En esta presentación el lector podrá apreciar distintos aspectos relevantes sobre la historia, taxonomía, principales agentes patógenos, generalidades, epidemiología, estructura antigénica, factores de virulencia, metabolismo, diagnóstico y otros datos de interés para estudiantes y especialistas en el área de bacteriología sobre dos géneros que causan infecciones infrecuentes, pero persistentes capaces de burlar los distintos mecanismos de defensa del organismo humano, a causa de sus características singulares. Agradezco de antemano que se cite el trabajo aquí presente, el cual a su vez es una recopilación de distintas fuentes actualizadas en relación al tema planteado.

1. Estudiante: Carlos Malpica
3er año de Bioanálisis. Sección 2
Profesora: Nancy Domínguez
Universidad de Carabobo
Facultad de Ciencias de la Salud
Escuela de Bioanálisis “Omaira Figueroa”
Departamento de Microbiología
Asignatura Microbiología I
Sede Aragua

2. Reseña Histórica
1898
Nocard y
Roux
M. mycoides
PPLO
(pleuro-
pneumonia-
like
organisms).
1900
Dujardin y
Beaumetz
Describen
colonias con
aspecto de
“huevo frito”.
1937
Dienes y
Edsall
Primer
aislamiento en
humanos.
Absceso en
glándula de
Bartholin
1944
Eaton
Agente que
superaba los
filtros y
ocasionaba
neumonía en
roedores.
“Agente
Eaton”
1962
Chanock
Cultivó M.
pneumoniae
en medios de
cultivo
acelulares.

3. Taxonomía
Reino: Bacteria
Filo: Firmicutes
Clase: Mollicutes
Orden:
Mycoplasmatales
Familia:
Mycoplasmataceae
Géneros:
Mycoplasma y
Ureaplasma
Especies…

4. Principales patógenos
M. pneumoniae U. urealyticum
M. genitalium M. hominis
Patógenos
atípicos

5. Generalidades
Ausencia de Pared Celular
• Sensibles a pH, gradientes osmóticos y
deshidratación.
Bacterias más pequeñas de vida libre
• Son capaces de atravesar los poros de los
filtros (0,45 μm).

6. Generalidades
Son anaerobios facultativos
• A excepción de Mycoplasma pneumoniae
(aerobio estricto).
Metabolismo
• Los Ureaplasmas son ureasa (+), entre los
Mycoplasmas algunos metabolizan la
glucosa y otros el aminoácido Arginina.

7. Generalidades
Son móviles, no tienen flagelos.
• Se ha estudiado un mecanismo de “Movilidad por
deslizamiento” (Mcbride, 2001) que involucra proteínas
del citoesqueleto bacteriano y adhesinas de superficie.

8. Generalidades
Presentan pleomorfismo.
• Debido a la ausencia de pared celular, observándose como
cocos de 0,2-0,3 μm o bacilos de 0,1-0,2 μm de ancho y 1-2
μm de longitud. No generan esporas.

9. Generalidades
Se reproducen por fisión binaria.
• Tienen un genoma muy reducido entre 570 y 2200 pb
(Fagundo, Sánchez y Pérez, 2006); capacidad
biosintética limitada, no producen ácido fólico, siendo
resistentes al trimetroprim-sulfamexotazol (op. cit.).

10. NOTA
• No confundir a estos microorganismos con las variantes de
clase L (Formas L). Formas microbianas con pared celular
defectuosa.
FORMAS L

11. Hábitat
Agua y suelos. Habitan en múltiples especies de mamíferos y aves, además de
insectos y plantas.
Los Mycoplasmas y Ureaplasmas humanos colonizan el epitelio respiratorio y el
tracto urogenital.

12. Epidemiología

13. Estructura antigénica y
Factores de virulencia
 Poseen estructuras polares especializadas de naturaleza
proteica (adhesinas). Con abundante prolina.
 Antígeno CF (complement fixation). Glucolípidos.

14. Estructura antigénica y
Factores de virulencia
 Varias especies de Mycoplasma son capaces de cambiar la
expresión de las lipoproteínas de superficie.
 Citotoxicidad directa por peróxido de hidrógeno.

15. Estructura antigénica y
Factores de virulencia
 Están delimitados por una membrana trilaminar, cubierta de
esteroles, los cuales adquieren del medio circundante.

16. Estructura antigénica y
Factores de virulencia
Esteroles y
proteínas de
membrana
Nota: Algunas
especies producen
hemolisinas.

17. 2012

18. Mycoplasma pneumoniae Única especie capaz de ocasionar infecciones respiratorias en adultos.
 Grupo etario más susceptible: 5-20 años.
 pH óptimo: 7,0-7,8 (para todas
 Utiliza la glucosa como fuente de C,
 Contagio: Secreciones respiratorias.
 Dosis infecciosa: 100 UFC.
 Hemadsorción: Oligosacáridos con ác. siálico.
las especies del género). (T=35-37 °C)
productos finales: ácido láctico y CO2.
Acidificación. Produce hemolisinas.

19. Ureaplasma urealyticum
Llamadas anteriormente "cepas T”
(tiny), colonias de 15-60 μm
Hidrolizan la urea, única fuente de C,
producto final: NH4. Alcalinización.
pH óptimo: 6,0-6,2.
Incidencia: 60% en mujeres
sexualmente activas, (vagina, tracto
genital inferior) la mayoría son
portadoras asintomáticas.
Suelen morir tras su aislamiento
inicial.

20. a) M. hominis
b) M. genitalium
c) M. hominis
d) M.genitalium
e) M.hominis
Relacionados con infertilidad en
ambos sexos. Uretritis, prostatitis,
vaginosis bacteriana, bajo peso y
alteraciones neurológicas en R.N.

21. Diagnóstico

22. ¿Coloración de Gram?
 Están filogenéticamente relacionados con los microorganismos Gram (+)
(Filo Firmicutes). Debido a su bajo contenido GC.

23. Diagnóstico microbiológico
Medios de cultivo: Suelen ser medios difásicos (caldo sobre Agar) con alto
contenido de peptonas, esteroles, infusión de corazón vacuno (ADN), agregado de
suero de caballo (colesterol) y extracto de levadura. Antibióticos beta lactámicos
para inhibir la flora acompañante y NaCl para mantener el balance osmótico.
Algunos medios de cultivo contienen Acetato de Talio, un agente que inhibe el
crecimiento de muchas especies de bacterias pero no a la mayoría de los
Mycoplasmas.
Medio de cultivo amarillo, el crecimiento se observa por turbidez
en el medio.Caldo PPLO

24. Agar PPLO con azul de metileno
Contiene peptonas, esteroles, infusión de corazón vacuno, agregado de suero de
caballo y extracto de levadura (25%). Penicilina, Acetato de Talio, Anfotericina
B; el azul de metileno inhibe el crecimiento de varias especies de Mycoplasmas,
excepto a M. pneumoniae.

25. Caldo y Agar Urea-Arginina
 Suspender la muestra en caldo Urea-Arginina, inocular en
Agar en forma de gotas no confluentes, sin extender.
 Incubar a 37 °C por 48h en atmósfera microaerofílica (método
de la vela).
 Cambios en el cultivo: Viraje en el caldo y observación de
morfología de colonias en Agar (objetivo 10x).

26. Mycoplasma pneumoniae
Muestras: Esputo, lavados faríngeos o bronquiales, material de aspirado traqueal,
hisopados nasofaríngeos, biopsias de tejido pulmonar.
Colonias: Aspecto granular homogéneo (“forma de mora”) o de “huevo frito”
precipitado central y turbidez en la periferia. Requiere 5% de CO2.

27. Ureaplasma urealyticum
Muestras: Uretrales, vaginales y cervicales, secreciones prostáticas, semen,
sangre y otros líquidos corporales, biopsias.
Colonias: Pequeñas, color marrón, forma de “erizo de mar”.
Los medios de cultivo para U. urealyticum deben contener una solución buffer,
10% de urea. El género Ureaplasma es inhibido por el Acetato de Talio.
Forma parte de la flora normal del tracto genitourinario junto a M. hominis y M.
genitalium. Especialmente en mujeres.

28. M. genitalium y M. hominis
M. hominis hidroliza la arginina y emplea este aa como fuente de C y ATP; producto
final: NH4. Alcalinización. Requiere 5% de CO2. Es el único Mycoplasma capaz de
crecer (tardíamente) en medios de cultivo habituales.
M. genitalium es difícil de cultivar, incluso en medios especializados, metaboliza la
glucosa. Su crecimiento también es inhibido por el Acetato de Talio.
Placa de Agar Sangre con colonias
de M. hominis a los 4 días de
incubación.
Placas de Agar Sangre con colonias
de M. hominis a mayor aumento.

29. Acerca de los cultivos
• El cultivo no es el método de diagnóstico más eficaz, puede
durar entre 14 días y 6 semanas, la probabilidad de aislar a los
microorganismos de estos géneros es de 40-60%

30. Medios de transporte
Diseñados para el transporte de microorganismos como Mycoplasma spp, Ureaplasma
spp, Chlamydia spp y virus en muestras biológicas. Contiene ATB que inhiben el
crecimiento de hongos y otras bacterias, contiene perlas de vidrio para facilitar la lisis
celular, la homogeneidad de la muestra y maximizar la elución. Ideado para el cultivo y
compatible con técnicas de diagnóstico molecular.
Almacenar a 4 °C por
periodos de tiempo
prolongados

31. Diagnóstico serológico
 Se realizan estudios de fijación de complemento con los
antígenos glucolípidos extraídos de Mycoplasmas cultivados.
(Fase aguda y de convalecencia).

32. Inhibición de la
hemaglutinación
 Se aplican a eritrocitos marcados con tanino y con antígenos
de Mycoplasma adsorbidos.

33. Inmunofluorescencia directa
• Inmunofluorescencia directa, inhibición del crecimiento por
acs específicos.

34. Crioaglutininas

35. Ensayos inmunoenzimáticos
ELISA IGM Especificidad: 100%
Sensibilidad: 71%
1) 2)
3) 4)

36. Biología Molecular
Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
Amplificación de segmentos genéticos específicos.
Elevada sensibilidad y especificidad respecto a los cultivos, diagnóstico precoz.
Susceptible de errores de ejecución y contaminantes (López-Ávila y cols, 2014).

37. Profilaxis y Tratamiento
Los antibióticos beta-lactámicos son inútiles dada la ausencia de pared celular
de Mycoplasma y Ureaplasma.

38. Resistencia antimicrobiana
Fagundo y cols, 2006

39. Prevención
 El aislamiento es inviable debido
al largo período de incubación que
aumenta la capacidad de contagio.
 Uso de tapabocas.
M. pneumoniae M. hominis, M. genitalium y
U. urealyticum
 Evitar la promiscuidad.
 Uso de anticonceptivos de
barrera.

40. ¿Vacunas?
Las vacunas en humanos aún no han sido desarrolladas.

42. 2005

44. “Sin laboratorios los hombres
de ciencia son como soldados
sin armas.” Louis Pasteur.