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Enzimas
Enzimas:

Son catalizadores biológicos, es decir son capaces de
aumentar la velocidad de una reacción sin modificar el
sentido de la misma.
Cada enzima cataliza un solo tipo de reacción.

¿Qué factores pueden modificar la actividad enzimatica?

-pH
-Temperatura
-Cofactores
-Inhibidores
-Concentración de sustrato y producto.
Energía de activación
Velocidad de una reacción química


La velocidad V indica el número
de reacciones por segundo que
son catalizadas por una enzima.
Con concentraciones crecientes
de sustrato [S], la enzima va
acercándose asintóticamente su
velocidad máxima (Vmax).
Las     enzimas    pueden     ser
caracterizadas por la concentra-
ción de sustrato a la cual la
velocidad de reacción es la mitad
de la velocidad máxima  KM.
Esta concentración de sustrato
se conoce como constante de
Michaelis-Menten (KM).

Esta constante representa la
afinidad de la enzima por el
sustrato.

Valores bajos de la KM indican
que la afinidad de la enzima por
el sustrato es elevada.
                                   Lineweaver-
                                   Burk
Enzimas séricas

El estudio de las enzimas séricas es muy importante para el
diagnóstico, control y comprensión de una gran variedad de
patologías.

Las enzimas presentes en el plasma pueden tener o no
función en ese medio por lo que se las clasifica como
funcionales o no funcionales.

Algunas enzimas tienen amplia distribución tisular, tanto
que otras son específicas de un determinado tejido.
Esta mayor o menor especificidad es importante para el
diagnóstico.
¿Por qué pueden aumentar sus niveles en plasma...?




• Necrosis de los tejidos

• Aumento del catabolismo celular (reparación tisular, cáncer)

• Aumento concentración intracelular (inducción)

• Obstrucción en la salida exocrina (α-amilasa)
Enzimas funcionales plasmáticas


Tienen una función definida y específica en el plasma.

A este grupo pertenecen: ceruloplasmina, lipoproteinlipasa,
pseudocolinesterasa, enzimas que intervienen en la
coagulación.

La determinación de la actividad de estas enzimas tiene
interés clínico en la evaluación tanto de la función propia de
la enzima, como de la función del tejido que la sintetiza.
Enzimas no funcionales plasmáticas


No tienen una función conocida en el plasma.

Su presencia en plasma en niveles más altos de lo normal
sugiere un aumento en la velocidad de destrucción celular y
tisular.

Pero niveles elevados de enzimas en plasma no siempre
deben ser interpretados como evidencia de necrosis celular
ya que, por ejemplo la realización de ejercicio vigoroso libera
cantidades significativas de enzimas musculares.
Enzimas no funcionales plasmáticas

Pueden dividirse en dos grupos: enzimas de secreción y
enzimas del metabolismo intermedio.

- enzimas de secreción: se producen en glándulas
exócrinas, como páncreas y próstata, así como en tejidos
(mucosa gástrica y hueso).

- enzimas del metabolismo intermedio: la concentración
tisular de las mismas es miles de veces más alta que en el
plasma. El daño puede conducir a un aumento en la
permeabilidad de la membrana plasmática con su
consecuente liberación a la circulación general.
Algunas enzimas del metabolismo intermedio

• Aspartato amino transferasa      (ASAT)   o   glutámico
oxalacético transaminasa (GOT),
• Alanina amino transferasa (ALAT) o glutámico pirúvico
transaminasa (GPT),
• Lactato deshidrogenasa (LDH),
• Creatina fosfato quinasa (CK),
• Gamma glutamil transpeptidasa (GT),
• α-Amilasa
• 5´nucleotidasa,
• Aldolasa (ALS).
o
Isoenzimas



Son proteínas que difieren en la secuencia de
aminoácidos pero que catalizan la misma reacción,
estando presentes en la misma especie.

La existencia de las isoenzimas permite el ajuste del
metabolismo para satisfacer las necesidades
particulares de un determinado tejido o etapa del
desarrollo.
Lactato deshidrogeneasa (LDH)
Lactato deshidrogeneasa (LDH)


Los niveles séricos aumentados de LDH se observan en
muchas circunstancias como ser anemias megaloblásticas,
infarto de miocardio y pulmonar, etc.


El gran número de
situaciones que
aumentan la actividad
de LDH hacen
relativa su utilidad
diagnóstica.
Lactato deshidrogeneasa (LDH)
Aspartato amino transferasa (ASAT/GOT)
       Valores normales: < 38 UI/L (H) – < 32 UI/L (M)
•Aumento importante: infarto de miocardio, hepatitis,
traumatismos
•Aumento moderado: cirrosis, mononucleosis, ictericia,
hemólisis

Alanina aminotransferasa (ALAT/GPT)
       Valores normales: < 42 UI/L (H) – < 32 UI/L (M)
•Aumento importante: shock, hepatitis
•Aumento moderado: cirrosis, mononucleosis, ictericia,
α-Amilasa:
                 Valores normales: < 96 UI/L
•Aumento importante: pancreatitis aguda y crónica, cáncer de
páncreas.
•Aumento moderado: parotiditis, algunos carcinomas, procesos
parapancreáticos (gastritis, úlcera duodenal, peritonitis,
obstrucción intestinal.

  Creatina fosfato quinasa (CPK)
       Valores normales: < 175 UI/L (H) y < 141 UI/L (M)
•Aumento importante: infarto de miocardio (isoenzima CPK-1)
•Aumento moderado: miopatías, distrofia muscular, accidente
cerebro-vascular
Fosfatasa ácida (ACP)
                  Valores normales: < 2 UI/L
• Aumento importante: hipertrofia o cáncer de próstata
(isoenzima prostática), hiperparatiroidismo, Hodkin, enf. Paget
• Aumento moderado: enf. Gaucher, insuficiencia renal aguda,
hepatitis, ictericia obstructiva

Fosfatasa alcalina (ALP-FAL)
            Valores normales: 98-279 UI/L (adulto).
                                  < 763UI/L (niños en desarrollo)
• Aumento importante: ictericia obstructiva, colelitiasis, neoplasia
de vías biliares, cirrosis, hepatomas
• Aumento moderado: neoplasias óseas osteogénicas,
osteomalacia, enf. Paget, hiperparatiroidismo
Gama glutamil transpeptidasa (GGT)
     Valores normales: < 62 UI/L (H) y < 37 UI/L (M)
•Aumento importante: hepatitis vírica, obstrucción biliar,
metástasis hepáticas, enf. alcohólica
•Aumento moderado: infecciones que afectan al hígado
(citomegalovirus, mononucleosis infecciosa)

Láctico deshidrogenasa (LDH)
             Valores normales: 230-460 UI/L
• Aumento importante: infarto de miocardio (LDH1),
hepatitis víricas (LDH4, LDH5)
• Aumento moderado: hemólisis, accidente cerebro-
vascular, distrofia muscular
5´ nucleotidasa (NTP)
            Valores normales: < 10 UI/L (adulto)
• Aumento importante: colestasis intra o extrahepática,
enfermedades hepatobiliares, cáncer hepático
Creatina fosfato quinasa:

La CK es una enzima dimérica formada por monómeros que
pueden ser de dos tipos: M y B.
Por lo tanto la CK tiene tres isoenzimas:



Los distintos órganos presentan distribuciones
Creatina fosfato quinasa
Depuración de enzimas plasmáticas no funcionales
Vías de eliminación de enzimas séricas


a- Eliminación renal: se cumple para aquellas de bajo
peso molecular. Ej: amilasa y algunas fosfatasas

b- Inactivación sérica: existen inactivadores o inhibidores
para varias enzimas: Ej: tripsina, quimiotripsina.

c- Para algunas enzimas existe recaptación por parte de
los tejidos convalecientes, al restablecerse anatómica y
fisiológicamente. Esta pequeñísima parte de las enzimas
previamente liberadas sería utilizada, no para su función
primitiva, sino como integrante de un “pool” (reservorio)
de aminoácidos.
Enzimas séricas en la enfermedad cardíaca

Aumentan:
• Creatinafosfatoquinasa (CPK) (Isoenzima “mb”)
• Láctico deshidrogenasa (LDH) isoenzima 1 (15-25%).
• Aspartato aminotransferasa (ASAT- GOT)

Tras el infarto, hay una liberación de proteínas intracelulares
de las células dañadas.

La primera en ser detectada es la troponina (5-10 h post
infarto), seguida de la CK-MB (pico a 1 día), y finalmente la
LDH, cuyo máximo se alcanza en los 2-3 días post infarto
Enzimas séricas en la enfermedad hepática


Aumentan:

• Alanina aminotransferasa (ALAT -GPT)
• Aspartato aminotransferasa (ASAT - GOT)
• Lactato deshidrogenasa (isoenzima 5)
• γ glutamil transpeptidasa (GGT)
• Fosfatasa alcalina
• Fosfatasa ácida
• 5’ nucleotidasa
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Enzimas sericas

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  • 3. Enzimas: Son catalizadores biológicos, es decir son capaces de aumentar la velocidad de una reacción sin modificar el sentido de la misma. Cada enzima cataliza un solo tipo de reacción. ¿Qué factores pueden modificar la actividad enzimatica? -pH -Temperatura -Cofactores -Inhibidores -Concentración de sustrato y producto.
  • 5. Velocidad de una reacción química La velocidad V indica el número de reacciones por segundo que son catalizadas por una enzima. Con concentraciones crecientes de sustrato [S], la enzima va acercándose asintóticamente su velocidad máxima (Vmax). Las enzimas pueden ser caracterizadas por la concentra- ción de sustrato a la cual la velocidad de reacción es la mitad de la velocidad máxima  KM.
  • 6. Esta concentración de sustrato se conoce como constante de Michaelis-Menten (KM). Esta constante representa la afinidad de la enzima por el sustrato. Valores bajos de la KM indican que la afinidad de la enzima por el sustrato es elevada. Lineweaver- Burk
  • 7. Enzimas séricas El estudio de las enzimas séricas es muy importante para el diagnóstico, control y comprensión de una gran variedad de patologías. Las enzimas presentes en el plasma pueden tener o no función en ese medio por lo que se las clasifica como funcionales o no funcionales. Algunas enzimas tienen amplia distribución tisular, tanto que otras son específicas de un determinado tejido. Esta mayor o menor especificidad es importante para el diagnóstico.
  • 8. ¿Por qué pueden aumentar sus niveles en plasma...? • Necrosis de los tejidos • Aumento del catabolismo celular (reparación tisular, cáncer) • Aumento concentración intracelular (inducción) • Obstrucción en la salida exocrina (α-amilasa)
  • 9. Enzimas funcionales plasmáticas Tienen una función definida y específica en el plasma. A este grupo pertenecen: ceruloplasmina, lipoproteinlipasa, pseudocolinesterasa, enzimas que intervienen en la coagulación. La determinación de la actividad de estas enzimas tiene interés clínico en la evaluación tanto de la función propia de la enzima, como de la función del tejido que la sintetiza.
  • 10. Enzimas no funcionales plasmáticas No tienen una función conocida en el plasma. Su presencia en plasma en niveles más altos de lo normal sugiere un aumento en la velocidad de destrucción celular y tisular. Pero niveles elevados de enzimas en plasma no siempre deben ser interpretados como evidencia de necrosis celular ya que, por ejemplo la realización de ejercicio vigoroso libera cantidades significativas de enzimas musculares.
  • 11. Enzimas no funcionales plasmáticas Pueden dividirse en dos grupos: enzimas de secreción y enzimas del metabolismo intermedio. - enzimas de secreción: se producen en glándulas exócrinas, como páncreas y próstata, así como en tejidos (mucosa gástrica y hueso). - enzimas del metabolismo intermedio: la concentración tisular de las mismas es miles de veces más alta que en el plasma. El daño puede conducir a un aumento en la permeabilidad de la membrana plasmática con su consecuente liberación a la circulación general.
  • 12. Algunas enzimas del metabolismo intermedio • Aspartato amino transferasa (ASAT) o glutámico oxalacético transaminasa (GOT), • Alanina amino transferasa (ALAT) o glutámico pirúvico transaminasa (GPT), • Lactato deshidrogenasa (LDH), • Creatina fosfato quinasa (CK), • Gamma glutamil transpeptidasa (GT), • α-Amilasa • 5´nucleotidasa, • Aldolasa (ALS).
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  • 20. Isoenzimas Son proteínas que difieren en la secuencia de aminoácidos pero que catalizan la misma reacción, estando presentes en la misma especie. La existencia de las isoenzimas permite el ajuste del metabolismo para satisfacer las necesidades particulares de un determinado tejido o etapa del desarrollo.
  • 22. Lactato deshidrogeneasa (LDH) Los niveles séricos aumentados de LDH se observan en muchas circunstancias como ser anemias megaloblásticas, infarto de miocardio y pulmonar, etc. El gran número de situaciones que aumentan la actividad de LDH hacen relativa su utilidad diagnóstica.
  • 24. Aspartato amino transferasa (ASAT/GOT) Valores normales: < 38 UI/L (H) – < 32 UI/L (M) •Aumento importante: infarto de miocardio, hepatitis, traumatismos •Aumento moderado: cirrosis, mononucleosis, ictericia, hemólisis Alanina aminotransferasa (ALAT/GPT) Valores normales: < 42 UI/L (H) – < 32 UI/L (M) •Aumento importante: shock, hepatitis •Aumento moderado: cirrosis, mononucleosis, ictericia,
  • 25. α-Amilasa: Valores normales: < 96 UI/L •Aumento importante: pancreatitis aguda y crónica, cáncer de páncreas. •Aumento moderado: parotiditis, algunos carcinomas, procesos parapancreáticos (gastritis, úlcera duodenal, peritonitis, obstrucción intestinal. Creatina fosfato quinasa (CPK) Valores normales: < 175 UI/L (H) y < 141 UI/L (M) •Aumento importante: infarto de miocardio (isoenzima CPK-1) •Aumento moderado: miopatías, distrofia muscular, accidente cerebro-vascular
  • 26. Fosfatasa ácida (ACP) Valores normales: < 2 UI/L • Aumento importante: hipertrofia o cáncer de próstata (isoenzima prostática), hiperparatiroidismo, Hodkin, enf. Paget • Aumento moderado: enf. Gaucher, insuficiencia renal aguda, hepatitis, ictericia obstructiva Fosfatasa alcalina (ALP-FAL) Valores normales: 98-279 UI/L (adulto). < 763UI/L (niños en desarrollo) • Aumento importante: ictericia obstructiva, colelitiasis, neoplasia de vías biliares, cirrosis, hepatomas • Aumento moderado: neoplasias óseas osteogénicas, osteomalacia, enf. Paget, hiperparatiroidismo
  • 27. Gama glutamil transpeptidasa (GGT) Valores normales: < 62 UI/L (H) y < 37 UI/L (M) •Aumento importante: hepatitis vírica, obstrucción biliar, metástasis hepáticas, enf. alcohólica •Aumento moderado: infecciones que afectan al hígado (citomegalovirus, mononucleosis infecciosa) Láctico deshidrogenasa (LDH) Valores normales: 230-460 UI/L • Aumento importante: infarto de miocardio (LDH1), hepatitis víricas (LDH4, LDH5) • Aumento moderado: hemólisis, accidente cerebro- vascular, distrofia muscular
  • 28. 5´ nucleotidasa (NTP) Valores normales: < 10 UI/L (adulto) • Aumento importante: colestasis intra o extrahepática, enfermedades hepatobiliares, cáncer hepático
  • 29. Creatina fosfato quinasa: La CK es una enzima dimérica formada por monómeros que pueden ser de dos tipos: M y B. Por lo tanto la CK tiene tres isoenzimas: Los distintos órganos presentan distribuciones
  • 31. Depuración de enzimas plasmáticas no funcionales
  • 32. Vías de eliminación de enzimas séricas a- Eliminación renal: se cumple para aquellas de bajo peso molecular. Ej: amilasa y algunas fosfatasas b- Inactivación sérica: existen inactivadores o inhibidores para varias enzimas: Ej: tripsina, quimiotripsina. c- Para algunas enzimas existe recaptación por parte de los tejidos convalecientes, al restablecerse anatómica y fisiológicamente. Esta pequeñísima parte de las enzimas previamente liberadas sería utilizada, no para su función primitiva, sino como integrante de un “pool” (reservorio) de aminoácidos.
  • 33. Enzimas séricas en la enfermedad cardíaca Aumentan: • Creatinafosfatoquinasa (CPK) (Isoenzima “mb”) • Láctico deshidrogenasa (LDH) isoenzima 1 (15-25%). • Aspartato aminotransferasa (ASAT- GOT) Tras el infarto, hay una liberación de proteínas intracelulares de las células dañadas. La primera en ser detectada es la troponina (5-10 h post infarto), seguida de la CK-MB (pico a 1 día), y finalmente la LDH, cuyo máximo se alcanza en los 2-3 días post infarto
  • 34. Enzimas séricas en la enfermedad hepática Aumentan: • Alanina aminotransferasa (ALAT -GPT) • Aspartato aminotransferasa (ASAT - GOT) • Lactato deshidrogenasa (isoenzima 5) • γ glutamil transpeptidasa (GGT) • Fosfatasa alcalina • Fosfatasa ácida • 5’ nucleotidasa