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Pruebas de
identificación de
Enterobacterias
Curso de Microbiología – Area III
Facultad de Veterinaria – Udelar
Integrantes: Ignacio Fagundez
Federico García
Enterobacterias
Entendemos por enterobacterias a las que
pertenecen a clasificación de Gram (–)
Se encuentran frecuentemente en el tracto
intestinal de animales superiores.
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facultativas.
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profesionales), provocan invasión en el
cuerpo en los lugares normalmente estériles.
Casi todos los MO son oportunistas.
Clasificación de las mismas
• Gram -
• Anaerobias
• Móviles o Inmóviles
• Fermentan lactosa
• Presencia o ausencia de capsula
• No forman esporas
Providencia Citrobacter
Shigella Enterobacter
Salmonella Escherichia coli
Serratia Klebsiella
Yersinia Morganella
Proteus
1 – Cultivo Puro a partir de mi muestra
2 – Observación macroscópica y microscópica
3 – Pruebas Bioquímicas:
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Mac Conkey: Agar selectivo y diferencial para el
aislamiento de Enterobacterias.
Contiene:
sales biliares y cristal violeta inhibe Gram +
Lactosa + indicador rojo neutro Lactosa +
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SS (Salmonella-Shigella): Medio selectivo y
diferencial para aislamiento de Enterobacterias,
especialmente Shigella y Salmonella.
Selectividad:
Sales biliares y verde brillantes: Inhiben Gram (+)
Coliformes
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Diferencialidad:
Fermentación de Lactosa y formación de ácido
sulfhídrico a partir de tiosulfato de sodio
Pruebas Primarias:
•Oxidasa
•Catalasa
•Caldo Tioglicolato
•Movilidad
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Pruebas Secundarias:
•IMViC
•TSI
•Coagulasa
•Urea
IMViC
Indol:
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la presencia
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enzima
triptofanasa
Reactivo de
Kovacs
Rojo Metilo:
Detecta la
capacidad de
fermentar, y por
lo tanto la
formación de
Ácido.
Indicador de pH:
Rojo Metilo
(indica acidez)
Voges-Proskauer:
Detecta la
fermentación con
formación de
Acetoína.
VP (+) = Acetoína
VP (-) = Sin Acetoína
Citrato:
Determina la
utilización del citrato
como única fuente
de carbono y
energía.
Indicador de pH:
Azul de bromotimol
(detecta alcalinidad)
+-
TSI (Triple azúcar de hierro)
Es uno de los medios de cultivo más empleados
para la diferenciación de enterobacterias según:
•Fermenten o no glucosa.
•Fermenten o no lactosa
o sacarosa.
•Produzcan o no ácido
sulfhídrico.
•Produzcan o no gas.
Ejemplos de enterobacterias
Salmonella
Escherichia Coli
Shigella
• Bacilo Gram (-)
• Anaerobio facultativo
• Móvil por flagelos peritricos (que rodean su cuerpo)
• No forma esporas
• Capaz de fermentar la glucosa y la lactosa
• Se encuentra en tracto gastrointestinal tanto de
humanos como animales superiores.
E. COLI
E. COLI
SALMONELLA
• Bacilo Gram (-)
• Anaerobio facultativo
• Móvil por flagelos peritricos (que rodean su cuerpo)
• No desarrollan cápsula, ni esporas
• Capaz de fermentar la glucosa, pero NO lactosa
• No producen ureasa
SALMONELLA
SHIGELLA
• Gram (-)
• Anaerobio facultativo
• Inmóviles
• No desarrollan esporas
• Capaz de fermentar la glucosa,
pero NO lactosa
SHIGELLA
IMViC: +/-/-/-
TSI: +/-/-/-
PCR
(Reacción en cadena de la polimerasa)
• La PCR ofrece alta sensibilidad y alta especificidad.
• Logra un diagnostico rápido y preciso.
• Su objetivo principal es la multiplicación in Vitro de uno o varios
segmentos de ADN, por acción una enzima ADN polimerasa (ADN
dependiente termoestable).
Conclusión
• Podemos concluir que, a través de los medios de
cultivo, las técnicas bioquímicas y los estudios
moleculares llegamos a la identificación completa de
Escherichia Coli, Salmonella y Shigella.
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  • 1. Pruebas de identificación de Enterobacterias Curso de Microbiología – Area III Facultad de Veterinaria – Udelar Integrantes: Ignacio Fagundez Federico García
  • 2. Enterobacterias Entendemos por enterobacterias a las que pertenecen a clasificación de Gram (–) Se encuentran frecuentemente en el tracto intestinal de animales superiores. No forman esporas, y son anaerobias facultativas.
  • 3. Con excepción de los géneros Salmonella, Shigella y Yersinia (patógenas profesionales), provocan invasión en el cuerpo en los lugares normalmente estériles. Casi todos los MO son oportunistas.
  • 4. Clasificación de las mismas • Gram - • Anaerobias • Móviles o Inmóviles • Fermentan lactosa • Presencia o ausencia de capsula • No forman esporas Providencia Citrobacter Shigella Enterobacter Salmonella Escherichia coli Serratia Klebsiella Yersinia Morganella Proteus
  • 5. 1 – Cultivo Puro a partir de mi muestra 2 – Observación macroscópica y microscópica 3 – Pruebas Bioquímicas: Pruebas Primarias Pruebas Secundaria Pruebas de Identificación
  • 6.
  • 7. Mac Conkey: Agar selectivo y diferencial para el aislamiento de Enterobacterias. Contiene: sales biliares y cristal violeta inhibe Gram + Lactosa + indicador rojo neutro Lactosa + Latosa -
  • 8. SS (Salmonella-Shigella): Medio selectivo y diferencial para aislamiento de Enterobacterias, especialmente Shigella y Salmonella. Selectividad: Sales biliares y verde brillantes: Inhiben Gram (+) Coliformes Proteus spp Diferencialidad: Fermentación de Lactosa y formación de ácido sulfhídrico a partir de tiosulfato de sodio
  • 9. Pruebas Primarias: •Oxidasa •Catalasa •Caldo Tioglicolato •Movilidad •Presencia de esporas Pruebas Secundarias: •IMViC •TSI •Coagulasa •Urea
  • 10. IMViC Indol: Determina la presencia de la enzima triptofanasa Reactivo de Kovacs Rojo Metilo: Detecta la capacidad de fermentar, y por lo tanto la formación de Ácido. Indicador de pH: Rojo Metilo (indica acidez) Voges-Proskauer: Detecta la fermentación con formación de Acetoína. VP (+) = Acetoína VP (-) = Sin Acetoína Citrato: Determina la utilización del citrato como única fuente de carbono y energía. Indicador de pH: Azul de bromotimol (detecta alcalinidad) +-
  • 11. TSI (Triple azúcar de hierro) Es uno de los medios de cultivo más empleados para la diferenciación de enterobacterias según: •Fermenten o no glucosa. •Fermenten o no lactosa o sacarosa. •Produzcan o no ácido sulfhídrico. •Produzcan o no gas.
  • 13. • Bacilo Gram (-) • Anaerobio facultativo • Móvil por flagelos peritricos (que rodean su cuerpo) • No forma esporas • Capaz de fermentar la glucosa y la lactosa • Se encuentra en tracto gastrointestinal tanto de humanos como animales superiores. E. COLI
  • 15. SALMONELLA • Bacilo Gram (-) • Anaerobio facultativo • Móvil por flagelos peritricos (que rodean su cuerpo) • No desarrollan cápsula, ni esporas • Capaz de fermentar la glucosa, pero NO lactosa • No producen ureasa
  • 17. SHIGELLA • Gram (-) • Anaerobio facultativo • Inmóviles • No desarrollan esporas • Capaz de fermentar la glucosa, pero NO lactosa
  • 19. PCR (Reacción en cadena de la polimerasa) • La PCR ofrece alta sensibilidad y alta especificidad. • Logra un diagnostico rápido y preciso. • Su objetivo principal es la multiplicación in Vitro de uno o varios segmentos de ADN, por acción una enzima ADN polimerasa (ADN dependiente termoestable).
  • 20.
  • 21. Conclusión • Podemos concluir que, a través de los medios de cultivo, las técnicas bioquímicas y los estudios moleculares llegamos a la identificación completa de Escherichia Coli, Salmonella y Shigella.
  • 22. Bibliografía • Brock – B. de los MO. Medigan, M; Martinko, J; Parker, J. Décima edición. • Microbiología. Prescott, Harley, Klein. Quinta edición