1. Diagnóstico Bacteriológico
Crecimiento y cultivo
Técnicas de visualización

2. Diagnóstico bacteriológico
Identificación de los microorganismos en los
cultivos o en los frotis de la muestra y
complementando en forma indirecta con
la respuesta inmune.
El diagnóstico bacteriológico más
contundente es la identificación del
agente infeccioso en las muestras
obtenidas del tejido inflamado.

3. • Para poder aislar en cultivos puros e
identificar al microorganismo deberemos
considerar la sospecha clínica y la
incidencia de los agentes más
comúnmente encontrados en cada
aparato o tejido.

4. POSTULADOS DE KOCH
1- Los organismos responsables de una
enfermedad, deben encontrarse y ser
observados en los casos de la enfermedad
diagnosticada como tal en base a signos y
síntomas.

5. 2- Esos organismos deben ser aislados de esas
victimas en CULTIVO PURO.
3- El microorganismo del CULTIVO PURO, debe
inocularse en animales y reproducir en ellos
la enfermedad

6. 4- De estos animales deben recuperarse
los microorganismos y aislarlos
nuevamente en CULTIVO PURO.
Excepciones y actualizaciones

7. Las bacterias se reproducen por planos
de división binaria, es decir la bacteria va
creciendo hasta dividirse y formar dos
organismos iguales.

9. FASE LAG o de adaptación:
La bacteria se tiene que adaptar al nuevo medio al que
se ha integrado. No hay un crecimiento importante

10. FASE DE crecimiento exponencial
La bacteria acostumbrada al medio y con condiciones
óptimas, inicia su multiplicación, esto se refleja en un
alto crecimiento

11. FASE ESTACIONARIA
El sustrato se agota y los desechos se acumulan, muere
el mismo número de bacterias que nace, por esto el
crecimiento se mantiene estático.

12. Fase de declinación o muerte
El sustrato falta, no nacen nuevas bacterias solo
mueren, esto se refleja en la disminución del
crecimiento.

13. CULTIVO PURO
Crecimiento a partir de UNA CELULA
bacteriana.
La evidencia del Cultivo Puro es la
COLONIA AISLADA

14. COLONIA BACTERIANA
Acumulo de bacterias generadas a partir
de una bacteria.
UNA BACTERIA INDIVIDUO
MUCHAS BACTERIAS COLONIA
BACTERIANA

15. MEDIOS DE CULTIVO DE
MICROBIOLOGIA
MEDIO DE CULTIVO: Compuesto de
nutrientes para la multiplicación de los
microorganismos en el laboratorio.

18. CLASIFICACION
POR SU CONSISTENCIA:
• Caldos: Medios de cultivo líquidos que se
utilizan para almacenar bacterias.
- Obtener cultivos puros posteriormente.
- Se contaminan mas rápido

20. • Agar:
Medios de cultivo sólidos.
Contienen agar:
polisacáridos, originalmente derivados
de algas marinas.
Se obtienen colonias aisladas

24. POR SU FUNCION:
• Básicos o Base:
Son útiles para preparar otros medios.
Ejemplos: Agar Simple, Tripticasa Soya,
Agar-Agar.
• Enriquecidos:
Son aquellos a los que se les agregan sustancias
que ayudan a la multiplicación de las bacterias.
Ejemplo: Glicerol, Sangre, Vitaminas,
Huevo de aves.

25. Agar Sangre Agar Chocolate

26. • Selectivo:
Impiden el crecimiento de bacterias que
no están incluidas en el estudio.
Se les agregan sustancias inhibidoras.
Ej.: Salmonella-Shigella,
Lowenstein Jensen, Thayer Martin.

27. DIAGNÓSTICO
IMPORTANCIA DE LA TOMA DE LA MUESTRA
Técnicas de visualización
Técnicas biología molecular
Técnicas de cultivo

28. Lowenstein Jensen

29. • Diferenciales:
Permiten la multiplicación de las bacterias bajo
estudio, además ayudan a clasificarlas por
características bioquímicas, en base a indicadores
incorporados previamente al medio de cultivo.
Ejemplo: Agar Mac Conkey
Contiene:
*Lactosa = azúcar diferencial
*Sales biliares = inhibidor
*Rojo neutro = indicador

30. Agar Mac Conkey

31. CULTIVO DE VIRUS:
Por su condición de intracelulares
obligados, necesitan técnicas de cultivo
especiales.
Se necesitan células vivas para lograr la
replicación del virus.

33. TECNICAS DE
VISUALIZACION DE
MICROORGANISMOS

34. MICROSCOPIO
El microscopio, de micro- (pequeño) y
scopio (observar), es un instrumento
que permite observar objetos que son
demasiado pequeños para ser vistos
a simple vista.

35. Generalmente se usa luz visible, la cual
se encausa de manera que choque con
un objeto y con ayuda de lentes
compuestos magnificar la imagen de
manera que pueda verse directamente.

36. Los microorganismos son
transparentes por lo que es necesario
utilizar Técnicas de Tinción
sobre todo con las bacterias.

37. CARACTERISTICAS
• La membrana celular es permeable
• Los constituyentes químicos de la
bacteria deben de reaccionar con
los colorantes
• Los colorantes deben penetrar la
membrana celular
• La pared celular debe estar intacta

38. CLASIFICACION DE LAS
COLORACIONES
• SIMPLE: Utiliza solo un colorante.
-Ejemplo: Azul de Metileno, Verde de
Malaquita, Fucsina, etc.
• NEGATIVA: Para bacterias que no toma
los colorantes comunes.
Se utiliza Nigrosina o Tinta China.

39. • DIFERENCIALES:
Ayudan a diferenciar características de la
membrana celular.

40. DIFERENCIALES
I- COLORACION DE GRAM:
Diferencia a las bacterias en Gram positivas
y Gram negativas.
Se basa en la naturaleza proteica de la
pared celular específicamente:
Peptidoglicano, Ácidos Teicoicos
y Ribonucleato de Magnesio.

41. Esos compuestos se encuentran mas
concentrados en las bacterias Gram (+)
En las Gram (-) se encuentran poco o están
ausentes.

43. COMPONENTES
• Colorante base = Cristal violeta
• Mordiente = Lugol
• Decolorante = Alcohol Acetona
• Colorante de contraste = Safranina

45. Gram(+) Gram(-)

46. II- COLORACION DE ZIEHL –
NEELSEN:
Se basa en la concentración de lípidos de
membrana celular.
Bacterias Ácido-Resistentes

47. COMPONENTES
• Colorante base Fucsina Básica
• Mordiente Calor
• Decolorante Alcohol Acido
• Colorante de contraste Azul de
Metileno

49. ESPECIALES:
• Para organelas de las bacterias:
flagelos, cápsulas, esporas, núcleo,
etc.