Linfocitos TCD8

1. LINFOCITOS TCD8+ (CITOTOXICOS)
Maria Rosa Buenahora Tobar
Maestría en Ciencias Odontológicas
Mayo 10-2015
Imagen tomada de «Healthy Human T Cell» de NIAID/NIH - NIAID Flickr's photostream.

2. Objetivos
• Concepto y generalidades
• Receptores
• Sinapsis inmunológica
• Señales de activación/inactivación
• Moléculas coestimuladoras
• Expansión clonal
• Mecanismos citotóxicos
• Células T de memoria.

3. CONCEPTO Y GENERALIDADES DE LINFOCITOS T CITOTOXICOS
Zhang N, Bevan MJ. CD8(+) T cells: foot soldiers of the immune system. Immunity, 2011. 26;35(2):161-8
Se producen en la MO y
maduran en el timo
Reconocen el MHC clase II
(CPA)
Reconocen el MHC clase I
(CPA y nucleadas)
TCD4+ colaboradores
TCD8+ citotóxicos
Capacidad de reaccionar por expansión masiva y migrar a el lugar de la infección
Interactúa con CPA en órganos linfoides
secundarios
Migrar al lugar de la infección
Células infectadas por virus
Células cancerosas
Celulas MHC clase I incompatibles
Células efectoras de corta
duración
Células de memoria
CPA
IL-2, TNFa, INFy
CD8(hi) < proteosomas y >T-be
CD8(lo) > proteosoma y < T-be
Se pueden dividir 19 /semana
Expansion de 500.000 veces
4-6 horas
Imagen tomada de «Healthy Human T Cell» de NIAID/NIH - NIAID Flickr's photostream.
Requiere gran cantidad de energía y
utiliza un mecanismo independiente
de oxigeno para producir ATP a
partir de la glucosa
Respuesta adquirida

4. TCR
RECEPTORES DE LOS LINFOCITOS TCD8+
Alberts et al. Biologia Molecular de la Celula. 5ta ed. Barcelona. Ediciones Omega S.A. 2010. Pg 1485-1601
Proteinas
invariables
Molecula CD8
interacciona con
region invariable del
MHC
proteinquinasas
Zhang N, Bevan MJ. CD8(+) T cells: foot soldiers of the immune system. Immunity, 2011. 26;35(2):161-8
Cadenaspolipeptidicas
280aa
Tirosin-quinasa
(Src)

5. Forman una estructura supramolecular que se ha denominado también SMAC
( SupraMolecular Activation Complex)
CORECEPTORES Y SINAPSIS INMONOLOGICA
 Es una estructura dinamica y organizada
 Su función es congregar en este punto, la
maquinaria de reconocimiento del Ag y de
transducción de señales.
 Su formación implica reorganización de las
balsas lipídicas y del citoesqueleto de
actina.
Receptores antigenicos
Moleculas coestimuladoras
Moleculas de adhesion
Estabilizan la sinapsis
LcK
ZAP-70
LAT
SLP-76
Grb2
Proteinquinasas
López Hoyos M. Tolerancia. In: , editors. Trasplante al día [Internet]. 1 ed. Barcelona(Spain): Sociedad Española de Nefrología/Plusmedical; 01/10/2013 [cited 2015 May
09]. http://dx.doi.org/10.xxxx/SET.2013.pub1.ed1.chapter12.
c-SMAC y p-SMAC

6. SEÑALES DE ACTIVACION
Reconocimiento
del Ag
Para que haya una
activación correcta de las
células T nativas
López Hoyos M. Tolerancia. In: , editors. Trasplante al día [Internet]. 1 ed. Barcelona(Spain): Sociedad Española de Nefrología/Plusmedical; 01/10/2013 [cited 2015 May
09]. http://dx.doi.org/10.xxxx/SET.2013.pub1.ed1.chapter12.
Zhang N, Bevan MJ. CD8(+) T cells: foot soldiers of the immune system. Immunity, 2011. 26;35(2):161-8

7. SEÑALES DE ACTIVACION
CD8
CMH I
CPA
Una vez hay el
reconocimiento del Ag
Se activa la protein
cinasa Lck y fosforila
residuos ITAM de CD3
Serán anclaje de ZAP-
70 que fosforila
sustratos de moleculas
adaptadoras de
fosfolipasas Cg y de la
ruta Ras-MAP cinasa
Imagen tomada de: López Hoyos M. Tolerancia. In: , editors. Trasplante al día [Internet]. 1 ed. Barcelona(Spain): Sociedad Española de Nefrología/Plusmedical;
01/10/2013 [cited 2015 May 09]. http://dx.doi.org/10.xxxx/SET.2013.pub1.ed1.chapter12.
LAT: linker for activation of T cell
ITAM: immunoreceptor tyrosine based activation motif
Sustratos de moléculas
adaptadoras de unión
PLCy: hidrólisis de lípidos de
membrana
IP3: inositol trifosfato
Aumenta niveles de Ca+
DAG:diacilglicerol
Activa las proteinquinasas C
Determina factores de
transcripcion

8. Se considera que la coestimulación es un punto de control desarrollado por el sistema
inmunitario para prevenir la activación de las células T autorreactivas que escapan de los
mecanismos de tolerancia central en el timo.
Las moléculas coestimuladoras pueden transmitir señales tanto activadoras como inhibidoras.
SEGUNDA SEÑAL
Se destacan las de la superfamilia de las inmunoglobulinas
CD28 y sus ligandos B7.1 (CD80) y B7.2 (CD86).
Es mediadas por la interacción entre receptores no polimórficos expresados en la
superficie de las células T y sus respectivos ligandos en la superficie de las CPAs
La ausencia de estas señales coactivadoras provoca la anergia,
las células T son incapaces de activarse y ejercer su función efectora.
Zhang N, Bevan MJ. CD8(+) T cells: foot soldiers of the immune system. Immunity, 2011. 26;35(2):161-8

9. VIAS DE TRANSDUCCION DE SEÑAL
Después de la1era y
2da señal
Se activan 3 vías de transducción
1. calcio/calcineurina
2. Ras/MAP kinasa
3. NF-kB
Inducen la
expresion de
moleculas
Il-2
Activa P13 quinasa esta a mTOR
Convierte en la 3ra señal para que
el linfocito T prolifere
Colaboración
de las TCD4
Imagen tomada de: López Hoyos M. Tolerancia. In: , editors. Trasplante al día [Internet]. 1 ed. Barcelona(Spain): Sociedad Española de Nefrología/Plusmedical;
01/10/2013 [cited 2015 May 09]. http://dx.doi.org/10.xxxx/SET.2013.pub1.ed1.chapter12.
AKT

10. CD8
MHC-I
Una vez inducida la
activación de la célula T por
la interacción CD28/B7, las
células T aumentan
rápidamente la expresión de
CTLA-4 (CD152)
 Inhibe la producción de IL-2 y
la expresión de sus
receptores.
 Arresta a la célula T en la fase
G1
Rudd CE. The reverse stop-signal model for CTLA4 function. Nat Rev
Immunol 2008;8: 153-160.
CD80/CD86

11. NUEVAS MOLECULAS COESTIMULADORAS
MOLECULA LIGANDO CARACTERISTICA
ICOS (inducible
costimulatory
molecule)
B7h (también denominado
ICOSL, B7RP-1, B7h-2 o GL-
50)
Es una molécula análoga de CD28. No se expresa constitutivamente en células T naive,
pero sí tras la activación.
La unión de ICOS por B7h aumenta la proliferación y supervivencia de células T y la
producción de citocinas.
PD-1 (programmed
death-1)
PD-L1 (P7-H1) y PD-L2 (B7-
DC).
Se expresa en células T y B activadas, y NK y macrófagos.
PD-1 se emplea como marcador del fenotipo exhausto (producción de citocinas y
proliferación disminuidas) de las células citotóxicas CD8+ específicas de virus.
BTLA (B and T
lymphocyte
attenuator)
CD160
LIGHT
(HVEM, herpes virus entry
mediator). De la familia
TNF
Unido a CD160: inhibidor
Unido a LIGHT: activador
Es un miembro de la superfamilia de las inmunoglobulinas expresado como
monómero en una gran variedad de células: T activadas, B y CPA.
Induce señales inhibidoras o activadoras a las células T dependiendo del ligando
OX40 (CD134) OX40L, se expresa en
células dendríticas,
linfocitos B y células
endoteliales inflamadas
Se expresa en alta concentración en células T activadas, pero no en células en reposo.
Transmite señales coestimuladoras tan potentes como CD28 y participa, además, en
los programas de diferenciación hacia Th1 o Th2 y en la generación de células T
memoria.
CD30
De la familia TNF
CD30L, se expresa en CPA y
células parenquimatosas.
se expresa en células T activadas y memoria, pero no en células naive. Actua como
regulador negativo.
GITR (glucocorticoid
induced tumor
necrosis factor
receptor)
GITRL, se expresa en
células dendríticas y
parenquimatosas.
Se expresa fundamentalmente en células T efectoras, células B, células NK y
macrófagos.
Promueve la proliferación de células T y la producción de citocinas. Al mismo tiempo,
GITR es capaz de inducir señales apoptóticas al interior de las células.

12.  La magnitud de la respuesta de células T y su duración depende en
parte del número y afinidad por el antígeno.
 Los linfocitos T CD8+ son capaces de seguir proliferando, incluso en
ausencia del antígeno que originó la respuesta; mientras que las células
T CD4+ precisan de la persistencia del antígeno.
 El tamaño clonal generado está limitado, tanto por la tasa de muerte
celular como por la de proliferación y se convierte en el componente
de memoria.
 La expansión y la contracción de las células T CD8+ clonales es muy
rápida, así como la generación de memoria. En cambio, las células T
memoria CD4+ tienen una cinética más lenta y se expanden menos que
las CD8+.
 Es posible que ésta diferencia sea porque las células T CD8+ son
efectoras por sí mismas y necesitan formar un gran número para
ejercer su función. En cambio, las células T CD4+ efectoras secretan
citocinas que activan otros tipos de células T efectoras
EXPANSIÓN CLONAL
Vincenti F, Luggen M. T cell costimulation: a rational target in the therapeutic armamentarium for autoimmune diseases and
transplantation. Annu Rev Med 2007;58: 23.1-23.12.

13. MECANISMOS CITOTOXICOS
APOPTOSIS
C9
1. Granulos citotoxicos
2. Fas-L/Fas
3. TNF

14. MECANISMOSCITOTOXICOS
Saint Basile G, Ménasche G, Fischer A. Molecular mechanisms of biogenesis and exocytosis of cytotoxic granules. Nature Reviews
Immunology. 2010; 11: 568-79
Perforinas y granzimas
La granzima B Bcl2(Bid) Genera tBid
Liberando citocromo c de
la mitocondria
Cascada proteolitica
de caspasas
manosa-6-fosfatasa
Tras el reconocimiento de Ag

15. MECANISMOSCITOTOXICOS
Ligando Fas/Fas
Las CTL también liberan citocinas capaces de ejercer función citotóxica
directa como IFN-y, TNF-a, y TNF-b. (linfotoxinas) que inducen a apoptosis.
Imagen tomada de: Alberts et al. Biologia Molecular de la Celula. 5ta ed. Barcelona. Ediciones Omega S.A. 2010. Pg 1485-1601
Activa el dominio de muerte

16. MECANISMOSCITOTOXICOS
Función efectora de los linfocitos
TCD8+
Imagen tomada de: Alberts et al. Biologia Molecular de la Celula. 5ta ed. Barcelona. Ediciones Omega S.A. 2010. Pg 1485-1601
 Producción de citoquinas como IFN-y, TNF-a, TNF-b
(linfotoxinas)
 Pueden activar macrofagos
 Pueden inducir la muerte de la celula por apoptosis

17. CELULAS T DE MEMORIA
Diferencias en la
expresión de moleculas
de superficie entre
células T nativas y
células T de memoria.
IL-2 sintetizadas por
células nativas para
supervivencia
IFN-y se aumenta a
medida que la célula de
memoria evoluciona a
célula efectora
Vincenti F, Luggen M. T cell costimulation: a rational target in the therapeutic armamentarium for autoimmune diseases and transplantation. Annu Rev Med
2007;58: 23.1-23.12.
Finlay D, Cantrell DA. Metabolism, migration and memory in cytotoxic T cells. Nature Reviews Immunology. 2011; 11: 109-17
CD45RO
Efecto rápido

18. Niveles de AKT y de mTOR en la diferenciacion de celulas T de memoria o efectoras
Finlay D, Cantrell DA. Metabolism, migration and memory in cytotoxic T cells. Nature Reviews Immunology. 2011; 11: 109-17
Se propone que la red diversa de serina / treonina quinasas como la AKT y la mTOR que
actúan en el metabolismo de las células T, también intervienen en controlar la
migración celular. Y la proteina quinasa AMPK además de controlar el metabolismo de
las células T, intervienen en determinar si la celula TCD8 sera efectora o de memoria.
TN: CD26L
CCR7
TE: CD26L
CCR7
Perdida de señalizacion
de citoquinas

19. GRACIAS