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Plasma
Serum
1 to 2 1 to 4 1 to 8
Plasma and Serum Dilutions
0.9
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OD630nm
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Lipid Standard (mg/dL)
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RelativeRatio
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VAC01
+
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GAPDH
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ヒト血清(%)
ヒト血清 (µL)    ヒト血漿 (µL)
50 12.5 3.125 0 50 12.5 3.125 0
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1.4
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0.8
0.6
0.4
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OD450nm
Mouse Preadipocyte 3T3-L1
Medium:D-MEM + 10%CS, D-MEM +10%FBS
Cell collection2DG (1 mM)Insulin (1μM) Phloretin (200μM)
30min 48min 50min 70min
serumfree medium
(D-MEM)
HKRP buffer
0-6hr
2DG   - + + +
Insulin   - - + -
Phloretin*1   - - - +
3000
2000
1000
2500
1500
500
0
2DG6Pincorporated
intocells(pmole/well)
*1 Phloretin : glucose
  transporter inhibitor
serumfree medium
(DE/F-12)
HKRP buffer
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2DG - + + + +
Insulin - - + + +
Phloretin - - - + -
Wortmannin - - - - +
2DG6Pincorporatedintocells
(pmole/µgDNA)
800
600
400
200
0
*1
Phloretin
: glucose transporter
inhibitor  
*2
Wortmannin
: PI3 kinase inhibitor
実験例 2  ヒト皮下脂肪細胞による 2DG の取り込み
y = 407x + 4502.6
R² = 1
0
5000
10000
15000
20000
25000
30000
0 10 20 30 40 50
FluorescenceIntensity
2DG6P(μM)
0
10
20
30
40
A B C
2DG6Pincorporatedintocells
(nmole/12wellculturedish)
添加物 Sample A Sample B Sample C
インスリン - - +
2DG - + +
Denaturing extraction Native extraction
250
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50
36
30
16
M M
S.cereviseae
L.Lactis(Gram
+
)
S.cereviseae
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entus
fungus
filam
entus
fungus
250   350   450   550   650
Wavelength (nm)
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Emission
Live-or-Dye 350/448 Live-or-Dye 405/452 Live-or-Dye 405/545 Live-or-Dye 488/515
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0
50
100
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ScienCellResearchLaboratories
TM
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1
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サンプル希釈液
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コスモバイオニュース No.118 (2016年06月)

  • 1.
  • 2.
  • 3.
  • 4. ®
  • 5. Plasma Serum 1 to 2 1 to 4 1 to 8 Plasma and Serum Dilutions 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 OD630nm
  • 6.
  • 7.
  • 8. 2.5 2 1.5 1 0.5 0 OD540nm 0 500 1000 1500 2000 2500 3000 Lipid Standard (mg/dL)
  • 9. 0 200 400 600 800 1000 RelativeRatio Exposure Time VAC01 0 2 4 6 8 10 12 RelativeRatio Exposure Time BAT10 NE(-) 1H 3H 6H 24H NE(-) 1H 3H 6H 24H kDa 34 VAC01 VAC01 + NE6h VAC01 + NE24h BAT10 UCP1 43 GAPDH 26
  • 10. 2500 2000 1500 1000 500 0 RFU 100 20 4 0 ヒト血清(%) ヒト血清 (µL)    ヒト血漿 (µL) 50 12.5 3.125 0 50 12.5 3.125 0 2.4 2.2 2 1.8 1.6 1.4 1.2 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 OD450nm
  • 11.
  • 12.
  • 13. Mouse Preadipocyte 3T3-L1 Medium:D-MEM + 10%CS, D-MEM +10%FBS Cell collection2DG (1 mM)Insulin (1μM) Phloretin (200μM) 30min 48min 50min 70min serumfree medium (D-MEM) HKRP buffer 0-6hr 2DG   - + + + Insulin   - - + - Phloretin*1   - - - + 3000 2000 1000 2500 1500 500 0 2DG6Pincorporated intocells(pmole/well) *1 Phloretin : glucose   transporter inhibitor serumfree medium (DE/F-12) HKRP buffer Wortmannin (50 nM) 2DG (1 mM)Insulin (1μM) Phloretin (200μM) 0 30min 48min 50min 70min Cell collection (DE/F-12) -6hr Human Preadipocyte -subcutaneous fat tissue   (ScienCell Research Laboratories Cat.# 7220) Medium :Visceral Adipocyte Culture Medium ver.2 (Cat.# PMC-VACM2-COS) 2DG - + + + + Insulin - - + + + Phloretin - - - + - Wortmannin - - - - + 2DG6Pincorporatedintocells (pmole/µgDNA) 800 600 400 200 0 *1 Phloretin : glucose transporter inhibitor   *2 Wortmannin : PI3 kinase inhibitor 実験例 2  ヒト皮下脂肪細胞による 2DG の取り込み y = 407x + 4502.6 R² = 1 0 5000 10000 15000 20000 25000 30000 0 10 20 30 40 50 FluorescenceIntensity 2DG6P(μM) 0 10 20 30 40 A B C 2DG6Pincorporatedintocells (nmole/12wellculturedish) 添加物 Sample A Sample B Sample C インスリン - - + 2DG - + +
  • 14.
  • 15.
  • 16.
  • 17.
  • 18.
  • 19.
  • 20. Denaturing extraction Native extraction 250 98 64 50 36 30 16 M M S.cereviseae L.Lactis(Gram + ) S.cereviseae filam entus fungus filam entus fungus 250   350   450   550   650 Wavelength (nm) Excitaion Emission
  • 21. Live-or-Dye 350/448 Live-or-Dye 405/452 Live-or-Dye 405/545 Live-or-Dye 488/515 Live-or-Dye 568/583 Live-or-Dye 594/614 Live-or-Dye 640/662 Live-or-Dye 750/777 Live-or-Dye 488/515 Live-or-Dye 568/583 Live-or-Dye 594/614 Live-or-Dye 640/662
  • 22. 0 50 100 150 0 5 10 15 Albuminproduction(µg/day/well) Culture time (day) Plastic Plate/5%-O2 VECELL® G-Plate/5%-O2 Plastic Plate/21%-O2 VECELL® G-Plate/21%-O2 Plastic Plate/5→21%-O2 VECELL® G-Plate/5→21%-O2 3 15 12 9 6 3 0 6 10 Resorufin(pmol/h/well) Culture time (Day) Plastic Plate/O2 - VECELL® H-Plate/O2 +
  • 25.
  • 26. サンプル希釈液 マウス血清 マウス血漿 組織培養培地 他社製品 マウス IFN-β (pg/㎖) 0.1 1 10 100 1000 吸光度【450nm】 3 2 1 0 pg/㎖ OD450nm 5 0.5 0.05 0.5 5 50 Mammalian Mu Beta E.coli Mu Beta