethnophü 2002 129 133 Rodíguez. ¿t dl. Resistencia primmia a fánnacos en la tuberculosis y comparación de pacientes con u¡ tratamiento previo en dos centros mayores de refereDcia y una clínica privada en la ciudad de Guatemala, 1998. Revista de RECCAVIR 2002t 14-20 Gorocica P. e¡ ¿]¿ Componentes glicosilados de la envoltura d€ Mycobacretiüm tuh.ttulosis EJe i¡te ienen en la patogénesis de la tuberculosis. Rev. Insl. Nal Resp Mex 2005 l8:142-153 Wayne D. Bioesladísrica. Base para el ¿nálisis de ld.s ciencids de la salud. Editorial No.jeg¿. México 1998: 245 345. Dulger, B. ér dl. Antimicrobial studies on three ¡rypen¡¡r, species jlom Turkey. South Afiican Joumal of Botany 2002,68190-93 26. 20. 22. Wenige¡ L. Elenents for a caribbean pharmacopeia. Cuba. 1998. pp3l8 Núñez E. Piantas nedici¡rales de Puerto Rico. Ed.Universidad de Puefo Rico. 1992. pp 498 Ramón S. Plantas medici¡ales de usó tradicional en Pinar del Río. Rev Cubana Fa¡¡. 1998 32 B¿uer C. Velo, A. Rodrigue, E. A prelim¡nar) phytochemical analysis of Gudí¡tcun olficinale, 28. 25 I 15