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TRANSFERENCIA DE
EMBRIONES
ELIANAHERNANDEZ
STEFANIEANAYA
RUTH MENESES
FARY MENESES
TRANSFERENCIA DE EMBRIONES
Técnica en la que se aprovecha la
calidad genética de los padres
(donadores) mediante, la obtención
de varios óvulos, para fecundarlos,
extraerlos e implantarlos en hembras
diferentes (receptoras).
OBJETIVOS
 Aumentar la capacidad reproductora de las vacas
con alto valor genético.
 Recuperar hembras infértiles de alto valor
genético (enfermedades, edad, accidentes).
 Intercambiar material genético (transporte,
adaptación al medio, patógenos).
PARAMETROS PARA UN PROGRAMA DE
TRANSFERENCIA DE EMBRIONES
VACAS DONADORAS:
 SELECCIÓN
 TRATAMIENTO
 INSEMINACIÓN
 CUIDADOS
SELECCIÓN DE DONADORAS
 Animales de alto valor genético, que este libre de
leptospira, brucelosis y trichonoma.
 Que presente ciclicidad ovárica cada 18 ó 21 días.
 Tener descanso post parto de mínimo 60 días.
TRATAMIENTOS
 Se inicia a partir de los días 8-12 del ciclo estral
(fase luteal ó diestro)
 Se aplica cualquier hormona con acción de FSH
 Se aplica dosis mañana y tarde, o bien una sola dosis
en el día por cuatro días, esto para
SUPEROVULACIÓN.
 Para SINCRONIZACIÓN, aplicar prostaglandina un
día después de iniciado el tratamiento
superovulatorio.
TRATAMIENTOS
 Se coloca PROGESTERONA por unos ocho días,
luego se retira abruptamente, el celo se presentará
de dos a cuatro días de retirar la
PROGESTERONA. Esto para SINCRONIZAR Celos.
INSEMINACIÓN
 Se realiza el mismo procedimiento que para
INSEMINACIÓN ARTIFICIAL, pero Dos veces,
una a las doce horas de presentarse el celo y
otra veinte y cuatro horas después de éste.
Algunos investigadores recomienda 3; unas 12
horas después del celo, otra 24 horas después, y
por último 36 horas luego del celo. Esto porque
son muchos óvulos y estos no se liberan a la vez.
CUIDADOS
Durante el tratamiento superovulatorio
 Evitar estrés por temperatura, o cambios bruscos de
alimentación
 Evitar realizar vacunaciones.
 Tenerla en lugares tranquilos, con buena sombra y
disposición de alimento y alejada de personal
agresivo.
PARÁMETROS PARA UN PROGRAMA DE
TRANSFERENCIA DE EMBRIONES
HEMBRAS RECEPTORAS
 Selección:
• Buen comportamiento reproductivo
• Buen tamaño y amplitud pélvica
• Útero con mas de 60 días de descanso
• Buen estado nutricional y sanitario
• Debe estar libre de enfermedades
• Buena habilidad materna
PARÁMETROS PARA UN PROGRAMA DE
TRANSFERENCIA DE EMBRIONES
 Tratamiento
 Cuidados
• Evitar palpaciones demasiado tempranas
• Evitar el estrés
• Evitar que los programas de vacunación coincidan
con los de transferencia de embriones
TRATAMIENTOS DONADORA VS RECEPTORA
celo
PARAMETROS PARA UN PROGRAMA DE
TRANSFERENCIA DE EMBRIONES
EMBRIONES:
 RECOLECCIÓN O LAVADO
 MANEJO
 EVALUACIÓN
 CONGELACIÓN Y DESCONGELACIÓN
 IMPLANTE ó TRANSFERENCIA A RECEPTORAS
 CONGELACIÓN, REFRIGERACIÓN
MICROCIRUGIA (OPCIONAL)
RECOLECCIÓN DE EMBRIONES
RECOLECCION Se hace del entre el día 7-8 luego de
inseminar y para ello se usan los siguientes
MATERIALES PARA RECOLECCIÓN DE EMBRIONES
Suero fetal inactivado, sirve como alimento a los
embriones(+concentrado en el medio de manutención
10-20%)
Sondas de Foley, sonda de transferencia de 2-3 vías;
Dilatador cervical. Para animales que no dilatan
suficientemente el cérvix, facilita la introducción de
las sonda bien sea de Foley o Cossou.
Lupa estereoscópica, para la búsqueda y
clasificación de embriones. Debe contar con lentes
desde 40x hasta mínimo 120x.
Medio PBS de lavado, es un buffer, es que funciona
como medio de arrastre de los embriones una vez es
introducida hasta los cuernos.
Anestesia epidural (xilocaina al 2%), colocada al
final del sacro, sobre la cola, para relajar los
músculos de esta y facilitar el trabajo del operario.
Agua bi destilada y de ionizada
Jeringas (hormonas y anestesia)
RECOLECCIÓN DE EMBRIONES
Probeta de 1 litro, para preparar el medio de
lavado PBS.
Micro pipetas
Congelador de embriones
Esterilizador (vapor, calor o ultravioleta)
Mini pajillas con capacidad de 0.25cc
Pistola miniaturizada
Cajas cuadriculadas de Petri y discos de cultivo,
permiten o ayuda a la búsqueda de los embriones.
Incubadora con rango de temperatura de 5-32ºC
MATERIALES
PROCEDIMIENTO TECNICO DE LA
RECOLECCION DE EMBRIONES
Preparación del medio PBS 1000 ml (1l)
Aseo del brete o cajilla para toma de muestras y
colocación de la donadora en él.
Lavar cuarto trasero de la donadora
Chequear el correcto funcionamiento del equipo
Aplicación de xilocaina al 2% (anestesia epidural )
Despejar la materia fecal del recto
Aplicar la técnica de lavado de embriones ( Vía del
aire)
Filtrado del medio
RECOLECCIÓN DE EMBRIONES
RECOLECCION DE EMBRIONES: vía de aire
 Introducción de la sonda de lavado Foley (Rush o
Cassou), con ayuda de un soporte metálico, hasta
los cuernos. Hasta la bifurcación de los dos cuernos.
 Aplicación de aire a la baloneta de la sonda, con
una jeringa, de a 5cc , hasta que se palpe que esta
cerrando completamente el cuerno.
 Cerrar la válvula de recolección y aplicar el medio en
bajas cantidades, con la mano que esta en el recto
hacer masajes, sobre el cuerno
 Cerrar la válvula de aplicación del medio y
abrirla de recolección y sacar el medio, con los
embriones
 Repetir el procedimiento, hasta que se esté
seguro que se ha lavado todos los embriones.
 Una vez obtenido los embriones, se filtra el
medio, con filtros especiales y se trasladan a un
recipiente de transporte
 Se transportan los embriones, se cubre el
recipiente con papel parafinado. Evitar que les
de la luz solar directamente.
MANEJOS Y ELECCIÓN
1) Reposo, por 20-30 minutos.
2) Decantación del medio (se deja 50ml ó
100 ml con los embriones)
3) Pasar cajas de Petri y búsqueda de
embriones, con la lupa estereoscópica.
4) Cajas de cultivos, se dejan por unos 30
minutos, si el embrión esta en buen
estado, si se duda, se dejan de 30-40
minutos y luego se observan con lente de
mayor aplicación 120x
5) Clasificación y Selección .
6) Pasado a pajillas de embriones (0.25-
0.5ml)
EMBRIONES VIABLES Y NO VIABLES
CONGELACIÓN Y DESCONGELACIÓN DE
EMBRIONES
 Refrigerar: Temperatura a 0- 4ºC / 24 horas
 Congelar : Liquido de Nitrógeno a -196ºC
 Descongelar : Agua a 37ºC/30 segundos
CLASIFICACIÓN DE LOS EMBRIONES
 GRADO 1: su estado de desarrollo corresponde al
día de recolección, es casi esférico, no presenta
células en el blastocele sueltas, la zona pelucida esta
intacta, todas las células se encuentra del mismo
tamaño y está unidas
 GRADO 2: Todo su desarrollo corresponde al día de
la recolección, pero presenta algunas células en el
blastocele sueltas, presenta pocas alteraciones en la
zona pelucida. Puede presentar vacuolas y
granulaciones en su superficie.
 GRADO 3-4: Presentan serias alteraciones en la
zona pelucida, Esta puede presentar orificios, en
algunos casos el embrión está saliendo de su zona
pelucida, presenta un elevado número de células
sueltas, de morfología y tamaño variado. Puede
presentar coloraciones oscuras e incluso desgarres
en la zona pelucida, existe poca compactación
entre células y estas son de diferentes tamaños.
 Solo se usan para transferencia los que están en
los GRADOS 1 y 2; los del grado 2 con más
reservas.
IMPLANTE DE EMBRIONES
NO QUIRURGICA
NO QUIRURGICA
 Usa una pistola similar a la de I.A, pero la pajilla es
más larga, y permite depositar al embrión
directamente en el cuerno. Todo el procedimiento es
similar al de I.A
 Aquí se debe primero realizar palpación de la
RECEPTORA, para determinar en que cuerno está el
C.L
 El procedimiento de transferencia, se debe hacer unas
dos horas después de cosechar los embriones, si estos
no van a recibir ningún tratamiento de congelación.
IMPLANTE DE EMBRIONES
QUIRURGICA
Realizando una laparotomía ventral bajo
anestesia general (Rowson y col 1969) o
a través del flanco, con anestesia local
QUIRURGICA
LAPAROTOMIAVENTRAL
QUIRURGICA
 Se usaba principalmente en pequeños
rumiantes,(ovejas, cabras) y en porcinos
 Se necesita exponer por medio de corte, ventral,
cerca la los ovarios, para exponer el cuerno donde
se depositará el o los embriones, se ubican en la
parte uterovarico del cuerno.
VENTAJAS
 Acortar el intervalo generacional e incrementa
la ganancia genética.
 Permite introducir y difundir rápidamente
nuevas razas de alto valor genético.
 Disminuye el riesgo de transmisión de
enfermedades.
 selección genética rigurosa por lado materno,
que incrementa el progreso genético
VENTAJAS
 Si se usa bipartición, se puede obtener más
crías por vaca de alta calidad genética.
 Si se usa fertilización y congelamiento en
laboratorio, se puede obtener crías de vacas
de alta calidad que hayan muerto.
 Se pueden obtener más crías por vaca,
aproximadamente 100 en toda su vida útil.
DESVENTAJAS
 Costosa por: adquisición del equipo, compra
de las hormonas, adquisición del alimento
para receptora y donante, y, la mano de
obra especializada.
 Es imposible predecir los resultados (alta
variabilidad genética en los embriones)
 Tiene un protocolo estricto, que debe
realizarse de forma perfecta para lograr
los resultados deseados.
DESVENTAJAS
Distocias
Falla de donadoras en un 12%
Abortos y reabsorciones en 6%
Disponibilidad de receptoras
Tiempo de espera en receptoras
Sólo aptos embriones de buena calidad
Daños por congelación (10%)
COSTOS DE TRANSFERENCIA DE
EMBRIONES
Transferencia de hembriones en bovinos

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Transferencia de hembriones en bovinos

  • 2. TRANSFERENCIA DE EMBRIONES Técnica en la que se aprovecha la calidad genética de los padres (donadores) mediante, la obtención de varios óvulos, para fecundarlos, extraerlos e implantarlos en hembras diferentes (receptoras).
  • 3. OBJETIVOS  Aumentar la capacidad reproductora de las vacas con alto valor genético.  Recuperar hembras infértiles de alto valor genético (enfermedades, edad, accidentes).  Intercambiar material genético (transporte, adaptación al medio, patógenos).
  • 4. PARAMETROS PARA UN PROGRAMA DE TRANSFERENCIA DE EMBRIONES VACAS DONADORAS:  SELECCIÓN  TRATAMIENTO  INSEMINACIÓN  CUIDADOS
  • 5. SELECCIÓN DE DONADORAS  Animales de alto valor genético, que este libre de leptospira, brucelosis y trichonoma.  Que presente ciclicidad ovárica cada 18 ó 21 días.  Tener descanso post parto de mínimo 60 días.
  • 6. TRATAMIENTOS  Se inicia a partir de los días 8-12 del ciclo estral (fase luteal ó diestro)  Se aplica cualquier hormona con acción de FSH  Se aplica dosis mañana y tarde, o bien una sola dosis en el día por cuatro días, esto para SUPEROVULACIÓN.  Para SINCRONIZACIÓN, aplicar prostaglandina un día después de iniciado el tratamiento superovulatorio.
  • 7. TRATAMIENTOS  Se coloca PROGESTERONA por unos ocho días, luego se retira abruptamente, el celo se presentará de dos a cuatro días de retirar la PROGESTERONA. Esto para SINCRONIZAR Celos.
  • 8. INSEMINACIÓN  Se realiza el mismo procedimiento que para INSEMINACIÓN ARTIFICIAL, pero Dos veces, una a las doce horas de presentarse el celo y otra veinte y cuatro horas después de éste. Algunos investigadores recomienda 3; unas 12 horas después del celo, otra 24 horas después, y por último 36 horas luego del celo. Esto porque son muchos óvulos y estos no se liberan a la vez.
  • 9. CUIDADOS Durante el tratamiento superovulatorio  Evitar estrés por temperatura, o cambios bruscos de alimentación  Evitar realizar vacunaciones.  Tenerla en lugares tranquilos, con buena sombra y disposición de alimento y alejada de personal agresivo.
  • 10. PARÁMETROS PARA UN PROGRAMA DE TRANSFERENCIA DE EMBRIONES HEMBRAS RECEPTORAS  Selección: • Buen comportamiento reproductivo • Buen tamaño y amplitud pélvica • Útero con mas de 60 días de descanso • Buen estado nutricional y sanitario • Debe estar libre de enfermedades • Buena habilidad materna
  • 11. PARÁMETROS PARA UN PROGRAMA DE TRANSFERENCIA DE EMBRIONES  Tratamiento  Cuidados • Evitar palpaciones demasiado tempranas • Evitar el estrés • Evitar que los programas de vacunación coincidan con los de transferencia de embriones
  • 12. TRATAMIENTOS DONADORA VS RECEPTORA celo
  • 13. PARAMETROS PARA UN PROGRAMA DE TRANSFERENCIA DE EMBRIONES EMBRIONES:  RECOLECCIÓN O LAVADO  MANEJO  EVALUACIÓN  CONGELACIÓN Y DESCONGELACIÓN  IMPLANTE ó TRANSFERENCIA A RECEPTORAS  CONGELACIÓN, REFRIGERACIÓN MICROCIRUGIA (OPCIONAL)
  • 14. RECOLECCIÓN DE EMBRIONES RECOLECCION Se hace del entre el día 7-8 luego de inseminar y para ello se usan los siguientes MATERIALES PARA RECOLECCIÓN DE EMBRIONES Suero fetal inactivado, sirve como alimento a los embriones(+concentrado en el medio de manutención 10-20%) Sondas de Foley, sonda de transferencia de 2-3 vías; Dilatador cervical. Para animales que no dilatan suficientemente el cérvix, facilita la introducción de las sonda bien sea de Foley o Cossou.
  • 15. Lupa estereoscópica, para la búsqueda y clasificación de embriones. Debe contar con lentes desde 40x hasta mínimo 120x. Medio PBS de lavado, es un buffer, es que funciona como medio de arrastre de los embriones una vez es introducida hasta los cuernos. Anestesia epidural (xilocaina al 2%), colocada al final del sacro, sobre la cola, para relajar los músculos de esta y facilitar el trabajo del operario. Agua bi destilada y de ionizada Jeringas (hormonas y anestesia)
  • 16. RECOLECCIÓN DE EMBRIONES Probeta de 1 litro, para preparar el medio de lavado PBS. Micro pipetas Congelador de embriones Esterilizador (vapor, calor o ultravioleta) Mini pajillas con capacidad de 0.25cc Pistola miniaturizada Cajas cuadriculadas de Petri y discos de cultivo, permiten o ayuda a la búsqueda de los embriones. Incubadora con rango de temperatura de 5-32ºC
  • 18. PROCEDIMIENTO TECNICO DE LA RECOLECCION DE EMBRIONES Preparación del medio PBS 1000 ml (1l) Aseo del brete o cajilla para toma de muestras y colocación de la donadora en él. Lavar cuarto trasero de la donadora Chequear el correcto funcionamiento del equipo Aplicación de xilocaina al 2% (anestesia epidural ) Despejar la materia fecal del recto Aplicar la técnica de lavado de embriones ( Vía del aire) Filtrado del medio
  • 20. RECOLECCION DE EMBRIONES: vía de aire  Introducción de la sonda de lavado Foley (Rush o Cassou), con ayuda de un soporte metálico, hasta los cuernos. Hasta la bifurcación de los dos cuernos.  Aplicación de aire a la baloneta de la sonda, con una jeringa, de a 5cc , hasta que se palpe que esta cerrando completamente el cuerno.  Cerrar la válvula de recolección y aplicar el medio en bajas cantidades, con la mano que esta en el recto hacer masajes, sobre el cuerno
  • 21.  Cerrar la válvula de aplicación del medio y abrirla de recolección y sacar el medio, con los embriones  Repetir el procedimiento, hasta que se esté seguro que se ha lavado todos los embriones.  Una vez obtenido los embriones, se filtra el medio, con filtros especiales y se trasladan a un recipiente de transporte  Se transportan los embriones, se cubre el recipiente con papel parafinado. Evitar que les de la luz solar directamente.
  • 22. MANEJOS Y ELECCIÓN 1) Reposo, por 20-30 minutos. 2) Decantación del medio (se deja 50ml ó 100 ml con los embriones) 3) Pasar cajas de Petri y búsqueda de embriones, con la lupa estereoscópica. 4) Cajas de cultivos, se dejan por unos 30 minutos, si el embrión esta en buen estado, si se duda, se dejan de 30-40 minutos y luego se observan con lente de mayor aplicación 120x 5) Clasificación y Selección . 6) Pasado a pajillas de embriones (0.25- 0.5ml)
  • 23. EMBRIONES VIABLES Y NO VIABLES
  • 24. CONGELACIÓN Y DESCONGELACIÓN DE EMBRIONES  Refrigerar: Temperatura a 0- 4ºC / 24 horas  Congelar : Liquido de Nitrógeno a -196ºC  Descongelar : Agua a 37ºC/30 segundos
  • 25. CLASIFICACIÓN DE LOS EMBRIONES  GRADO 1: su estado de desarrollo corresponde al día de recolección, es casi esférico, no presenta células en el blastocele sueltas, la zona pelucida esta intacta, todas las células se encuentra del mismo tamaño y está unidas  GRADO 2: Todo su desarrollo corresponde al día de la recolección, pero presenta algunas células en el blastocele sueltas, presenta pocas alteraciones en la zona pelucida. Puede presentar vacuolas y granulaciones en su superficie.
  • 26.  GRADO 3-4: Presentan serias alteraciones en la zona pelucida, Esta puede presentar orificios, en algunos casos el embrión está saliendo de su zona pelucida, presenta un elevado número de células sueltas, de morfología y tamaño variado. Puede presentar coloraciones oscuras e incluso desgarres en la zona pelucida, existe poca compactación entre células y estas son de diferentes tamaños.  Solo se usan para transferencia los que están en los GRADOS 1 y 2; los del grado 2 con más reservas.
  • 28. NO QUIRURGICA  Usa una pistola similar a la de I.A, pero la pajilla es más larga, y permite depositar al embrión directamente en el cuerno. Todo el procedimiento es similar al de I.A  Aquí se debe primero realizar palpación de la RECEPTORA, para determinar en que cuerno está el C.L  El procedimiento de transferencia, se debe hacer unas dos horas después de cosechar los embriones, si estos no van a recibir ningún tratamiento de congelación.
  • 29. IMPLANTE DE EMBRIONES QUIRURGICA Realizando una laparotomía ventral bajo anestesia general (Rowson y col 1969) o a través del flanco, con anestesia local
  • 31. QUIRURGICA  Se usaba principalmente en pequeños rumiantes,(ovejas, cabras) y en porcinos  Se necesita exponer por medio de corte, ventral, cerca la los ovarios, para exponer el cuerno donde se depositará el o los embriones, se ubican en la parte uterovarico del cuerno.
  • 32. VENTAJAS  Acortar el intervalo generacional e incrementa la ganancia genética.  Permite introducir y difundir rápidamente nuevas razas de alto valor genético.  Disminuye el riesgo de transmisión de enfermedades.  selección genética rigurosa por lado materno, que incrementa el progreso genético
  • 33. VENTAJAS  Si se usa bipartición, se puede obtener más crías por vaca de alta calidad genética.  Si se usa fertilización y congelamiento en laboratorio, se puede obtener crías de vacas de alta calidad que hayan muerto.  Se pueden obtener más crías por vaca, aproximadamente 100 en toda su vida útil.
  • 34. DESVENTAJAS  Costosa por: adquisición del equipo, compra de las hormonas, adquisición del alimento para receptora y donante, y, la mano de obra especializada.  Es imposible predecir los resultados (alta variabilidad genética en los embriones)  Tiene un protocolo estricto, que debe realizarse de forma perfecta para lograr los resultados deseados.
  • 35. DESVENTAJAS Distocias Falla de donadoras en un 12% Abortos y reabsorciones en 6% Disponibilidad de receptoras Tiempo de espera en receptoras Sólo aptos embriones de buena calidad Daños por congelación (10%)
  • 36. COSTOS DE TRANSFERENCIA DE EMBRIONES