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TEMA:  ELECTROFORESIS CURSO:   QUIMICA ANALÍTICA E INSTRUMENTAL II HUAMANÍ CÁRDENAS, C. ÁNGEL DOCENTE:   JESÚS LIZA SECCIÓN:   FB5M1
ELECTROFORESIS
INTRODUCCION La electroforesis es una técnica de separación que puede ser utilizada con fines analíticos y que fue introducida por el químico sueco Arne Tiselius. El interés principal de este investigador fue la química de las proteínas séricas. Por su trabajo pionero en este campo, Tiselius recibió el Premio Nobel en 1948.
ELECTROFORESIS ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
PRINCIPIOS TEÓRICOS Es una técnica de separación que consiste en el transporte de iones a través de una disolución por acción de un campo eléctrico.
 
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
PARÁMETROS QUE INFLUYEN EN LA MOVILIDAD ELECTROFORÉTICA ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
EQUIPO ELECTROFORÉTICO - + + (E. horizontal) (E. vertical) muestra muestra fuente de  alimentación fuente de  alimentación cable cable - tampón tampón cubeta cubeta gel gel electrodo electrodo cátodo ánodo electrodo cátodo ánodo * Fuente de alimentación * Cubeta * Tampón de electroforesis *  Soporte electroforético (gel) *  Dos electrodos ánodo (+) cátodo (-) Componentes:
TIPOS DE ELECTROFORESIS ,[object Object],[object Object]
Electroforesis de frente móvil Aquella en la cual las partículas se mueven de forma libre en el medio en el que se encuentran dispersas.  Las sustancias a separar se introducen en un tubo en forma de U, disueltas en un tampón de pH y fuerza iónica adecuados.   Se colocan los electrodos en sendos brazos del dispositivo, entre los que se crea un campo eléctrico, provocando que las moléculas de la muestra (por ejemplo: proteínas) cargadas emigren hacia los electrodos de polaridad opuesta.
Electroforesis de zona La disolución a tratar se aplica como una mancha, o como una banda, y las partículas migran a través de un disolvente, utilizando además un medio soporte inerte y homogéneo, tal como el papel o ciertos tipos de geles. Esta técnica es utilizada para analizar mezclas, para determinar la pureza de una muestra, para detectar cambios de movilidad o de conformación de sustancias.
Medios de soporte usados en electroforesis de zona ,[object Object],Método sencillo y rápido Se usa para la separación de proteínas oligonucleótidos carbohidratos lípidos
Desventajas ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Gran parte de los grupos hidroxil de la celulosa se han esterificado por acetilación  no hay interacción con las proteínas. Desventaja: ,[object Object],Su aplicación principales para separar las proteínas del suero, lo que se denomina una proteinograma.
[object Object],Factor que influyen en la migración de la muestra en los geles: Son polímeros de red tridimensional El uso de geles como medio de soporte en electroforesis, constituye una alternativa para solucionar algunos problemas asociados con el uso de papel y de acetato de celulosa como la adsorción, la difusión y poca resolución de los compuestos separados. Resistencia o fricción a este movimiento ,[object Object],[object Object]
Geles Almidón Poliacrilamida Agarosa Técnica barata, fácil y rápida ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
ANÁLISIS CUALITATIVO Consiste en identificar, visualizar o localizar, en el medio de soporte, los componentes del espécimen separados por electroforesis. Se puede realizar por medio de colorantes o por métodos inmunológicos. Lo más frecuente es teñir el medio de soporte con una colorante.
 
APLICACIONES ,[object Object],[object Object],[object Object]
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Electroforesis

  • 1. TEMA: ELECTROFORESIS CURSO: QUIMICA ANALÍTICA E INSTRUMENTAL II HUAMANÍ CÁRDENAS, C. ÁNGEL DOCENTE: JESÚS LIZA SECCIÓN: FB5M1
  • 3. INTRODUCCION La electroforesis es una técnica de separación que puede ser utilizada con fines analíticos y que fue introducida por el químico sueco Arne Tiselius. El interés principal de este investigador fue la química de las proteínas séricas. Por su trabajo pionero en este campo, Tiselius recibió el Premio Nobel en 1948.
  • 4.
  • 5. PRINCIPIOS TEÓRICOS Es una técnica de separación que consiste en el transporte de iones a través de una disolución por acción de un campo eléctrico.
  • 6.  
  • 7.
  • 8.
  • 9. EQUIPO ELECTROFORÉTICO - + + (E. horizontal) (E. vertical) muestra muestra fuente de alimentación fuente de alimentación cable cable - tampón tampón cubeta cubeta gel gel electrodo electrodo cátodo ánodo electrodo cátodo ánodo * Fuente de alimentación * Cubeta * Tampón de electroforesis * Soporte electroforético (gel) * Dos electrodos ánodo (+) cátodo (-) Componentes:
  • 10.
  • 11. Electroforesis de frente móvil Aquella en la cual las partículas se mueven de forma libre en el medio en el que se encuentran dispersas. Las sustancias a separar se introducen en un tubo en forma de U, disueltas en un tampón de pH y fuerza iónica adecuados. Se colocan los electrodos en sendos brazos del dispositivo, entre los que se crea un campo eléctrico, provocando que las moléculas de la muestra (por ejemplo: proteínas) cargadas emigren hacia los electrodos de polaridad opuesta.
  • 12. Electroforesis de zona La disolución a tratar se aplica como una mancha, o como una banda, y las partículas migran a través de un disolvente, utilizando además un medio soporte inerte y homogéneo, tal como el papel o ciertos tipos de geles. Esta técnica es utilizada para analizar mezclas, para determinar la pureza de una muestra, para detectar cambios de movilidad o de conformación de sustancias.
  • 13.
  • 14.
  • 15.
  • 16.
  • 17.
  • 18. ANÁLISIS CUALITATIVO Consiste en identificar, visualizar o localizar, en el medio de soporte, los componentes del espécimen separados por electroforesis. Se puede realizar por medio de colorantes o por métodos inmunológicos. Lo más frecuente es teñir el medio de soporte con una colorante.
  • 19.  
  • 20.