El documento describe un medio de cultivo selectivo llamado Palcam Agar Base que permite el cultivo y aislamiento de Listeria spp. Contiene nutrientes para el desarrollo bacteriano y es diferencial para Listeria spp., la cual hidroliza la esculina formando un compuesto fenólico negro. El medio es selectivo debido a los antibióticos agregados que inhiben la flora acompañante pero permiten el crecimiento de Listeria spp.
1. PALCAM AGAR BASE.
Medio de cultivo, que con el agregado de antimicrobianos, permite el cultivo y aislamiento selectivo de Listeria spp.
Fundamento
Medio de cultivo selectivo y diferencial, que contiene los nutrientes necesarios para el adecuado desarrollo bacteriano.
Es diferencial para el desarrollo de Listeria spp, debido a que el producto de hidrólisis de la esculina en presencia de iones
Fe3+ forma un compuesto fenólico de color negro. Es selectivo para Listeria spp., por el agregado del Suplemento Selectivo
para Palcam Agar Base, debido a que contiene antibióticos que inhiben total o parcialmente el desarrollo de la flora
acompañante presente en la muestra y permiten la recuperación de Listeria spp.
Fórmula (en gramos por litro) Instrucciones
Columbia Agar Base 39.0 Suspender 33 g de polvo en 500 ml de agua
D-Glucosa 0.5 destilada. Dejar reposar 5 minutos. Mezclar y
D-Manitol 10.0 calentar con agitación frecuente. Llevar a ebullición
para disolución total. Distribuir en recipientes
Esculina 0.8 apropiados y esterilizar en autoclave a 121 ºC
Citrato de Hierro y amonio 0.5 durante 15 minutos.
Rojo fenol 0.08
Enfriar a 50 ºC y agregar asépticamente el contenido
Cloruro de litio 15.0 de un vial Suplemento Selectivo para PALCAM Agar
base, reconstituido según instrucciones.
Homogeneizar y distribuir en placas de Petri
estériles.
pH final: 7.2 ± 0.2
Siembra
Sembrar estriando la superficie del medio
Incubación
Durante 24-48 horas a 35-37 ºC, en atmósfera con 5-10% CO2.
Resultados
Microorganismo Crecimiento Características de las
colonias
Listeria monocytogenes ATCC 19114 Bueno Lisas verdosas, con halo negro
sobre fondo rojo
Listeria ivanovii ATCC 19119 Bueno Lisas verdosas, con halo negro
sobre fondo rojo
Escherichia coli ATCC 25922 Inhibido -
Enterococcus faecalis ATCC 29212 Inhibido -
Proteus mirabilis ATCC 43071 Inhibido -
Características del medio
Medio preparado: rojo.
Almacenamiento
Medio deshidratado: a 10-35 ºC.
Medio preparado: a 2-8 ºC.
Presentación
