Este documento describe una práctica de laboratorio sobre la tinción de Gram para identificar bacterias. El procedimiento involucra el uso de colorantes como cristal violeta, Lugol, alcohol acetona y safranina. Las bacterias Gram positivas se tiñen de azul y las Gram negativas de rosa, lo que permite distinguir sus diferencias estructurales en la pared celular. El objetivo es conocer esta técnica y aplicarla a muestras para identificar bacterias.

1. PRACTICAS LABORATORIO
PRACTICAS DE LABORATORIO VIRTUAL DEL CURSO
DE MICROBIOLOGIA AMBIENTAL
INFORME DE PRACTICA N° 2 TINCION DE MICROORGANISMOS
ALUMNO(a): RAFAEL ANDRES BERNALES UGARTE
FECHA:11/10/2021
Luego de visionar los videos:
https://www.youtube.com/watch?v=bdlKR0BBczE
https://www.youtube.com/watch?v=QPqvuoXwWzw
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1.- INTRODUCCION (Realice una breve introducción):
Una de las características más importante de las bacterias es su morfología, definida por el
tamaño, la forma, el arreglo y la estructura. Existen bacterias en forma redondeada denominadas
cocos, en forma cilíndrica, denominadas bacilos y una tercera morfología como son las que tienen
forma de espirales, denominadas espirilos. A su vez cada categoría puede subclasificarse con base
a diferentes arreglos. Estas características pueden determinarse examinando muestras al
microscopio. Las células no teñidas son prácticamente transparentes, pero pueden observarse al
microscopio de luz haciendo preparaciones entre lámina y laminilla o con microscopios especiales
como por ejemplo: de contraste de fases o de campo oscuro.
2.- OBJETIVOS:
- Conocer la coloración de Gram
- Aplicar la técnica de coloración de Gram a determinadas muestras.
3.- MATERIAL Y EQUIPOS (consigne todos los materiales y equipos que se utilizan en la
práctica virtual)
-CRYSTAL VIOLETA
-LUGOL
-ALCOHOL ACETONA
-SAFRANINA
-PIZETA CON AGUA DE
-BANDEJA PEQUEÑA
-SOPORTE
-MICROOSCOPIO
-ACEITE DE INVERSION
-RELOJ CON CRONOMETRO

2. PRACTICAS LABORATORIO
4.- RESULTADOS: (Dibuje y rotule el procedimiento y muestras observadas al microscopio)
COCOS
ESPIRILOS
COCOSBACILOS
BACILOS

3. PRACTICAS LABORATORIO
1. BACTERIA COCOS: Estas pueden agrupar según su forma de la siguiente manera
Las bacterias grampositivas se clasifican por el color que adquieren después de aplicarles
un proceso químico denominado tinción de Gram. Las bacterias grampositivas se tiñen de
azul cuando se les aplica dicha tinción. Otras bacterias se tiñen de rojo, son las
gramnegativas. Las bacterias grampositivas y las gramnegativas se tiñen de forma distinta
porque sus paredes celulares son diferentes. También causan diferentes tipos de infecciones,
y hay distintos tipos de antibióticos eficaces contra ellas.

4. PRACTICAS LABORATORIO
5.- CONCLUSIONES:
- Tanto las bacterias Gram positivas como las B a c t e r i a s G r a m n e g a t i v a s s e
p r e s e n t a n morfológicamente como cocos o bacilos, sin embargo al ejecutar tinción de
Gram en estas para iden tificar su gr upo taxon ómico, l a s Gr am positivas se tiñen de color
violeta mientras que lasGram negativas se tiñen de color rosado.
-Mediante la tinción de Gram se identifican bacterias Gram positivas y Gram negativas gracias al
color que tornan después de ser teñidas; en el caso de las bacterias Gram positivas se tiñen de
violeta, esto se debe a que gracias a que contienen un a par ed gr u esa d e p epti d og li can o y
gr an cantidad de ácidos teicóicos que permiten fijar y retener rápidamente el colorante inicial el cual
es,el cristal violeta de Hacker, y a d em á s h i jo resistentes a la decoloración. Lo contrario
ocurre con el caso de las Gram negativas, las cuales poseer una pared delgada con menos
cantidad depeptidoglicano y lípidos, el cual requiere de un colorante de contratación como la
safranina o lafucsina en este caso, ya que el colorante inicial Es fácilmente retirado en la decoloración
con alcohol, debido a que por su delgada pared celular no lo retienen.
-
CUESTIONARIO:
i. ¿A qué tipo de muestras se puede aplicar la tinción de Gram?
La tinción de Gram es una prueba que busca bacterias en una parte del cuerpo
donde se sospecha una infección o en ciertos fluidos corporales, como la sangre o la
orina. Esto incluye la garganta, los pulmones, los genitales y lesiones en la piel
ii. ¿De dónde se obtiene la muestra?
Staphylococcus epidermidis: Esta se encuentra de manera natural en la piel formando
parte de la micro biota normal de la superficie corporal, sin causar daño al organismo.
iii. ¿Qué colorantes se usan y cómo actúan?:
-CRYSTAL VIOLETA
-LUGOL
-ALCOHOL ACETONA
-SAFRANINA
iv. ¿Cuál es la composición y porcentaje de los colorantes utilizados?
Tiene que cubrir toda la muestra y dejar que repose un 1 minuto para que pueda hacer
efecto luego enjuagamos con abundante agua y repetimos el mismo paso con todos los
reactivos para poder obtener nuestro resultado final.
v. ¿Qué medidas de bioseguridad se deben adoptar en esta práctica?
Tenemos que tener nuestra mascarilla, guantes, gorro. mandil para nuestro cuidado.
Para el manipular los instrumentos debemos tener siempre nuestro mechero que nos
ayuda a esterilizar la zona donde estaremos trabajando así podremos tener mayor cuidado
y no obtener ninguna bacteria con las que trabajemos.

5. PRACTICAS LABORATORIO
vi. ¿Por qué las bacterias se tiñen de colores diferentes?
Porque eso nos indica si es gram positiva o gram negativa según la bacteria con la que
estemos trabajando en el momento
vii ¿Que son los microrganismos control?
Tejidos vivos con agentes químicos para prevenir una infección o sepsis, esto se lleva a
cabo con los antisépticos que son agentes químicos que destruyen o inhiben el crecimiento
de agentes patógenos.
REFERENCIA BIBLIOGRAFICA:
https://www.google.com/search?q=filococos+epidermis+donde+se+obtiene&sxsrf=AOaem
vK3yAlq_E2k-
99BnGSENXKtOpvXFQ%3A1633968653739&ei=DWJkYfrJLJG95OUPkeiF4Aw&ved=0
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s+donde+se+obtiene&gs_lcp=Cgdnd3Mtd2l6EAM6BwgAEEcQsAM6BggAEBYQHjoICA
AQFhAKEB46BQghEKABOgcIIRAKEKABSgQIQRgAUKYcWIo2YJs3aAFwAngAgAG
kAYgBtxKSAQQwLjE4mAEAoAEByAEIwAEB&sclient=gws-wiz
https://medlineplus.gov/spanish/pruebas-de-laboratorio/tincion-de-gram/
https://www.mayoclinic.org/es-es/diseases-conditions/staph-infections/symptoms-
causes/syc-20356221