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“What’s New in…
Allergologia….Molecolare”
Dr. Adriano Mari
Dr.ssa Danila Zennaro
adriano.mari@caam-allergy.com
danila.zennaro@caam-allergy.com
www.caam-allergy.com
Clinical section:
Claudia Alessandri, MD
Maria Livia Bernardi, PhD
Rosetta Ferrara, MD
Adriano Mari, MD
Danila Zennaro, MD
Lab section:
Marina Liso, BD
Paola Palazzo, PhD
Chiara Rafaiani, Tc
Bioinformatics section:
Mario Santoro, PhD
Sara Zuzzi, PhD
Assistant:
Silvia Monti
Centri Associati di Allergologia Professionale
Gabriele Carabella
Vincenzo Lavinio
Allergome – October 2015
www.allergome.org
Adriano Mari
Giorgio Perotti
Sara Nuti
Alessandro Brunetti
adriano.mari@allergome.org
Maria Antonietta Ciardiello, PhD
Ivana Giangrieco, PhD
Maurizio Tamburrini, PhD
Lisa Tuppo, PhD
Laura Camardella, BD
Vito Carratore, BD
Roberta Crescenzo, PhD
Rosanna D’Avino, BD
Istituto di Bioscienze e Biorisorse
Institute for Biosciences and Bioresources
Consiglio Nazionale delle Ricerche
Naples, Italy
IBBR - CNR - October 2015
Termini
Fonte Allergenica
Molecola Allergenica
Antigene legante le IgE
Transizione dagli Estratti alle Molecole
How is an Allergen named?
Bull.WHO 1986;64:767-74 - Bull.WHO 1994;72:797-806
http://www.allergen.org/
Birch (ENG)
Betula verrucosa
Betula verrucosa
Bet v 1
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Bet v 1.0101
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………
Candida
Candida albicans
Candida albicans
Cand a 1
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Snail (ENG)
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Helix aspersa
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How are Allergenic Sources and Allergens
named?
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Prunus dulcis
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Pru du 5.0101
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Skin Test (Array)
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1999
2001
2003
2005
2007
2009
2011
2013
2015
The Microarray as Diagnostic Tool in Allergy
The real story seen by the CAAM members
e50, e96, e167, e131 ABA FABER?
76b, 79b, 85, 89, 103 112
29, 51, 71a, 73a, 74a
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Which allergies can be tested using ISAC ?
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ratio
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ratio
Dog A (SPT) 33.4 ± 1.9 31.3 ± 1.9 1.07
169.8 ±
12.3
5,085
Dog B (SPT) 5.1 3 1.7 11.1 2,180
Dog C (SPT) 29.6 7.5 3.95 13.3 451
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Dog
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(RAST)
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Dog
G
(RAST)
275.3 334 0.82 1,272.60 4,623
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= Der f (IIa) = Der f (VIII)
Der f Der f Der f Der fDer p Der p Der p Der p
Sottostima della pollinosi da Cipresso
MariAetal.Allergy1997;52(3):355-6
Tuppo L. et al Clin Exp. Llergy 2013 ;43:128-40
Pru p 7
Schematic
Clinical Cases
  
Patient 1
AllergenicMolecules



    
AllergenicMolecules
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Allergic Reactions
to Plant-derived Foods
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Rhinitis
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2000 2001 2003 2004 20052006
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Cavatorta V et al. J Mass Spectrom 2006;44:535-42
Il Progetto GlobAll
1. GlobAll perché la malattia allergica ha una
maggior prevalenza nei nuclei familiari:
I figli, i genitori, i nonni possono essere affetti da uno
o più problemi di allergia, rappresentando questo un
impegno per tutta la famiglia. Noi lo interpretiamo e
cerchiamo di aiutarvi tutti.
Il Progetto GlobAll
2. GlobAll perché i pazienti possono avere un
problema di allergia a tutte le età e in alcuni casi per
tutta la vita:
Da prima della nascita a 100 anni di età ci prendiamo
cura di voi.
Il Progetto GlobAll
3. GlobAll perché ogni paziente può essere affetto da
una sensibilizzazione allergica a qualsiasi allergene,
alimenti, pollini, acari, animali, farmaci, veleni, latice:
La crescita delle nostre conoscenza su tutti gli
allergeni è il nostro primario impegno di ricerca, per
darvi il miglior approccio diagnostico usando gli
allergeni molecolari e le microtecnologie.
Il Progetto GlobAll
4. GlobAll perché uno o più sintomi correlati
all’allergia possono comparire nello stesso paziente,
interessando uno o più organi, con asma, rinite,
orticaria, anafilassi, eczema:
Ci prendiamo cura della vostra allergia come
patologia del sistema immunitario che interessa
contemporaneamente diversi organi. Questo è
l’unico approccio razionale che vi aiuta.
Il Progetto GlobAll
5. GlobAll perché una malattia multi-organo richiede
un approccio terapeutico che utilizza tutte le risorse:
Utilizziamo tutti gli strumenti terapeutici più avanzati
per controllare i vostri sintomi e curare le vostre
allergie. I “vaccini” per l’allergia hanno questa
finalità primaria.
Il Progetto GlobAll
6. GlobAll perché l’esposizione agli allergeni cambia
con il cambiare degli ambienti indoor, nelle diverse
stagioni, nei diversi climi, con le diverse abitudini
alimentari:
In qualunque momento e situazione dovessero
comparire sintomi da allergia, noi vi aiutiamo
a capire come prevenirli e a controllarne
l’esposizione.
Il Progetto GlobAll
7. GlobAll perché i pazienti allergici viaggiano nel
mondo:
La geografia dell’allergia è molto importante. Noi vi
aiutiamo a capire le vostre allergie globalmente.
“What’s New in Allergologia”
Dr. Adriano Mari
Dr.ssa Danila Zennaro
adriano.mari@caam-allergy.com
danila.zennaro@caam-allergy.com

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Mari A. - Zennaro D. Allergologia nel III° Millennio: cosa è cambiato e cosa bisogna sapere. ASMaD 2015

  • 1. “What’s New in… Allergologia….Molecolare” Dr. Adriano Mari Dr.ssa Danila Zennaro adriano.mari@caam-allergy.com danila.zennaro@caam-allergy.com
  • 2. www.caam-allergy.com Clinical section: Claudia Alessandri, MD Maria Livia Bernardi, PhD Rosetta Ferrara, MD Adriano Mari, MD Danila Zennaro, MD Lab section: Marina Liso, BD Paola Palazzo, PhD Chiara Rafaiani, Tc Bioinformatics section: Mario Santoro, PhD Sara Zuzzi, PhD Assistant: Silvia Monti Centri Associati di Allergologia Professionale
  • 3. Gabriele Carabella Vincenzo Lavinio Allergome – October 2015 www.allergome.org Adriano Mari Giorgio Perotti Sara Nuti Alessandro Brunetti adriano.mari@allergome.org
  • 4. Maria Antonietta Ciardiello, PhD Ivana Giangrieco, PhD Maurizio Tamburrini, PhD Lisa Tuppo, PhD Laura Camardella, BD Vito Carratore, BD Roberta Crescenzo, PhD Rosanna D’Avino, BD Istituto di Bioscienze e Biorisorse Institute for Biosciences and Bioresources Consiglio Nazionale delle Ricerche Naples, Italy IBBR - CNR - October 2015
  • 7. How is an Allergen named? Bull.WHO 1986;64:767-74 - Bull.WHO 1994;72:797-806 http://www.allergen.org/ Birch (ENG) Betula verrucosa Betula verrucosa Bet v 1 Bet v 2 Bet v 3 ……… Bet v 1.0101 Bet v 1.0102 Bet v 1.0103 ……… Candida Candida albicans Candida albicans Cand a 1 Cand a 3 Snail (ENG) Helix aspersa Helix aspersa Hel as 1
  • 8. How are Allergenic Sources and Allergens named? Almond Prunus dulcis Prunus dulcis Pru du [Leaf] Pru du [Pollen] Pru du [Pulp] Pru du [Seed] Almond Prunus dulcis Prunus dulcis Pru du 3 Pru du 3.0101 Pru du 4 Pru du 4.0101 Pru du 4.0102 Pru du 5 Pru du 5.0101 Pru du 6 Pru du 6.0101 Almond Prunus dulcis Prunus dulcis Pru du 1 Pru du 2 Pru du 2S Albumin Pru du Conglutin
  • 9. Transizione dai Test Singleplex ai Multiplex
  • 11. Array (Matrice) o Microarray http://it.wikipedia.org/wiki/Array http://it.wikipedia.org/wiki/Microarray
  • 14. 1999 2001 2003 2005 2007 2009 2011 2013 2015 The Microarray as Diagnostic Tool in Allergy The real story seen by the CAAM members e50, e96, e167, e131 ABA FABER? 76b, 79b, 85, 89, 103 112 29, 51, 71a, 73a, 74a
  • 15. Courtesy of VBC-Genomics, Vienna, Austria Slide Allergen IgE (serum) Anti-IgE Fluorescence
  • 16. 4 Hours max 80 samples x 112 molecules = 8,960 results per day Bet v 1-like Serum Albumin LTP ISAC 112 IgE Testing
  • 17. • 112 Allergenic Molecules • 51 Organisms • 28 Allergenic Groups or “Markers” Which allergies can be tested using ISAC ?
  • 18. • Tree pollen • Weed pollen • Mites • Animal Tissues • Foods • Moulds • Insects • Latex Which allergies can be tested using ISAC ?
  • 19. Da che età si può utilizzare il test? Da 0 a 100 anni Intrauterine sensitization of allergen- specific IgE analyzed by a highly sensitive new allergen microarray  Kamemura N. The Journal of Allergy and Clinical Immunology - July 2012
  • 20. In quali patologie può essere utile prescrivere il test? (1) Allergie Eczema and HyperIgE
  • 21. In quali patologie può essere utile prescrivere il test? (2) Job’s Syndrome - HIES IPEX Immune-Dysregulation Polyendocrinophaty Enteropaty X-linked Sézary Syndrome
  • 22. In quali patologie può essere utile prescrivere il test? (3) Oncologic Diseases Autoimmune Diseases: Bullous pemphigoides
  • 23. In che modo sono aumentate le nostre conoscenze con l’allergologia molecolare e con questo test?
  • 24. Organism Allergen extract* Der p 1 (ng/ml) Der p 2 (ng/ml) Der p 1 / Der p 2 ratio Can f 1 (µg/ml) Can f 1 / Der p 1 ratio Dog A (SPT) 33.4 ± 1.9 31.3 ± 1.9 1.07 169.8 ± 12.3 5,085 Dog B (SPT) 5.1 3 1.7 11.1 2,180 Dog C (SPT) 29.6 7.5 3.95 13.3 451 Dog D (SPT) 0.4 <0.56 >0.16 3.8 9,440 Dog E (SPT) 1.9 <1.1 >0.76 59.4 31,275 Dog F (RAST) 101.1 72.3 1.4 535 5,292 Dog G (RAST) 275.3 334 0.82 1,272.60 4,623 Mite M (SPT) 8,751 1,670 5.2 <0.043 <0.00021
  • 25. Patient: IP35 Patient: IG67 = Der f (IIa) = Der f (VIII) Der f Der f Der f Der fDer p Der p Der p Der p
  • 26. Sottostima della pollinosi da Cipresso MariAetal.Allergy1997;52(3):355-6
  • 27. Tuppo L. et al Clin Exp. Llergy 2013 ;43:128-40 Pru p 7
  • 29.    Patient 1 AllergenicMolecules   
  • 30.      AllergenicMolecules Patient 2
  • 31. Allergic Reactions to Plant-derived Foods 1998 Rhinitis Mite & Grasses 2000 2001 2003 2004 20052006 1998 2000 2005 Visits Pru p 3+ Pru p 3+ Pru p 3+ Pru p 3+ Peeled Peach Peeled Peach Peeled Peach DR – M 7yo 2003 Urticaria Whole Peach Serum CAAM, Data on file
  • 32. LTP - MALDI Mass Spectrometry Imaging Cavatorta V et al. J Mass Spectrom 2006;44:535-42
  • 33. Il Progetto GlobAll 1. GlobAll perché la malattia allergica ha una maggior prevalenza nei nuclei familiari: I figli, i genitori, i nonni possono essere affetti da uno o più problemi di allergia, rappresentando questo un impegno per tutta la famiglia. Noi lo interpretiamo e cerchiamo di aiutarvi tutti.
  • 34. Il Progetto GlobAll 2. GlobAll perché i pazienti possono avere un problema di allergia a tutte le età e in alcuni casi per tutta la vita: Da prima della nascita a 100 anni di età ci prendiamo cura di voi.
  • 35. Il Progetto GlobAll 3. GlobAll perché ogni paziente può essere affetto da una sensibilizzazione allergica a qualsiasi allergene, alimenti, pollini, acari, animali, farmaci, veleni, latice: La crescita delle nostre conoscenza su tutti gli allergeni è il nostro primario impegno di ricerca, per darvi il miglior approccio diagnostico usando gli allergeni molecolari e le microtecnologie.
  • 36. Il Progetto GlobAll 4. GlobAll perché uno o più sintomi correlati all’allergia possono comparire nello stesso paziente, interessando uno o più organi, con asma, rinite, orticaria, anafilassi, eczema: Ci prendiamo cura della vostra allergia come patologia del sistema immunitario che interessa contemporaneamente diversi organi. Questo è l’unico approccio razionale che vi aiuta.
  • 37. Il Progetto GlobAll 5. GlobAll perché una malattia multi-organo richiede un approccio terapeutico che utilizza tutte le risorse: Utilizziamo tutti gli strumenti terapeutici più avanzati per controllare i vostri sintomi e curare le vostre allergie. I “vaccini” per l’allergia hanno questa finalità primaria.
  • 38. Il Progetto GlobAll 6. GlobAll perché l’esposizione agli allergeni cambia con il cambiare degli ambienti indoor, nelle diverse stagioni, nei diversi climi, con le diverse abitudini alimentari: In qualunque momento e situazione dovessero comparire sintomi da allergia, noi vi aiutiamo a capire come prevenirli e a controllarne l’esposizione.
  • 39. Il Progetto GlobAll 7. GlobAll perché i pazienti allergici viaggiano nel mondo: La geografia dell’allergia è molto importante. Noi vi aiutiamo a capire le vostre allergie globalmente.
  • 40. “What’s New in Allergologia” Dr. Adriano Mari Dr.ssa Danila Zennaro adriano.mari@caam-allergy.com danila.zennaro@caam-allergy.com

Notes de l'éditeur

  1. In questa slide (vedendo l’animazione) c’è il riferimento alla contaminazione dell’estratto di epitelio di cane? Ne parlerei io dopo R: no ci sono due animali. Al primo non puoi mettere il collare.
  2. Forse troppo specifica ma la lascio e decidi tu se ti vuoi addentrare sulla spiegazione
  3. Oltre l’enfasi sulla collaborazione avuta a suo tempo dai MdB è importante dire che questa fase è superata se oltre seguire l’anamnesi il test “suggerisce” altre domande al paziente, es. Cup a 1 marker di ..... Starnutisce a marzo? Nell’immagine che compare puoi indicare prima gli allergeni delle graminacee che sono in basso e che motivano la sintomatologia primaverile con cui si presentava il paziente ma necessariamente va chiesto del cipresso con Cup a 1 e Cry j 1 positivi (sono i due verdi nella terza riga) Questa slide era per te no???
  4. Qui accennerei all’identificazione di nuovi allergeni senza andare troppo nello specifico perchè non abbiamo mai parlato nemmeno di LTP e quindi Pru p 3 che ne pensi? R: Ok ma devi però fare accenno al fatto che la clinica guida sempre la diagnosi, in presenza di 112 negativi ci siamo posti la domanda bla bla Pru p 7
  5. Qui dì che il plurale è fuori luogo perché ne presenti uno come testimone di molti e variegati, ma che lo stesso schema può essere applicato anche a tutti gli altri grandi gruppi (es. pollini-alimenti vegetali, mammiferi come inalanti-alimenti). Ricorda sempre di richiamare la completezza e la personalizzazione della diagnosi.
  6. Richiama le fonti allergeniche (acari etc) in alto e gli spot colorati sono molecole diverse o uguali a seconda del coloreRichiama I nomei delle molecole anche se non sono scritti Questa slide prima di iniziare me la ricordi perfavore?O almeno io ti dico come la esporrei …
  7. Richiama ovviamente la tropomiosina e il fatto che la sua positività rende positivi tutti gli estratti che la contengono. I box che compaiono servono ad indicare che le molecole omologhe permettono la scelta semplificata dei vaccini. L’ultimo che ho spostato sui gamberi è una estremizzazione dove con l’estratto di gamberi si potrebbe fare ITS anche per gli acari…..ma questa condizione oltre essere rara è rischiosa perchè si tratta di un allergene alimentare.