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作用点公知  細胞増殖抑制 生物活性未知
作用機構研究ツール
アッセイコンセプト確認
陽性化合物
創薬リード化合物 / 構造展開
用途特許出願
など、幅広い利用法
18.4   29.7   51.9
酵素阻害
膜蛋白質(受容体・
チャネル)
複製・転写・翻訳
シグナル伝達
細胞骨格・細胞周期
その他(RedOx)
30.0
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O
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Cl
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1)抽出物の作製
2)化合物の精製
3)化合物のMS分析
4)データべース検索
5)標品による確認
素材
抽出物
分画・分取
(アッセイ)
LC-MS分析
既存の化合物データ
ベースの検索・照合
推定される化合物の
標品のLS-MS分析
(活性確認)
Ⅰ.化合物の推定
Ⅱ.化合物の同定
NMR解析
化合物の構造決定
化合物の同定
量の確保のための追加
抽出・分画・精製
6)化合物の量上げ
7)NMR解析
LIBRARY GENERATION
LIBRARY AMPLIFICATION
Reverse Transcription
(oligodT priming)
RNA Removal
Purification
PCR
Purification
Poly(A) RNA
Removal of RNA template
Random priming
cDNA library with adapters for Illumina sequencing
200 min 60 min
5’
5’
5’
3’
3’
3’
3’
5’
3’
3’
Tagged cDNA library
Double-stranded cDNA library
i7 index
(AAAAAAAA)
(AAAAAAAA)
(TTTTTTTTT)
5’
Second Strand
Synthesis
SEQUENCING - Read orientation for QuantSeq FWD
70 min 45 min
5’
i5 index (optional)
NBAAAAA.....AAAAAA
i7
index
Index 1 (i7)
Sequencing
Primer
Read 2 Read 2
Sequencing Primer
Read 1
Sequencing
Primer Read 1
(not recommended)
i5 index
(optional)
Index 2 (i5)
Sequencing
Primer
dCAS9dCAS9
dCAS9dCAS9
promoter
promoter Gene X
Gene X
KRAB
TA
sgRNA
sgRNA
NGG
NGG
CRISPRi and CRISPRa Variations
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MyoD sg-1
MyoD sg-2
MyoD sg-1+2
exp. #1 exp. #2 exp. #3
Catalog No. : T6234701-1
Cores : 90
Sixe : 2mm
Cut : 8μm
Format : 5×9
QA/QC : H&E
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Tel Cen5p13.1
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E12 / 13 E13 / 15 E14 / 15 DapB
MET△14
(H596)
MET WT
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BaseScopeTM
probe
Wild-type
MET
MET△14
Probe DesignCRISPR-Mediated DeletionUnedited Liver Edited Liver
A
C D
B
WT-only hepatocytes
Edited-only hepatocytes
Co-expressing hepatocytes
Kupffer cells
Edited
Edited
WT
49 nt
WT
CAS9
Guide RNA
49 bp
A B
Enzo社
他社
HDAC   HDAC+0.1% Tritone X-100
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【 Trichostatin A 】
%activity
0 nM 0.5nM 1nM 5nM 10nM 50nM 100nM 500nM
Untreated
Green channel Red channel Far-red channel
Untreated
Sudan Black B
TrueBlack™
NaO OO
O
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密度 (g/mL) 浸透圧 (mOsm) 粘度 (mPas)
濃度(% w/v) 濃度(% w/v) 濃度(% w/v)
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ショ糖
Nycodenz@ lodixanol (OptiPrepTM )
他社品P 塩化セシウム他社品F
0 10 20 30 40 50 60
ショ糖
Nycodenz@ lodixanol (OptiPrepTM )
他社品P 塩化セシウム他社品F ショ糖
Nycodenz@ lodixanol (OptiPrepTM )
他社品P 塩化セシウム他社品F
Iodixanol
(OptiPrepTM)
Iodixanol
(OptiPrepTM)
Iodixanol
(OptiPrepTM)
0 10 20 30 40 50 60 0 10 20 30 40 50 60
TNF-α Concentrastion (pg/mL)
Four Parameter Logistic(4-PL) Curve Fit
R2 
= 0.999
OpticalDensity
10
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0.1
0.01
1 10 100 500
Cas9
sgRNA
TUNR
AAAAAAAAA
Your Gene of Interest
TUNR Gene of Interest
Introduction of the TUNR polyA track results
in reduced gene expression.
Wild Type
Short PolyA
Long PolyA
ProteinExpressionHighLow
Streptavidin Peroxidase
Conjugate
Substrate reaction
Anti-AAV1
Biotin Conjugate
AAV1 particles
Anti-AAV1 antibody
Synthetic Promotor
P/A1/04/03
T7 Terminator
Amp
ori
EcoRIXhol
Xbal
Nhel
Hpa
pOPE101-215 (Yol)
Hpa NotI BamHI Bglll XbalEcoRI NcoI XbaI HindIII MluI EcoRV
RBS Serum A epitope
Mab Myc1-9E10 epitope Stop codon
His-tag
6×HisVL(215)VH(215)
leader sequence
epitope linker
119
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