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1. Práctica N° 2
Reconocimiento de Material
de Laboratorio de
Microbiología

2. CONSEJOS QUE DEBEN CUMPLIR LOS ALUMNOS QUE SE INCIAN EN LAS PRACTICAS DE MICROBIOLOGIA
1. Vista antes de ingresar al laboratorio un guardapolvo o mandil, gorro, guantes, mascarilla.
2. No beber agua directamente del grifo, ni utilice para beber ningún utensilio de trabajo.
3. N o debe fumar en el interior del laboratorio.
4. No moje directamente con la boca el material de trabajo, excepto el que está estéril.
5. Mantenga limpieza y cuidado escrupuloso en el instrumental que se emplee, antes, durante y después del trabajo
realizado.
6. No amontonar en la mesa de trabajo con material innecesario como mochilas, cuadernos, toallas etc, que
dificulten el trabajo.
7. El material de laboratorio ya utilizado debe colocarse en recipientes adecuados para su esterilización.
8. Cualquier accidente que ocurra con cultivos u otro material biológico, comuníquelo al profesor de la cátedra para
tomar las medidas necesarias de desinfección y esterilización.
9. Al terminar todo trabajo, lávese cuidadosamente las manos con agua y jabón antiséptico y secarse con un paño
limpio.
10. Antes de retirarse del laboratorio, dejar en orden el material que utilizó y limpia la mesa de trabajo.

3. RECOMENDACIONES PARA EL DESARROLLO DE
LAS PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGIA
• Poseer conocimientos teóricos muy claros y precisos acerca de la práctica
que va a desarrollar.
• Para ello es necesario que el alumno revise su teoría del tema que va a
ejecutar, así como sus bases y fundamentos.
• Realizar un esquema ordenado de su plan de trabajo.
• Conocer bien el material de trabajo que necesita, así como también las
técnicas a emplear.
• Estar seguro de la finalidad que persigue la experiencia.
• Asesorarse con el personal docente en cualquier momento de la
experiencia.

4. Vestimenta para el laboratorio
Mascarilla N-95
Botas o Polainas
Gafas o Lentes Guantes
Gorro Bata o Guardapolvo

5. Material del Vidrio
• Característica: Material pírex
• Tubos de prueba:
Son de diversos tamaños y
capacidades, sirven como
base para los medios de
cultivo, líquidos o sólidos.
Deben estar taponados con
algodón o tener una tapa de
rosca

6. • Matraz: Kitasato:
• Probeta: Placas de Petri:
Frasco de cuerpo
cónico, base
plana y cuello
corto. Sirve como
base a los medios
cultivo.
Frasco cónico de
base plana con un
tubo lateral situado
en la base del cuello.
Sirve para recibir los
filtrados estériles.
Tubo de vidrio
graduado con
base plana. Sirve
para medir
líquidos o
soluciones
Cajas de vidrio
cilíndricas,
constituidas por una
tapa y una base
donde se colocan
los medios de
cultivo sólidos

7. • Espátula de Drigalsky: Baguetas:
• Jarra de Brewer: Láminas y laminillas: Frascos goteros:
Varilla de vidrio
compacta que
termina en un
triangulo. Sirve
para la siembra de
bacterias
Son varillas de
vidrio compacto.
Sirven para
disolver sales,
colorantes etc.
También llamada Jarra
de anaerobios. Consta
de:
- Una abrazadera con
un tornillo en el centro
para el cierre
hermético.
- Una Tapa
- una Jarra donde se
colocan las placas o
tubos.
Sirven para colocar
los colorantes o
reactivos
Sirven para colocar
las muestras a
observar

8. Material de Metal
• Asas bacteriológicas: Mechero bunsen:
• Gradillas: Espátulas:
Consta de un mango aislante
del calor, el cuerpo que
termina en un tornillo en el
que se incrusta el alambre de
platino que termina en un aro
(asa de kolle) o en punta
(aguja). Sirve para realizar la
siembra de bacterias.
Estos mecheros
trabajan con gas
propano. Sirven
para brindar
esterilidad al
ambiente de trabajo
Son de
material de
metal
plastificados.
Sirven para
portar tubos
Sirven para pesar
medios de cultivo,
sales, colorantes
etc,

9. Equipos de Laboratorio
• Estufa de Incubación: Horno de esterilización:
• Estufa de Incubación Centrífuga
Presentan dos puertas: la interior de vidrio que
permite visualizar los cultivos, y la externa de
metal que le da cierre hermético. En la parte
inferior interna se encuentra la resistencia que
se conecta a un termostato que regula la
temperatura interna a través de botones de
control que se encuentran en la parte externa
.Sirve para facilitar el crecimiento de las
bacterias. Trabaja a 35-37ºC.
Este aparato tiene una
estructura similar a la estufa
de incubación pero se
diferencia en que presenta
una sola puerta. Permite
esterilizar el material de
vidrio (180ºC/30)
Aparato que sirve para
separar los sólidos de los
líquidos

10. • Destilador de agua Autoclave
Equipo que permite
destilar el agua,
necesaria para la
preparación de
medios de cultivo,
soluciones, etc
Consta de una resistencia situada
en la parte inferior.
Por encima se encuentra la olla
donde se coloca el material a
esterilizar.
Entre la olla y la resistencia debe
haber agua.
La tapa que presenta buiones o
llaves para el cierre hermético.
Sobre la tapa existe el manómetro
para medir la presión interna y la
espita para la salida de vapor.

11. • Baño María: Refrigeradora:
Es un recipiente de forma rectangular que está
constituido en su parte inferior por una resistencia que
va conectado a un termostato que permite regular la
temperatura a través de botones que se ubican en la
parte frontal del aparato. Presenta una cuba en la que
se coloca el agua a calentar. Se emplea para disolver
los medios de cultivo, inactivación de sueros, pruebas
de reducción etc.
Sirve para mantener
conservada a baja
temperatura los medios de
cultivo, sueros, antisueros,
etc.

12. • Microscopio Compuesto:

13. Manejo del Microscopio óptico
1) Ubicar el microscopio en una mesa firme y estable y conectarlo a la fuente de energía.
2) Prender la fuente de luz.
3) Colocar el objetivo de menor aumento en la posición de uso y bajar la platina completamente.
4) Colocar la preparación de la muestra en la platina sujetándola con las pinzas.
5) Iniciar la observación con el objetivo de menor aumento ( 4x ) y con el condensador bajo.
6) Para realizar el enfoque acercar al máximo el lente objetivo a la preparación con ayuda del macrométrico hasta observar la
imagen con el lente ocular.
7) Luego pasar al siguiente lente objetivo y ajustar la nitidez de la imagen con el micrométrico. Aumentar el ingreso de luz subiendo
el condensador.
8) Para utilizar el objetivo de inmersión es necesario colocar una pequeña gota de aceite de cedro en la preparación, luego girar el
revólver con el objetivo de inmersión y ponerlo en contacto con la gota de aceite con ayuda del macrométrico.
9) Una vez ubicado la muestra a observar fijar la nitidez de la imagen con ayuda del micrométrico.
10) Una vez finalizada la observación de la muestra se baja la platina y se coloca el objetivo de menor aumento girando el revólver.
En este momento ya se puede retirar de la platina la preparación.
11) Limpiar el objetivo de inmersión con cuidado usando un papel especial para óptica.

14. Limpieza de Material y su Esterilización
• El material usado en el laboratorio de microbiología, debe ser previamente limpiado antes de su
esterilización, tratamiento previo que va a depender del tipo de material.
• En general se procede de la siguiente manera:
1) El material sucio se sumerge en solución detergente y se cepilla cada pieza bajo abundante chorro de agua.
Es preferible dejar en la solución detergente por 24 horas a temperatura ambiente.
2) Se enjuaga mínimo tres veces cada pieza con agua corriente en caliente.
3) Se enjuaga cinco veces con agua destilada.
4) Se deja escurrir y se secan en estufa.
5) Finalmente se prepara el material para su esterilización.
• A continuación se va a detallar la metodología de limpieza y esterilización para cada tipo de material de
laboratorio.

15. Limpieza de Material y su Esterilización
Pipetas:
• Se colocan en frascos de vidrio de base ancha que contenga una solución desinfectante. El recipiente se
autoclava a 121ºC/15 lb de presión durante 15 a 20 minutos.
• Al enfriarse se eliminan los tapones de algodón, se colocan con la punta hacia arriba en el lavador de pipetas
o canastillas altas y se limpian completamente con agua caliente, se ocurren en otras canastillas y se dejan
secar.
• El extremo oral de la pipeta debe taparse con algodón. Se envuelven en papel Kraft una por una o en grupos,
se marcan y se colocan en tubos especiales con la punta sobre la base, en donde deberá colocarse algodón.
Se procede esterilizar al horno a 180ºC durante 30 minutos.

16. CUESTIONARIO
1. Cómo preparar los tubos, placas, matraces y pipetas para que sean
utilizadas en la practica microbiológica?
2. Cómo se emplea la jarra de anaerobios, explique su
funcionamiento?
3. Explique el funcionamiento del destilador de agua y del autoclave?
4. Que cuidados se deben tener en cuenta en el uso del microscopio
óptico?

17. Limpieza de Material y su Esterilización
Tubos de ensayo:
• Los tubos de ensayo conteniendo medios de cultivo contaminados con microorganismos deben ser
autoclavados a 121ºC/15 lb/15-20 minutos. Luego se lavan con abundante agua y detergente, se dejan
escurrir y se taponan luego con algodón no absorbente. Se envuelven en papel kraft en paquetes de 10
tubos y se colocan a esterilizar en el horno.
Placas de Petri:
• Las placas conteniendo cultivos microbianos, se llevan al autoclave para su esterilización, colocándose con la
tapa hacia arriba. Luego se lavan con abundante agua y detergente. Se dejan escurrir, se secan y se
empaquetan individualmente o en paquetes de 6 unidades con papel kraft para luego esterilizarlas en el
horno.