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Universidad Nacional de Loja
BIOTECNOLOGÍAS REPRODUCTIVAS
ECOGRAFÍA Y EVALUACIÓN SEMINAL
2020
LEONARDO MARTINEZ
NOVENO A
INTRODUCCIÓN
• Es una técnica en la que se emplean ondas de sonido de alta frecuencia para
producir imágenes de los tejidos blandos y órganos internos de bovinos y equinos
desde los 80s y ha tenido grandes avances tecnológicos para su mejor aplicación.
UTILIDADES
Estado de gestación
precoz
El sexado de las
crías
la evaluación de las
enfermedades del
sistema reproductor
de las vacas
También llamada
ultrasonografía, es una
técnica de diagnóstico
por imágenes, basada en
la emisión de
ultrasonidos y la
recepción de ecos que se
producen por reflexión.
Órganos examinados por ultrasonografía
• En el caso del útero, se puede analizar los cambios morfológicos durante el ciclo
estral de la vaca. Es fundamental para el diagnóstico de diferentes enfermedades
del aparato reproductor, como la metritis y salpingitis
Se pueden diagnosticar los quistes ováricos que
provocan que la vaca no cicle normalmente.
EQUIPOS DE ECOGRAFÍA
• Los equipos ultrasonográficos utilizados en bovinos son conocidos como scanners
de modo B y tiempo completo con transductores lineales o sectoriales de 3,5 , 5,0
o 7,5 MHz.
Modo B indica la modalidad de brillo en el que la imagen es un
corte bidimensional del órgano que se analiza.
SECTORIALES
Los ecógrafos sectoriales trabajan con transductor sectorial y producen una imágen
tipo pirámide.
LINEALES
• Los lineales funcionan con transductores lineales conformando imágenes de tipo
rectangular. Los transductores lineales son usados más frecuentemente en
reproducción bovina, ya que el recto tiene una amplia superficie plana.
CONVEXOS
En la actualidad los ecógrafos emplean transductores convexos que son de frecuente
aplicación en la tecnología de aspiración folicular y obtención de ovocitos para la
fertilización in vitro.
ECOGENICIDAD DE LOS TEJIDOS
Las estructuras corporales están formadas por
distintos tejidos, lo que da lugar a múltiples
interfases que originan, en imagen digital, la
escala de grises
HIPERCOGÉNICO
• Aquellas estructuras que en sus diferentes interfases reflejan más los ultrasonidos
se denominan hiperecoicas (brillantes, su espectro va del blanco al gris claro), ej.,
tendones; se produce una gran reflexión de US (escasa o nula transmisión).
ISOECOGÉNICO
• La imagen es más o menos
blanquecina, según la ecogenicidad de
un órgano o de la región estudia
HIPOECOGÉNICO
• Aquellas estructuras que propagan
menos y producen una menor
reflectividad se conocen como
hipoecoicas (espectro gris oscuro a
negro), ej., músculo.
ANECOGÉNICO
• Ausencia de ecos por no producirse reflexión de US (transmisión completa). Es
aquella estructura que no refleja el haz ultrasónico y produce una imagen negra,
como es el caso de algunos líquidos orgánicos, ej., contenido de los quistes
sinoviales.
MEJOR MOMENTO PARA EXAMEN
ECOGRAFICO
• BOVINOS: (28 a 30 en hembras bovinas)
• EQUINOS: (Yeguas alrededor del día 12 a 15)
• PORCINOS: (A partir del día 18 post-servicio)
ECOGRAFÍA EN OVINOS Y CAPRINOS
• Las ecografías deben realizarse a partir de los
26 días de gestación, ya que en este momento
tiene una certeza muy alta(mayor o igual al
95%;) antes de este periodo los resultados
pueden ser inciertos. a los 40 dias de gestación
se puede ver la presencia de cotiledones
placentarios, agilizando mucho el trabajo,
debida a la rápida confirmación de preñez.
EVALUACIÓN SEMINAL
EXAMÉN FISICO DEL TORO
• El examen físico incluye la observación del toro en movimiento,
la conformación de las patas y la condición corporal general.
Observación de los ojos,
dientes y fosas nasales. Una
vez que el toro reúne las
características fenotípicas
buscadas en cuanto a su
conformación, estructura y
desarrollo.
GENITALES EXTERNOS
RECOLECCIÓN DEL SEMEN
La recolección de semen en el toro puede hacerse por medio de una vagina artificial
o por medio de la electroeyaculación. La elección del método va acorde con las
características del animal del que se va a colectar
PROCESO DE HIGIENIZACIÓN PRECOLECTA
Se realiza el alistamiento o la preparación
del toro para ser colectado. El toro que va
ser destinado para el proceso de colecta
debe pasar por una serie de procesos o
prácticas que permiten obtener al final del
proceso, una muestra de semen colectado
con unas excelentes cualidades higiénicas
HIGIENIZACIÓN
• El proceso inicia con un lavado de
limpieza de la parte ventro abdominal de
manera descendente, utilizando un bajón
neutro y abundante agua, realizando una
serie de masajes para remover cualquier
tipo de suciedad presente y posteriormente
realizar el secado con papel toalla.
CONDUCTA SEXUAL DEL TORO
El comportamiento sexual en el toro
incluye la detección, cortejo y
servicio de hembras en estro. La
libido, o impulso sexual, ha sido
definida como la "disposición y
entusiasmo" de un toro de tratar de
montar y servir a una hembra,
mientras que la habilidad de
apareamiento describe su habilidad
física para completar el servicio.
COLECTA CON VAGINA ARTIFICIAL
Consiste en un tubo cilíndrico de plástico rígido
y resistente, de siete centímetros de diámetro y
35–40 centímetros de largo, recubierto
internamente por una camisa de goma que se
dobla sobre los extremos del cilindro formando
una cámara que se llena con agua caliente (45–
46 º C) y aire, con el fin de proveer el estímulo
adecuado de temperatura y presión, lográndose
así la eyaculación.
PROCEDIMIENTO
Se apoya con el método más efectivo para estimular al toro, la monta falsa, que
consiste en permitir al semental montar sobre el señuelo y desviar el pene tomando
con la palma de la mano la piel del prepucio sin ofrecerle la vagina.
COLECTA CON ELECTROEYACULADOR
En este método se hace uso de un electroeyaculador que no es más que un electrodo
conectado a una batería que genera estimulaciones rítmicas provocadas por
descargas no mayores a 20 voltios
PROCEDIMIENTO
Primero se asegura que las tres líneas metálicas o
electrodos ubicados ventralmente, estén limpios y
libres de corrosión. Posteriormente se retira el exceso
de heces del recto, se levanta la cola del toro hasta
hacerla horizontal, se lubrica el electrodo y se
introduce en el recto
Cuando se utiliza la electroeyaculación se inician los estímulos
a mínima intensidad y rítmicamente se incrementa, de acuerdo
con la reacción del animal, gradocada estímulo debe durar
menos de un segundo y se deben aplicar entre cinco y 10
estímulos por cada de intensidad.
CALIDAD SEMINAL
• CARACTERISTICAS MACROSCÓPICAS
Volumen: El volumen del eyaculado se
expresa en mililitros (mL), y su lectura se
hace por medio de un tubo colector
graduado. Normalmente dicho valor, para
el eyaculado de toros, es de
aproximadamente 2 mL en animales
jóvenes y en animales adultos ≥ a 4 mL,
llegando hasta 12 mL
Color:
Esta característica se evalúa por medio de la visualización en el laboratorio. El color
del eyaculado depende del contenido de riboflavina, siendo normalmente desde
blanquecino marfil hasta amarillento.
Densidad:
Para la evaluación de la densidad macroscópica se han establecido criterios basados
en intervalos de concentración espermática, dependiendo de la opacidad de las
muestras, lo que indica mayor o menor concentración espermática.
• Azoospérmico: ausencia de espermatozoides en el
eyaculado.
• Oligozoospérmico: ≤ 200 millones espermatozoides/mL.
• Ralo: 200–500 millones espermatozoides/mL.
• Semi-denso: 500–800 millones espermatozoides/mL.
• Denso: 800–1.500 millones espermatozoides/mL.
• Densísimo: ≥ 1.500 millones espermatozoides/mL.
Ph
El pH del semen varía normalmente en un rango
muy estrecho (7,2 - 8,0), pocos son los trastornos
capaces de alterarlo. Se ha sugerido que un pH
elevado (> 8) puede considerarse un signo de
infección seminal si se asocia a otros síntomas y
signos de sospecha, mientras que un pH
disminuido (< 7,2)
Olor:
Las muestras de semen
recolectadas
higiénicamente, de toros
sanos y fértiles, tienen un
débil olor sui géneris.
• CARACTERISTICAS MICROSCÓPICAS
CONCENTRACIÓN:
La determinación de la concentración
espermática se lleva a cabo mediante
métodos semejantes al recuento de glóbulos
rojos realizado en hematología. El conteo
directo de células, a través del hemocitómetro
o cámara de Neubauer fue diseñado para
contar eritrocitos.
Motilidad masal:
El movimiento en masa va a depender de
tres factores: concentración, porcentaje de
células con movimiento progresivo y
velocidad de movimiento de los
espermatozoides (Muiño, 2007). Para
evaluar se usa una escala de 1 a 5,
evaluando como 1 al semen que no
presenta ondas y 5 cuando las ondas se
mueven rápidamente formando remolinos.
La motilidad individual:
de una muestra de semen se expresa como el
porcentaje de células móviles bajo un campo
microscópico. Debido a que el semen bovino
es muy concentrado, no se puede realizar
este análisis con semen fresco, por lo tanto,
se lo debe diluir, colocar una gota sobre un
portaobjeto temperado a 37ºC y observado al
microscopio en una lente de 100x.
Morfología:
los espermatozoides deben ser morfológicamente
normales. Cualquier anomalía que afecte a algún
atributo del espermatozoide puede dificultar su
migración en el tracto genital de la hembra,
impidiendo la unión con el ovocito (Muiño,
2007). En general, un buen reproductor no deberá
tener más del 30% de células anormales en un
eyaculado
Viabilidad
La vitalidad de la célula espermática, generalmente se determina valorando su
integridad a través de la capacidad de la membrana plasmática para excluir ciertas
sustancias extracelulares (Betancourt, 2013).
Estado de acrosoma
El acrosoma juega un papel fundamental en la fecundación y esta importancia hace
que convenga realizar una valoración específica del mismo.
•
CRIOCEPTORES
• Son los que tienen la finalidad de proteger a los espermatozoides durante la fase
de cristalización debido a las bajas temperaturas, el glicerol es la sustancia más
empleada debido a los resultados obtenidos.
ENVASADO DEL SEMEN
La inseminación artificial (IA) es la
biotecnología reproductiva más empleada
en las empresas ganaderas; su
consolidación se ha logrado a partir del uso
de semen congelado empacado en pajillas
de 0.25 y 0.5 ml, el cual es aplicado en el
cuerpo del útero mediante una técnica
instrumental
Dilutor Tris – Yema de huevo
Los diluyentes más comúnmente utilizados
en este protocolo tienen como
amortiguadores el Tris (hidroximetil-
aminometano) o el Citrato de sodio

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  • 1. Universidad Nacional de Loja BIOTECNOLOGÍAS REPRODUCTIVAS ECOGRAFÍA Y EVALUACIÓN SEMINAL 2020 LEONARDO MARTINEZ NOVENO A
  • 2. INTRODUCCIÓN • Es una técnica en la que se emplean ondas de sonido de alta frecuencia para producir imágenes de los tejidos blandos y órganos internos de bovinos y equinos desde los 80s y ha tenido grandes avances tecnológicos para su mejor aplicación.
  • 3. UTILIDADES Estado de gestación precoz El sexado de las crías la evaluación de las enfermedades del sistema reproductor de las vacas También llamada ultrasonografía, es una técnica de diagnóstico por imágenes, basada en la emisión de ultrasonidos y la recepción de ecos que se producen por reflexión.
  • 4. Órganos examinados por ultrasonografía • En el caso del útero, se puede analizar los cambios morfológicos durante el ciclo estral de la vaca. Es fundamental para el diagnóstico de diferentes enfermedades del aparato reproductor, como la metritis y salpingitis Se pueden diagnosticar los quistes ováricos que provocan que la vaca no cicle normalmente.
  • 5. EQUIPOS DE ECOGRAFÍA • Los equipos ultrasonográficos utilizados en bovinos son conocidos como scanners de modo B y tiempo completo con transductores lineales o sectoriales de 3,5 , 5,0 o 7,5 MHz. Modo B indica la modalidad de brillo en el que la imagen es un corte bidimensional del órgano que se analiza.
  • 6. SECTORIALES Los ecógrafos sectoriales trabajan con transductor sectorial y producen una imágen tipo pirámide.
  • 7. LINEALES • Los lineales funcionan con transductores lineales conformando imágenes de tipo rectangular. Los transductores lineales son usados más frecuentemente en reproducción bovina, ya que el recto tiene una amplia superficie plana.
  • 8. CONVEXOS En la actualidad los ecógrafos emplean transductores convexos que son de frecuente aplicación en la tecnología de aspiración folicular y obtención de ovocitos para la fertilización in vitro.
  • 9. ECOGENICIDAD DE LOS TEJIDOS Las estructuras corporales están formadas por distintos tejidos, lo que da lugar a múltiples interfases que originan, en imagen digital, la escala de grises
  • 10. HIPERCOGÉNICO • Aquellas estructuras que en sus diferentes interfases reflejan más los ultrasonidos se denominan hiperecoicas (brillantes, su espectro va del blanco al gris claro), ej., tendones; se produce una gran reflexión de US (escasa o nula transmisión).
  • 11. ISOECOGÉNICO • La imagen es más o menos blanquecina, según la ecogenicidad de un órgano o de la región estudia
  • 12. HIPOECOGÉNICO • Aquellas estructuras que propagan menos y producen una menor reflectividad se conocen como hipoecoicas (espectro gris oscuro a negro), ej., músculo.
  • 13. ANECOGÉNICO • Ausencia de ecos por no producirse reflexión de US (transmisión completa). Es aquella estructura que no refleja el haz ultrasónico y produce una imagen negra, como es el caso de algunos líquidos orgánicos, ej., contenido de los quistes sinoviales.
  • 14. MEJOR MOMENTO PARA EXAMEN ECOGRAFICO • BOVINOS: (28 a 30 en hembras bovinas) • EQUINOS: (Yeguas alrededor del día 12 a 15) • PORCINOS: (A partir del día 18 post-servicio)
  • 15. ECOGRAFÍA EN OVINOS Y CAPRINOS • Las ecografías deben realizarse a partir de los 26 días de gestación, ya que en este momento tiene una certeza muy alta(mayor o igual al 95%;) antes de este periodo los resultados pueden ser inciertos. a los 40 dias de gestación se puede ver la presencia de cotiledones placentarios, agilizando mucho el trabajo, debida a la rápida confirmación de preñez.
  • 17. EXAMÉN FISICO DEL TORO • El examen físico incluye la observación del toro en movimiento, la conformación de las patas y la condición corporal general. Observación de los ojos, dientes y fosas nasales. Una vez que el toro reúne las características fenotípicas buscadas en cuanto a su conformación, estructura y desarrollo.
  • 19. RECOLECCIÓN DEL SEMEN La recolección de semen en el toro puede hacerse por medio de una vagina artificial o por medio de la electroeyaculación. La elección del método va acorde con las características del animal del que se va a colectar
  • 20. PROCESO DE HIGIENIZACIÓN PRECOLECTA Se realiza el alistamiento o la preparación del toro para ser colectado. El toro que va ser destinado para el proceso de colecta debe pasar por una serie de procesos o prácticas que permiten obtener al final del proceso, una muestra de semen colectado con unas excelentes cualidades higiénicas
  • 21. HIGIENIZACIÓN • El proceso inicia con un lavado de limpieza de la parte ventro abdominal de manera descendente, utilizando un bajón neutro y abundante agua, realizando una serie de masajes para remover cualquier tipo de suciedad presente y posteriormente realizar el secado con papel toalla.
  • 22. CONDUCTA SEXUAL DEL TORO El comportamiento sexual en el toro incluye la detección, cortejo y servicio de hembras en estro. La libido, o impulso sexual, ha sido definida como la "disposición y entusiasmo" de un toro de tratar de montar y servir a una hembra, mientras que la habilidad de apareamiento describe su habilidad física para completar el servicio.
  • 23. COLECTA CON VAGINA ARTIFICIAL Consiste en un tubo cilíndrico de plástico rígido y resistente, de siete centímetros de diámetro y 35–40 centímetros de largo, recubierto internamente por una camisa de goma que se dobla sobre los extremos del cilindro formando una cámara que se llena con agua caliente (45– 46 º C) y aire, con el fin de proveer el estímulo adecuado de temperatura y presión, lográndose así la eyaculación.
  • 24. PROCEDIMIENTO Se apoya con el método más efectivo para estimular al toro, la monta falsa, que consiste en permitir al semental montar sobre el señuelo y desviar el pene tomando con la palma de la mano la piel del prepucio sin ofrecerle la vagina.
  • 25. COLECTA CON ELECTROEYACULADOR En este método se hace uso de un electroeyaculador que no es más que un electrodo conectado a una batería que genera estimulaciones rítmicas provocadas por descargas no mayores a 20 voltios
  • 26. PROCEDIMIENTO Primero se asegura que las tres líneas metálicas o electrodos ubicados ventralmente, estén limpios y libres de corrosión. Posteriormente se retira el exceso de heces del recto, se levanta la cola del toro hasta hacerla horizontal, se lubrica el electrodo y se introduce en el recto
  • 27. Cuando se utiliza la electroeyaculación se inician los estímulos a mínima intensidad y rítmicamente se incrementa, de acuerdo con la reacción del animal, gradocada estímulo debe durar menos de un segundo y se deben aplicar entre cinco y 10 estímulos por cada de intensidad.
  • 28. CALIDAD SEMINAL • CARACTERISTICAS MACROSCÓPICAS Volumen: El volumen del eyaculado se expresa en mililitros (mL), y su lectura se hace por medio de un tubo colector graduado. Normalmente dicho valor, para el eyaculado de toros, es de aproximadamente 2 mL en animales jóvenes y en animales adultos ≥ a 4 mL, llegando hasta 12 mL
  • 29. Color: Esta característica se evalúa por medio de la visualización en el laboratorio. El color del eyaculado depende del contenido de riboflavina, siendo normalmente desde blanquecino marfil hasta amarillento. Densidad: Para la evaluación de la densidad macroscópica se han establecido criterios basados en intervalos de concentración espermática, dependiendo de la opacidad de las muestras, lo que indica mayor o menor concentración espermática.
  • 30. • Azoospérmico: ausencia de espermatozoides en el eyaculado. • Oligozoospérmico: ≤ 200 millones espermatozoides/mL. • Ralo: 200–500 millones espermatozoides/mL. • Semi-denso: 500–800 millones espermatozoides/mL. • Denso: 800–1.500 millones espermatozoides/mL. • Densísimo: ≥ 1.500 millones espermatozoides/mL.
  • 31. Ph El pH del semen varía normalmente en un rango muy estrecho (7,2 - 8,0), pocos son los trastornos capaces de alterarlo. Se ha sugerido que un pH elevado (> 8) puede considerarse un signo de infección seminal si se asocia a otros síntomas y signos de sospecha, mientras que un pH disminuido (< 7,2) Olor: Las muestras de semen recolectadas higiénicamente, de toros sanos y fértiles, tienen un débil olor sui géneris.
  • 32. • CARACTERISTICAS MICROSCÓPICAS CONCENTRACIÓN: La determinación de la concentración espermática se lleva a cabo mediante métodos semejantes al recuento de glóbulos rojos realizado en hematología. El conteo directo de células, a través del hemocitómetro o cámara de Neubauer fue diseñado para contar eritrocitos.
  • 33. Motilidad masal: El movimiento en masa va a depender de tres factores: concentración, porcentaje de células con movimiento progresivo y velocidad de movimiento de los espermatozoides (Muiño, 2007). Para evaluar se usa una escala de 1 a 5, evaluando como 1 al semen que no presenta ondas y 5 cuando las ondas se mueven rápidamente formando remolinos.
  • 34. La motilidad individual: de una muestra de semen se expresa como el porcentaje de células móviles bajo un campo microscópico. Debido a que el semen bovino es muy concentrado, no se puede realizar este análisis con semen fresco, por lo tanto, se lo debe diluir, colocar una gota sobre un portaobjeto temperado a 37ºC y observado al microscopio en una lente de 100x.
  • 35. Morfología: los espermatozoides deben ser morfológicamente normales. Cualquier anomalía que afecte a algún atributo del espermatozoide puede dificultar su migración en el tracto genital de la hembra, impidiendo la unión con el ovocito (Muiño, 2007). En general, un buen reproductor no deberá tener más del 30% de células anormales en un eyaculado
  • 36. Viabilidad La vitalidad de la célula espermática, generalmente se determina valorando su integridad a través de la capacidad de la membrana plasmática para excluir ciertas sustancias extracelulares (Betancourt, 2013). Estado de acrosoma El acrosoma juega un papel fundamental en la fecundación y esta importancia hace que convenga realizar una valoración específica del mismo. •
  • 37. CRIOCEPTORES • Son los que tienen la finalidad de proteger a los espermatozoides durante la fase de cristalización debido a las bajas temperaturas, el glicerol es la sustancia más empleada debido a los resultados obtenidos.
  • 38. ENVASADO DEL SEMEN La inseminación artificial (IA) es la biotecnología reproductiva más empleada en las empresas ganaderas; su consolidación se ha logrado a partir del uso de semen congelado empacado en pajillas de 0.25 y 0.5 ml, el cual es aplicado en el cuerpo del útero mediante una técnica instrumental Dilutor Tris – Yema de huevo Los diluyentes más comúnmente utilizados en este protocolo tienen como amortiguadores el Tris (hidroximetil- aminometano) o el Citrato de sodio