Spesielle koagulasjonsanalyser ved Koagulasjonslaboratoriet, Rikshospitalet.

3. Familien S fra Åland i Finland

4. Normal blodgjennomstrømning i blodårene: Brosstad 99

5. Trombocytt-adhesjon til vWF: Skadested vWF GPIb = vWF reseptor GPIIb/IIIa = fibrinogen reseptor

6. Brosstad 99 S-S S-S S-S S-S vWF- dimer vWF- tetramer vWF-multimer Basalmembran Endotel Syntese av vWF i endotel

7. Interaksjon mellom plater og von Willebrand Faktor von Willebrand faktor Basalmembran Endotel Blodplater Plateplugg Brosstad 99

8. vWF som transportprotein: Brosstad99 Lever FVIII m/s von Willebrand

9. ” von Willebrand sykdom (vWD), type, profylakse/behandling” – fra ”Utredning og behandling av økt blødningstendens” av Brosstad/Brinch Type Molekyl/Arvegang/Prevalens Blødningssted Profylakse/Behandling vWD 1 Partiell, kvantitativ vWF mangel. Autosomal dominant arv, men diagnose vanskelig pga. redusert penetranse og variablet klinisk uttrykk. Samtidig reduksjon av vWF:Ag og FVIII. Normalt multimer-mønster. 1:100-500? Hud Slimhinner Octostim Cyklokapron P-pille ved menoragi vWD 2A Kvalitativ vWF-defekt hvor de største multimerene mangler og med lav ristocetinkofaktor-aktivitet relativt til vWF:Ag. Vanligvis i autosomal dominant arv betinget i missense mutasjon i vWF A2 repeat. Gruppe 1 (defekt i intracellulær transport) eller Gruppe 2 (økt postsekretorisk proteolyse i plasma) <1:100 000? Hud Slimhinner Octostim Cyklokapron Hemate eller Octanate vWD 2B Kvalitativ vWF-defekt vanligvis assosiert med nedsatt mengde store multimerer. Økt ristocetin-indusert plateaggregasjon (RIPA), mens ristocetin-kofaktor kan være normal. Autosomal dominant arv. <1:100 000? Hud Slimhinner Hemate eller Octanate Cyklokapron vWD 2M Kvalitativ vWF-defekt i A1 domenet assosiert med spesifikke defekter i plate/vWF interaksjoner, men normalt multimer-mønster. Autosomal dominant arv. 1:100 000? Hud Slimhinner Octostim ved chirurgia minor Cyklokapron Hemate vWD 2N Kvalitativ vWF-defekt som skyldes nedsatt vWF-binding av FVIII og derfor lavt nivå av sirku-lerende FVIII (<5%). Autosomal recessiv arv. 1:100 000? Hud Slimhinner Hemate eller Octanate Cyklokapron vWD 3 Klinisk alvorlig kvantitativ vWF-mangel (<5%). FVIII <10%. Vanligvis autosomal recessiv arv, sjelden homozygot eller dobbel heterozygot arv av vWD type 1. 1:100 000? Symptomer som ved alvorlig hemofili Hemate eller Octanate Cyklokapron

12. Farging av prøvematerialet Foto: N.M.Schjelderup

13. Inkubering i 56 °C Foto: N.M.Schjelderup

14. Støping av elektroforese-gel Foto: N.M.Schjelderup

15. Professor Solum ved UiO

16. Appliserte prøver på gel Foto: N.M.Schjelderup

17. Elektroforese Foto: N.M.Schjelderup

18. Elektroforese etter 15 minutter Foto: N.M.Schjelderup

19. Ferdig kjørt elektroforese Foto: N.M.Schjelderup

20. Blotting-utstyret Foto: N.M.Schjelderup

21. Elfo-gel oppå NC-membran før blotting Foto: N.M.Schjelderup

22. Blotting ved 5 volt i 30 minutter Foto: N.M.Schjelderup

23. Elfo-gel oppå NC-membran etter blotting Foto: N.M.Schjelderup

24. Blokkering med 3% tørrmelk Foto: N.M.Schjelderup

25. Inkubering med antistoffer under risting Foto: N.M.Schjelderup

26. Fremkalling av NC-membranen Foto: N.M.Schjelderup

27. Abra … Foto: N.M.Schjelderup

28. … kadabra! Foto: N.M.Schjelderup

29. Ferdig resultat: Foto: N.M.Schjelderup

33. FX FVIIIa Aktivert blodplatemembran Indre Koagulasjonssystem Aktivert plate-membran: FX FIXa FXa

34. Trombocytt-aktivering Ikke-aktivert blodplate Aktivert blodplate Brosstad 2002 Translokering av negativt ladet fosfolipid fra det indre til det ytre blad av blodplatens plasma-membran starter koagulasjonen

35. Skadested vWF GPIb = vWF reseptor GPIIb/IIIa = fibrinogen reseptor Fibrinogen Plate-til-plate-adhesjon

38. Trombocyttaggregasjon Foto: N.M.Schjelderup

40. Agonister ved trc-aggregering Agonist 1. konsentrasjon 2. konsentrasjon Kollagen 8,4 µg/mL 2,1 µg/mL ADP 9,37 µM 1,87 µM Adrenalin 7,3 µM - Arachidonsyre 1,2 mM 0,6 mM Trombin 1 U 0,25 U Ristocetin 1,5 g/L 0,75 g/L TRAP 25 µM -

41. Prøvemateriale Foto: N.M.Schjelderup TRC: 250-350 x 10^3/mm^3

42. Chrono-Log Whole-Blood Aggro-meter Foto: Frank Brosstad

43. Aggregometerets prinsipp Kilde: Dr. Brosstad

44. Trombocyttaggregasjon Kilde: Dr. Brosstad Foto: N.M.Schjelderup Kollagen ADP

49. Kollagen