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BIOQUI
GUIA DE SUPERVIVENCIA – FAMURP
2016
MIJAIL JACOME NUÑEZ
PROTECCION COMPLETA CONTRA EL
EXAMEN DE LABORATORIO
PRACTICA 3: ESPECTROFOTOMETRICA – CURVA DE CALIBRACION
LEY DE LAMBERT: Rayo de luz en medio absorbente, Intensidad IP Espesor.
LEY DE BEER: Rayo de luz en medio absorbente, Intensidad IP Concentracion.
LEY DE LAMBERT-BEER: Relación exponencial entre la transmisión de luz a través de una sustancia y la concentración
así como de la transmisión y longitud del cuerpo que la luz esta atravesando.
𝐶𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛 ¿ ? =
𝐶𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛 𝑆𝑡
𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑆𝑡
×𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 (𝐴𝑏𝑠 𝑜 𝐷𝑂)¿ ?
𝐹𝐴𝐶𝑇𝑂𝑅 𝐷𝐸 𝐶𝐴𝐿𝐼𝐵𝑅𝐴𝐶𝐼𝑂𝑁 (𝐹𝐶) =
𝐶𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛
𝐴𝑏𝑠 𝑜 𝐷𝑂
Absorbancia es lo mismo que densidad óptica (DO).
𝐴𝑏𝑠 𝑜 𝐷𝑂 = 2 − 𝑙𝑜𝑔𝑇
APLICACIÓN:
N° tubo St 1 St 2 St 3 St 4 St 5 Pb
ml. de sol standart 2 4 6 8 10 -
ml. Agua destilada 8 6 4 2 - 8.5
ml. muestra problema - - - - - 1.5
% Transmitancia 85.5 70.8 59.1 50 40.7 42.7
Calcular Absorbancia ¿? ¿? ¿? ¿? ¿? ¿?
Calcular mg % ¿? ¿? ¿? ¿? ¿? ¿?
En el laboratorio nos dan solamente la TRANSMITANCIA, debemos calcular la Abs y mg%.
DATO: Concentracion de cristal violeta = 5mg%.
PRIMER PASO, CALCULO DE LA ABSORBANCIA:
𝐴𝑏𝑠 𝑜 𝐷𝑂 = 2 − 𝑙𝑜𝑔𝑇
St1 => 2 – log85.5 = 0.068
St2 => 2 – log70.8 = 0.150
St3 => 2 – log59.1 = 0.228
St4 => 2 – log50 = 0.301
St5 => 2 – log40.7 = 0.39
Pb (Problema) => 2 – log42.7 = 0.37
SEGUNDO PASO, CALCULO DE mg%:
St1:
5mg 100 ml
Xmg 2ml
X = 0.1 mg
0.1mg 10 ml
Xmg 100ml
X = 1mg%
St2:
5mg 100 ml
Xmg 4ml
X = 0.2 mg
0.2mg 10 ml
Xmg 100ml
X = 2mg%
St3:
5mg 100 ml
Xmg 6ml
X = 0.3 mg
0.3mg 10 ml
Xmg 100ml
X = 3mg%
St4:
5mg 100 ml
Xmg 8ml
X = 0.4 mg
0.4mg 10 ml
Xmg 100ml
X = 4mg%
St5:
5mg 100 ml
Xmg 10ml
X = 0.5 mg
0.2mg 10 ml
Xmg 100ml
X = 5mg%
TERCER PASO, para calcular los mg% o [ ] de la muestra problema se realiza un procedimiento distinto:
𝐹𝐶 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 =
∑ 𝐹𝐶𝑠𝑡
5
St1 => 1/0.068 = 14.71
St2 => 2/0.150 = 13.34
St3 => 3/0.228 = 13.16
St4 => 4/0.301 = 13.29
St5 => 5/0.39 = 12.82
TOTAL = 67.32
FC total = 57.32/5=13.46
Pb => [ ]¿? = 13.46 x 0.37= 4.98 mg%.
RESPUESTA: La concentracion de la muestra problema es de 4.98 mg por 100 ml de solucion.
Curvas de calibración en la siguiente pagina…
CURVAS DE CALIBRACION
INTERPRETACION: La absorbancia es directamente proporcional a la concentracion.
INTERPRETACION: La transmitancia es inversamente proporcional a la concentracion.
PRACTICA 4: FACTORES QUE AFECTAN LA ACTIVIDAD ENZIMATICA
Factores imporantes: pH, [enzima], [sustrato], temperatura.
pH:
Extra: pH de amilasa = 6.9.
Temperatura:
[Sustrato]:
[Enzima]
TIPO DE REACCION: 1er Orden (Velocidad DP a pH).
pH OPTIMO = Máxima actividad de enzima, menor o
mayor pH = reducción en actividad.
TIPO DE REACCION: 1er Orden (Velocidad DP a Temperatura).
TEMPERATURA OPTIMA = Máxima actividad de enzima,
menor o mayor TEMPERATURA = reducción en actividad, a
mayor temperatura la enzima se desnaturaliza con la
consecuente pérdida de actividad.
TIPO DE REACCION: MIXTA
ORDEN 0
Al aumentar la [ ] de sustrato la enzima tiene mas sitios
donde actuar pero al no aumentar la [ ] de enzima, la
cantidad de enzima que se encuentra en el medio se satura
y ya no se forma mas producto, por eso en la primera parte
la reacción es de 1er ORDEN y al saturarse la enzima ya es
de ORDEN 0 porque no se forma mas producto.
TIPO DE REACCION: 1er ORDEN
Esto va en relación a la cantidad de sustrato que se
disponga, si esta cantidad es infinita entonces al aumentar
la [ ] de enzima la velocidad de la reacción seguirá
aumentando progresivamente hacia el infinito.
IMPORTANTE:
Para calcular la actividad enzimática en la prueba con pH:
Actividad enzimática = DO (blanco) – DO (1) – DO(2) – DO(3) – DO(4) – DO(5).
Para calcular la actividad enzimática en la prueba con [enzima]:
Actividad enzimática = DO (blanco) – DO (1) – DO(2) – DO(3) – DO(4) – DO(5).
Para calcular la actividad enzimática en la prueba con temperatura:
Actividad enzimática = DO (blanco) – DO (1) – DO(2) – DO(3) – DO(4) – DO(5).
Para calcular la actividad enzimática en la prueba con [sustrato]:
Actividad enzimática = Lectura inicial – Lectura final (esto se hace en cada tubo ya que se mide la DO
2 veces, una cada 5 minutos; notar que esta formula es para cada tubo).
INHIBICION ENZIMATICA Y VALORES DEL Km Y Vmax
⁅S⁆
(mM)
V1, sin
inhibidor
(mmol.min-1
)
V2, con inhibidor
(mmol.min-1
)
3,0 4,58 3,66
5,0 6,4 5,12
7,0 7,72 6,18
9,0 8,72 6,98
11,0 9,5 7,60
PRIMER PASO: Invertir todo.
1/[S] 1/V1 1/V2
0,34 0,22 0,273
0,2 0,156 0,195
0,142 0,129 0,162
0,12 0,114 0,143
0,09 0,105 0,132
SEGUNDO PASO: Usando la calculadora científica o Excel realizamos el calculo de la pendiente en función lineal.
1/[S] y 1/V1
1/[S] y 1/V2
Ecuacion para V1: y = 0.0614 + 0.467x
Ecuacion para V2: y = 0.0788 + 0.572x
𝑦 = 𝑎 + 𝑏𝑥
𝐾𝑚
𝑉𝑚𝑎𝑥
= 𝑏
1
𝑉𝑚𝑎𝑥
= 𝑎
1
𝐾𝑚
= 𝑎 𝑥
1
𝑏
CUARTO PASO: Para realizar la grafica de Lineweaver-Burk necesitamos 1/Km y 1/Vmax.
V1 = Sin inhibidor:
Aplicando las formulas obtenemos:
1/Km = 0.132
1/Vmax = 0.0614
Vmax = 16.28
V2 = Con inhibidor:
Aplicando las formulas obtenemos:
1/Km = 0.136
1/Vmax = 0.078
Vmax = 12.82
Observando la Vmax demostramos que la velocidad con inhibidor es menor que sin usar un inhibidor.
-0.132
-0.0614
-0.078
-0.136
PRACTICA 5: DIGESTION ENZIMATICA DEL ALMIDON
ALMIDON: Polimero de glucosa con enlaces α1-4 (amilosa) y α1-6 (amilopectina).
En presencia del reactivo de Benedict (CuSO4 principalmente) un azúcar “reductor” precipita Cu2O que es de un
color rojo ladrillo.
GLUCOSA FRUCTOSA
ALMIDON
AZUCARES REDUCTORES: GLUCOSA, FRUCTOSA, MALTOSA.
NO SON AZUCARES REDUCTORES: SACAROSA, ALMIDON.
Digestion enzimática del almidon por accion de AMILASA => DEXTRINA, MALTOSA, MALTOTRIOSA Y GLUCOSA.
PRIMERA PARTE: DETERMINACION DEL SUSTRATO
Todos los tubos presentan almidon.
El tubo 1: Presenta el sustrato (almidon), buffer y NaCl (activador) pero no la enzima.
El tubo 2: Presenta el sustrato, buffer y el activador además de la enzima.
El tubo 3: Presenta el sustrato, buffer, no presenta activador y H2O además de la enzima.
El tubo 4: Presenta el sustrato, no presenta buffer, presenta HCl y la enzima.
PARA LA DETERMINACION DEL SUSTRATO: Se agrega HCl a todas la muestras para detener la reacción y se agrega
LUGOL que es el indicador.
El tubo 5 es de la preparación realizada en el tubo 1, el tubo 6 es de la preparación realizada en el tubo 2 y asi
sucesivamente.
TUBO 5: Tenemos todas las condiciones pero no la enzima por tanto el ALMIDON sigue completo y la solución se tiñe
de COLOR AZUL.
TUBO 6: Tenemos todas las condiciones y la enzima por tanto el ALMIDON se ha HIDROLIZADO y el lugol no se puede
fijar al producto de la hidrolisis que es la ACRODEXTRINA con un COLOR TRANSPARENTE.
TUBO 7: Falta el activador por tanto la reacción se da a medias, la solución se tiñe de ROSA PALIDO por que queda la
ERIDEXTRINA.
TUBO 8: Hemos agregado el HCl que es un acido y por tanto altera el pH optimo para el funcionamiento de la enzima
e inclusive la desnaturaliza por tanto el ALMIDON NO SE HIDROLIZA, obtenemos por tanto COLOR AZUL.
α1-6
α1-4
α1-4 α1-4 α1-4 α1-4
AMILOPECTINA (20%)
AMILOSA (80%)
SEGUNDA PARTE: DETERMINACION DEL PRODUCTO
Como en la anterior prueba de las preparaciones que habíamos realizado agregamos REACTIVO DE BENEDICT, el
tubo 9 proviene del tubo 5, el tubo 10 proviene del tubo 6 y asi sucesivamente, el tubo 13 es GLUCOSA pura con
reactivo de BENEDICT.
TUBO 9: Teniamos ALMIDON, en reactivo de BENEDICT NO DA PRECIPITADO por tanto NO ES AZUCAR REDUCTOR.
TUBO 10: Teniamos ACRODEXTRINA o DEXTRINA que con BENEDICT da una solución celeste verdosa con precipitado
rojo por tanto ES AZUCAR REDUCTOR.
TUBO 11: Teniamos ERIDEXTRINA que da un resultado similar al tubo 10 siendo AZUCAR REDUCTOR.
TUBO 12: En reactivo de BENEDICT no forma precipitado, recordemos que quedaba ALMIDON que NO ES AZUCAR
REDUCTOR.
TUBO 13: Glucosa al 1% con BENEDICT forma precipitado ROJO LADRILLO por tanto es AZUCAR REDUCTOR.
TERCERA PARTE: REACCION DE BENEDICT
Tenemos Glucosa, Fructosa, Maltosa y Sacarosa “puras” que exponemos al reactivo de Benedict:
AZUCARES REDUCTORES: GLUCOSA, FRUCTOSA, MALTOSA.
NO SON AZUCARES REDUCTORES: SACAROSA, ALMIDON.
PRACTICA 6: PRUEBA DE TOLERANCIA ORAL DE LA GLUCOSA
En sospecha de metabolismo anormal de la glucosa (DIABETES).
Para realizar la prueba en un paciente:
75g de glucosa (idealmente es 100g pero se obtiene el mismo resultado) + 400ml de H2O + 2 limones (para ayudar a
que el paciente tome la solución).
Aplicando lo aprendido en la PRACTICA 5:
Tenemos 2 muestras: 1 de nosotros (estamos sanos) y 1 de nuestro paciente del que tenemos sospecha de diabetes.
Exponemos esas 2 muestras al reactivo de Benedict y obtenemos:
Nuestra muestra de orina no forma precipitado.
La muestra de nuestro paciente forma precipitado ROJO LADRILLO => CONCLUSION: El paciente esta
eliminando azucares reductores (no sabemos si es glucosuria u otras, solo sabemos que es un azúcar).
𝑉. 𝑁. (𝐺𝐿𝑈𝐶𝑂𝑆𝐴 𝑆𝐸𝑅𝐼𝐶𝐴) = 75 → 115 𝑚𝑔/𝑑𝐿
𝑉. 𝑁. (𝐺𝐿𝑈𝐶𝑂𝑆𝐴 𝑆𝐸𝑅𝐼𝐶𝐴) = 4,16 → 6,39 𝑚𝑚𝑜𝑙/𝐿
CURVA DE TOLERANCIA ORAL DE LA GLUCOSA:
Nosotros en el laboratorio vamos a tener muestras de suero de un paciente al que se le han tomado dichas muestras
cada 30 minutos, mezclamos con Reactivo de glucosa y luego incubamos para luego medir su DO (Abs).
Con los mg/dl que obtengamos (ver mas adelante) realizamos una grafica que va a ser similar a las que están en la
parte superior.
Los valores estándar que debemos conocer son:
A los 0 minutos: Menor a 115 mg/dL.
A los 60 minutos: Menor a 180 mg/dL.
A los 120 minutos: Menor a 140 mg/dL.
Si la glucosa supera los 180 mg/dL a los 60´ el paciente generalmente presenta glucosuria.
CONVERSION DE mg/dL A mmol/L:
Ej: 75 mg/dL.
75𝑚𝑔
𝑑𝐿
𝑥
1𝑑𝐿
10−1 𝐿
= 750𝑚𝑔/𝐿
𝑚𝑔 → 𝑚𝑚𝑜𝑙
1mol C6H12O6 180g
XmolC6H12O6 750g
X = 75/18 = 4.16 mmol/L
DETERMINACION DE LA GLUCOSA SERICA
Tubo 1 (Blanco) 2 (St) 3 (0´) 4 (30´) 5 (60´) 6 (90´) 7 (120´)
DO (Abs) - 0.231 0.274 0.366 0.650 0.624 0.582
DATO: St de glucosa = 100 mg/dL
PRIMER PASO: Factor de Calibracion Estandar.
𝐹𝐶𝑠𝑡 =
100
0.231
= 433
SEGUNDO PASO: Calculo de mg/dL usando la formula ( [ ] ¿? = FCst x Abs ¿? )
0´ => 0.274 x 433 = 118.64 mg/dl
30´ => 0.366 x 433 = 158.48 mg/dl
60´ => 0.650 x 433 = 281.45 mg/dl
90´ => 0.624 x 433 = 270.2 mg/dl
120´ => 0.582 x 433 = 252 mg/dl
A los 60´ el paciente supero los 180 mg/dl y a 120´ (generalmente tiende a disminuir) sigue sobre los niveles
normales.
CONCLUSION: El paciente no metaboliza bien la glucosa, presenta una curva de tolerancia a la glucosa anormal y
probablemente sea diabético.
DIABETES
Un diabético presenta generalmente:
Polidipsia (sed).
Polifagia (hambre).
Poliuria (orina excesiva).
Al haber menos insulina la glucosa se eleva = Hiperglucemia, la glucosa en exceso no puede ser usada por el
organismo y en respuesta se inicia la gluconeogénesis que eleva aun mas la glucosa en sangre.
Se requieren sustratos para la gluconeogénesis (aminoácidos y lípidos) lo que lleva a proteólisis muscular causando
atrofia y que se manifiesta como polifagia (requiere materia prima para reparar el musculo que se esta
destruyendo), aumenta la lipolisis que a su vez aumenta los acidos grasos séricos que se transforman a cuerpos
cetónicos (acidos) los cuales reducen el bicarbonato (HCO3) en sangre derivando hacia una ACIDOSIS DIABETICA.
PRACTICA 7: ACIDOSIS DIABETICA
Cuerpos cetónicos: Aceto acetato, Acetona (volátil) y B-hidroxibutirato.
Estos en sangre reducen el pH.
El bicarbonato en sangre esta asociado a sodio.
HCO3Na + HCl -> H2CO3 + NaCl -> H2O + CO2 + NaCl
𝑉. 𝑁. (𝐵𝐼𝐶𝐴𝑅𝐵𝑂𝑁𝐴𝑇𝑂 𝑆𝐸𝑅𝐼𝐶𝑂) = 26 → 32 𝑚𝐸𝑞/𝐿
PRIMERA PARTE => NEUTRALIZACION DEL BICARBONATO
Tenemos 2 Beackers con 1ml de suero en los que agregamos 5ml de HCl.
Para titular el Beacker 1 se requirió 2ml de NaOH.
5ml – 2ml = 3ml (Volumen de HCl neutralizado por el HCO3 que estaba en el suero).
Para titular el Beacker 2 se requirió 3,4 ml de NaOH.
5ml – 3,4ml = 1.6ml (Volumen de HCl neutralizado por el HCO3 que estaba en el suero).
Convertir los ml a L.
DATO: La normalidad = 0.1.
Ahora para calcular los mEq de HCO3 que había en el suero realizamos el siguiente procedimiento:
Beacker 1:
PRIMERA PARTE:
10−2
=
#𝐸𝑞
3𝑥10−3⁄
#𝐸𝑞 = 3𝑥10−5
#𝑚𝐸𝑞 = 3𝑥10−5
𝐸𝑞 𝑥
1000 𝑚𝐸𝑞
1 𝐸𝑞⁄
#𝑚𝐸𝑞 = 3𝑥10−2
(𝑒𝑛 1 𝑚𝑙)
SEGUNDA PARTE:
3x10^-2 1ml
XmEq 1L(1000ml)
X = 30 mEq/L
Beacker 2:
PRIMERA PARTE:
10−2
=
#𝐸𝑞
16𝑥10−4⁄
#𝐸𝑞 = 16𝑥10−6
#𝑚𝐸𝑞 = 16𝑥10−6
𝐸𝑞 𝑥
1000 𝑚𝐸𝑞
1 𝐸𝑞⁄
#𝑚𝐸𝑞 = 16𝑥10−3
(𝑒𝑛 1 𝑚𝑙)
SEGUNDA PARTE:
16x10^-3 1ml
XmEq 1L(1000ml)
X = 16 mEq/L
La muestra del Beacker 1 se encuentra en los valores normales pero la muestra del Beacker 2 esta disminuido.
CONCLUSION: El paciente del Beacker 2 probablemente se encuentre en acidosis.
SEGUNDA PARTE => TEST DE ROTHERA
Esta prueba se utiliza para determinar únicamente acetona (que es volátil y da el olor característico de manzana a un
diabético en acidosis), evidencia la presencia únicamente de acetona.
SO4(NH4)2 o Sulfato de Amonio + Nitroprusiato de Na + Orina
Si hay presencia de cuerpos cetónicos => Anillo purpura-rojizo.
Si no hay presencia de cuerpos cetónicos => Anillo transparente.
PRACTICA 8: PERFIL LIPIDICO Y RIESGO CORONARIO
Enfermedad cardiaca coronaria = 1ra causa de morbilidad prematura causada por aumento en el colesterol
plasmático.
El HDL aumenta con los flavonoides, ejercicio y dieta adecuada.
La hipercolesterolemia no da síntomas, da signos.
Lipidos séricos = Colesterol + Trigliceridos.
Triglicerido = Glicerol + 3 acidos grasos (cadena carbonada con un grupo carboxilo).
HDL = Transporte en reversa del colesterol (hacia el hígado), de protección.
VALOR NORMAL DEL COLESTEROL = 160 - 200 mg/dl
VALOR NORMAL DE TRIGLICERIDOS = 60 – 200 mg/dl
VALOR NORMAL DEL HDL = 40 – 60 mg/dl
VALOR NORMAL DEL VLDL = 5 – 40 mg/dl
Si el colesterol pasa de 350 mg/dl se empiezan a observan Xantomas.
ECUACION DE FRIEDEWALD:
LDL = Colesterol total – HDL – VLDL (expresado en mg/dl)
VLDL = TG/5 si y solo si TAG < 400 mg/dl.
FACTOR DE CALIBRACION = CONCENTRACION/ABSORBANCIA O DENSIDAD OPTICA.
FORMULAS:
COLESTEROL = FC x DO
TRIGLICERIDOS = FC x DO
HDL = DO x FD
FD = FACTOR DE DILUCION = 76.5/ABSORBANCIA ESTANDAR.
RIESGO CORONARIO:
1) COLESTEROL TOTAL/HDL
Debe ser menor a 5, si es mayor = riesgo.
2) LDL/HDL
Debe ser menor a 3.5, si es mayor = riesgo.
Se disminuye el riesgo coronario con ejercicio + dieta.
DETERMINACION DEL COLESTEROL
Tubo N° Blanco Standard
Muestra
1
Muestra
2
St-Colesterol: 200 mg/dl - 30 ul - -
Suero –Pb - - 30 ul 30 ul
Reactivo Color 3.0 ml 3.0 ml 3.0 ml 3.0 ml
ABSORBANCIA - 0.299 0.178 0.383
1) Calcular el FC:
FC = CONCENTRACION/ABSORBANCIA = 200/0.299 = 668.9
2) Muestra 1:
M1 = 668.9 X 0.178 = 119.1 mg/dl => Deseable
3) Muestra 2:
M2 = 668.9 X 0.383 = 256 mg/dl => Calculando el riesgo coronario se determina si hay riesgo.
DETERMINACION DE TRIGLICERIDOS
Tubo N° Blanco Standard
Muestra
1
Muestra
2
St-Triglicérido: 200 mg| dl - 30 ul - -
Suero -Pb - - 30 ul 30 ul
Reactivo Color 3.0 ml 3.0 ml 3.0 ml 3.0 ml
ABSORBANCIA - 0.384 0.151 0.642
1) Calcular el FC:
FC = 200/0.384 = 520.84
2) Muestra 1:
M1 = 520.84 X 0.151 = 78.54 => OK
3) Muestra 2:
M2 = 520.84 X 0.642 = 334.38 => MUY ALTO
4) Calculo del VLDL:
M1: 78.64/5 = 15.73
M2: 334.38/5 = 66.87
DETERMINACION DEL HDL
Tubo N° Blanco Standard Muestra 1 Muestra 2
Sobrenadante (ml) - - 0.30 0.30
Standard (ml) - 0.03 - -
Reactivo (ml) 3.00 3.00 3.00 3.00
ABSORBANCIA - 0.291 0.140 0.063
1) Factor de Dilucion:
FD = 76.5/0.291 = 262.89
2) Muestra 1:
M1 = 0.140 X 269.89 = 36.80 => OK
3) Muestra 2:
M2 = 0.063 X 269.89 = 16.55 => MUY BAJO
DETERMINACION DEL LDL
MUESTRA 1:
LDL = 119.1 – 36.8 - 15.73 = 66.57
MUESTRA 2:
LDL = 256 – 66.87 – 16.55 = 172.58
RIESGO CORONARIO
COLESTEROL/HDL < 5
LDL/HDL < 3.5
MUESTRA 1:
A) 119.1/36.8 = 3.24 => OK
B) 66.57/36.8 = 1.8 => OK
MUESTRA 2:
A) 256/16.55 = 15.46 => ALTISIMO
B) 172.58/16.55 = 10.42 => ALTISIMO
CONCLUSION:
Paciente 1 no presenta ningún riesgo, en estado correcto de salud.
Paciente 2 presenta un alto riesgo, debe mejorar sus habitos de vida.
PRACTICA 9: ICTERICIA E HIPERBILIRRUBINEMIA
Se presenta ictericia si la bilirrubina > 2 – 2.5 mg/dl => Se acumula en tejidos con mayor numero de fibras
elásticas (piel + mucosas) = ICTERICIA.
Hiperbilirrubinemia (No conjugada o Indirecta): En anemia hemolítica, Sindrome de Gilbert (Deficiencia parcial
de glucoroniltransferasa con leve ictericia, es benigno) y Sindrome de Crigler Najar (No glucoroniltransferasa =
ictericia no hemolítica con alto nivel de bilirrubina en sangre que ocasiona daño cerebral en el infante).
Hiperbilirrubinemia (Conjugada o Directa): Insuficiente capacidad de excreción como en hepatitis aguda,
obstrucción biliar, cirrosis hepática o colestasia.
PRE-HEPATICA
Aumento de
Bilirrubina indirecta
Sobreproduccion
Anemia hemolítica
(autoinmune o
esferocitosis).
Talasemias.
Anemia
megaloblastica.
Absorcion de
hematomas.
La bilirrubina
indirecta es
insoluble por tanto
esta unida a la Hb y
no filtra.
HEPATICA
Aumento de
Bilirrubina indirecta
Menor captación Sindrome de Gilbert
Aumento en la
excreción de la
bilirrubina directa
ya que esta es
soluble y es filtrada
por el riñon.
Menor conjugación
Enfermedad de
Crigler Najar
Aumento de la
Bilirrubina directa
Alteracion en
transporte y
excreción
Sindrome de Dubin-
Johnson
Sindrome Rotor
Obstruccion en via
biliar intrahepatica
Cirrosis Biliar
Necrosis
hepatocelular
Hepatitis
POST-HEPATICA
Aumento de la
Bilirrubina directa
Obstruccion en via
biliar extrahepatica
Calculos biliares
Calculos de cabeza
de pancreas
BILIRRUBINA TOTAL = 0.3 – 1.1 mg/dl
BILIRRUBINA DIRECTA = 0.1 – 0.4 mg/dl
BILIRRUBINA INDIRECTA = 0.2 a 0.7 mg/dl
La bilirrubina total medida con el acido sulfanilico diazodato, la bilirrubina indirecta medida con benzoato de
cafeína.
Reaccion de Ehrlich => Urobilinogeno.
Reaccion de Gmelin => Bilirrubina urinaria.
Bilirrubina = pigmento de heces y orina, 4 porfirinas abiertas.
Aumento de bilirrubina indirecta => alteración de antes de que entre al hígado (hemolisis masiva).
Aumento de bilirrubina directa => menor captación hepática, no conjugación y no hay excreción.
Heces claras = no bilirrubina = obstrucción, si hay bilirrubina en orina = no metabolismo.
Los carotenos ocasionan falsa ictericia => No se fijan a las mucosas.
La ictericia causada por BILIRRUBINA DIRECTA (HIDROSOLUBLE) y por tanto es la única que se puede difundir y
fijar al tejido.
Si la bilirrubina directa e indirecta están ambos elevados => Hemolisis y obstrucción.
Si todos los niveles de bilirrubina aumentados = Hiperbilirrubinemia (2.2 mg/dl de bilirrubina).
BILIRRUBINA DIRECTA BILIRRUBINA INDIRECTA
0.1 a 0.4 mg/dl 0.2 a 0.7 mg/dl
Soluble Insoluble
Libre Unida a albumina
Via circulación hepático renal Entra al higado
Conjugada con ac. glucoronico No conjugada
Blanco Directa Total
Muestra 200 ul 200 ul 200 ul
Agua Destilada 2.4 ml 2.4 ml -
Desarrollador - - 2.4 ml
Reactivo sulfanílico 200 ul - -
Diazorreactivo - 200 ul 200 ul
ABSORBANCIA 0.057 0.177 0.252
Nos dan de dato:
Concentracion estándar = 2mg%
DO estándar = 0.09
1) CALCULO DEL FACTOR DE CALIBRACION:
FC = 2/0.09 = 22.23
2) CALCULO DE LA BILIRRUBINA TOTAL:
BT = FC (Abs – Blanco)
BT = 22.23 (0.252-0.057) = 4.33
3) CALCULO DE LA BILIRRUBINA DIRECTA:
BD = FC (Abs – Blanco)
BD = 22.23 (0.177 – 0.057) = 2.66
4) CALCULO DE LA BILIRRUBINA INDIRECTA:
BT = BD + BI
4.33 = 2.66 + BI
BI = 1.67
CONCLUSION:
Todos los niveles de bilirrubina en este paciente se encuentran aumentados, sufre de hiperbilirrubinemia.
PRACTICA 10: TRANSAMINACION
AA en el hígado  Eliminacion de α-amino = TRANSAMINACION => Paso del amino desde el aminoácido entrante al
α-cetoglutarato formando además un α-cetoacido, es una reacción REVERSIBLE.
DATO: Prolina, hidroxiprolina, lisina y treonina no participan en transaminacion.
TRANSAMINASAS Y LESIONES TISULARES
Alanina aminotransferasa (ALT) = Glutamato – piruvato transaminasa (GPT), específicamente
hepática, menor en hepatitis vírica pero mayor en cirrosis, enfermedad hepática, tumores hepáticos,
colestasis y hepatitis toxica.
glutamato + piruvato ⇌ α-cetoglutarato + alanina
Aspartato aminotransferasa (AST) = Glutamato – oxalacetato transaminasa (GOT) en corazón,
hígado y musculo; en cantidades elevadas en infarto agudo de miocardio, hepatopatía y miopatías
(daño celular grave).
L-aspartato + 2-oxoglutarato ⇌ oxalacetato + L-glutamato
Creatina quinasa => Primera en liberarse al suero sanguíneo tras un ataque cardiaco, ellas dan
información sobre la gravedad de la lesión.
Creatina quinasa  GOT  GTP
Tubo N° 1 1 2
PIRUVATO 0.2 M (ml) 0.3 0.3
GLUTAMATO 0.2 M (ml) 0.3 0.3
ARSENITO 0.2 M (ml) 0.4 0.4
ENZIMA ACTIVA 0.2 M (ml) 0 1
ENZIMA INACTIVA 0.2 M (ml) 1 0
Aminacion de α-cetoglutarato
quedando como glutamato.
Desaminacion de α-aminacido
quedando como α-cetoacido.
Dador de aminos en rutas
biosinteticas y de excreción.
TRANSAMINACION => Enzima = Transaminasa
Cofactor = Piridoxal fosfato (de vit. B6).
Transportador de aminos
Racemizacion (Cα)
Descarboxilacion
Transaminasa = Amino transferasa
En la guía se proporciona este cuadro que en realidad no es muy útil en el procedimiento, se usaron “capilares” para
distribuir la muestra en el papel de silica con 4 puntos equidistantes que eran de: Alanina, Glutamato, M1 y M2.
Buscabamos determinar a que correspondían la muestra 1 y la muestra 2.
Rf = relación de frentes, expresa la posición de un compuesto sobre la placa.
Rf = Distancia de la sustancia/Distancia del solvente
El solvente es el agua por tanto mediamos hasta donde el H2O subia en el papel de silica.
Se obtuvo que la distancia del H2O (solvente) era de 14,3 cm.
La distancia de la alanina fue de 7,2 cm.
La distancia del glutamato fue de 5,7 cm.
La distancia de la muestra 1 fue de 7,2 cm.
La distancia de la muestra 2 presentaba 2 puntos: a 5,3 cm y a 7 cm.
CALCULO DEL RF:
ALANINA: 7.2/14.3 = 0.5 cm.
GLUTAMATO: 5.7/14.3 = 0.39 cm.
MUESTRA 1: 7.2/14.3 = 0.5 cm => Por tanto es de ALANINA.
MUESTRA 2:
Punto 1: 5.3/14.3 = 0.37 cm => Muy cercano al GLUTAMATO.
Punto 2: 7/14.3 = 0.48 cm => Muy cercano al de ALANINA.
PRACTICA 11: BALANCE NITROGENADO, RELACION INGESTA – EXCRETA
Evaluacion del metabolismo proteico, se evalua mediante el nitrógeno total estimado.
BN = N. INGERIDO – (N. UREICO + N. CREATININICO + 2)
 Nitrogeno ureico = 88%, Nitrogeno creatininico = 7%, Nitrogeno eliminado por sudor o piel 3% (no significativo).
Las proteínas y aa no se almacenan por tanto el exceso se exceta.
Tipos:
BN 0 => Ingesta = Excreta => Ideal, en individuos sanos.
BN (-) => Ingesta < Excreta => En inanición, desnutrición, vejez, diabetes no controlada, fiebre, estrés (sepsis,
post quirúrgico, traumatismo, quemaduras).
BN (+) => Ingesta > Excreta => En niñez (crecimiento), gestantes, pacientes en recuperación y post inanición.
Valores:
>2 = Anabolismo
2 a -2 = Equilibrio
-2 a -5 = Catabolismo leve
-5 a -10 = Catabolismo moderado
< -10 = Catabolismo severo
Volumen normal de la orina = 1.4 a 1.5 L
Nitrogeno ingerido:
1g de Nitrogeno = 1g de proteína/6.25
6.25:
100g proteínas 16g de N (experimentalmente)
X 1g de N
X = 6.25 => Por cada 6.25g de proteínas se elimina 1g de N.
Si se presenta albuminuria la formula tiene una variación:
BN = N. INGERIDO – (N. UREICO + N. CREATININICO + 2 + PROTEINA URINARIA/6.25)
Valores normales de los parámetros:
VN DE CREATININA = 0.8 – 1.5 g/dia
VN DE UREA = 15 – 30 g/dia
VN DE N. Ureico = 7 – 14 g/dia
Ingesta de proteínas en adulto: 0.7 a 0.8g/kg/dia.
Creatinina:
Producto de la actividad muscular, disminuye al movilizarla. De la degradación de creatinina,
se filtra en los riñones y se excreta en la orina, se utiliza para valorar la función renal.
Peso Molecular = 113
# de N = 3
Creatina:
Derivado de Arginina, Glicina y Metionina, se sintetiza en el hígado y páncreas, esta
presente en el musculo y la neurona, se usa como vector para el transporte de ATP
hacia la miofibrilla.
Urea:
Producto de la degradación de compuestos nitrogenados mediante el ciclo de la urea.
Urea por accion de UREASA => 2NH3 + CO2
Peso Molecular = 60
# de N = 2
DATOS GENERALES DEL PACIENTE
PACIENTE 1: Volumen de orina = 1500ml, Peso = 65 kg, Ingesta proteica = 1g/kg.
PACIENTE 2: Volumen de orina = 1200ml, Peso = 42 kg, Ingesta proteica = 0.7g/kg.
DETERMINACION DEL NITROGENO INGERIDO
PACIENTE 1:
1 X 65 = 65g de proteína
Para el calculo del nitrógeno ingerido recordar: 6.25 g de proteínas = 1 g de N.
65/6.25 = 10.4g de N
PACIENTE 2:
0.7 X 42 = 29.4 g de proteina
Para el calculo del nitrógeno ingerido recordar: 6.25 g de proteínas = 1 g de N.
29.4/6.25 = 4.704g de N
DETERMINACION DE LA CREATININA
N° TUBO BL ST Muestra 1 Muestra 2
ORINA 1/10 ml 0.04 0.04
AGUA ml 0.8 0.2 0.8 0.8
St. 1.5 mg/dl ml 0.2
R. Pícrico ml 1.6 0.8 1.6 1.6
Buffer Alcalino ml 0.4 0.2 0.4 0.4
ABSORBANCIA - 0.159 0.8 0.099
1) Creatinina en orina:
Absorbancia de la muestra/Absorbancia del estándar x 150
Muestra 1:
0.8/0.159 x 150 = 754.72 mg/dl
Muestra 2:
0.099/0.159 x 150 = 93.396 mg/dl
2) Creatinina urinaria en 24 horas:
Creatinina en orina X Volumen de orina en 24 Hrs (L)
Muestra 1:
754.72 x 1.5 = 1132.08
Muestra 2:
93.396 x 1.2= 112.0752
3) Nitrogeno creatininico en 24 horas:
(Creatinina urinaria x 0.37)/100
Muestra 1:
1132.08 x 0.37/100 = 4.1886 g/dia
Muestra 2:
112.0752 x 0.37/100 = 0.4146 g/dia
¿De donde proviene el 0.37?
La creatinina presenta 3 Nitrogenos, 3x14 = 42. 113 es el peso molecular de la creatinina.
113g de creatinina 42g de Nitrogeno
1g de creatinina X => 0.37
DETERMINACION DE LA UREA
N° TUBO Blanco Standard Muestra 1 Muestra 2
Orina:1/100 (ml) 0.02 0.02
St:66mg/dl (ml) 0.02
Reactivo de trabajo (ml) 2.0 2.0 2.0 2.0
Mezclar incubar 3' a 37°C o 5’ a T° ambiente
Reactivo de Hipoclorito (ml) 2.0 2.0 2.0 2.0
Mezclar incubar 5' a 37°C o 10’ a T° ambiente
ABSORBANCIA - 0.891 0.164 0.090
1) Factor Urea:
66/Abs estándar => 66/0.891 = 74
2) Urea en orina en 24 horas:
Factor Urea X DO de muestra X Volumen (ml)
Muestra 1:
74 x 0.164 x 1500 = 18204
Muestra 2:
74 x 0.090 x 1200 = 7992
3) Nitrogeno ureico en 24 horas:
(Urea en orina en 24 horas x 0.455)/1000
Muestra 1:
18204 x 0.455/1000 = 8.285 g/dia
Muestra 2:
7992 x 0.455/1000 = 3.636 g/dia
¿De donde proviene el 0.455?
La urea presenta 2 Nitrogenos, 2x14 = 28. 60 es el peso molecular de la Urea.
60g de urea 28g de Nitrogeno
1g de urea X => 0.46
BALANCE NITROGENADO
PACIENTE 1:
BN = 10.4 – (8.28 + 4.188 + 2) = -4.068
PACIENTE 2:
BN = 4.704 – (0.414 + 3.63 + 2) = -1.34
CONCLUSION:
El paciente numero 1 presenta un catabolismo leve, necesita reponer las perdidas.
El paciente numero 2 esta sano, es normal.
PRACTICA 12: EVALUACION DE MASA PROTEICA VISCERAL Y ESQUELETICA
Compartimiento visceral midiendo: Transferrina, Pre-albumina, Albumina => Proteina total.
Compartimiento esquelético: Excrecion de la creatinina.
Nivel alto de albumina: Inflamacion o infección (hepatitis) además de transtornos en la medula osea.
Nivel bajo de albumina: Hemorragia, transtorno hepático, glomerulonefritis, desnutrición, absorción insuficiente o
quemaduras.
La albumina mantiene la presión oncotica (carga -), para sintetizar hormonas tiroideas, transporte de acidos
grasos, control del pH.
PROTEINA TOTAL ALBUMINA CREATININA PESO/TALLA
VARON MUJER VARON MUJER VARON MUJER VARON MUJER
7,01 6,99 3,89 3,9 660-830 430-670 30-38 29-34
g/dL g/dL g/dL g/dL mg/24h/m mg/24h/m Kg/m Kg/m
KWASHIORKOR MARASMO
Observamos que hay poca diferencias de genero en cuanto a la PROTEINA TOTAL y ALBUMINA SERICA.
Indicadores para el Kwashiorkor: PROTEINA TOTAL y ALBUMINA SERICA.
Indicadores para el Marasmo: CREATININA URINARIA e INDICE PESO Y TALLA.
KWASHIORKOR
En niños de 1-3 años, dieta baja en proteínas pero ingesta de CH normal o excesiva.
Sintomatologia: Irritabilidad, diarrea, falta de crecimiento, infecciones, cambios en el color del pelo, piel escamosa,
infiltración grasa en el hígado, menor masa muscular y edema masivo.
MARASMO
Carencia de alimentos en general (poca proteínas y poco CH), mas común en el primer año de edad.
Cuasado también por infecciones o parasitosis, también parto prematuro, malabsorción o interrupción temprana de
la lactancia.
Sintomatologia: Crecimiento deficiente, poca grasa subcutánea, delgadez extrema, anemia, ulceraciones por presión,
cambio en la textura del cabello el color normal.
KWASHIORKOR MARASMICO
Malnutricion grave con edema y peso menor al 60% de lo esperado de su edad. Presentan caracterisiticas del
marasmo y edema, además se puede observar dermatosis y hepatomegalia.
CARACTERISTICA KWASHIORKOR
Hipoalbuminemia
MARASMO
Caquexia
EDEMA SI NO
DERMATOSIS FRECUENTE RARO
CARÁCTER IRRITABLE APATICO
IMC NORMAL/AUMENTADO DISMINUIDO
GRASA CORPORAL NORMAL/AUMENTADO DISMINUIDO
ALBUMINA DISMINUIDO NORMAL/AUMENTADO
MASA MUSCULAR NORMAL DISMINUIDO
HIGADO GRASO SI NO
INSULINA NORMAL DISMINUIDO
CORTISOL NORMAL/DISMINUIDO AUMENTADO
DATOS GENERALES DEL PACIENTE:
PACIENTE 1: Peso = 45kg, Talla = 1.65m, Indice Peso/Talla = 27.27, Volumen de Orina en 24hrs = 1500ml.
PACIENTE 2: Peso = 50kg, Talla = 1.56m, Indice Peso/Talla = 32.05, Volumen de Orina en 24hrs = 1200ml.
DETERMINACION DE LA PROTEINA TOTAL
BL Muestra 1 Muestra 2 St
Agua destil. 20 ul
Suero 20 ul 20 ul
St. Prot. Tot 5.7 g/dl 20 ul
R. Color 2.0 ml 2.0 ml 2.0 ml 2.0 ml
ABSORBANCIA - 0.127 0.131 0.162
1) Calculando el FC:
FC = Concentracion/Abs estándar
FC = 5.7/0.162 = 35.185
2) Calculando la proteína total:
Concentracion Muesta = FC x Absorbancia de muestra
MUESTRA 1:
35.185 x 0.127 = 4.468g/dl
MUESTRA 2:
35.185 x 0.131 = 4.609g/dl
INTERPRETACION: Ambos pacientes presentan la proteína total sérica baja.
DETERMINACION DE LA ALBUMINA SERICA
BL Problema Problema St
Agua destil. 20 ul
Suero 20 ul 20 ul
St. Albúmina 3.3 g/dl 20 ul
R. Color 2.0 ml 2.0 ml 2.0 ml 2.0 ml
ABSORBANCIA - 0.677 0.551 0.435
1) Calculando el FC:
FC = Concentracion/Abs estándar
FC = 3.3/0.435 = 7.586
2) Calculando la proteína total:
Concentracion Muesta = FC x Absorbancia de muestra
MUESTRA 1:
7.586 x 0.677 = 5.135g/dl
MUESTRA 2:
7.586 x 0.551 = 4.179g/dl
INTERPRETACION: Ambos pacientes presentan niveles correctos de albumina serica.
DETERMINACION DE LA CREATININA URINARIA
N° TUBO BL ST Muestra 1 Muestra 2
ORINA 1/10 ml 0.04 0.04
AGUA ml 0.8 0.2 0.8 0.8
St. 1.5 mg/dl ml 0.2
R. Picrico ml 1.6 0.8 1.6 1.6
Buffer Alcalino ml 0.4 0.2 0.4 0.4
ABSORBANCIA - 0.170 0.054 0.092
1) Calculando la creatinina urinaria:
Creatinina urinaria (mg/dl) = Absorbancia muestra/Absorbancia estándar x 150
MUESTRA 1:
0.054/0.170 x 150 = 47.64mg/dl
MUESTRA 2:
0.092/0.170 x 150 = 81.176mg/dl
2) Calculando la creatinina urinaria en 24hrs:
Creatinina urinaria x Volumen de orina (L) x 10
MUESTRA 1:
47.64 x 1.5 x 10 = 714.6mg/24hrs
Luego: 714.6/1.65 (talla del paciente 1) = 433.09 mg/24hrs/m
MUESTRA 2:
81.176 x 1.2 x 10 = 974.112mg/24hrs
Luego: 974.112/1.56 (talla del paciente 2) = 624.43 mg/24hrs/m
INTERPRETACION: Si ambos pacientes son varones entonces ambos pueden ser marasmaticos, si ambos son mujeres
entonces están dentro del rango normal.
GLOBAL
Paciente 1:
Indice peso/talla: 27.27
Proteina total sérica: 4.468g/dl
Albumina sérica: 5.135g/dl
Creatinina urinaria: 433.09 mg/24hrs/m
Paciente 2:
Indice peso/talla: 32.05
Proteina total sérica: 4.609g/dl
Albumina sérica: 4.179g/dl
Creatinina urinaria: 624.43 mg/24hrs/m
Si el paciente es varon: El índice
peso/talla y la creatinina urinaria
corresponden a un marasmatico.
Si el paciente es mujer: El único índice
bajo es el de proteína total, no se
concluye que tenga Kwahiorkor, esta
normal.
PRACTICA 13: METODOS PARA LA EVALUACION NUTRICIONAL
PESO CORPORAL:
%𝑃𝑒𝑠𝑜 𝐼𝑑𝑒𝑎𝑙 = 𝑃𝑒𝑠𝑜 𝐴𝑐𝑡𝑢𝑎𝑙
𝑃𝑒𝑠𝑜 𝐼𝑑𝑒𝑎𝑙⁄ 𝑥100
+120% = OBESIDAD
110-120 = SOBREPESO
90-110 = NORMAL
80-90 = DESNUTRICION LEVE
70-80 = DESNUTRICION MODERADA
-69% = DESNUTRICION GRAVE
PESO IDEAL SEGÚN TALLA (Metodo Practico):
HOMBRES
1.45->1.5 => 53±1
1.5->1.55 => 56±1
1.55->1.6 => 59±1
1.6->1.65 => 62±1
1.65->1.7 => 65±1
1.7->1.75 => 68±1
1.75->1.8 => 72±1
1.8->1.85 => 76±1
MUJERES
1.40->1.45 => 46±1
1.45->1.5 => 49±1
1.5->1.55 => 52±1
1.55->1.6 => 55±1
1.6->1.65 => 58±1
1.65->1.69 => 61±1
IMPORTANTE: Es +1 si se aproxima al límite superior y es -1 si se aproxima al limite inferior.
INDICE DE MASA CORPORAL:
𝐼𝑀𝐶 = 𝑃𝑒𝑠𝑜
𝑇𝑎𝑙𝑙𝑎2⁄
+40 = OBESO MORBIDO
35-39,9 = OBESIDAD SEVERA
30-35,9 = OBESIDAD MODERADA
25,1-30 = SOBREPESO
19,1-25 = NORMAL
17-19 = DESNUTRICION LEVE
16-16,9 = DESNUTRICION MODERADA
-16 = DESNUTRICION SEVERA
ADECUACION DE LA DIETA:
𝐴𝑑𝑒𝑐𝑢𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛 𝑑𝑒 𝐷𝑖𝑒𝑡𝑎 =
𝐸𝑛𝑒𝑟𝑔𝑖𝑎 𝑑𝑒 𝐷𝑖𝑒𝑡𝑎
𝑁𝑒𝑐𝑒𝑠𝑖𝑑𝑎𝑑 𝐸𝑛𝑒𝑟𝑔𝑒𝑡𝑖𝑐𝑎⁄ 𝑥100%
V.N. = 100%, aumento = sobrepeso, disminución = desnutrición.
GASTO CALORICO:
𝐷𝑢𝑟𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛 𝑑𝑒 𝑎𝑐𝑡𝑖𝑣𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑥 𝐾𝑐𝑎𝑙 𝑥 𝑃𝑒𝑠𝑜
Hombres = 2800 Kcal/24h, Mujeres = 2200 – 2500 Kcal/24h.
En el paciente su metabolismo basal:
Varon = (1xpesox24)+50%
Mujer = (0,9xpesox24)+50%
PLIEGUE CUTANEO:
Estimado del almacenamiento de lípidos.
Varon = 12,5 mm.
Mujer = 16,5 mm.
+3
+3
+3
+3
+3
+4
+4
+3
+3
+3
+3
+3
CIRCUNFERENCIA MUSCULAR DEL BRAZO:
𝐶𝑖𝑟𝑐𝑢𝑛𝑓𝑒𝑟𝑒𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑀𝑢𝑠𝑐𝑢𝑙𝑎𝑟 𝑑𝑒𝑙 𝐵𝑟𝑎𝑧𝑜 = 𝐶𝑖𝑟𝑐𝑢𝑛𝑓𝑒𝑟𝑒𝑛𝑐𝑖𝑎 𝐵𝑟𝑎𝑧𝑜 − (3,34 𝑥 𝑃𝑙𝑖𝑒𝑔𝑢𝑒 𝑐𝑢𝑡𝑎𝑛𝑒𝑜)
VN Circunferencia Muscular:
Varon = 25,3 mm.
Mujer = 23,2 mm.
VN Circunferencia Brazo:
Varon = 29,3 mm.
Mujer = 28,5 mm.
TABLA DE COMPOSICION DE ALIMENTOS:
𝑇𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝑃𝑟𝑜𝑡𝑒𝑖𝑛𝑎𝑠 𝑥 4 = 𝐾𝑐𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝑃𝑟𝑜𝑡𝑒𝑖𝑛𝑎𝑠
𝑇𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝐶𝑎𝑟𝑏𝑜ℎ𝑖𝑑𝑟𝑎𝑡𝑜𝑠 𝑥 4 = 𝐾𝑐𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝐶𝑎𝑟𝑏𝑜ℎ𝑖𝑑𝑟𝑎𝑡𝑜𝑠
𝑇𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝐿𝑖𝑝𝑖𝑑𝑜𝑠 𝑥 9 = 𝐾𝑐𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝐿𝑖𝑝𝑖𝑑𝑜𝑠
𝐾𝑐𝑎𝑙 𝑇𝑂𝑇𝐴𝐿 = 𝐾𝑐𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝑃𝑟𝑜𝑡𝑒𝑖𝑛𝑎𝑠 + 𝐾𝑐𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝐶𝑎𝑟𝑏𝑜ℎ𝑖𝑑𝑟𝑎𝑡𝑜𝑠 + 𝐾𝑐𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝐿𝑖𝑝𝑖𝑑𝑜𝑠
Ej: Cantidad de proteínas en leche fresca de vaca = 3.1g/100g, supongamos que una persona consume 200ml de
leche fresca de vaca al dia:
Si en 100g hay 3.1g en 200g habrá => 6.2g de proteínas => 6.2 x 4 = 24.8 Kcal obtenemos de 200ml de leche fresca de
vaca.
GASTO ENERGETICO POR ACTIVIDAD FISICA (TENER COMO REFERENCIA):
En esta pagina se encuentran la cantidad de proteínas, grasas, carbohidratos y demás en determinados alimentos:
http://www.ins.gob.pe/insvirtual/images/otrpubs/pdf/Tabla%20de%20Alimentos.pdf

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  • 1. BIOQUI GUIA DE SUPERVIVENCIA – FAMURP 2016 MIJAIL JACOME NUÑEZ PROTECCION COMPLETA CONTRA EL EXAMEN DE LABORATORIO
  • 2. PRACTICA 3: ESPECTROFOTOMETRICA – CURVA DE CALIBRACION LEY DE LAMBERT: Rayo de luz en medio absorbente, Intensidad IP Espesor. LEY DE BEER: Rayo de luz en medio absorbente, Intensidad IP Concentracion. LEY DE LAMBERT-BEER: Relación exponencial entre la transmisión de luz a través de una sustancia y la concentración así como de la transmisión y longitud del cuerpo que la luz esta atravesando. 𝐶𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛 ¿ ? = 𝐶𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛 𝑆𝑡 𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑆𝑡 ×𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 (𝐴𝑏𝑠 𝑜 𝐷𝑂)¿ ? 𝐹𝐴𝐶𝑇𝑂𝑅 𝐷𝐸 𝐶𝐴𝐿𝐼𝐵𝑅𝐴𝐶𝐼𝑂𝑁 (𝐹𝐶) = 𝐶𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛 𝐴𝑏𝑠 𝑜 𝐷𝑂 Absorbancia es lo mismo que densidad óptica (DO). 𝐴𝑏𝑠 𝑜 𝐷𝑂 = 2 − 𝑙𝑜𝑔𝑇 APLICACIÓN: N° tubo St 1 St 2 St 3 St 4 St 5 Pb ml. de sol standart 2 4 6 8 10 - ml. Agua destilada 8 6 4 2 - 8.5 ml. muestra problema - - - - - 1.5 % Transmitancia 85.5 70.8 59.1 50 40.7 42.7 Calcular Absorbancia ¿? ¿? ¿? ¿? ¿? ¿? Calcular mg % ¿? ¿? ¿? ¿? ¿? ¿? En el laboratorio nos dan solamente la TRANSMITANCIA, debemos calcular la Abs y mg%. DATO: Concentracion de cristal violeta = 5mg%. PRIMER PASO, CALCULO DE LA ABSORBANCIA: 𝐴𝑏𝑠 𝑜 𝐷𝑂 = 2 − 𝑙𝑜𝑔𝑇 St1 => 2 – log85.5 = 0.068 St2 => 2 – log70.8 = 0.150 St3 => 2 – log59.1 = 0.228 St4 => 2 – log50 = 0.301 St5 => 2 – log40.7 = 0.39 Pb (Problema) => 2 – log42.7 = 0.37 SEGUNDO PASO, CALCULO DE mg%: St1: 5mg 100 ml Xmg 2ml X = 0.1 mg 0.1mg 10 ml Xmg 100ml X = 1mg% St2: 5mg 100 ml Xmg 4ml X = 0.2 mg
  • 3. 0.2mg 10 ml Xmg 100ml X = 2mg% St3: 5mg 100 ml Xmg 6ml X = 0.3 mg 0.3mg 10 ml Xmg 100ml X = 3mg% St4: 5mg 100 ml Xmg 8ml X = 0.4 mg 0.4mg 10 ml Xmg 100ml X = 4mg% St5: 5mg 100 ml Xmg 10ml X = 0.5 mg 0.2mg 10 ml Xmg 100ml X = 5mg% TERCER PASO, para calcular los mg% o [ ] de la muestra problema se realiza un procedimiento distinto: 𝐹𝐶 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 = ∑ 𝐹𝐶𝑠𝑡 5 St1 => 1/0.068 = 14.71 St2 => 2/0.150 = 13.34 St3 => 3/0.228 = 13.16 St4 => 4/0.301 = 13.29 St5 => 5/0.39 = 12.82 TOTAL = 67.32 FC total = 57.32/5=13.46 Pb => [ ]¿? = 13.46 x 0.37= 4.98 mg%. RESPUESTA: La concentracion de la muestra problema es de 4.98 mg por 100 ml de solucion. Curvas de calibración en la siguiente pagina…
  • 4. CURVAS DE CALIBRACION INTERPRETACION: La absorbancia es directamente proporcional a la concentracion. INTERPRETACION: La transmitancia es inversamente proporcional a la concentracion.
  • 5. PRACTICA 4: FACTORES QUE AFECTAN LA ACTIVIDAD ENZIMATICA Factores imporantes: pH, [enzima], [sustrato], temperatura. pH: Extra: pH de amilasa = 6.9. Temperatura: [Sustrato]: [Enzima] TIPO DE REACCION: 1er Orden (Velocidad DP a pH). pH OPTIMO = Máxima actividad de enzima, menor o mayor pH = reducción en actividad. TIPO DE REACCION: 1er Orden (Velocidad DP a Temperatura). TEMPERATURA OPTIMA = Máxima actividad de enzima, menor o mayor TEMPERATURA = reducción en actividad, a mayor temperatura la enzima se desnaturaliza con la consecuente pérdida de actividad. TIPO DE REACCION: MIXTA ORDEN 0 Al aumentar la [ ] de sustrato la enzima tiene mas sitios donde actuar pero al no aumentar la [ ] de enzima, la cantidad de enzima que se encuentra en el medio se satura y ya no se forma mas producto, por eso en la primera parte la reacción es de 1er ORDEN y al saturarse la enzima ya es de ORDEN 0 porque no se forma mas producto. TIPO DE REACCION: 1er ORDEN Esto va en relación a la cantidad de sustrato que se disponga, si esta cantidad es infinita entonces al aumentar la [ ] de enzima la velocidad de la reacción seguirá aumentando progresivamente hacia el infinito.
  • 6. IMPORTANTE: Para calcular la actividad enzimática en la prueba con pH: Actividad enzimática = DO (blanco) – DO (1) – DO(2) – DO(3) – DO(4) – DO(5). Para calcular la actividad enzimática en la prueba con [enzima]: Actividad enzimática = DO (blanco) – DO (1) – DO(2) – DO(3) – DO(4) – DO(5). Para calcular la actividad enzimática en la prueba con temperatura: Actividad enzimática = DO (blanco) – DO (1) – DO(2) – DO(3) – DO(4) – DO(5). Para calcular la actividad enzimática en la prueba con [sustrato]: Actividad enzimática = Lectura inicial – Lectura final (esto se hace en cada tubo ya que se mide la DO 2 veces, una cada 5 minutos; notar que esta formula es para cada tubo). INHIBICION ENZIMATICA Y VALORES DEL Km Y Vmax ⁅S⁆ (mM) V1, sin inhibidor (mmol.min-1 ) V2, con inhibidor (mmol.min-1 ) 3,0 4,58 3,66 5,0 6,4 5,12 7,0 7,72 6,18 9,0 8,72 6,98 11,0 9,5 7,60 PRIMER PASO: Invertir todo. 1/[S] 1/V1 1/V2 0,34 0,22 0,273 0,2 0,156 0,195 0,142 0,129 0,162 0,12 0,114 0,143 0,09 0,105 0,132 SEGUNDO PASO: Usando la calculadora científica o Excel realizamos el calculo de la pendiente en función lineal. 1/[S] y 1/V1 1/[S] y 1/V2 Ecuacion para V1: y = 0.0614 + 0.467x Ecuacion para V2: y = 0.0788 + 0.572x
  • 7. 𝑦 = 𝑎 + 𝑏𝑥 𝐾𝑚 𝑉𝑚𝑎𝑥 = 𝑏 1 𝑉𝑚𝑎𝑥 = 𝑎 1 𝐾𝑚 = 𝑎 𝑥 1 𝑏 CUARTO PASO: Para realizar la grafica de Lineweaver-Burk necesitamos 1/Km y 1/Vmax. V1 = Sin inhibidor: Aplicando las formulas obtenemos: 1/Km = 0.132 1/Vmax = 0.0614 Vmax = 16.28 V2 = Con inhibidor: Aplicando las formulas obtenemos: 1/Km = 0.136 1/Vmax = 0.078 Vmax = 12.82 Observando la Vmax demostramos que la velocidad con inhibidor es menor que sin usar un inhibidor. -0.132 -0.0614 -0.078 -0.136
  • 8. PRACTICA 5: DIGESTION ENZIMATICA DEL ALMIDON ALMIDON: Polimero de glucosa con enlaces α1-4 (amilosa) y α1-6 (amilopectina). En presencia del reactivo de Benedict (CuSO4 principalmente) un azúcar “reductor” precipita Cu2O que es de un color rojo ladrillo. GLUCOSA FRUCTOSA ALMIDON AZUCARES REDUCTORES: GLUCOSA, FRUCTOSA, MALTOSA. NO SON AZUCARES REDUCTORES: SACAROSA, ALMIDON. Digestion enzimática del almidon por accion de AMILASA => DEXTRINA, MALTOSA, MALTOTRIOSA Y GLUCOSA. PRIMERA PARTE: DETERMINACION DEL SUSTRATO Todos los tubos presentan almidon. El tubo 1: Presenta el sustrato (almidon), buffer y NaCl (activador) pero no la enzima. El tubo 2: Presenta el sustrato, buffer y el activador además de la enzima. El tubo 3: Presenta el sustrato, buffer, no presenta activador y H2O además de la enzima. El tubo 4: Presenta el sustrato, no presenta buffer, presenta HCl y la enzima. PARA LA DETERMINACION DEL SUSTRATO: Se agrega HCl a todas la muestras para detener la reacción y se agrega LUGOL que es el indicador. El tubo 5 es de la preparación realizada en el tubo 1, el tubo 6 es de la preparación realizada en el tubo 2 y asi sucesivamente. TUBO 5: Tenemos todas las condiciones pero no la enzima por tanto el ALMIDON sigue completo y la solución se tiñe de COLOR AZUL. TUBO 6: Tenemos todas las condiciones y la enzima por tanto el ALMIDON se ha HIDROLIZADO y el lugol no se puede fijar al producto de la hidrolisis que es la ACRODEXTRINA con un COLOR TRANSPARENTE. TUBO 7: Falta el activador por tanto la reacción se da a medias, la solución se tiñe de ROSA PALIDO por que queda la ERIDEXTRINA. TUBO 8: Hemos agregado el HCl que es un acido y por tanto altera el pH optimo para el funcionamiento de la enzima e inclusive la desnaturaliza por tanto el ALMIDON NO SE HIDROLIZA, obtenemos por tanto COLOR AZUL. α1-6 α1-4 α1-4 α1-4 α1-4 α1-4 AMILOPECTINA (20%) AMILOSA (80%)
  • 9. SEGUNDA PARTE: DETERMINACION DEL PRODUCTO Como en la anterior prueba de las preparaciones que habíamos realizado agregamos REACTIVO DE BENEDICT, el tubo 9 proviene del tubo 5, el tubo 10 proviene del tubo 6 y asi sucesivamente, el tubo 13 es GLUCOSA pura con reactivo de BENEDICT. TUBO 9: Teniamos ALMIDON, en reactivo de BENEDICT NO DA PRECIPITADO por tanto NO ES AZUCAR REDUCTOR. TUBO 10: Teniamos ACRODEXTRINA o DEXTRINA que con BENEDICT da una solución celeste verdosa con precipitado rojo por tanto ES AZUCAR REDUCTOR. TUBO 11: Teniamos ERIDEXTRINA que da un resultado similar al tubo 10 siendo AZUCAR REDUCTOR. TUBO 12: En reactivo de BENEDICT no forma precipitado, recordemos que quedaba ALMIDON que NO ES AZUCAR REDUCTOR. TUBO 13: Glucosa al 1% con BENEDICT forma precipitado ROJO LADRILLO por tanto es AZUCAR REDUCTOR. TERCERA PARTE: REACCION DE BENEDICT Tenemos Glucosa, Fructosa, Maltosa y Sacarosa “puras” que exponemos al reactivo de Benedict: AZUCARES REDUCTORES: GLUCOSA, FRUCTOSA, MALTOSA. NO SON AZUCARES REDUCTORES: SACAROSA, ALMIDON.
  • 10. PRACTICA 6: PRUEBA DE TOLERANCIA ORAL DE LA GLUCOSA En sospecha de metabolismo anormal de la glucosa (DIABETES). Para realizar la prueba en un paciente: 75g de glucosa (idealmente es 100g pero se obtiene el mismo resultado) + 400ml de H2O + 2 limones (para ayudar a que el paciente tome la solución). Aplicando lo aprendido en la PRACTICA 5: Tenemos 2 muestras: 1 de nosotros (estamos sanos) y 1 de nuestro paciente del que tenemos sospecha de diabetes. Exponemos esas 2 muestras al reactivo de Benedict y obtenemos: Nuestra muestra de orina no forma precipitado. La muestra de nuestro paciente forma precipitado ROJO LADRILLO => CONCLUSION: El paciente esta eliminando azucares reductores (no sabemos si es glucosuria u otras, solo sabemos que es un azúcar). 𝑉. 𝑁. (𝐺𝐿𝑈𝐶𝑂𝑆𝐴 𝑆𝐸𝑅𝐼𝐶𝐴) = 75 → 115 𝑚𝑔/𝑑𝐿 𝑉. 𝑁. (𝐺𝐿𝑈𝐶𝑂𝑆𝐴 𝑆𝐸𝑅𝐼𝐶𝐴) = 4,16 → 6,39 𝑚𝑚𝑜𝑙/𝐿 CURVA DE TOLERANCIA ORAL DE LA GLUCOSA: Nosotros en el laboratorio vamos a tener muestras de suero de un paciente al que se le han tomado dichas muestras cada 30 minutos, mezclamos con Reactivo de glucosa y luego incubamos para luego medir su DO (Abs). Con los mg/dl que obtengamos (ver mas adelante) realizamos una grafica que va a ser similar a las que están en la parte superior. Los valores estándar que debemos conocer son: A los 0 minutos: Menor a 115 mg/dL. A los 60 minutos: Menor a 180 mg/dL. A los 120 minutos: Menor a 140 mg/dL. Si la glucosa supera los 180 mg/dL a los 60´ el paciente generalmente presenta glucosuria. CONVERSION DE mg/dL A mmol/L: Ej: 75 mg/dL. 75𝑚𝑔 𝑑𝐿 𝑥 1𝑑𝐿 10−1 𝐿 = 750𝑚𝑔/𝐿 𝑚𝑔 → 𝑚𝑚𝑜𝑙 1mol C6H12O6 180g XmolC6H12O6 750g X = 75/18 = 4.16 mmol/L DETERMINACION DE LA GLUCOSA SERICA Tubo 1 (Blanco) 2 (St) 3 (0´) 4 (30´) 5 (60´) 6 (90´) 7 (120´) DO (Abs) - 0.231 0.274 0.366 0.650 0.624 0.582 DATO: St de glucosa = 100 mg/dL
  • 11. PRIMER PASO: Factor de Calibracion Estandar. 𝐹𝐶𝑠𝑡 = 100 0.231 = 433 SEGUNDO PASO: Calculo de mg/dL usando la formula ( [ ] ¿? = FCst x Abs ¿? ) 0´ => 0.274 x 433 = 118.64 mg/dl 30´ => 0.366 x 433 = 158.48 mg/dl 60´ => 0.650 x 433 = 281.45 mg/dl 90´ => 0.624 x 433 = 270.2 mg/dl 120´ => 0.582 x 433 = 252 mg/dl A los 60´ el paciente supero los 180 mg/dl y a 120´ (generalmente tiende a disminuir) sigue sobre los niveles normales. CONCLUSION: El paciente no metaboliza bien la glucosa, presenta una curva de tolerancia a la glucosa anormal y probablemente sea diabético. DIABETES Un diabético presenta generalmente: Polidipsia (sed). Polifagia (hambre). Poliuria (orina excesiva). Al haber menos insulina la glucosa se eleva = Hiperglucemia, la glucosa en exceso no puede ser usada por el organismo y en respuesta se inicia la gluconeogénesis que eleva aun mas la glucosa en sangre. Se requieren sustratos para la gluconeogénesis (aminoácidos y lípidos) lo que lleva a proteólisis muscular causando atrofia y que se manifiesta como polifagia (requiere materia prima para reparar el musculo que se esta destruyendo), aumenta la lipolisis que a su vez aumenta los acidos grasos séricos que se transforman a cuerpos cetónicos (acidos) los cuales reducen el bicarbonato (HCO3) en sangre derivando hacia una ACIDOSIS DIABETICA.
  • 12. PRACTICA 7: ACIDOSIS DIABETICA Cuerpos cetónicos: Aceto acetato, Acetona (volátil) y B-hidroxibutirato. Estos en sangre reducen el pH. El bicarbonato en sangre esta asociado a sodio. HCO3Na + HCl -> H2CO3 + NaCl -> H2O + CO2 + NaCl 𝑉. 𝑁. (𝐵𝐼𝐶𝐴𝑅𝐵𝑂𝑁𝐴𝑇𝑂 𝑆𝐸𝑅𝐼𝐶𝑂) = 26 → 32 𝑚𝐸𝑞/𝐿 PRIMERA PARTE => NEUTRALIZACION DEL BICARBONATO Tenemos 2 Beackers con 1ml de suero en los que agregamos 5ml de HCl. Para titular el Beacker 1 se requirió 2ml de NaOH. 5ml – 2ml = 3ml (Volumen de HCl neutralizado por el HCO3 que estaba en el suero). Para titular el Beacker 2 se requirió 3,4 ml de NaOH. 5ml – 3,4ml = 1.6ml (Volumen de HCl neutralizado por el HCO3 que estaba en el suero). Convertir los ml a L. DATO: La normalidad = 0.1. Ahora para calcular los mEq de HCO3 que había en el suero realizamos el siguiente procedimiento: Beacker 1: PRIMERA PARTE: 10−2 = #𝐸𝑞 3𝑥10−3⁄ #𝐸𝑞 = 3𝑥10−5 #𝑚𝐸𝑞 = 3𝑥10−5 𝐸𝑞 𝑥 1000 𝑚𝐸𝑞 1 𝐸𝑞⁄ #𝑚𝐸𝑞 = 3𝑥10−2 (𝑒𝑛 1 𝑚𝑙) SEGUNDA PARTE: 3x10^-2 1ml XmEq 1L(1000ml) X = 30 mEq/L Beacker 2: PRIMERA PARTE: 10−2 = #𝐸𝑞 16𝑥10−4⁄ #𝐸𝑞 = 16𝑥10−6 #𝑚𝐸𝑞 = 16𝑥10−6 𝐸𝑞 𝑥 1000 𝑚𝐸𝑞 1 𝐸𝑞⁄ #𝑚𝐸𝑞 = 16𝑥10−3 (𝑒𝑛 1 𝑚𝑙) SEGUNDA PARTE: 16x10^-3 1ml XmEq 1L(1000ml) X = 16 mEq/L La muestra del Beacker 1 se encuentra en los valores normales pero la muestra del Beacker 2 esta disminuido. CONCLUSION: El paciente del Beacker 2 probablemente se encuentre en acidosis. SEGUNDA PARTE => TEST DE ROTHERA Esta prueba se utiliza para determinar únicamente acetona (que es volátil y da el olor característico de manzana a un diabético en acidosis), evidencia la presencia únicamente de acetona. SO4(NH4)2 o Sulfato de Amonio + Nitroprusiato de Na + Orina Si hay presencia de cuerpos cetónicos => Anillo purpura-rojizo. Si no hay presencia de cuerpos cetónicos => Anillo transparente.
  • 13. PRACTICA 8: PERFIL LIPIDICO Y RIESGO CORONARIO Enfermedad cardiaca coronaria = 1ra causa de morbilidad prematura causada por aumento en el colesterol plasmático. El HDL aumenta con los flavonoides, ejercicio y dieta adecuada. La hipercolesterolemia no da síntomas, da signos. Lipidos séricos = Colesterol + Trigliceridos. Triglicerido = Glicerol + 3 acidos grasos (cadena carbonada con un grupo carboxilo). HDL = Transporte en reversa del colesterol (hacia el hígado), de protección. VALOR NORMAL DEL COLESTEROL = 160 - 200 mg/dl VALOR NORMAL DE TRIGLICERIDOS = 60 – 200 mg/dl VALOR NORMAL DEL HDL = 40 – 60 mg/dl VALOR NORMAL DEL VLDL = 5 – 40 mg/dl Si el colesterol pasa de 350 mg/dl se empiezan a observan Xantomas. ECUACION DE FRIEDEWALD: LDL = Colesterol total – HDL – VLDL (expresado en mg/dl) VLDL = TG/5 si y solo si TAG < 400 mg/dl. FACTOR DE CALIBRACION = CONCENTRACION/ABSORBANCIA O DENSIDAD OPTICA. FORMULAS: COLESTEROL = FC x DO TRIGLICERIDOS = FC x DO HDL = DO x FD FD = FACTOR DE DILUCION = 76.5/ABSORBANCIA ESTANDAR. RIESGO CORONARIO: 1) COLESTEROL TOTAL/HDL Debe ser menor a 5, si es mayor = riesgo. 2) LDL/HDL Debe ser menor a 3.5, si es mayor = riesgo. Se disminuye el riesgo coronario con ejercicio + dieta. DETERMINACION DEL COLESTEROL Tubo N° Blanco Standard Muestra 1 Muestra 2 St-Colesterol: 200 mg/dl - 30 ul - - Suero –Pb - - 30 ul 30 ul Reactivo Color 3.0 ml 3.0 ml 3.0 ml 3.0 ml ABSORBANCIA - 0.299 0.178 0.383 1) Calcular el FC: FC = CONCENTRACION/ABSORBANCIA = 200/0.299 = 668.9 2) Muestra 1: M1 = 668.9 X 0.178 = 119.1 mg/dl => Deseable 3) Muestra 2: M2 = 668.9 X 0.383 = 256 mg/dl => Calculando el riesgo coronario se determina si hay riesgo.
  • 14. DETERMINACION DE TRIGLICERIDOS Tubo N° Blanco Standard Muestra 1 Muestra 2 St-Triglicérido: 200 mg| dl - 30 ul - - Suero -Pb - - 30 ul 30 ul Reactivo Color 3.0 ml 3.0 ml 3.0 ml 3.0 ml ABSORBANCIA - 0.384 0.151 0.642 1) Calcular el FC: FC = 200/0.384 = 520.84 2) Muestra 1: M1 = 520.84 X 0.151 = 78.54 => OK 3) Muestra 2: M2 = 520.84 X 0.642 = 334.38 => MUY ALTO 4) Calculo del VLDL: M1: 78.64/5 = 15.73 M2: 334.38/5 = 66.87 DETERMINACION DEL HDL Tubo N° Blanco Standard Muestra 1 Muestra 2 Sobrenadante (ml) - - 0.30 0.30 Standard (ml) - 0.03 - - Reactivo (ml) 3.00 3.00 3.00 3.00 ABSORBANCIA - 0.291 0.140 0.063 1) Factor de Dilucion: FD = 76.5/0.291 = 262.89 2) Muestra 1: M1 = 0.140 X 269.89 = 36.80 => OK 3) Muestra 2: M2 = 0.063 X 269.89 = 16.55 => MUY BAJO DETERMINACION DEL LDL MUESTRA 1: LDL = 119.1 – 36.8 - 15.73 = 66.57 MUESTRA 2: LDL = 256 – 66.87 – 16.55 = 172.58 RIESGO CORONARIO COLESTEROL/HDL < 5 LDL/HDL < 3.5
  • 15. MUESTRA 1: A) 119.1/36.8 = 3.24 => OK B) 66.57/36.8 = 1.8 => OK MUESTRA 2: A) 256/16.55 = 15.46 => ALTISIMO B) 172.58/16.55 = 10.42 => ALTISIMO CONCLUSION: Paciente 1 no presenta ningún riesgo, en estado correcto de salud. Paciente 2 presenta un alto riesgo, debe mejorar sus habitos de vida.
  • 16. PRACTICA 9: ICTERICIA E HIPERBILIRRUBINEMIA Se presenta ictericia si la bilirrubina > 2 – 2.5 mg/dl => Se acumula en tejidos con mayor numero de fibras elásticas (piel + mucosas) = ICTERICIA. Hiperbilirrubinemia (No conjugada o Indirecta): En anemia hemolítica, Sindrome de Gilbert (Deficiencia parcial de glucoroniltransferasa con leve ictericia, es benigno) y Sindrome de Crigler Najar (No glucoroniltransferasa = ictericia no hemolítica con alto nivel de bilirrubina en sangre que ocasiona daño cerebral en el infante). Hiperbilirrubinemia (Conjugada o Directa): Insuficiente capacidad de excreción como en hepatitis aguda, obstrucción biliar, cirrosis hepática o colestasia. PRE-HEPATICA Aumento de Bilirrubina indirecta Sobreproduccion Anemia hemolítica (autoinmune o esferocitosis). Talasemias. Anemia megaloblastica. Absorcion de hematomas. La bilirrubina indirecta es insoluble por tanto esta unida a la Hb y no filtra. HEPATICA Aumento de Bilirrubina indirecta Menor captación Sindrome de Gilbert Aumento en la excreción de la bilirrubina directa ya que esta es soluble y es filtrada por el riñon. Menor conjugación Enfermedad de Crigler Najar Aumento de la Bilirrubina directa Alteracion en transporte y excreción Sindrome de Dubin- Johnson Sindrome Rotor Obstruccion en via biliar intrahepatica Cirrosis Biliar Necrosis hepatocelular Hepatitis POST-HEPATICA Aumento de la Bilirrubina directa Obstruccion en via biliar extrahepatica Calculos biliares Calculos de cabeza de pancreas BILIRRUBINA TOTAL = 0.3 – 1.1 mg/dl BILIRRUBINA DIRECTA = 0.1 – 0.4 mg/dl BILIRRUBINA INDIRECTA = 0.2 a 0.7 mg/dl La bilirrubina total medida con el acido sulfanilico diazodato, la bilirrubina indirecta medida con benzoato de cafeína. Reaccion de Ehrlich => Urobilinogeno. Reaccion de Gmelin => Bilirrubina urinaria. Bilirrubina = pigmento de heces y orina, 4 porfirinas abiertas. Aumento de bilirrubina indirecta => alteración de antes de que entre al hígado (hemolisis masiva). Aumento de bilirrubina directa => menor captación hepática, no conjugación y no hay excreción. Heces claras = no bilirrubina = obstrucción, si hay bilirrubina en orina = no metabolismo. Los carotenos ocasionan falsa ictericia => No se fijan a las mucosas. La ictericia causada por BILIRRUBINA DIRECTA (HIDROSOLUBLE) y por tanto es la única que se puede difundir y fijar al tejido. Si la bilirrubina directa e indirecta están ambos elevados => Hemolisis y obstrucción. Si todos los niveles de bilirrubina aumentados = Hiperbilirrubinemia (2.2 mg/dl de bilirrubina). BILIRRUBINA DIRECTA BILIRRUBINA INDIRECTA 0.1 a 0.4 mg/dl 0.2 a 0.7 mg/dl Soluble Insoluble Libre Unida a albumina Via circulación hepático renal Entra al higado Conjugada con ac. glucoronico No conjugada
  • 17. Blanco Directa Total Muestra 200 ul 200 ul 200 ul Agua Destilada 2.4 ml 2.4 ml - Desarrollador - - 2.4 ml Reactivo sulfanílico 200 ul - - Diazorreactivo - 200 ul 200 ul ABSORBANCIA 0.057 0.177 0.252 Nos dan de dato: Concentracion estándar = 2mg% DO estándar = 0.09 1) CALCULO DEL FACTOR DE CALIBRACION: FC = 2/0.09 = 22.23 2) CALCULO DE LA BILIRRUBINA TOTAL: BT = FC (Abs – Blanco) BT = 22.23 (0.252-0.057) = 4.33 3) CALCULO DE LA BILIRRUBINA DIRECTA: BD = FC (Abs – Blanco) BD = 22.23 (0.177 – 0.057) = 2.66 4) CALCULO DE LA BILIRRUBINA INDIRECTA: BT = BD + BI 4.33 = 2.66 + BI BI = 1.67 CONCLUSION: Todos los niveles de bilirrubina en este paciente se encuentran aumentados, sufre de hiperbilirrubinemia.
  • 18. PRACTICA 10: TRANSAMINACION AA en el hígado  Eliminacion de α-amino = TRANSAMINACION => Paso del amino desde el aminoácido entrante al α-cetoglutarato formando además un α-cetoacido, es una reacción REVERSIBLE. DATO: Prolina, hidroxiprolina, lisina y treonina no participan en transaminacion. TRANSAMINASAS Y LESIONES TISULARES Alanina aminotransferasa (ALT) = Glutamato – piruvato transaminasa (GPT), específicamente hepática, menor en hepatitis vírica pero mayor en cirrosis, enfermedad hepática, tumores hepáticos, colestasis y hepatitis toxica. glutamato + piruvato ⇌ α-cetoglutarato + alanina Aspartato aminotransferasa (AST) = Glutamato – oxalacetato transaminasa (GOT) en corazón, hígado y musculo; en cantidades elevadas en infarto agudo de miocardio, hepatopatía y miopatías (daño celular grave). L-aspartato + 2-oxoglutarato ⇌ oxalacetato + L-glutamato Creatina quinasa => Primera en liberarse al suero sanguíneo tras un ataque cardiaco, ellas dan información sobre la gravedad de la lesión. Creatina quinasa  GOT  GTP Tubo N° 1 1 2 PIRUVATO 0.2 M (ml) 0.3 0.3 GLUTAMATO 0.2 M (ml) 0.3 0.3 ARSENITO 0.2 M (ml) 0.4 0.4 ENZIMA ACTIVA 0.2 M (ml) 0 1 ENZIMA INACTIVA 0.2 M (ml) 1 0 Aminacion de α-cetoglutarato quedando como glutamato. Desaminacion de α-aminacido quedando como α-cetoacido. Dador de aminos en rutas biosinteticas y de excreción. TRANSAMINACION => Enzima = Transaminasa Cofactor = Piridoxal fosfato (de vit. B6). Transportador de aminos Racemizacion (Cα) Descarboxilacion Transaminasa = Amino transferasa
  • 19. En la guía se proporciona este cuadro que en realidad no es muy útil en el procedimiento, se usaron “capilares” para distribuir la muestra en el papel de silica con 4 puntos equidistantes que eran de: Alanina, Glutamato, M1 y M2. Buscabamos determinar a que correspondían la muestra 1 y la muestra 2. Rf = relación de frentes, expresa la posición de un compuesto sobre la placa. Rf = Distancia de la sustancia/Distancia del solvente El solvente es el agua por tanto mediamos hasta donde el H2O subia en el papel de silica. Se obtuvo que la distancia del H2O (solvente) era de 14,3 cm. La distancia de la alanina fue de 7,2 cm. La distancia del glutamato fue de 5,7 cm. La distancia de la muestra 1 fue de 7,2 cm. La distancia de la muestra 2 presentaba 2 puntos: a 5,3 cm y a 7 cm. CALCULO DEL RF: ALANINA: 7.2/14.3 = 0.5 cm. GLUTAMATO: 5.7/14.3 = 0.39 cm. MUESTRA 1: 7.2/14.3 = 0.5 cm => Por tanto es de ALANINA. MUESTRA 2: Punto 1: 5.3/14.3 = 0.37 cm => Muy cercano al GLUTAMATO. Punto 2: 7/14.3 = 0.48 cm => Muy cercano al de ALANINA.
  • 20. PRACTICA 11: BALANCE NITROGENADO, RELACION INGESTA – EXCRETA Evaluacion del metabolismo proteico, se evalua mediante el nitrógeno total estimado. BN = N. INGERIDO – (N. UREICO + N. CREATININICO + 2)  Nitrogeno ureico = 88%, Nitrogeno creatininico = 7%, Nitrogeno eliminado por sudor o piel 3% (no significativo). Las proteínas y aa no se almacenan por tanto el exceso se exceta. Tipos: BN 0 => Ingesta = Excreta => Ideal, en individuos sanos. BN (-) => Ingesta < Excreta => En inanición, desnutrición, vejez, diabetes no controlada, fiebre, estrés (sepsis, post quirúrgico, traumatismo, quemaduras). BN (+) => Ingesta > Excreta => En niñez (crecimiento), gestantes, pacientes en recuperación y post inanición. Valores: >2 = Anabolismo 2 a -2 = Equilibrio -2 a -5 = Catabolismo leve -5 a -10 = Catabolismo moderado < -10 = Catabolismo severo Volumen normal de la orina = 1.4 a 1.5 L Nitrogeno ingerido: 1g de Nitrogeno = 1g de proteína/6.25 6.25: 100g proteínas 16g de N (experimentalmente) X 1g de N X = 6.25 => Por cada 6.25g de proteínas se elimina 1g de N. Si se presenta albuminuria la formula tiene una variación: BN = N. INGERIDO – (N. UREICO + N. CREATININICO + 2 + PROTEINA URINARIA/6.25) Valores normales de los parámetros: VN DE CREATININA = 0.8 – 1.5 g/dia VN DE UREA = 15 – 30 g/dia VN DE N. Ureico = 7 – 14 g/dia Ingesta de proteínas en adulto: 0.7 a 0.8g/kg/dia. Creatinina: Producto de la actividad muscular, disminuye al movilizarla. De la degradación de creatinina, se filtra en los riñones y se excreta en la orina, se utiliza para valorar la función renal. Peso Molecular = 113 # de N = 3 Creatina: Derivado de Arginina, Glicina y Metionina, se sintetiza en el hígado y páncreas, esta presente en el musculo y la neurona, se usa como vector para el transporte de ATP hacia la miofibrilla. Urea: Producto de la degradación de compuestos nitrogenados mediante el ciclo de la urea. Urea por accion de UREASA => 2NH3 + CO2 Peso Molecular = 60 # de N = 2 DATOS GENERALES DEL PACIENTE PACIENTE 1: Volumen de orina = 1500ml, Peso = 65 kg, Ingesta proteica = 1g/kg. PACIENTE 2: Volumen de orina = 1200ml, Peso = 42 kg, Ingesta proteica = 0.7g/kg.
  • 21. DETERMINACION DEL NITROGENO INGERIDO PACIENTE 1: 1 X 65 = 65g de proteína Para el calculo del nitrógeno ingerido recordar: 6.25 g de proteínas = 1 g de N. 65/6.25 = 10.4g de N PACIENTE 2: 0.7 X 42 = 29.4 g de proteina Para el calculo del nitrógeno ingerido recordar: 6.25 g de proteínas = 1 g de N. 29.4/6.25 = 4.704g de N DETERMINACION DE LA CREATININA N° TUBO BL ST Muestra 1 Muestra 2 ORINA 1/10 ml 0.04 0.04 AGUA ml 0.8 0.2 0.8 0.8 St. 1.5 mg/dl ml 0.2 R. Pícrico ml 1.6 0.8 1.6 1.6 Buffer Alcalino ml 0.4 0.2 0.4 0.4 ABSORBANCIA - 0.159 0.8 0.099 1) Creatinina en orina: Absorbancia de la muestra/Absorbancia del estándar x 150 Muestra 1: 0.8/0.159 x 150 = 754.72 mg/dl Muestra 2: 0.099/0.159 x 150 = 93.396 mg/dl 2) Creatinina urinaria en 24 horas: Creatinina en orina X Volumen de orina en 24 Hrs (L) Muestra 1: 754.72 x 1.5 = 1132.08 Muestra 2: 93.396 x 1.2= 112.0752 3) Nitrogeno creatininico en 24 horas: (Creatinina urinaria x 0.37)/100 Muestra 1: 1132.08 x 0.37/100 = 4.1886 g/dia Muestra 2: 112.0752 x 0.37/100 = 0.4146 g/dia ¿De donde proviene el 0.37? La creatinina presenta 3 Nitrogenos, 3x14 = 42. 113 es el peso molecular de la creatinina. 113g de creatinina 42g de Nitrogeno 1g de creatinina X => 0.37
  • 22. DETERMINACION DE LA UREA N° TUBO Blanco Standard Muestra 1 Muestra 2 Orina:1/100 (ml) 0.02 0.02 St:66mg/dl (ml) 0.02 Reactivo de trabajo (ml) 2.0 2.0 2.0 2.0 Mezclar incubar 3' a 37°C o 5’ a T° ambiente Reactivo de Hipoclorito (ml) 2.0 2.0 2.0 2.0 Mezclar incubar 5' a 37°C o 10’ a T° ambiente ABSORBANCIA - 0.891 0.164 0.090 1) Factor Urea: 66/Abs estándar => 66/0.891 = 74 2) Urea en orina en 24 horas: Factor Urea X DO de muestra X Volumen (ml) Muestra 1: 74 x 0.164 x 1500 = 18204 Muestra 2: 74 x 0.090 x 1200 = 7992 3) Nitrogeno ureico en 24 horas: (Urea en orina en 24 horas x 0.455)/1000 Muestra 1: 18204 x 0.455/1000 = 8.285 g/dia Muestra 2: 7992 x 0.455/1000 = 3.636 g/dia ¿De donde proviene el 0.455? La urea presenta 2 Nitrogenos, 2x14 = 28. 60 es el peso molecular de la Urea. 60g de urea 28g de Nitrogeno 1g de urea X => 0.46 BALANCE NITROGENADO PACIENTE 1: BN = 10.4 – (8.28 + 4.188 + 2) = -4.068 PACIENTE 2: BN = 4.704 – (0.414 + 3.63 + 2) = -1.34 CONCLUSION: El paciente numero 1 presenta un catabolismo leve, necesita reponer las perdidas. El paciente numero 2 esta sano, es normal.
  • 23. PRACTICA 12: EVALUACION DE MASA PROTEICA VISCERAL Y ESQUELETICA Compartimiento visceral midiendo: Transferrina, Pre-albumina, Albumina => Proteina total. Compartimiento esquelético: Excrecion de la creatinina. Nivel alto de albumina: Inflamacion o infección (hepatitis) además de transtornos en la medula osea. Nivel bajo de albumina: Hemorragia, transtorno hepático, glomerulonefritis, desnutrición, absorción insuficiente o quemaduras. La albumina mantiene la presión oncotica (carga -), para sintetizar hormonas tiroideas, transporte de acidos grasos, control del pH. PROTEINA TOTAL ALBUMINA CREATININA PESO/TALLA VARON MUJER VARON MUJER VARON MUJER VARON MUJER 7,01 6,99 3,89 3,9 660-830 430-670 30-38 29-34 g/dL g/dL g/dL g/dL mg/24h/m mg/24h/m Kg/m Kg/m KWASHIORKOR MARASMO Observamos que hay poca diferencias de genero en cuanto a la PROTEINA TOTAL y ALBUMINA SERICA. Indicadores para el Kwashiorkor: PROTEINA TOTAL y ALBUMINA SERICA. Indicadores para el Marasmo: CREATININA URINARIA e INDICE PESO Y TALLA. KWASHIORKOR En niños de 1-3 años, dieta baja en proteínas pero ingesta de CH normal o excesiva. Sintomatologia: Irritabilidad, diarrea, falta de crecimiento, infecciones, cambios en el color del pelo, piel escamosa, infiltración grasa en el hígado, menor masa muscular y edema masivo. MARASMO Carencia de alimentos en general (poca proteínas y poco CH), mas común en el primer año de edad. Cuasado también por infecciones o parasitosis, también parto prematuro, malabsorción o interrupción temprana de la lactancia. Sintomatologia: Crecimiento deficiente, poca grasa subcutánea, delgadez extrema, anemia, ulceraciones por presión, cambio en la textura del cabello el color normal. KWASHIORKOR MARASMICO Malnutricion grave con edema y peso menor al 60% de lo esperado de su edad. Presentan caracterisiticas del marasmo y edema, además se puede observar dermatosis y hepatomegalia. CARACTERISTICA KWASHIORKOR Hipoalbuminemia MARASMO Caquexia EDEMA SI NO DERMATOSIS FRECUENTE RARO CARÁCTER IRRITABLE APATICO IMC NORMAL/AUMENTADO DISMINUIDO GRASA CORPORAL NORMAL/AUMENTADO DISMINUIDO ALBUMINA DISMINUIDO NORMAL/AUMENTADO MASA MUSCULAR NORMAL DISMINUIDO HIGADO GRASO SI NO INSULINA NORMAL DISMINUIDO CORTISOL NORMAL/DISMINUIDO AUMENTADO DATOS GENERALES DEL PACIENTE: PACIENTE 1: Peso = 45kg, Talla = 1.65m, Indice Peso/Talla = 27.27, Volumen de Orina en 24hrs = 1500ml. PACIENTE 2: Peso = 50kg, Talla = 1.56m, Indice Peso/Talla = 32.05, Volumen de Orina en 24hrs = 1200ml.
  • 24. DETERMINACION DE LA PROTEINA TOTAL BL Muestra 1 Muestra 2 St Agua destil. 20 ul Suero 20 ul 20 ul St. Prot. Tot 5.7 g/dl 20 ul R. Color 2.0 ml 2.0 ml 2.0 ml 2.0 ml ABSORBANCIA - 0.127 0.131 0.162 1) Calculando el FC: FC = Concentracion/Abs estándar FC = 5.7/0.162 = 35.185 2) Calculando la proteína total: Concentracion Muesta = FC x Absorbancia de muestra MUESTRA 1: 35.185 x 0.127 = 4.468g/dl MUESTRA 2: 35.185 x 0.131 = 4.609g/dl INTERPRETACION: Ambos pacientes presentan la proteína total sérica baja. DETERMINACION DE LA ALBUMINA SERICA BL Problema Problema St Agua destil. 20 ul Suero 20 ul 20 ul St. Albúmina 3.3 g/dl 20 ul R. Color 2.0 ml 2.0 ml 2.0 ml 2.0 ml ABSORBANCIA - 0.677 0.551 0.435 1) Calculando el FC: FC = Concentracion/Abs estándar FC = 3.3/0.435 = 7.586 2) Calculando la proteína total: Concentracion Muesta = FC x Absorbancia de muestra MUESTRA 1: 7.586 x 0.677 = 5.135g/dl MUESTRA 2: 7.586 x 0.551 = 4.179g/dl INTERPRETACION: Ambos pacientes presentan niveles correctos de albumina serica.
  • 25. DETERMINACION DE LA CREATININA URINARIA N° TUBO BL ST Muestra 1 Muestra 2 ORINA 1/10 ml 0.04 0.04 AGUA ml 0.8 0.2 0.8 0.8 St. 1.5 mg/dl ml 0.2 R. Picrico ml 1.6 0.8 1.6 1.6 Buffer Alcalino ml 0.4 0.2 0.4 0.4 ABSORBANCIA - 0.170 0.054 0.092 1) Calculando la creatinina urinaria: Creatinina urinaria (mg/dl) = Absorbancia muestra/Absorbancia estándar x 150 MUESTRA 1: 0.054/0.170 x 150 = 47.64mg/dl MUESTRA 2: 0.092/0.170 x 150 = 81.176mg/dl 2) Calculando la creatinina urinaria en 24hrs: Creatinina urinaria x Volumen de orina (L) x 10 MUESTRA 1: 47.64 x 1.5 x 10 = 714.6mg/24hrs Luego: 714.6/1.65 (talla del paciente 1) = 433.09 mg/24hrs/m MUESTRA 2: 81.176 x 1.2 x 10 = 974.112mg/24hrs Luego: 974.112/1.56 (talla del paciente 2) = 624.43 mg/24hrs/m INTERPRETACION: Si ambos pacientes son varones entonces ambos pueden ser marasmaticos, si ambos son mujeres entonces están dentro del rango normal. GLOBAL Paciente 1: Indice peso/talla: 27.27 Proteina total sérica: 4.468g/dl Albumina sérica: 5.135g/dl Creatinina urinaria: 433.09 mg/24hrs/m Paciente 2: Indice peso/talla: 32.05 Proteina total sérica: 4.609g/dl Albumina sérica: 4.179g/dl Creatinina urinaria: 624.43 mg/24hrs/m Si el paciente es varon: El índice peso/talla y la creatinina urinaria corresponden a un marasmatico. Si el paciente es mujer: El único índice bajo es el de proteína total, no se concluye que tenga Kwahiorkor, esta normal.
  • 26. PRACTICA 13: METODOS PARA LA EVALUACION NUTRICIONAL PESO CORPORAL: %𝑃𝑒𝑠𝑜 𝐼𝑑𝑒𝑎𝑙 = 𝑃𝑒𝑠𝑜 𝐴𝑐𝑡𝑢𝑎𝑙 𝑃𝑒𝑠𝑜 𝐼𝑑𝑒𝑎𝑙⁄ 𝑥100 +120% = OBESIDAD 110-120 = SOBREPESO 90-110 = NORMAL 80-90 = DESNUTRICION LEVE 70-80 = DESNUTRICION MODERADA -69% = DESNUTRICION GRAVE PESO IDEAL SEGÚN TALLA (Metodo Practico): HOMBRES 1.45->1.5 => 53±1 1.5->1.55 => 56±1 1.55->1.6 => 59±1 1.6->1.65 => 62±1 1.65->1.7 => 65±1 1.7->1.75 => 68±1 1.75->1.8 => 72±1 1.8->1.85 => 76±1 MUJERES 1.40->1.45 => 46±1 1.45->1.5 => 49±1 1.5->1.55 => 52±1 1.55->1.6 => 55±1 1.6->1.65 => 58±1 1.65->1.69 => 61±1 IMPORTANTE: Es +1 si se aproxima al límite superior y es -1 si se aproxima al limite inferior. INDICE DE MASA CORPORAL: 𝐼𝑀𝐶 = 𝑃𝑒𝑠𝑜 𝑇𝑎𝑙𝑙𝑎2⁄ +40 = OBESO MORBIDO 35-39,9 = OBESIDAD SEVERA 30-35,9 = OBESIDAD MODERADA 25,1-30 = SOBREPESO 19,1-25 = NORMAL 17-19 = DESNUTRICION LEVE 16-16,9 = DESNUTRICION MODERADA -16 = DESNUTRICION SEVERA ADECUACION DE LA DIETA: 𝐴𝑑𝑒𝑐𝑢𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛 𝑑𝑒 𝐷𝑖𝑒𝑡𝑎 = 𝐸𝑛𝑒𝑟𝑔𝑖𝑎 𝑑𝑒 𝐷𝑖𝑒𝑡𝑎 𝑁𝑒𝑐𝑒𝑠𝑖𝑑𝑎𝑑 𝐸𝑛𝑒𝑟𝑔𝑒𝑡𝑖𝑐𝑎⁄ 𝑥100% V.N. = 100%, aumento = sobrepeso, disminución = desnutrición. GASTO CALORICO: 𝐷𝑢𝑟𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛 𝑑𝑒 𝑎𝑐𝑡𝑖𝑣𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑥 𝐾𝑐𝑎𝑙 𝑥 𝑃𝑒𝑠𝑜 Hombres = 2800 Kcal/24h, Mujeres = 2200 – 2500 Kcal/24h. En el paciente su metabolismo basal: Varon = (1xpesox24)+50% Mujer = (0,9xpesox24)+50% PLIEGUE CUTANEO: Estimado del almacenamiento de lípidos. Varon = 12,5 mm. Mujer = 16,5 mm. +3 +3 +3 +3 +3 +4 +4 +3 +3 +3 +3 +3
  • 27. CIRCUNFERENCIA MUSCULAR DEL BRAZO: 𝐶𝑖𝑟𝑐𝑢𝑛𝑓𝑒𝑟𝑒𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑀𝑢𝑠𝑐𝑢𝑙𝑎𝑟 𝑑𝑒𝑙 𝐵𝑟𝑎𝑧𝑜 = 𝐶𝑖𝑟𝑐𝑢𝑛𝑓𝑒𝑟𝑒𝑛𝑐𝑖𝑎 𝐵𝑟𝑎𝑧𝑜 − (3,34 𝑥 𝑃𝑙𝑖𝑒𝑔𝑢𝑒 𝑐𝑢𝑡𝑎𝑛𝑒𝑜) VN Circunferencia Muscular: Varon = 25,3 mm. Mujer = 23,2 mm. VN Circunferencia Brazo: Varon = 29,3 mm. Mujer = 28,5 mm. TABLA DE COMPOSICION DE ALIMENTOS: 𝑇𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝑃𝑟𝑜𝑡𝑒𝑖𝑛𝑎𝑠 𝑥 4 = 𝐾𝑐𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝑃𝑟𝑜𝑡𝑒𝑖𝑛𝑎𝑠 𝑇𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝐶𝑎𝑟𝑏𝑜ℎ𝑖𝑑𝑟𝑎𝑡𝑜𝑠 𝑥 4 = 𝐾𝑐𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝐶𝑎𝑟𝑏𝑜ℎ𝑖𝑑𝑟𝑎𝑡𝑜𝑠 𝑇𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝐿𝑖𝑝𝑖𝑑𝑜𝑠 𝑥 9 = 𝐾𝑐𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝐿𝑖𝑝𝑖𝑑𝑜𝑠 𝐾𝑐𝑎𝑙 𝑇𝑂𝑇𝐴𝐿 = 𝐾𝑐𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝑃𝑟𝑜𝑡𝑒𝑖𝑛𝑎𝑠 + 𝐾𝑐𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝐶𝑎𝑟𝑏𝑜ℎ𝑖𝑑𝑟𝑎𝑡𝑜𝑠 + 𝐾𝑐𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝐿𝑖𝑝𝑖𝑑𝑜𝑠 Ej: Cantidad de proteínas en leche fresca de vaca = 3.1g/100g, supongamos que una persona consume 200ml de leche fresca de vaca al dia: Si en 100g hay 3.1g en 200g habrá => 6.2g de proteínas => 6.2 x 4 = 24.8 Kcal obtenemos de 200ml de leche fresca de vaca. GASTO ENERGETICO POR ACTIVIDAD FISICA (TENER COMO REFERENCIA): En esta pagina se encuentran la cantidad de proteínas, grasas, carbohidratos y demás en determinados alimentos: http://www.ins.gob.pe/insvirtual/images/otrpubs/pdf/Tabla%20de%20Alimentos.pdf