がん免疫研究にお使いいただけるツールのほか、消化器病関連研究用ツール、GPCRスクリーニングキット、組織サンプルの深層ショットガンプロテオーム解析受託サービスなどをご紹介。

3. 文献
1. Dunn GP, Bruce AT, Ikeda H, Old LJ, Schreiber RD. Cancer immunoediting: from
immunosurveillance to tumor escape. Nat Immunol 2002;3:991-8
2. Ishida Y, Agata Y, Shibahara K, Honjo T. Induced expression of PD-1, a novel member of the
immunoglobulin gene superfamily, upon programmed cell death. EMBO J 1992;11:3887-95
3. Nishimura H, Okazaki T, Tanaka Y, Nakatani K, Hara M, Matsumori A, et al. Autoimmune dilated
cardiomyopathy in PD-1 receptor-deficient mice. Science 2001;291:319-22
4. Iwai Y, Ishida M, Tanaka Y, Okazaki T, Honjo T, Minato N. Involvement of PD-L1 on tumor cells
in the escape from host immune system and tumor immunotherapy by PD-L1 blockade. Proc
Natl Acad Sci U S A 2002;99:12293-7
5. Rosenberg SA, Spiess P, Lafreniere R. A new approach to the adoptive immunotherapy of cancer
with tumor-infiltrating lymphocytes. Science 1986;233:1318-21
6. Chowdhury PS, Chamoto K, Honjo T. Combination therapy strategies for improving PD-1
blockade efficacy: a new era in cancer immunotherapy. J Intern Med 2018;283:110-20
7. Johnson CH, Spilker ME, Goetz L, Peterson SN, Siuzdak G. Metabolite and Microbiome Interplay
in Cancer Immunotherapy. Cancer Res 2016;76:6146-52
8. Gopalakrishnan V, Helmink BA, Spencer CN, Reuben A, Wargo JA. The Influence of the Gut
Microbiome on Cancer, Immunity, and Cancer Immunotherapy. Cancer Cell 2018;33:570-80
図１抗腫瘍免疫反応は様々な因子によって制御されている
環境因子
Food
Microbiota
Age
B cells
CD4＋
T cells
Macrophage
Antigen presenting
cells
Antigen
Tumor cell
腫瘍関連因子
免疫関連因子
がん微小環境関連因子
Mitochondria
Metabolism
Cytokine
Blood vessel
pH,
O2 concentration
では効果が少なく、認可にまでは至らなかったがん抗原ワクチン治療や、自
然免疫を中心とした免疫アジュバンド治療が見直され、併用することにより
免疫チェックポイントの効果を増強する研究が盛んに進んでいる。
多くの研究では、不応答性の原因として主に腫瘍側の因子が探索されてい
るが、今後免疫側の個人差に関わる要因についても研究が進むであろう。腫
瘍側に注目した併用治療として、現在臨床試験が行われているものは、化学
療法、放射線治療、血管新生阻害治療等があげられる。一方で免疫側に着目
して進められている併用治療として、Lag-3、Tim3、VISTA等の他の免疫
チェックポイント分子阻害剤、GITR、4-1BBやOX-40等の補助シグナル分
子活性化剤とPD-1阻害剤の併用治療の治験が行われている(6)
。
効果予測バイオマーカー
現時点ではまだ免疫チェックポイント阻害剤は非常に高価な治療薬である
が、多くのがんに保険適応されつつある。しかし、がんの多くは高齢者に発
症するため、少子高齢社会である日本では医療費の圧迫が社会問題になって
いる。本治療法に対して無効である患者と有効である患者を見分けることが
できると、医療費の削減につながるだけでなく患者の治療の選択肢の拡大に
もつながるため、有効と無効を見分けるバイオマーカーの同定は急務であ
る。
前述した様にバイオマーカーの主な考え方として、腫瘍側の因子と免疫側
の因子に分けて考える必要がある。免疫側の因子としては、腫瘍局所におけ
るCD8+
T細胞の浸潤数が挙げられ、腫瘍側の因子としては、PD-L1の発現
や腫瘍の遺伝子変異の数(neo-antigen)など、いくつかの有望なバイオマー
カーが挙げられる。しかし、それぞれのバイオマーカーだけで完全に有効性
を予測することは難しいのが現状である。抗腫瘍免疫反応を規定する因子は
図1に示すように数多く存在し複雑である。例えば、一見免疫とは無関係に
思える腸内細菌や代謝産物等も免疫反応に大きく関わっていることが明らか
になってきた(7,8)
。抗腫瘍免疫反応を正確に予測するには、免疫と他の高次統
御機構を考慮し、分野横断的に研究を進めていく必要がある。現在、上述し
たように多くの併用治療が開発されつつある。併用治療は副作用が少なく、
有効性の最も高いものを残すべきであるが、バイオマーカーに関しては、排
除するのではなく融合すればするほど予想効率が上がると考えられる。知財
等の問題から企業間におけるバイオマーカーの融合は簡単ではないが、これ
らを融合し臨床現場へ届けることのできるシステム構築が必要である。
今後の展開
現在、併用治療を含めると3千以上ものPD-1阻害抗体を中心としたがん
免疫治療の臨床試験が行われている（ClinicalTrials.gov）。5-10年後には
様々な腫瘍に対して、最適の併用治療が選択され、治療効率はさらに上がる
ものと予想される。現在行われている併用治療の試みは、免疫反応制御の理
論に基づいたものから、ただ既存治療法と併用したものが混在した状態であ
る。本来ならば開発の順番は前者であるべきである。しかし後者も多く行わ
れているのが現状であり、その場合、臨床試験の実施と結果が先に実証され、
なぜPD-1抗体治療法の効果が増強されるかという理論は追って解明される
ことになるであろう。予想されることは、治療効果（増強効果）の高い治療法
が生き残り、治療効果の低い併用治療法は淘汰されていくことである。奏効
率の高い新規併用治療が登場すれば、それに対する効果予測（患者選別）バイ
オマーカーも必要になることが予想され、バイオマーカー研究も併用治療の
変化に応じてどんどん変遷していくものと考えられる。一方で、新規併用治
療 法 に よ りPD-1阻 害 抗 体 治 療 で み ら れ る 副 作 用、immune related-
adverse event (irAE)が増強される可能性もあり、今後のirAEに関連する研
究もますます重要になってくるであろう。併用治療による不測な副作用を心
配するより、PD-1阻害抗体単独で効く患者には単独治療の方がいいという
考え方も依然あり、やはりPD-1阻害治療単独の奏効者、無効者を見分けるバ
イオマーカーの開発は重要であるとも考えられる。現在様々な製薬企業が
競って免疫チェックポイント阻害薬を開発しており、がん腫適応範囲の拡
大、様々な併用治療の開発の現状を鑑みると、一定の落ち着きが見られるま
でまだまだ時間を要することになると思われる。
ヒト間葉系幹細胞 19
MSC NutriStem®
XFヒト間葉系幹細胞用ゼノフリー培地 20
ラット膵β細胞株iGL細胞 21
GIST-T1細胞 22
樹状前駆細胞 22
ヒト FLT3 Ligandタンパク質 23
P19~ 細胞関連
ヒトEGFRリコンビナントタンパク質 23
動物サンプルのホルモン測定受託サービス 24
P23~ 生理活性物質
CRISPR-Cas9ノックインキット HDRノックインクローン 注目 25
CRISPR/Cas9挿入欠損検出システム IndelCheck™ 26
TrueBlot®
免疫沈降／ウェスタンブロット用二次抗体 26
P25~ 遺伝子／タンパク質工学
Hycult Biotech社の消化器病関連研究用ツール 注目 13
マウス IFN-gamma 測定ELISAキット 14
TNF alphaモノクローナル抗体 14
P13~ 免疫・炎症
Screen Quest™ カルシウムアッセイキット（発光）
（GPCRスクリーニング） 15
SCREEN-WELL®
Stem Cell Library 15
P15 スクリーニング
FFPE組織サンプルの深層ショットガンプロテオーム解析 注目 16
クライオ電子顕微鏡と単粒子解析法によるタンパク質の
高分解能構造解析受託サービス 17
P16~ タンパク質・プロテオーム
CHEMILUM DE LYS®
HDAC アッセイ（化学発光） 18
P18 エピジェネティクス
ライフサイエンスの研究人 27
ヒト由来エクソソーム定量用CD9／CD63 ELISAキット 28
お知らせコーナー 29
［
特
集
］
が
ん
免
疫
免
疫
・
炎
症
ス
ク
リ
ー
ニ
ン
グ
タ
ン
パ
ク
質
・
プ
ロ
テ
オ
ー
ム
エ
ピ
ジ
ェ
ネ
テ
ィ
ク
ス
細
胞
関
連
遺
伝
子
／
タ
ン
パ
ク
質
工
学
生
理
活
性
物
質
1Cosmo Bio News No.160

7. ③ ラベルプローブ
② Amplifier
② PreAmplifier
ターゲット RNA
（1,000 base)
プローブ結合
（50 base)
① ZZ ペア
CXCL13
CD274 (PD-L1)
KRT19

8. ペプチド抗原 デキストラン
MHC PE DNAバーコード
5’ primer seq. Barcode ＆ UMI Capture / primer seq 3’

9. Conventional CD4 cells Introduced Tregs (iTregs)
FL2-H :: CD25 PE
CD25 PE, CD4 FITC subset
FL2-H :: CD25 PE
CD25 PE, CD4 FITC subset
1.55 94.1
FL1-H::CD4FITC
FL1-H::CD4FITC
CD4＋CD25-
87.7
CD4＋CD25-
3.67
104
103
102
101
100
104
103
102
101
100
100 101 102 103 104 100 101 102 103 104

11. K562
RaJi
Lu99
HCT116
0% 20% 40% 60% 80% 100%
NK : 各細胞株＝1：1
37℃, 2時間
平均＋標準誤差
各群 3回以上実施

13. Merged CSV CD45 PD-L1 Nucleus
Merged CSV CD45 PD-L1 Nucleus
45
31
45
66
97.4
(kDa)
α-EBNA-LP
α-β-actin
Ramos
LCL
P3HR1

14. 0.5×105
cells / well
1.0×105
cells / well
2.0×105
cells / well
day 0 day 1 day 2 day 3 day 4
200
100
0
PD-L1(pg/mL)
CD9
抗 CD9 抗体（固相）
抗 PD-L1 抗体
( 標識 )
エクソソーム
PD-L1
発色
基質
HRP 標識

16. Sample Diluent PT 1-ac
Four Parameter Logistic (4-PL) Curve Fit
R2
= 0.999
10
1
0.1
0.01
OpticalDensity
10 100 1,000 2,000
Mouse IFN-γ Concentration (pg/mL)

19. 粒子の切り出し＋2Dクラス分け 選別＋3Dクラス分け 構造最適化Cryo-EMでの撮影
A ）横から見た図 B ）上から見た図 C ）部分分解能（色分け）
5 nm 5 nm 5 nm
5 A 3 A
○ ○
分解能

20. PTC124
他社
Enzo社、HeLa extract
PTC124
0μM 0.01μM 0.1μM 1μM 10μM 100μM
1.1
1.0
0.9
0.8
0.7
0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0.0
RelativeChemiluminecenceValue
600,000
500,000
400,000
300,000
200,000
100,000
0
-100,000
0 5 10 15 20
Replicate

21. 記事 ID 検索 15287特集：マイコプラズマ対策
マイコプラズマは、細胞の代謝や増殖、タンパク質合成、サイトカイン分泌、さらには DNA や RNA にも深刻なダメージを与えるため、信頼性
の高い結果を得るためには、マイコプラズマのコンタミネーションを防ぐ必要があります。Biological Industries 社では、マイコプラズマ検出キッ
トをはじめ、除去、感染予防試薬を取り揃えています。 Biological Industries Ltd. メーカー略号：BLG
検出 除去 感染予防 試薬
マイコプラズマ

23. a b
a b
Glucose :
Folds :
Days :
4.2 6.5 5.4 6.5 7.6
1 2 3 4 7
4 × 105
cells
Culture medium Cell lysate
1 2 3 4 7
4 × 105
cells
Glucose :
Folds :
Days :
5
4
3
2
1
0
20
15
10
5
0
0.91 0.93 0.89 0.89 0.65
LuciferaseActivity(×109rlu/well)
a b
LuciferaseActivity(×109rlu/well)
－ ＋ － ＋ － ＋ － ＋ － ＋ － ＋ － ＋ － ＋ － ＋ － ＋

24. A
C
B

25. Log（EGFR 抗体［pg/mL］）
4
3
2
1
0
OD450nm
0 2 4 6 8

27. Primer Set（GCl）
ROSA26
CRISPR-Cas9
Negative
Control
5’ 3’ 5’ 3’ M bp
3,000
2,500
2,000
1,500
1,250
1,000
750
500
Control
Sample
Red fluorescene
(exposure time : 1s)
Green fluorescene
(exposure time : 1s)
Phase contrast
(exposure time : 1s)
Red fluorescene
(exposure time : 1s)
Green fluorescene
(exposure time : 1s)
Phase contrast
(exposure time : 1s)

28. IPビーズ IPビーズ
カスパーゼ 7
洗浄
細胞ライセート
を添加
SDS-PAGE
カスパーゼ 7
マウス TrueBlot®
カスパーゼ7
カスパーゼ 7
IgG軽鎖
（25kDa)
IgG重鎖
（50kDa) マウス抗
カスパーゼ７
抗体
IPビーズ
加熱（タンパク質の乖離）
カスパーゼ７
の結合
HRP
HRP
HRP
カスパーゼ７
IgG 重鎖
IgG 軽鎖
マウス抗カスパーゼ７抗体マウス抗カスパーゼ７抗体
TrueBlot® 通常の抗マウスHRP抗体
＋ ＋
通常の抗マウスHRP抗体
（還元 / 変性）
１ 2 3 4
567
8
マウス抗
カスパーゼ７抗体
ゲノム DNA 増幅
T7 エンドヌクレアーゼⅠ切断
細胞集団
wt wt MU
wt wt MU
TALEN/CRISPR 誘導性 NHEJ
TALEN/CRISPR
DSB
wt
挿入欠失変異
MU
ミスマッチ切断
Gel
wt MU
変性と
再アニーリング
電気泳動による確認

30. 0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0.8
0.9
1
0 10 20 30 40 50 60
OD450nm
MDA-MB-231 Exosome(ng protein/well)
標準タンパク質 5 pg を
1 ユニットとすると
MDA-MB-231 由来で CD9(＋)、CD63(＋) エクソソームの
タンパク質換算で 50 ng が 1 ユニットとなる
0.7
3
2
1
0
0 5
標準タンパク質 (pg/well)
R2
=0.9979
10 15 20 25
2.5
1.5
0.5
OD450nm
A B
1500
1000
2500
2000
500
0
medium HCT116 HT29 AsPC-1 PC3MDA-MB-231
エクソソーム(pg/mL)
（標準タンパク質相当量）
A B3
2.5
2
1.5
1
0.5
0
0 50 100
R2
=0.9982
150 200 250
OD450nm
標準タンパク質 (pg/mL)