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LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA María  Isabel Durango lozano
Rol del Laboratorio de microbiología ,[object Object], Identificación del agente etiológico: selección del  mejor examen y de la mejor muestra.  Informe de susceptibilidad a antimicrobianos.  Contribuir al control de la resistencia bacteriana  Implementación de tecnología moderna: tiempo de respuesta, sensibilidad y especificidad.
Métodos de diagnóstico microbiológico ,[object Object]
 Cultivos: Identificación/sensibilidad
 Detección de antígenos
 Detección de anticuerpos: serología
 Detección de ácidos nucleicos
Mayor rapidez
 Alta calidad
 Costo/beneficio,[object Object]
 De bajo costo y gran utilidad: 1.Orientación diagnóstica  rápida   2. Características inflamatorias    3. infecciones mixtas (anaerobios) ,[object Object],[object Object]
 De bajo costo y gran utilidad: 1. Rápida   2. Fácil disponibilidad   3. Indice de infectividad ,[object Object],Tinción de Ziehl Neelsen
Tinciones para Hongos ,[object Object]
 Blanco de calcoflúor es una tinción  específica para hongos (quitina).
 Mejora la sensibilidad,[object Object]
 En el caso de bacterias y hongos la automatización ha permitido disminuir los tiempos de respuesta (mejores sistemas de detección).,[object Object]
 Requieren medios de transporte, especialmente anaerobios
  Medios líquidos son más sensibles que los sólidos
 Una buena alternativa en punciones  y muestras líquidas es la inoculación en botellas de hemocultivos,[object Object]
 Identificación y sensibilidad a drogasDiferentes plazos de entrega:  Cultivo corriente: 48 horas Cultivo anaeróbico: 7 días Cultivo de hongos: 7 días a 4 semanas Cultivo de Micobacterias: 8 semanas
Susceptibilidad bacteriana ,[object Object],Staphylococcus aureus R a meticilina Streptococcus pneumoniae R a penicilina  Enterococcus R a Vancomicina  E. coli y K. pneumoniae R a todos los -lactámicos (ESBL) ,[object Object],Estandarización de AAM ensayados e informados       Depende de complejidad de los pacientes y patrones locales de R       Resultado requiere reporte selectivo e interpretación adecuada Kirby-Bauer   S -I - R
  2  4 8 16 2 4 8 16 2 4 8 16 2 4 8 16 2 4 8 16 Susceptibilidad bacteriana Concentración inhibitoria mínima Métodos: Dilución en agar Ej. Cefazolina,  Escherichia coli  Cortes : Sensible=  2 g/ml    Intermedio =4- 8 g/ml  Resistente: 16 CIM  2         S 2 CIM = 4         I 4 CIM = 8         I 8 CIM = 16       R16 CIM   16      R  16
microbiología Cumplimiento de la fase pre analítica Adecuada muestra Medios de cultivos atemperados  Libres de agua de condensación. Trabajar en una campana de     bioseguridad  muestras. Uso de mecheros o incinerador Fernández  y cols. 2005. Gestión de calidad en el laboratorio Clínico.
[object Object]
 Responsabilidad y supervisión facultativa
 Normas de asepsia
 Muestra representativa del proceso
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Evitar contaminación con flora saprófita
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Control de Calidad en el Laboratorio de microbiologia

  • 1. LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA María Isabel Durango lozano
  • 2.
  • 3.
  • 5. Detección de antígenos
  • 6. Detección de anticuerpos: serología
  • 7. Detección de ácidos nucleicos
  • 10.
  • 11.
  • 12.
  • 13.
  • 14. Blanco de calcoflúor es una tinción específica para hongos (quitina).
  • 15.
  • 16.
  • 17. Requieren medios de transporte, especialmente anaerobios
  • 18. Medios líquidos son más sensibles que los sólidos
  • 19.
  • 20. Identificación y sensibilidad a drogasDiferentes plazos de entrega: Cultivo corriente: 48 horas Cultivo anaeróbico: 7 días Cultivo de hongos: 7 días a 4 semanas Cultivo de Micobacterias: 8 semanas
  • 21.
  • 22. 2 4 8 16 2 4 8 16 2 4 8 16 2 4 8 16 2 4 8 16 Susceptibilidad bacteriana Concentración inhibitoria mínima Métodos: Dilución en agar Ej. Cefazolina, Escherichia coli Cortes : Sensible=  2 g/ml Intermedio =4- 8 g/ml Resistente: 16 CIM  2 S 2 CIM = 4 I 4 CIM = 8 I 8 CIM = 16 R16 CIM  16 R  16
  • 23.
  • 24. microbiología Cumplimiento de la fase pre analítica Adecuada muestra Medios de cultivos atemperados Libres de agua de condensación. Trabajar en una campana de bioseguridad muestras. Uso de mecheros o incinerador Fernández y cols. 2005. Gestión de calidad en el laboratorio Clínico.
  • 25.
  • 26. Responsabilidad y supervisión facultativa
  • 27. Normas de asepsia
  • 30. Evitar contaminación con flora saprófita
  • 32.
  • 33. Porción media de 1ª orina de la mañana
  • 34. Limpieza escrupulosa de genitales
  • 35. La bolsa (niños) se cambiará cada hora
  • 36. Volumen mínimo 10 ml para cultivo bacterias y Levaduras
  • 37.
  • 38. Frasco de boca ancha
  • 39. 2-5 g de heces recientes (pus, moco, sangre)
  • 40. Remitir rápidamente al laboratoriomantener a 4ºC si se demora el envío
  • 41. Exudados /Abscesos Limpiar la superficie con suero fisiológico y gasa Recoger el pus mediante jeringa y aguja aspirando de las zonas profundas Cuando sea necesario instilar suero y aspirarlo nuevamente Sólo cuando lo anterior no sea posible se utilizaran escobillones enviando
  • 43. microbiología Uso de asas calibradas ( recuento de microorganismos ). Buena siembra en estría. ( trabajar con colonias perfectamente aisladas ).
  • 44. Elston D. 2008. Clin Lab Med 28:173-177
  • 45. Medios de cultivo Selección de medios de cultivo Generales, selectivos, selectivos- diferenciales. Necesidades particulares de cada hospital Comunicación laboratorio – área clínica . Realización de tablas de siembra. 2007. Clinical Microbiology Procedures Hanbook 2nd Edition . ASM
  • 46. Identificación de microorganismos PRIMERA ETAPA : Observación de la colonia. Ahorro de tiempo y dinero en el Dx. Morfología, color Interacción con el medio ( hemolisis )
  • 47. Segunda etapa : Diagnostico presuntivo Medios cromogénicos Sensibilidad a antibióticos: S. pneumoniae S opt S. pyogenes S bac Pruebas complementarias: Oxidasa,catalasa,coagulasa Aglutinación con antisueros específicos.
  • 48. Tercera etapa: dx. confirmativo Basa en realización pruebas bioquímicas A partir de cultivos puros. Bioquímicas: manuales o por sistemas semi automatizado.
  • 49. Control de calidad en el laboratorio microbiológico Toma de muestra y adecuado transporte. Manipulación de la muestra rigurosamente. Control de material y equipos: Temperatura estufas, refrigeradores Campanas de incubación Pipetas automáticas: calibración Sistemas automatizados
  • 50. CONTROL DE MEDIOS CULTIVO Esterilidad del medio: se comprobara en cada lote Eficacia del medio (utilización de cepas ATCC).
  • 51. Control de reactivos y discos pruebas diferenciales Los reactivos se controlan cada vez que se preparan o nuevo frasco Colorantes de tinción, fijadores reveladores de pruebas bioquímicas. Eficacia se comprueba con microorganismos que dan respuesta positiva y negativa. Discos para pruebas diferenciales refrigerado con un desecante
  • 52. Control de discos de antibiograma : cepas cuya sensibilidad conocida: E. coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853. Control de antisuero y antígenos Control de resultados intralaboratorios e interlaboratorios.
  • 53. Fase Postanalítica. Captura de resultados : manual o automática. Validación de resultados Envió de resultados impresos- internet Impresión de Diarios de Trabajo.
  • 54. Indicadores de calidad fase Postanalítica Tiempo de respuesta del lab para sol urgentes ( min ) Proporción de reediciones diarias de informes ya entregados: No. reediciones de informes/No. total informes Proporción de informes reclamados por demoras. Indicadores herramientas objetivas evaluar las disposiciones establecidas y ver posibilidades de mejora.
  • 55.
  • 56. Errores en el proceso