inmunoserologias.....ayudas diagnosticas..... La importancias de los examenes paraclinicos son una herramienta importante para llegar a un diagnostico certero, por lo tanto conocer a fondo el manejo y principios de las herramientas brindadas por el laboratorio es de vital importancia para el profesional de medicina.

2. La serología aprovecha la habilidad de
los organismos de defenderse ante una
infección por un patógeno. Esta defensa
incluye diferentes mecanismos
específicos e inespecíficos, de los cuales
los inespecíficos son innatos
Tras una infección la presencia de
anticuerpos se puede detectar en general
en un plazo de entre 10 y 15 días
dependiendo de:
 Tipo, cantidad, virulencia y
patogenicidad del antígeno
 Estado, la vía de infección y la
capacidad inmune del organismo
infectado.

4. La detección de anticuerpos circulantes no solo depende
de factores ligados al individuo o el patógeno investigado,
sino también de los métodos empleados para su
detección
a) El sistema de complemento: Su activación resulta en una reacción con las membranas de
células que puede causar bien su activación, la alteración de su estructura o su destrucción.
Eritrocitos sobre la superficie de los cuales se han fijado anticuerpos son destruidos mediante
lisis por el sistema de complemento. La técnica utiliza cantidades conocidas de complemento
para medir la cantidad de anticuerpos presentes en una muestra.
b) La reacción de anticuerpos con el antígeno:
es muy específica, y por esta razón constituye un instrumento muy valioso para mediante un
componente conocido (antígeno) identificar la presencia de uno desconocido con un alto
nivel de seguridad.
La reacción de un antígeno con anticuerpos resulta en la formación de complejos inmunes de
diferentes tipos. Dependiendo del antígeno y el sistema de prueba utilizados se pueden
obtener y medir diferentes tipos de estos complejos. En general, en las pruebas de serología
se emplea una cantidad conocida de antígeno y se diluye el suero que se investiga de forma
seriada. Se mide la concentración del suero que aún inhibe (mediante complejos anticuerpo
antígeno) una acción concreta del antígeno, o la que aún forma complejos que provocan una
reacción demostrable.

6. Pruebas indirectas que demuestran que el sistema inmune del individuo afectado ha
estado en contacto con el agente en cuestión.
1- Precipitación
La adición de un antígeno soluble a una
solución con anticuerpos homólogos resulta
en la formación de complejos inmunes que
precipitan de la solución.
2- Inmunodifusión
Cuando esta técnica se utiliza en un medio
semisolido como los geles de agar en los cuales
los dos componentes el antígeno y el
anticuerpo migran a través del agar hasta que
se encuentren y precipitan en el lugar donde
su proporción es optima, se trata de
inmunodifusión.

7. 3- Aglutinación
Anticuerpos pueden reaccionar con un
antígeno determinado y luego interconectar
entre ellos o diferentes componentes
antígenos presentes por ejemplo en la
superficie de una bacteria. Este proceso resulta
en la aglutinación que es visible
macroscopicamente y es un instrumento útil
en la identificación de bacterias, hongos e
incluso protozoos mediante antisueros
específicos.
4- Floculación
La reacción de floculación es una prueba de
agrupamiento microscópico del antígeno y el
anticuerpo. Esta prueba es basada en la
reacción de floculación visible del antígeno
artificial, esto es debido por el desarrollo de
anticuerpos IgG que reaccionan mediante la
combinación de un lipoide.

8. 5- Inmunoelectroforesis
6- Fijación de complemento (CFT)
7- Hemaglutinación e inhibición de la misma (HA y HAI)
8- Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)
9- Radioimmunoassay (RIA)
10- Inmunofluorescencia
11- Inmunoperoxidasa
12- Test de neutralización de virus
ESPECIFIDAD Y SENSIBILIDAD
Todo depende de su especificad (capacidad de distinguir el material
(anticuerpo, antígeno) objetivo de la prueba de otro parecido y de su
sensibilidad (capacidad de detectar cantidades pequeñas del material
objetivo de la prueba).
El ideal sería una prueba que al mismo tiempo garantizara la máxima
especificad (sin falsos positivos) y la máxima sensibilidad (sin falsos
negativos) y que la mismo tiempo diera resultados rápidos.

10.  Es una técnica en la que se utilizan los principios de
la reacción Ag-Ac para determinar la presencia de
diferentes componentes inmunológicos utilizando
directamente estos o materiales de soporte que
permiten visualizar una aglutinación macro y
microscópica para su posterior interpretación clínica
 En esta presentación se mencionaran al LATEX, la
aglutinación directa y al CARBON

11.  El látex es un material polimérico compuesto de grasas y
resinas vegetales.
 Contiene grupos carboxilos que le dan la propiedad ligar
imunocomponentes de manera eficaz.
 Se pegan los Ac’s o Ag’s en partículas de látex de un tamaño de
0,5 a 1 μm por condensacion

12. Entonces cuando se añada el reactante a las
partículas de látex con recubierto
inmunológico se formaran aglutinados que se
observan macroscópicamente.

13. De esta manera funcionan muchos de los kits
comerciales usados en el laboratorio de
inmunología clínica tales como:
1. Determinación de estreptolisina “O” (ASTO)
2. Determinación de factores reumatoideos (RF)
3. Determinación de proteína C-reactiva (PCR)

14. PARTICULAS DE
LATEX RECUBIERTAS
CON Ag
ANTICUERPOS IgM
PENTAMERICOS EN EL SUERO
AGLUTINADO MACROSCOPICAMENTE VISIBLE

15. Principio de aglutinación

16. Aglutinacion en latex
Es un método de laboratorio para examinar ciertos
anticuerpos o antígenos
Los anticuerpos o antígenos conocidos son unidos a partículas de látex, con el objeto
de facilitar la visualización de la prueba. Se pueden emplear otras partículas insolubles
como el poliestireno o la bentonita

17. Tipos de reactivos en látex
PREPARACION REACTIVO REACCION
ANTICUERPOS
ANTIGENOS

18. Aglutinación en látex
DE FÁCIL USO
PRESUNTIVO
Muy cómodoMUY RÁPIDO
CUALITATIVO Y
SEMICUANTITATIVOSENSIBLE Y ESPECIFICO

19. procedimiento

20. PCR – proteína c reactiva
se produce en el hígado cuando hay una infección o inflamación aguda en el
cuerpo. Su importancia es que reacciona con el sistema del complemento
que es un sistema de defensa contra agresiones externas del cuerpo humano
¿PARA QUÉ SE REALIZA?
enfermedades infecciosas
bacterianas
enfermedades inflamatorias
Para realizar este análisis No se precisa estar
en ayunas.

21. PRUEBA EN PORTA
La determinación se efectúa ensayando una suspensión de látex recubierto con
anticuerpos anti-PCR, frente a los sueros problema. La presencia de aglutinación
es indicativa de un aumento del nivel de PCR por encima del límite superior del
intervalo de referencia de las muestras ensayadas
COMPOSICION DE LOS REACTIVOS
R CONTROL +
CONTROL -
Reactivo PCR-Latex.
Suspensión estabilizada y
tamponada de partículas
de látex recubiertas con
anticuerpos específicos
anti-PCR humana.
Contiene 0,95g/L de azida
sódica
Suero humano con una
concentración de PCR >
15 mg/L. Contiene 0,95
g/L de azida sódica
Suero animal, con una
concentración máxima
de 1 mg/L de PCR
humana. Contiene 0,95
g/L de azida sódica

22. PCR
Artritis aguda
Artritis reumatoide
Fiebre reumática
Otras enfermedades autoinmunes
(Síndrome de Reiter, Enfermedad de
Crohn, vasculitis, LED, etc...)
Infarto de miocardio
Infarto pulmonar
Problemas de rechazo
de transplantes
Traumatismos
Infecciones bacterianas (urinarias,
tuberculosis, etc...)
Cáncer.

23. PCR

26. ANTIESTREPTOLISINA-O (AS0)
es la medición de anticuerpos anti-Estreptococo betahemolíticos del tipo A. Esta
bacteria produce una enzima llamada estreptolisina O, que puede destruir los
hematíes y el cuerpo reacciona contra ella produciendo anticuerpos específicos
antiestreptolisina O.
¿PARA QUÉ SE REALIZA?
La presencia de títulos altos de antiestreptolisinas O ó ASLO, indican una infección por
la bacteria Estreptococo betahemolíticos del tipo A, que puede producir una
glomerulonefritis, una fiebre reumática, una endocarditis bacteriana o una escarlatina
Para realizar este análisis NO se precisa estar en ayunas.

27. La determinación se efectúa ensayando una suspensión de partículas de látex recubiertos con
estreptolisina frente a los sueros problema. La presencia o ausencia de aglutinación visible es
indicativa de la presencia o ausencia de ASLO en las muestras nsayadas a niveles significativos
ASLO-Latex
Determinación de anti-estreptolisina O
PRUEBA EN PORTA
R CONTROL + CONTROL -
Antígeno ASLO-Latex.
Suspensión estabilizada y
tamponada de partículas de
látex recubiertas con
estreptolisina O. Contiene
0,95 g/L de azida sódica.
Suero humano con una
actividad ASLO superior a 200
UI/mL. Contiene 0,95 g/L de
azida sódica
Suero animal con una
actividad ASLO inferior a
100 UI/mL. Contiene 0,95
g/L de azida sódica.
COMPOSICION DE LOS
REACTIVOS

28. Niveles normales de ASLO
en adultos Menores de 160 Unidades/ml
en niños menores de 2 años Menores de 50 Unidades/ml
en niños entre 2 y 4 años Menores de 160 Unidades/ml
en niños entre 4 y 12 años Entre 160 y 300 Unidades/ml
Niveles normales de Saturación de la
transferrina
Hombres del 20 al 50%
Mujeres del 15 al 50%
En estos valores puede haber ciertas diferencias

29. ASO

30. ASLO
•Infección por Estreptococo beta
hemolíticos del tipo A
•Glomerulonefritis
•Fiebre reumática
•Endocarditis
bacteriana
•Escarlatina
•Pioderma por Estreptococo
betahemolíticos del tipo A

31. FACTOR REMATOIDEO (FR)
El factor reumatoide (FR) es una prueba que mide la presencia y nivel de la IgM
específica contra las inmunoglobulinas IgG anormales, producidas por los linfocitos de
la membrana sinovial, de las articulaciones de personas afectadas por la Artritis
Reumatoide
¿PARA QUÉ SE REALIZA ESTE ESTUDIO?
La Artritis Reumatoide es una enfermedad crónica, que produce la inflamación de las
articulaciones principalmente de manos y pies.
VALORES NORMALES DE FACTOR REUMATOIDE (FR)
Valores normales o NEGATIVOS:
•Menor de 60 U/ ml (por nefelometría).
•Título menor de 1:80 (método de aglutinación)
En estos valores puede haber muy pequeñas diferencias por la técnica o por criterios de
normalidad propios de laboratorios concretos, a veces en el rango de valores y otras veces
por las unidades a las que se hace referencia.

32. PRUEBA EN PORTA
La determinación se efectúa ensayando una suspensión de partículas de látex recubiertos con
gamma globulina humana frente a los sueros problema. La presencia o ausencia de aglutinación
visible es indicativa de la presencia o ausencia de FR en las muestras ensayadas
COMPOSICION DE LOS REACTIVOS
R
CONTROL + CONTROL -
Reactivo FR-Latex.
Suspensión estabilizada y
tamponada de partículas
de látex recubiertas con
gamma globulina humana.
Contiene 0,95 g/L de azida
sódica
Suero humano con una
actividad aproximada
equivalente a 25
UI/mL. Contiene 0,95
g/L de azida sódica
Suero animal con una
actividad inferior a 5
UI/mL. Contiene 0,95 g/L
de azida sódica

33. FR

34. (FR)
Artritis Reumatoide
Dermatomiositis
Escleroderma Hepatitis crónica
Infección viral crónica Mononucleosis infecciosa
Leucemia
Lupus Eritematoso Sistémico
Síndrome de Sjogren
Síndrome Nefrótico
Tuberculosis

36. • En este caso se utilizan directamente los
antígenos en una suspensión salina sin un
soporte como el látex o carbón.
• Se usan células muertas de los agentes
infecciosos como en la prueba de widal para la
detección de salmonella y brucella

39. WIDAL
AGLUTINA
En el suero del paciente se encuentran
anticuerpos anti-membranas flagelares
de salmonella y brucella
El paciente cursa una infección
por salmonella o brucella
El paciente podría estar
cursando una FIEBRE ENTERICA,
SEPTICEMIA, ENTERITIS
Se hacen otras pruebas para
confirmar el estado
aparentemente saludable del
paciente
NO AGLUTINA

40. INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS
 4+: todos los microorganismos aglutinan.
 3+: aglutinan aproximadamente el 75%.
 2+: aglutinan aproximadamente el 50%.
 1+: aglutinan aproximadamente el 25%.
Negativo: no aparece aglutinación. Técnica
I: se indica solamente positivo o negativo.
Técnica II: el título se considerará la última
dilución que da aglutinación del 50% (++).
VALORES DE REFERENCIA
 Generalmente títulos de 1:40 ó 1:80 son
sospechosos de enfermedad.
 Sólo títulos mayores de 1:80 pueden
considerarse probatorios de diagnóstico de
enfermedad cuando estén acompañados de
la sintomatología clínica.
 Títulos mayores de 1:320, son concluyentes.

41. • El carbón (activado) proveniente de la
combustión de materias vegetales y es un
potente adsorbente de varias sustancias.
• Esta propiedad adsorbente se le atribuyen a
los micro poros que tienen sus partículas con
poros de aproximadamente 1 nm de radio o
menos.

42. • En inmunoaglutinacion las partículas de
carbón tienen adsorbidas a sus partículas
sustancias como colesterol, leticina y
cardiolipina o conocidas como reagininas
plasmáticas en la prueba de RPR

43.  COLESTEROL
 LECITINA
 CARDIOLIPINA
CARBON ACTIVADO
LIPIDOS
ADSORBIDOS EN EL
CARBON
ANTICUERPOS IgM
AGLUTINADO

44. RPR
AGLUTINA
En el suero del paciente se encuentran
anticuerpos anti-reaginas producidas
por las celulas infectadas posiblemente
con T. pallidum y por el mismo MO
El paciente posiblemente cursa
o curso una infección por T.
pallidum
Se debe confirmar si se trata de SIFILIS
relacionando el resultado de laboratorio con la
clinica o pruebas mas especificas ya que el RPR
no es especifico del Ag de T. pallidum
Se hacen otras pruebas para
confirmar el estado
aparentemente saludable del
paciente
NO AGLUTINA

45. Huésped produce anticuerpos:
1. contra material lipoidal liberado por las células dañadas
(reaginas)
2. contra material lipoproteico y cardiolipina liberada por los
treponemas (anticuerpos específicos)
Anticuerpos antilipídicos:
 Se detectan en etapa primaria
 Aumenta cantidad en etapa secundaria
Disminuyen en etapas posteriores
 Se producen en otras enfermedades
Treponémicas
 Se producen en respuesta a enfermedades
No treponémicas agudas o crónicas