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DMV. MSc. Florencia Buroni
División de Laboratorios Veterinarios «Miguel C. Rubino» – MGAP
Núcleo de Salud Animal de Tacuarembó- NUSAT
LEPTOSPIROSIS EN BOVINOS
LEPTOSPIROSIS
• Enfermedad bacteriana, infecto-contagiosa
• Causada por especies patógenas del género Leptospira
sp.
• Afecta a todas las especies de mamíferos
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Adler & de la Peña Moctezuma, 2010
EPIDEMIOLOGÍA
LA ENFERMEDAD EN HUMANOS
Enfermedad de notificación obligatoria al Sistema Nacional de Vigilancia desde 1998
Las mayores tasas corresponden a zonas de producción lechera
Hombres en etapa laboral activa, entre 20 y 40 años de edad
(Schelotto et al. 2012; Rosa, 2013; Haake & Levett, 2015).
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LA ENFERMEDAD EN BOVINOS
• Forma aguda en terneros:
• Síntomas clínicos: septicemia, fiebre, anorexia, anemia
• Alteraciones patológicas: ictericia, hemoglobinuria, hemorragias
petequiales, hepatomegalia, lesiones focales grisáceas en riñones
http://www.cresa.cat
LA ENFERMEDAD EN BOVINOS
• Abortos esporádicos o tormentas de abortos
• Partos prematuros, nacimientos de terneros débiles
• Merma en la producción de leche
• Infertilidad
DATOS SEROLÓGICOS EN NUESTRO PAÍS
• Sistemas ganaderos: seroprevalencia individual de
38,5% y de 71,2% a nivel de establecimientos (Repiso et
al. 2005)
• Sistemas lecheros: seroprevalencia individual de 14% y
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• El 56% de las muestras remitidas a DILAVE por
sospecha de leptospirosis positiva al MAT (Suanes,
2013)
• Uruguay no contaba con una colección en el dominio
público de cepas aisladas de casos autóctonos de
leptospirosis bovina.
• Se desconocía qué cepas o serovares circulaban en
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• El diagnóstico se basaba en técnicas serológicas (MAT) y
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Alianza ANII ALI_1_2014_1_4982, “Creación y caracterización
de un banco de cepas de Leptospira spp. aisladas de casos
de leptospirosis bovina en Uruguay”.
ANII-INNOVAGRO FSA_1_2013_1_12557, “Tipificación y
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el diseño de vacunas recombinantes”.
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ELECCIÓN DE PREDIOS A MUESTREAR
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TÉCNICAS DIAGNÓSTICAS APLICADAS
• MAT (microscopic agglutination test) (DILAVE)
• PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa) (I. Pasteur)
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• Identificación de aislamientos (I. Pasteur)
• Histopatología (DILAVE)
RESULTADOS PARCIALES
(Enero 2015 - Octubre 2017)
• Muestreo de 44 focos con sospecha de leptospirosis
• 42 focos con problemas reproductivos y 2 con enfermedad
aguda en terneros
• 860 animales muestreados
57 % (25/44) de los
establecimientos con
vacunación
490 animales
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establecimientos sin
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DISTRIBUCIÓN DE LOS PREDIOS
MUESTREADOS
68 % (30/44) sistemas carniceros , 32 % (14/44) a sistemas
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RESULTADOS SEROLÓGICOS: MAT
De un total de 860 muestras de suero procesadas:
• 339/860 (39%) positivas a MAT, con al menos un serovar
reaccionante
Analizando los antecedentes de vacunación:
• 129/822 (15%) positivas a MAT, sin antecedentes de
vacunación
• 204/822 (24%) positivas a MAT, con antecedentes de
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167/860 (19%)
orinas positivas a
PCR lipL32
33/44 (75%)
establecimientos
positivos PCR lipL32
50% predios
vacunados
PCR lipL32
Serogrupo N° animales Porcentaje (%)
Sejroe 189 56
Pomona 79 23
Sejroe/Pomona 60 18
Otras coaglut. 11 3
TOTAL 339 100
MAT
AISLAMIENTOS
35%
49%
16%
L. borgpetersinii
L. interrogans
L. noguchii
IDENTIFICACIÓN DE AISLAMIENTOS
63 aislamientos
L. Interrogans
(31)
Pomona
Kennewicki
Canicola
Canicola
L. borgpetersenii
(22)
Sejroe
Hardjo
L. Noguchii
(10)
Autumnalis Australis Pyrogenes
• L. interrogans y L. borgpetersenii son los principales agentes
infecciosos en bovinos (Ellis, 2015)
• Elevada proporción de aislamientos de serogrupo Pomona
concuerda con los datos reportados en otras partes del
mundo (Arent et al. 2017)
• La especie L. interrogans, serovar Kennewicki, serogrupo
Pomona, ha sido aislada recientemente en Uruguay de
trabajadores rurales (Meny et al. 2017)
• L. noguchii también ha sido asilada de bovinos en Brasil
(Martins et al. 2014; Hamond et al. 2015; Libonati et al. 2017)
CONSIDERACIONES SOBRE LAS
TÉNICAS DIAGNÓSTICAS
• Precaución en la interpretación de resultados serológicos (MAT).
Resultados positivos no siempre indican animal enfermo.
• Precaución al expresar resultados de PCR en orina, ya que existe
eliminación intermitente de Leptospiras sp. (Ribeiro Rocha et al.
2017)
Por lo tanto, es necesario:
• Llevar registros y aportarlos al momento de la remisión de material
al laboratorio
• La combinación de las herramientas diagnósticas hoy disponibles
• Continuar con estudios de investigación
¿Cuál es el impacto de la leptospirosis en los
distintos sistemas productivos?
Estudio en diferentes sistemas productivos
expuestos a Leptospiras patógenas en bovinos del
Uruguay
• Entendimiento del diagnóstico y de la epidemiología de la
enfermedad en bovinos
• Identificación de posibles pérdidas reproductivas y
productivas
• Cuantificación de pérdidas y evaluación de costo
¿Cuál es el impacto de la leptospirosis en
los fetos abortados?
Determinar las causas de aborto en bovinos de carne en
el norte del Uruguay
• Identificar las principales causas de aborto en ganado de
carne en la región norte
• Establecer la epidemiología de las enfermedades que
causan aborto en la región
• Establecer protocolos de diagnóstico adecuados a las
principales causas de aborto
¿Las cepas de Leptospira aisladas en
Uruguay causan la enfermedad en bovinos?
Estudio de virulencia de Leptospira spp autóctonas
en modelo bovino
• Evaluar si las cepas autóctonas de Leptospira causan la
enfermedad en el bovino.
¿Las vacunas disponibles en el mercado son
efectivas contra la Leptospirosis en bovinos?
Estudio de la eficacia de vacunas anti-leptospira en
bovinos naturalmente expuestos a la infección
• Evaluar si determinadas vacunas disponibles son efectivas
contra la leptospirosis y la infección en bovinos
naturalmente expuestas.
CONSIDERACIONES FINALES
• Se implementaron nuevas herramientas diagnósticas en los
diferentes laboratorios y se ajustaron las técnicas ya aplicadas
• Se creó un grupo de trabajo multidiciplinario e interinstitucional
• Se cumplieron los objetivos propuestos en ambos proyectos
ejecutados
• Capacitaciones en Uruguay por técnicos extranjeros y
capacitaciones de técnicos de nuestro país en Brasil y Francia
• Formación de recursos humanos. Se llevaron a cabo dos Tesis de
Maestría (Facultad de Ciencias y Facultad de Veterinaria)
• Obtención de los primeros aislamientos de cepas de Leptospira
patógenas de dominio público
DI.LA.VE
• Alejandra Suanes
• Ximena Salaberry
• Cristina Easton
• Alberto Mortola
• Natasha Barrandeguy
• Gimena Avila
• Rodolfo Rivero
• Víctor Rodríguez
• Florencia Buroni
• Carolina Briano
• Fernando Dutra
• Agustín Romero
INSTITUT PASTEUR
• Leticia Zarantonelli
• Cecilia Nieves
• Mathieu Picardeau
• Alejandro Buschiazzo
INIA
• Caroline Da Silva Silveira
• Martin Fraga
• Camila Hamond
• Federico Giannitti
• Melissa Macías-Rioseco
• Franklin Riet-Correa
INSTITUTO DE HIGIENE
• Paulina Meny
• Natalia Ashfield
• Clara Menéndez,
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Leptospirosis dra. florencia buroni

  • 1. DMV. MSc. Florencia Buroni División de Laboratorios Veterinarios «Miguel C. Rubino» – MGAP Núcleo de Salud Animal de Tacuarembó- NUSAT LEPTOSPIROSIS EN BOVINOS
  • 2. LEPTOSPIROSIS • Enfermedad bacteriana, infecto-contagiosa • Causada por especies patógenas del género Leptospira sp. • Afecta a todas las especies de mamíferos • Zoonosis ocupacional Adler & de la Peña Moctezuma, 2010
  • 4. LA ENFERMEDAD EN HUMANOS Enfermedad de notificación obligatoria al Sistema Nacional de Vigilancia desde 1998 Las mayores tasas corresponden a zonas de producción lechera Hombres en etapa laboral activa, entre 20 y 40 años de edad (Schelotto et al. 2012; Rosa, 2013; Haake & Levett, 2015). Enfermedad endémica con la ocurrencia de pequeños brotes epidémicos, ocasionales y vinculados a la actividad rural Se presenta como una enfermedad febril aguda no específica
  • 5. LA ENFERMEDAD EN BOVINOS • Forma aguda en terneros: • Síntomas clínicos: septicemia, fiebre, anorexia, anemia • Alteraciones patológicas: ictericia, hemoglobinuria, hemorragias petequiales, hepatomegalia, lesiones focales grisáceas en riñones http://www.cresa.cat
  • 6. LA ENFERMEDAD EN BOVINOS • Abortos esporádicos o tormentas de abortos • Partos prematuros, nacimientos de terneros débiles • Merma en la producción de leche • Infertilidad
  • 7. DATOS SEROLÓGICOS EN NUESTRO PAÍS • Sistemas ganaderos: seroprevalencia individual de 38,5% y de 71,2% a nivel de establecimientos (Repiso et al. 2005) • Sistemas lecheros: seroprevalencia individual de 14% y de 61,% a nivel de establecimientos (Gil, 2001) • El 56% de las muestras remitidas a DILAVE por sospecha de leptospirosis positiva al MAT (Suanes, 2013)
  • 8. • Uruguay no contaba con una colección en el dominio público de cepas aisladas de casos autóctonos de leptospirosis bovina. • Se desconocía qué cepas o serovares circulaban en nuestro país. • El diagnóstico se basaba en técnicas serológicas (MAT) y patología.
  • 9. Alianza ANII ALI_1_2014_1_4982, “Creación y caracterización de un banco de cepas de Leptospira spp. aisladas de casos de leptospirosis bovina en Uruguay”. ANII-INNOVAGRO FSA_1_2013_1_12557, “Tipificación y diagnóstico de Leptospira pp. por técnicas moleculares: hacia el diseño de vacunas recombinantes”. Prondil S.A. / Virbac- Santa Elena S.A. / Microsules S.A.
  • 10. ELECCIÓN DE PREDIOS A MUESTREAR Productores detectan problemas clínicos en su rodeo Consulta a Veterinario particular DILAVE procesa materiales recibidos Según resultados se coordina y realiza MUESTREO
  • 11. MUESTRAS A COLECTAR Animales vivos: • Sangre • Orina Animales muertos: • Órganos refrigerados (riñón, bazo, hígado, cont. abomasal, humor acuoso) • Órganos en formol • Orina
  • 12. TÉCNICAS DIAGNÓSTICAS APLICADAS • MAT (microscopic agglutination test) (DILAVE) • PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa) (I. Pasteur) • Cultivo y aislamiento (DILAVE – Inst. Higiene) • Identificación de aislamientos (I. Pasteur) • Histopatología (DILAVE)
  • 13. RESULTADOS PARCIALES (Enero 2015 - Octubre 2017) • Muestreo de 44 focos con sospecha de leptospirosis • 42 focos con problemas reproductivos y 2 con enfermedad aguda en terneros • 860 animales muestreados 57 % (25/44) de los establecimientos con vacunación 490 animales 39 % (17/44) de los establecimientos sin vacunación 332 animales 4% (2/44) de los establecimientos sin información 38 animales 83% (714/860) de los animales muestreados corresponden a vacas y vaquillonas.
  • 14. DISTRIBUCIÓN DE LOS PREDIOS MUESTREADOS 68 % (30/44) sistemas carniceros , 32 % (14/44) a sistemas lecheros
  • 15. RESULTADOS SEROLÓGICOS: MAT De un total de 860 muestras de suero procesadas: • 339/860 (39%) positivas a MAT, con al menos un serovar reaccionante Analizando los antecedentes de vacunación: • 129/822 (15%) positivas a MAT, sin antecedentes de vacunación • 204/822 (24%) positivas a MAT, con antecedentes de vacunación
  • 16. 167/860 (19%) orinas positivas a PCR lipL32 33/44 (75%) establecimientos positivos PCR lipL32 50% predios vacunados PCR lipL32 Serogrupo N° animales Porcentaje (%) Sejroe 189 56 Pomona 79 23 Sejroe/Pomona 60 18 Otras coaglut. 11 3 TOTAL 339 100 MAT
  • 18. IDENTIFICACIÓN DE AISLAMIENTOS 63 aislamientos L. Interrogans (31) Pomona Kennewicki Canicola Canicola L. borgpetersenii (22) Sejroe Hardjo L. Noguchii (10) Autumnalis Australis Pyrogenes
  • 19. • L. interrogans y L. borgpetersenii son los principales agentes infecciosos en bovinos (Ellis, 2015) • Elevada proporción de aislamientos de serogrupo Pomona concuerda con los datos reportados en otras partes del mundo (Arent et al. 2017) • La especie L. interrogans, serovar Kennewicki, serogrupo Pomona, ha sido aislada recientemente en Uruguay de trabajadores rurales (Meny et al. 2017) • L. noguchii también ha sido asilada de bovinos en Brasil (Martins et al. 2014; Hamond et al. 2015; Libonati et al. 2017)
  • 20. CONSIDERACIONES SOBRE LAS TÉNICAS DIAGNÓSTICAS • Precaución en la interpretación de resultados serológicos (MAT). Resultados positivos no siempre indican animal enfermo. • Precaución al expresar resultados de PCR en orina, ya que existe eliminación intermitente de Leptospiras sp. (Ribeiro Rocha et al. 2017) Por lo tanto, es necesario: • Llevar registros y aportarlos al momento de la remisión de material al laboratorio • La combinación de las herramientas diagnósticas hoy disponibles • Continuar con estudios de investigación
  • 21. ¿Cuál es el impacto de la leptospirosis en los distintos sistemas productivos? Estudio en diferentes sistemas productivos expuestos a Leptospiras patógenas en bovinos del Uruguay • Entendimiento del diagnóstico y de la epidemiología de la enfermedad en bovinos • Identificación de posibles pérdidas reproductivas y productivas • Cuantificación de pérdidas y evaluación de costo
  • 22. ¿Cuál es el impacto de la leptospirosis en los fetos abortados? Determinar las causas de aborto en bovinos de carne en el norte del Uruguay • Identificar las principales causas de aborto en ganado de carne en la región norte • Establecer la epidemiología de las enfermedades que causan aborto en la región • Establecer protocolos de diagnóstico adecuados a las principales causas de aborto
  • 23. ¿Las cepas de Leptospira aisladas en Uruguay causan la enfermedad en bovinos? Estudio de virulencia de Leptospira spp autóctonas en modelo bovino • Evaluar si las cepas autóctonas de Leptospira causan la enfermedad en el bovino.
  • 24. ¿Las vacunas disponibles en el mercado son efectivas contra la Leptospirosis en bovinos? Estudio de la eficacia de vacunas anti-leptospira en bovinos naturalmente expuestos a la infección • Evaluar si determinadas vacunas disponibles son efectivas contra la leptospirosis y la infección en bovinos naturalmente expuestas.
  • 25. CONSIDERACIONES FINALES • Se implementaron nuevas herramientas diagnósticas en los diferentes laboratorios y se ajustaron las técnicas ya aplicadas • Se creó un grupo de trabajo multidiciplinario e interinstitucional • Se cumplieron los objetivos propuestos en ambos proyectos ejecutados • Capacitaciones en Uruguay por técnicos extranjeros y capacitaciones de técnicos de nuestro país en Brasil y Francia • Formación de recursos humanos. Se llevaron a cabo dos Tesis de Maestría (Facultad de Ciencias y Facultad de Veterinaria) • Obtención de los primeros aislamientos de cepas de Leptospira patógenas de dominio público
  • 26.
  • 27. DI.LA.VE • Alejandra Suanes • Ximena Salaberry • Cristina Easton • Alberto Mortola • Natasha Barrandeguy • Gimena Avila • Rodolfo Rivero • Víctor Rodríguez • Florencia Buroni • Carolina Briano • Fernando Dutra • Agustín Romero INSTITUT PASTEUR • Leticia Zarantonelli • Cecilia Nieves • Mathieu Picardeau • Alejandro Buschiazzo INIA • Caroline Da Silva Silveira • Martin Fraga • Camila Hamond • Federico Giannitti • Melissa Macías-Rioseco • Franklin Riet-Correa INSTITUTO DE HIGIENE • Paulina Meny • Natalia Ashfield • Clara Menéndez, • Jair Quintero • Cristina Ríos • Gustavo Varela • Felipe Schelotto VETERINARIOS PRODUCTORES