Centrifuga

1. ESCUELA SALUD
GUÍA
CENTRIFUGAS
DIRIGIDO A ALUMNOS DE:
Técnico Superior de Laboratorio Clínico y Banco de Sangre
PRE-REQUISITO:
No tiene
.

2. INTRODUCCIÓN
Las centrífugas son instrumentos extensamente utilizados en todas las áreas que involucran la
biología, la bioquímica y la medicina.
Esencialmente una centrífuga es un aparato que separa partículas que están en solución. En el
área de Biología estas partículas pueden ser células, orgánulos subcelulares o
macromoléculas. En el Laboratorio Clínico, la principal función de esta técnica es la separación
de los elementos figurados de la sangre del suero o plasma, según corresponda, ya que la
mayoría de las reacciones útiles en Clínica se realizan en suero o plasma.
OBJETIVOS
Al finalizar el taller el alumno será capaz de:
 Realizar un correcto procedimiento de centrifugación
 Realizar en forma correcta la mantención de una centrífuga
 Reconocer distintos tipos de centrífugas de uso en Laboratorio Clínico
REALIZADO POR:
Tecnólogo Médico, Bioquímico, Químico Farmacéutico, Biólogo
DURACIÓN:
90 minutos
NUMERO DE ALUMNOS POR DOCENTE:
Máximo 20 alumnos
MARCO TEORICO:
Definición de fuerza centrífuga:
Es la fuerza que se pone de manifiesto en los movimientos rotatorios y que tiende a impulsar al
objeto hacia el extremo de la curva.

3. En el caso de un cuerpo unido a la extremidad de una cuerda que se hace girar en una órbita
circular, teniendo con la mano el otro extremo de la cuerda extendida, la fuerza centrífuga es la
que mantiene la cuerda en tensión y que se siente como una tracción en la mano. A ella se
opone una fuerza igual y contraria y llamada centrípeta, la que la mano ejerce sobre el objeto a
través de la cuerda.
La centrifugación es un método de separación de partículas, que se basa en la
distinta velocidad de desplazamiento de éstas en un medio líquido al ser
sometidas a un campo centrífugo. Cuando se centrifuga una solución, ésta se
separa en sus componentes sólidos y líquidos, lo cual está directamente
relacionado con la masa de las sustancias. Las primeras partículas en
sedimentar son las de mayor masa.
La velocidad de una centrífuga se mide en rpm (revoluciones por minuto), las
que pueden ser transformadas por un cálculo matemático en unidades g, otra
forma de medir la velocidad. La velocidad está relacionada con el radio del
rotor de la centrífuga. Para obtener los resultados esperados de una
centrifugación se debe considerar la velocidad y el tiempo de centrifugación
(ver más adelante).
En una muestra centrifugada se diferencian dos zonas:
 Sobrenadante: es la parte líquida de la muestra que queda en la parte
superior del tubo.
 Pellet o sedimento: es la porción, generalmente sólida, que se deposita
en el fondo del tubo.
En Clínica se utilizan como muestras la orina o la sangre de pacientes, donde
se realizan determinaciones físicas, biológicas, bioquímicas u hormonales.
Dependiendo del estudio y de la muestra –sangre u orina- el producto que se
utilice después de la centrifugación puede ser el sobrenadante (suero, plasma)
o el sedimento o pellets, formado por los elementos que se han ido al fondo del
tubo (células, cristales).
Tipos de centrífugas
Existen diversos tipos de centrífugas, las que se diferencian en la velocidad que alcanzan y el
uso que se les dé.

4. Centrífugas de baja velocidad, de sobremesa o clínicas:
Son de pequeño tamaño, con o sin refrigeración. Su velocidad es de 5000 rpm.-10000 rpm.
Son útiles para partículas grandes (células, precipitados de sales insolubles, muestras de
sangre, muestras de orina, etc.).
1. Centrífugas de alta velocidad.
Alcanzan una velocidad entre 18000 y 25000 rpm. Son
refrigeradas, algunas con sistema de vacío. Se utilizan en la
separación de fracciones celulares. Sin embargo, son
insuficientes para la separación de ribosomas, virus o
macromoléculas.

5. 2.- Ultracentrífugas
Alcanzan velocidades desde 50000 rpm. Presentan sistemas
auxiliares: sistemas de refrigeración, sistemas de alto vacío. Se
utilizan en la obtención de datos precisos de propiedades de
sedimentación y en el aislamiento de partículas de tamaño muy
diminuto (microsomas, virus, macromoléculas).
3. Centrífugas de Banco de Sangre
Son centrífugas de diferentes capacidades, como por ejemplo de 6 x1000 ml. Funcionan a
velocidades de hasta 4900-5000 rpm, son refrigeradas y algunas poseen rotores
universales en los que se centrifugan tubos, microplacas, botellas, frascos y bolsas de
sangre. Alunas tienen capacidad para manejar 6 bolsas de sangre triples, cuádruples o
dobles

6. Tipos de rotores.
Definición: Rotor es el accesorio de la centrífuga en el que se insertan los tubos o bolsas que
serán centrifugadas. Existen rotores fabricados con metales comunes y otros, más costosos,
fabricados en titanio, como los de las ultracentrífugas. Cada tipo de rotor es adecuado para un
tipo determinado de separación.
En el Laboratorio Clínico y en la mayoría de los laboratorios se utilizan centrífugas con dos
tipos principales de rotores:
 Rotores flotantes o de ángulo móvil
 Rotores de ángulo fijo o angulares
Tipos
de rotores
flotantes o de ángulo móvil
En este tipo de rotor, los tubos que se utilizan para centrifugar están unidos al brazo del rotor
por su parte superior. Durante la centrifugación, debido a la fuerza centrífuga, los tubos pierden
la verticalidad y se sitúan perpendiculares al eje de rotación. En este tipo de rotor el pellet o
sedimento queda, al final de la centrifugación, en el fondo del tubo.

7. Rotores de ángulo fijo o angulares:
En este tipo de rotores la centrifugación se lleva a cabo siempre en un ángulo fijo respecto al
eje de rotación. El pellet o sedimento queda, al final de la centrifugación, adosado a las paredes
del tubo en forma oblicua.jo o angulares.
Tiempo de Centrifugación:
Para muestras utilizadas en el Laboratorio Clínico, en general, los tiempos de
centrifugación están definidos, de acuerdo al objetivo que se desea lograr.
Las muestras de sangre pueden ser separadas en suero (o plasma si se utilizó
un anticoagulante en el tubo) y elementos figurados a 1500 rpm x 5 minutos,
sin embargo si la muestra fue tomada en un tubo con gel separador, para
obtener el mismo resultado, se debe centrifugar a 3500 rpm x 15 minutos, de
acuerdo a las especificaciones del fabricante.
Para las muestras de coagulación (sangre tomada en tubos con anticoagulante
citrato) la sangre debería centrifugarse a 2.000 rpm x 15 minutos, generalmente
en centrífuga refrigerada, ya que muchos componentes estudiados en la
coagulación son lábiles a la temperatura.

8. Control visual del plasma después de la centrifugación a diversas velocidades.
Las muestras de orina, para la obtención de sedimentos pueden ser
centrifugadas a 1500 rpm x 5 minutos.
INSUMOS Y EQUIPOS REQUERIDOS:
 Sala de Simulación de Laboratorio Clínico
 Centrífugas , diferentes tipos
 Tubos para centrífuga (20)
 Paño seco para limpieza de superficies de la centrífuga
 Tubos de sangre con anticoagulante
 Tubos con muestras de orina
 Balanza para equilibrar los tubos
 Pizetas con agua destilada
 Tubos con agua corriente para equilibrar
 Gradillas
 guantes

9. DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO:
 Abrir la centrífuga e identificar sus componentes: rotor, control de tiempo, control de
velocidad, enchufe. Reconocer si es o no refrigerada.
 Preparación de muestras para centrifugación: seleccione los tubos que serán
centrifugados. Cuide de que sean del mismo tipo de muestras a fin de facilitar el
equilibrio de los tubos
 Equilibrio de tubos: En una balanza pesa aproximadamente los tubos que se
enfrentarán en el rotor de la centrífuga. Para centrífugas clínicas, cuyas velocidades
son bajas, se pueden igualar los pesos de los tubos en una balanza granataria. Si la
centrífuga es de alta velocidad (ultracentrífuga), los equilibrios de peso deben ser
exactos.
Nota: Si esta etapa está mal realizada se corre el riesgo de dañar la centrífuga y la
muestra.
 Poner los tubos, ya equilibrados en el rotor de la centrífuga, cuidando que los de
pesos iguales queden enfrentados en el rotor.
 Cerrar la tapa de la centrífuga
 Programar el tiempo de centrifugación y subir, GRADUALMENTE, la velocidad
utilizando para esto el tacómetro (indica las rpm). Dejar en 3500 rpm por 10
minutos.
 Una vez cumplido el tiempo de centrifugación, la velocidad comenzará a descender
gradualmente. Cuando el movimiento del rotor cese, lo que se evidencia al
observar que las rpm llegan a cero, es posible abrir la centrífuga y rescatar las
muestras en gradillas. La mayoría de las centrífugas poseen un ruido de alerta que
indica que se puede abrir la cubierta.
 Mantención:
1. Con un paño limpio y húmedo limpiar la superficie interna de la centrífuga,
cuidando de no limpiar el eje central. Si tiene salpicaduras se pueden sacar
con agua jabonosa.
2. Sacar el rotor y lavar con agua corriente y solución jabonosa, escurrir
después de enguajar muy bien y secar. Antes de acomodar nuevamente el
rotor en el eje de la centrífuga, cuidar de que esté totalmente seco.

10. ACTIVIDAD PARA EL ALUMNO:
Actividad 1
El docente realiza el procedimiento paso a paso, tal como se describe para la centrifugación de
muestras.
Actividad 2
El docente realiza, explicando en detalle, los pasos relacionados con la mantención de la
centrífuga.
Actividad 3
Cada alumno realiza las actividades mostradas por el docente. El docente supervisa cada
etapa del equilibrio de tubos y centrifugación.
Actividad 4
Cada alumno realiza las actividades mostradas por el docente para la mantención de la
centrífuga, supervisado por el docente.
BIBLIOGRAFIA
• http://es.geocities.com/centrifugacion/tiposcentrifugacion.htm
• http://www.jaelsa.com/laboratorio5.html
• http://www.astromia.com/glosario/centrifuga.htm