Este documento describe la importancia de la dosificación de los componentes del sistema del complemento en la patología autoinmune. Explica los objetivos de identificar la relación entre las concentraciones plasmáticas de estos componentes y las patologías autoinmunes, así como conocer los procesos de evaluación sérica del complemento y su papel en diversas enfermedades. Además, resume los componentes del complemento, su utilidad médica, formas de medición y valores de referencia. Finalmente, discute las patologías asociadas con alteraciones del sistema del complemento
3. OBJETIVOS
GENERALES:
ESPECÍFICOS:
• Identificar la relación de las
concentraciones plasmáticas
de los componentes del
sistema del complemento
con patologías de etiología
autoinmune.
• Conocer los procesos de
evaluación
sérica
del
complemento.
• Vincular su papel en la
génesis
de
diversas
patologías.
10. COMPONENTES
Pp. Vía Clásica y
del MAC
Pp. Vía
Alternativa
(Factores)
Pp. Reguladoras
Receptores del
Complemento
11. UTILIDAD MÉDICA
Orientación diagnóstica en
procesos mediados por
inmunocomplejos
Valoración de la actividad
de enfermedades por
inmunocomplejos
• ↓Inmunocomplejos=Consumo
del complemento
Interpretación en el contexto de la
situación clínica del pcte.
ÍNDICE CATABÓLICO: 2%
Déficit en los
componentes iniciales de
la Vía Clásica (C1, C4,
C2) en asociación con
Enfermedades
Autoinmunes
12. CONSIDERACIONES SOBRE LOS
RESULTADOS
• Índice Catabólico: 2%
• Algunas de las proteínas que conforman el sistema del
complemento fungen como Reactantes de Fase Aguda.
• Función diversa en los diferentes compartimentos
corporales.
• ↓ del nivel del complemento avala la sospecha de su
participación en daño tisular, mas no lo prueba.
• Nivel normal del complemento no excluye su participación
en injuria tisular.
• ↓ de los componentes de una vía hacen presumir que ésta se
encuentra activada y media la agresión (no se requiere
conocer los niveles de todos los componentes).
13. MEDICIÓN DE LOS FACTORES DEL COMPLEMENTO
A. Inmunoquímico
(Búsqueda como Ag)
RID
Nefelometría
Valoración
Funcional
Características:
Altamente
específicos
Fáciles de
realizar (suero
o plasma)
Vías
Procedimientos:
Vía
Clásica
Vía
Alternativa
Menor costo y
tiempo
No determinan
funcionalidad
No detectan niveles bajos
(desde 10µg/ml)
TEST CH50
(Actividad
Hemolítica
Total)
Actividad
Funcional
Aislada
Productos de
Degradación
ELISA
(10-20ng/ml)
Ac.
Monoclonales
14. NIVELES DE COMPLEMENTO MEDIANTE ENSAYOS
ANTIGÉNICOS: VÍA CLÁSICA Y ALTERNATIVA
• Materiales:
– Muestra de suero o plasma a <(-20°C)
– Suero proteico estándar (estabiliza)
– Equipos de RID
• Procesamiento:
– RID:
• Tca. Mancini (exceso de Ac., más exacto)
• Tca. Fahey (no exceso de Ac.)
15. VALORACIÓN FUNCIONAL: VÍA CLÁSICA
(CH50) Y ACTIVIDAD AISLADA
• Materiales:
–
–
–
–
Eritrocitos de oveja (sensibles, Ag. Forssman para Ac. De conejo)
Sol. De Alserver
Buffer (barbital)
Ac. Anti Forssman
• Procesamiento:
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
Extracción aséptica, solución de Alserver.
Conservación hasta 6 semanas a 4°C.
Centrifugación a 4°C, se descarta sobrenadante y capa leucocitaria.
G. rojos en buffer, se lavan y sensibilizan con Ac.
Disoluciones de suero del pcte.
Unir muestra de EA
Incubar a 37°C durante 1h. Agitando c/15’.
Colocar en hielo + Barbital.
Centrifugar 5’ a 800rpm, sobrenadante medir en espectrofotómetro a 540nm.
Elaborar curva.
16. VALORACIÓN FUNCIONAL: VÍA
ALTERNATIVA (AH50)
• Materiales:
– Suero humano (dilución 1:5)
– Eritrocitos de conejo (EDTA+iones de Mg+2)
Título (CH50/AH50)= dilución final de
suero humano que lisa el 50% de los
eritrocitos de oveja/conejo.
18. PRUEBA DE FIJACIÓN DEL
COMPLEMENTO
Capacidad del complemento de
interaccionar con los complejos Ag-Ac.
• Materiales:
– Suero del paciente
– Antígeno (soluble o particulado)
– EA (eritrocitos de oveja sensibilizados)
• Procesamiento:
– Incubación de suero con 3-5 unidades CH50
• Positiva: Fijación (complemento es consumido)
– Agregar EA
– Incubación a 37°C por 1h. O toda la noche en frío (títulos mayores)
• Positiva: No lisis
• Negativa: Lisis
21. VALORES REFERENCIALES
• Nivel total del complemento en sangre: 41 a 90
unidades hemolíticas (CH50).
• Nivel de C1: 16 a 33 mg/dL.
• Niveles de C3:
– hombres: 88 a 252 mg/dL.
– mujeres: 88 a 206 mg/dL.
• Niveles de C4:
– hombres: 12 a 72 mg/dL.
– mujeres: 13 a 75 mg/dL.
22. ACTIVACIÓN (CONSUMO) PATOLÓGICO
DEL SISTEMA DEL COMPLEMENTO
Ac. Anormal
Complejo Inmune
Material Extraño
Neoantígeno del
Sistema del
Complemento
(MAC)
23. DISMINUCIÓN DEL
COMPLEMENTO
PRIMARIA O CONGÉNITA
•
•
•
•
•
•
LES
Angioedema hereditario
Fiebre mediterránea familiar
Vasculitis por urticaria
GMN
Inmunodeficiencia
combinada grave
• Hipogammaglobulinemia
ligada al sexo
• Infecciones recurrentes
SECUNDARIA O
ADQUIRIDA
• Enfermedades asociadas a
Artritis
• Enfermedades asociadas a
vasculitis
• Enfermedades asociadas a
nefritis
25. PATOLOGÍAS CON VINCULACIÓN
DEL SISTEMA DEL COMPLEMENTO
↓ Primaria o Congénita
•
•
•
•
•
•
LES
Angioedema hereditario
Fiebre mediterránea familiar
Vasculitis por urticaria
GMN
Inmunodeficiencia
combinada grave
• Hipogammaglobulinemia
ligada al sexo
• Infecciones recurrentes
↓Secundaria o Adquirida
• Enfermedades asociadas a
artritis
• Enfermedades asociadas a
vasculitis
• Enfermedades asociadas a
nefritis
26. AVERIGUAR:
• ¿Qué es el LES?
• ¿Qué otros exámenes de laboratorio ayudan en
su diagnóstico?
27. BIBLIOGRAFÍA
• Balcells, A.; Soriano, M. La Clínica y el Laboratorio. 9na. Edición.
Editorial Marín. Barcelona – España. 1973.
• Henry, B.; et all. Laboratorio en el Diagnóstico Clínico. Editorial
Marbán Libros. Madrid – España. 2010.
• Kindt, T.; Goldsby, R.; Osborne, B. Inmunología de Kuby. VI
Edición. Editorial Mc Graw-Hill. México D.F.-México. 2007.
• Prieto, J. Yuste, J. La Clínica y El Laboratorio Balcells. 21era.
Edición. Editorial Elsevier Masson. Barcelona – España. 2010.
• Regueiro J., López C., González S., Martínez E. Inmunología. IV
Edición Revisada. Ed. Médica Panamericana. Madrid - España.
2012.
• Rojas, W., Anaya J., Aristizábal B., Cano L., Gómez L., Lopera D.
Inmunología de Rojas. XV Edición. Corporación para las
Investigaciones Biológicas. Medellín – Colombia. 2010.