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PAOLA ANDREA CUESTAS
HOLLMAN MAURICIO MORENO
Universidad Antonio Nariño
2016
LEISHMANIASIS
LEISHMANIA
(KINETOPLASTIDA): ESPECIES ESCRI
BIENDO CON ISOENZIMA
Y PCR-RFLP DE LOS PACIENTES DE
LEISHMANIASIS CUTÁNEA
EN ETIOPÍA
Dos niños que sufren de la
leishmaniosis visceral, con
distensión abdominal debida a la
hepatoesplenomegalia.
Niño con leishmaniasis
cutánea, forma más
común.
Isoenzima análisis
•El patrón de isoenzimas y la movilidad
relativa (Rm) de todos los
aislamientos delas enzimas GPI, PGM, P
GD, GOT1, NP1, PN2 y MPI es la misma a
la L.aethiopica se refieren-
cia cepa. La enzima G6PD es el mismo
para L. aethio-pica y L. tropica y MPI se
encontró que era el mismo
para L. aethiopica y L. major
Cepas / aisla
mientos 
clínicos
  GPI PGM PGD G6PD GOT1 NP1 NP2 MPI
L. aethiapica MHOM/ET/72/L100 0.53 1.23 1.38 0.82 1.27 6.95 1.2 1.49
Clinical isolates
 
0.53 1.23 1.38 0.82 1.27 6.95 1.2 1.49
L. tropica MHOM/SU/74/K27 0.76 1.07 0.93 0.82 1.36 4.49 1.01 1.01
L. major MHOM/SU/73 /5 -A 
SKH
0.77 1.18 1.23 0.94 1.1 4.03 9.01 1.49
L. donovani MHOM/IN80/DD8 1.00 1.00 1.00 1.00 1.13 1.00 1.00 1.00
L. infantum MHOM/FR/LEM-75 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00
tabla 1
Movilidad relativa (Rm) de las cepas de referencia y los aislados
clínicos
Movilidad rm, por L. infantum / la
cepa correspondiente (redondeado oV a 2 decimales). Medición
absoluta se hizo en milímetros.
PCR-RFLP
•La amplificación de la ITS1 dio
aproximadamente un fragmento de 328 pb de
tamaño de ambos biopsia (Fig. 1A) y
promastigotes de ADN (datos no mostrados)
muestras. De las 36 muestras de biopsia de
prueba, 30 fueron positivas en la PCR. Las seis
muestras de PCR negativos cultivo negativo, 25
de las 30 muestras positivas de PCR fueron con
cultivo positivo, tres se perdieron debido a la
contaminación y 2 fueron negativos de los
cultivos.
La digestión del producto de
PCR con HaeIII producido tres
bandas
para L. aethiopica, L.tropical y
L. donovani
Los patrones para la cepa de
referencia L. aethiopica y los
aislados clínicos fueron
idénticos
. A pesar de la baja 2
bandas de L.tropica son del
mismo tamaño
que L. aethiopica , la banda
superior es de menor tamaño
molecular distinguiendo
así las dos cepas.Más,
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PCR digerido
con HhaI distingue los
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de las cepas de referencia
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Leishmaniasis

  • 1.
  • 2. Integrantes: PAOLA ANDREA CUESTAS HOLLMAN MAURICIO MORENO Universidad Antonio Nariño 2016
  • 3. LEISHMANIASIS LEISHMANIA (KINETOPLASTIDA): ESPECIES ESCRI BIENDO CON ISOENZIMA Y PCR-RFLP DE LOS PACIENTES DE LEISHMANIASIS CUTÁNEA EN ETIOPÍA
  • 4.
  • 5.
  • 6. Dos niños que sufren de la leishmaniosis visceral, con distensión abdominal debida a la hepatoesplenomegalia. Niño con leishmaniasis cutánea, forma más común.
  • 7.
  • 8.
  • 9.
  • 10.
  • 11.
  • 12.
  • 13.
  • 14. Isoenzima análisis •El patrón de isoenzimas y la movilidad relativa (Rm) de todos los aislamientos delas enzimas GPI, PGM, P GD, GOT1, NP1, PN2 y MPI es la misma a la L.aethiopica se refieren- cia cepa. La enzima G6PD es el mismo para L. aethio-pica y L. tropica y MPI se encontró que era el mismo para L. aethiopica y L. major
  • 15. Cepas / aisla mientos  clínicos   GPI PGM PGD G6PD GOT1 NP1 NP2 MPI L. aethiapica MHOM/ET/72/L100 0.53 1.23 1.38 0.82 1.27 6.95 1.2 1.49 Clinical isolates   0.53 1.23 1.38 0.82 1.27 6.95 1.2 1.49 L. tropica MHOM/SU/74/K27 0.76 1.07 0.93 0.82 1.36 4.49 1.01 1.01 L. major MHOM/SU/73 /5 -A  SKH 0.77 1.18 1.23 0.94 1.1 4.03 9.01 1.49 L. donovani MHOM/IN80/DD8 1.00 1.00 1.00 1.00 1.13 1.00 1.00 1.00 L. infantum MHOM/FR/LEM-75 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 tabla 1 Movilidad relativa (Rm) de las cepas de referencia y los aislados clínicos Movilidad rm, por L. infantum / la cepa correspondiente (redondeado oV a 2 decimales). Medición absoluta se hizo en milímetros.
  • 16. PCR-RFLP •La amplificación de la ITS1 dio aproximadamente un fragmento de 328 pb de tamaño de ambos biopsia (Fig. 1A) y promastigotes de ADN (datos no mostrados) muestras. De las 36 muestras de biopsia de prueba, 30 fueron positivas en la PCR. Las seis muestras de PCR negativos cultivo negativo, 25 de las 30 muestras positivas de PCR fueron con cultivo positivo, tres se perdieron debido a la contaminación y 2 fueron negativos de los cultivos.
  • 17. La digestión del producto de PCR con HaeIII producido tres bandas para L. aethiopica, L.tropical y L. donovani Los patrones para la cepa de referencia L. aethiopica y los aislados clínicos fueron idénticos . A pesar de la baja 2 bandas de L.tropica son del mismo tamaño que L. aethiopica , la banda superior es de menor tamaño molecular distinguiendo así las dos cepas.Más, más, producto de la PCR digerido con HhaI distingue los aislamientos clínicos y la cepa de L. aethiopica de referencia de las cepas de referencia