trabajo sobre las tinciones de GRAM y ZIEHL NEELSEN

1. UNIVERSIDAD CATÓLICA
DE CUENCA
UNIDAD ACADEMICA DE
SALUD Y BIENESTAR
FACULTAD DE MEDICINA
CATEDRA: MICROBIOLOGIA Y PARSITOLOGIA I
CATEDRÁTICA: DRA. ANDREA ASTUDILLO.
INTEGRANTES: MARITZA ENRÍQUEZ
ANDREA ESCANDON
ANDRES FLORES
PARALELO: TERCER CICLO DE MEDICINA “A”

2. TINCIÒN
 Las células bacterianas son ricas en ácidos nucleicos tienen cargas (+)
en los grupos fosfatos que se combina con las cargas (+) de los
colorantes básicos.
 Los colorantes ácidos no tiñen a las células bacterianas, se utilizan
para teñir el material de fondo para proporcionar un contraste de
color

3. TINCIÒN DE GRAM
 Tinción utilizada para separar las bacterias en Gram (+) y Gram (-).
 Se fija la muestra en un portaobjetos mediante calentamiento o tratamiento con
alcohol.
 Se expone ala muestra a violeta de cristal.
 Se añade yodo para formar el complejo con el colorante principal.

4. TINCIÒN DE GRAM
 En la decoloración con alcohol o acetona el complejo:
• Queda retenido en las bacterias Gram positivas y
• Se pierde en las Gram negativas.
 Los microrganismos Gram (-) retienen el colorante safranina( color rojo).

5. TINCIÒN DE GRAM
 El grado en el que un microrganismo conserva el colorante depende de:
• Del microorganismo
• De las condiciones del cultivo.
• Habilidades tintoriales del microscopista.

6. TINCIÒN DE GRAM

7. TINCIÒN DE GRAM

8. TINCIÓN DE ZIEHL
NEELSEN

9. La tinción de Ziehl-Neelsen (BAAR) es una técnica de tinción diferencial rápida
y económica, usada para la identificación de microorganismos patógenos,
como M. tuberculosis o el género Apicomplexa (coccidios intestinales) entre
otros.
Fue descrita por primera vez por dos médicos alemanes: Franz Ziehl, un
bacteriólogo, y Friedrich Neelsen, un patólogo.
TINCIÓN DE ZIEHL
NEELSEN

10. TINCIÓN DE ZIEHL
NEELSEN
 Esta tinción demuestra la capacidad de ciertas bacterias de resistir a la decoloración por
ácidos y alcoholes, lo cual se correlaciona con su alto contenido en lípidos en la pared
celular y presencia de ácidos micólicos que aumentan el carácter hidrófobo.
 Una de las bacterias que presentan esta característica es Mycobacterium tuberculosis
Principal causante de la tuberculosis.

11. TINCIÒN DE ZIEHL
NEELSEN Se utiliza para teñir micobacterias y otros microorganismos acido resistentes.
 Se tiñen con carbolfucsina básica.
 Resisten a la descoloración con soluciones de acido-alcohol.
 Se realiza contra tinción del fondo con azul de metileno.
 Los microorganismos aparecen de color rojo sobre un fondo azul claro.

12. Los reactivos necesarios para su realización son los siguientes:
ácido periódico 58% carbol fucsina de Ziehl culina (fucsina fenicada). Preparar
mezclando en el orden dado:
0,5 g fucsina básica
50 cc agua destilada
5 cc etanol absoluto
28,5 g cristales de fenol derretidos
hematoxilina
alcohol ácido 1%:
alcohol de 35º
ácido clorhídrico
Técnica

13. PROCEDIMIENTO

14. Etapa 1:
 PREPARACIÓN DEL EXTENDIDO
Tomar una cantidad homogénea de esputo y extenderla de un extremo a
otro del portaobjetos para lograr una película homogénea

15. Etapa 2
 CUBRIR El EXTENDIDO CON FUCSINA FILTRADA

16. Etapa 3
 CALENTAR HASTA EMISIÓN DE VAPORES TRES VECES DURANTE 5 MINUTOS

17. Etapa 4
 LAVAR CON AGUA

18. Etapa 5
 CUBRIR CON SOLUCIÓN DECOLORANTE DURANTE 3 MINUTOS
Solución decolorante: alcohol ácido

19. Etapa 6
 LAVAR CON AGUA

20. Etapa 7
 CUBRIR CON AZUL DE METILENO DURANTE 1 MINUTO

21. Etapa 8
 LAVAR CON AGUA Y SECAR AL AIRE

22. ETAPA 10
 OBSERVACION MICROSCÓPICA Y LECTURA DE EXTENDIDOS

23. INTERPRETACION DE RESULTADOS
Células Color
Bacilos y microorganismos
Alcohol Acido-Resistentes.
Rojo brillante
Gérmenes, otros organismos y
material de soporte.
Diferentes tonalidades de azules