Evidências científicas para a ação anticancer da própolis de Baccharis dracunculifolia (SCIENTIFIC EVIDENCES TO PHARMACOLOGICAL ANTICANCER ACTION OF Baccharis dracunculifolia BRAZILIAN PROPOLIS)

1. UNIVERSIDADE ANHANGUERA DE SÃO PAULO
Jornada Acadêmica de Farmácia - 2014
Data: 26/ 11/ 2014
Prof. Dr. Niraldo Paulino
Evidências científicas para a ação anticancer da própolis de Baccharis dracunculifolia (SCIENTIFIC EVIDENCES TO PHARMACOLOGICAL ANTICANCER ACTION OF Baccharis dracunculifolia BRAZILIAN PROPOLIS)

2. Doutor em Farmacologia pela Universidade Federal de Santa Catarina e Maximilian Universität München (2005). Atualmente é Coordenador do Grupo de Pesquisa e Desenvolvimento de Biomedicamentos, no Programa de Mestrado Profissional em Farmácia na UNIBAN (SP), Assessor Técnico-Científico e Diretor de Negócios da MEDLEX Gestão de Informações e Cursos Ltda. Tem experiência na área de Farmacologia, com ênfase em Farmacologia Bioquímica e Molecular de Plantas Medicinais. Atuando principalmente nos temas: Mecanismo de ação de Plantas Medicinais e Produtos Naturais, Inflamação e seus mecanismos farmacodinâmicos.
Contatos:
Universidade Anhanguera de São Paulo
Programa de Mestrado Profissional em Farmácia
Grupo de Pesquisa e Desenvolvimento de Biomedicamentos
Rua Maria Cândida, 1813, Vila Guilherme - São Paulo, SP
Prof. Niraldo Paulino
E-mail: niraldop@yahoo.com.br
(11) 2967-9147 (48) 9986-6003
MEDLEX Gestão de Informações e Cursos Ltda. Av. Desemb. Vitor Lima, 260 sala 908, Ed. Madson Center Trindade - Florianópolis/SC - CEP 88040-400. Fone 48 32261616 diretoria@medlex.com.br

3. Talk during the RLHH Journal Club Schedule
60 Great Ormond Street - London WC1N 3HR
Tel: 0845 1555 000 - Website: http://www.rlhh.org.uk
Palestra extraída das conferencias do autor no:
Royal London Homeopathic Hospital, e no
Imperial College London, ambas em Londres na Inglaterra.

4. INTRODUÇÃO

5. Própolis é coletado, limpo, triturado e percolado em condições padronizadas (em geral em alcool) para produzir extrato.
Essas substâncias são transformadas na colméia e usada para fechar a abertura e protege-la da proliferação de micro-organismos: bactérias,fungos e virus.
Esta substância resinosa é chamada de própolis.
O extrato de própolis é usado para preparar várias formulações farmacêuticas: capsulas, cremes, spray oral, shampoos...
Abelhas coletam substâncias resinosas de determinadas plantas
Própolis

6. Própolis Européia
No Europa Central e Leste a principal fonte botânica para produzir própolis é o Populos nigra.
Populos nigra
Os principais componentes são Flavonóides e ésteres do Ácido Cafeico (CAPE) e derivados allyl (ALERGENICOS).

7. Própolis do Brasil
Brasilia(DF)
Amazonas
Roraima
No Brasil nos temos muitas regiões fitogeográficas e muitos tipos de própolis (pelo menos 14) com diferentes constituições químicas.
Marrom
Verde
Amazônia
Pantanal
Vermelho
Floresta das Araucárias
Mata Atlântica
Cerrado
Mangue

8. Própolis Brasileira
Brasilia(DF)
Amazonas
Roraima
MG
SP
PR
SC
RS
Maiores produtores de própolis no Brasil estão no sul e sudeste. A maior parte da produção é exportada para o mercado Asiático (Japão) e Europa (Alemanha)!
Marrom
Verde

9. Própolis Brasileira
MG
SP
PR
SC
RS
Marrom
Verde
Baccharis dracunculifolia
Araucaria angustifolia
Eucalipto citriodora

10. Própolis Brasileira
Amostras de própolis coletadas no RS (A), SC (B), PR (C) e MG (D).
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Retention Time (min)
0.0
0.5
1.0
1.5
Absorbance (AU)
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Retention Time (min)
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
1.2
Absorbance (AU)
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Retention Time (min)
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
1.2
Absorbance (AU)
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Retention Time (min)
0.0
0.5
1.0
1.5
2.0
2.5
Absorbance (AU)
A
D
C
B
MG
RS
SC
PR

11. Própolis de Baccharis dracunculifolia
Abelhas coletam de Baccharis dracunculifolia uma resina verde.
Apicultores em operação para a coleta de própolis de Baccharis
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12. A composição química da própolis varia de região para região.
55% de resinas e bálsamos,
30% de ceras,
10% de pólens
e de metabólitos secundários incluindo:
Ácidos graxos, ácidos fenólicos e seus esteres, flavonóides (flavonas, flavononas, chalconas, etc.), terpenos, b-esteroides, aldeídos aromáticos e álcoois, sesquiterpenos, naftaleno e derivados do estilbeno.
Química da própolis

13. The chemical composition of Baccharis dracunculifolia Premium Brazilian Propolis was determined by high performance liquid chromatograpy using a Merck-Hitachi apparatus (Germany), equipped with a pump (model L-7100, Merck-Hitachi) and a diode array detector (model L-7455, Merck- Hitachi). phenolic compounds (mg/g) (1) coumaric acid (3.81), (2) rutin (9.87), (3) pinobanksin (3.48), (4) quercetin (2.15), (5) kaempferol (0.78), (6) apigenin (1.86), (7) pinocembrin (22.55), (8) pinobanksin-3-acetate (4.10), (9) chrysin (2.49), (10) galangin (4.14), (11) kaempferide (5.59), (12) tectochrysin (2.90), (13) ARTEPILLIN C (87.97).
Própolis de Baccharis

14. Peak
Name
Retention time
Content (mg/g)
1
Coumaric acid
8.176
3.81
2
Rutin
14.058
9.87
3
Pinobanksin
21.209
3.48
4
Quercetin
25.598
2.15
5
Kaempferol
31.946
0.78
6
Apigenin
32.611
1.86
7
Pinocembrin
38.083
22.55
8
Pinobanksin-3- acetate
40.200
4.10
9
Chrysin
41.792
2.49
10
Galangin
46.789
4.14
11
Kaempferide
52.137
5.59
12
Tectochrysin
67.054
2.90
13
Artepillin C
72.599
87.97
Chemical markers in Propolis from Baccharis dracunculifolia
Própolis de Baccharis

15. Alguns compostos
coumaric acid
apigenine
chrysin
galangin
kaempferol
quercetin
rutin

16. O
O
H
H
O
3-Prenyl 4-hydroxycinnamic acid
O
O
OH
2,2-Dimethy-6-carboxyetenil-2H-1- benzopiran
Prenilados e Artepillin C

17. O
H
O
O
2,2-Dimethyl-6-carboxyetenil-8- prenyl-2H-1-benzopiran
Artepillin C®
3,5-Diprenyl-4-hydroxycinnamic acid
H
O
O
H
O
Prenilados e Artepillin C

18. Atividades biológicas
Própolis
Antiviral
Antimicrobiano
Fungicida
Debiaggi,1990
Schimidt, 1996
Burdock, 1998
Scheller et al.,1998
Kujumgiev et al., 1999
Vynograd et al., 2000
Huleihel e Isanu, 2002
Abd Al Hady et al., 2003
Ilhan et al., 2004
Metzner et al., 1975
Metzner et al., 1979
Grange et al, 1990
Aga et al., 1994
Kain et al., 1996
Kujumgiev et al., 1999
Kartal et al., 2003
Santos et al., 2003
Ugur e Arsian 2004
Scheller et al.,1977a e b
Millet-Clerc et al. 1987
Scheller et al., 1998
Kujumgiev et al., 1999
Ozean 2004
Anti protozoário
Metzner et al, 1975
Holderna e Kedzia, 1987
Torres et al, 1990
Higashi et al, 1991
Amoros et al., 1992a, 1992b
Matsuno, 1992
Krol et al, 1993
Scheller et al 1998
da Silva Filho et al., 2004
da Silva Cunha et al., 2004
Anticárie
Ikeno et al., 1991
Steinberg et al., 1996
Botushanov et al., 2004

19. Própolis
Imunomodulatório
Metzner et al, 1975
Holderna e Kedzia, 1987
Torres et al, 1990
Higashi et al, 1991
Amoros et al., 1992a, 1992b
Matsuno, 1992
Krol et al, 1993
Scheller et al 1998
da Silva Filho et al., 2004
da Silva Cunha et al., 2004
Atividades biológicas
Antiinflamatória
Paintz e Metzner, 1979
Bankova et al.,1983
Wang et al., 1993
Khayyal et al., 1993
Schimidt, 1996
Volpert e Elstner, 1996
Mirzoeva e Calder, 1996
Menezes et al., 1999
Paulino et al., 2003
Silva et al., 2004
Antioxidante
Krol et al., 1990
Scheller et al., 1990
Dobrowolski et al., 1991
Schmidt, 1996
Volpert e Elstner, 1996
Ichikawa et al., 2002
Shinohara et al., 2002
Simões et al., 2004
Shimizu et al., 2004
Hepatoprotetor
Merino et al., 1996
Basnet et al., 1996
Lin et al., 1997
Banskota et al., 2001
El-Khatib et al., 2002
Seo et al., 2003
Shukla et al., 2004
Liu et al., 2004
Antihiperalgésico
Paintz e Metzer, 1979
Schimidt, 1996
Paulino et al.,1996d
Campos et al., 1998
Paulino et al., 2003

20. Própolis
ANTITUMORAL
Ribeiro et al. 2006
Padmavathi et al., 2006a
Scifo et al., 2006
Chen et al., 2006
Bestwick et al., 2006
Padmavathi et al., 2006b
Padmavathi etal., 2006c
Chen et al., 2005
Abdel-Latif et al., 2005
Shimizu et al., 2005a
Shimizu et al., 2005b
Hwang et al., 2006
Orsolic et al., 2005a
Orsolic et al., 2005b
Gunduz et al., 2005
Orsolic et al., 2005c
Jin et al., 2005
Mishima et al., 2005
Kuo et al., 2006
Weng et al., 2005
Shieh et al., 2005
Orsolic et al., 2005
Woo et al., 2005
Lee et al., 2004
Atividades biológicas
De Lima et al., 2005
Russo et al., 2004
Woo et al., 2004
Scifo et al., 2004
Kumazawa et al., 2004
Aso et al., 2004
Orsolic et al., 2003
Shimizu et al., 2004
Gambelunghe et al., 2003
Liao et al., 2003
Chen et al., 2004
Lee et al., 2003
Asao et al., 2003
Chen et al., 2003
Sugimoto et al., 2003
Kimono et al., 2001a
Kimoto et al., 2001b
Kimono et al., 2000
Kimono et al., 1998
Kimoto et al., 1996
Scheller et al., 1989

21. Biological Therapy using Propolis as Nutritional Supplement in Cancer Treatment Galvao, J.; Lemos, S.R.; Abreu, J.A.; Cruz, T.; Machado, G.A.S.; Daugsch, A.; Moraes, C.S.; Fort, P.; Park, Y.K. Paulino, N. International Journal of Cancer Research

23. CÂNCER: Conceitos Gerais

24. Conceitos gerais em Câncer
Câncer é o nome dado a um conjunto de mais de 100 doenças que têm em comum o crescimento desordenado (maligno) de células que invadem os tecidos e órgãos, podendo espalhar-se (metástase) para outras regiões do corpo.
NÓS TEMOS VÁRIAS ESTRATÉGIAS PARA TRATAR O CANCER: Indução de apoptose, Controle da diferenciação celular e controle da neoangiogenese e/ou inflamação local.

25. Recentes avanços no estudo do cancer

26. Recentes avanços no estudo do cancer

27. Recentes avanços no estudo do cancer

28. Dos 6 alvos farmacológicos identificados pela indústria para novas drogas no tratamento do câncer, 4 deles já foram investigadas e tem publicações para a Própolis ou seus compostos.
Recentes avanços no estudo do cancer

29. Mecanismos farmacológicos de ação antitumoral própolis ou de seus constituintes

30. Cyt C APAF1
Caspase 9
Smac
AIF
Cell cycle
G1 - S
Caspase 3
Mit
External
stimulus
Nucleus
fragmentation
DNA
Indução de Apoptose em Células Tumorais
BAX/
BAK
Estímulos repetitivos,
persistentes, induzem
resposta celular.
Após o estímulo a
célula produz proteinas
pró-apoptótica:
BAX/BAK, que atuam
na mitocôndria
A mitocondria, fonte
energética na célula,
libera três proteinas
principais
Proteina Smac Diablo,
modula a resposta
apoptótica
Citocromo C liga-se
rapidamente a proteina
APAF1 formando um
complexo que ativa a
caspase 9
Proteina AIF que
funciona como fator de
transcrição nuclear pró-apoptótico
Caspase 9 proteina
apoptótica com função
protease que ativa a
caspase 3
Ciclo de crescimento e
diferenciação celular.
Definido pelos estágio
da evolução da célula.
Caspase 3, protease
extremamente potente,
inibe a diferenciação
celular G1-S
A fragmentação do
DNA induzido pela
caspase 3 promove o
desmonte programado
da célula
Além disso, a Caspase 3
transloca para o núcleo
e promove dano ao
DNA.
Cyt C
Redutase
Citocromo C redutase
inibe a formação do
complexo Cyt C + APAF1

31. Cyt C APAF1
Caspase 9
Smac
AIF
Caspase 3
Mit
External
stimulus
Nucleus
fragmentation
DNA
BAX/
BAK
Cyt C
Redutase
Green
Propolis
Artepillin C
Kimoto T, Arai S, Aga M, Hanaya T, Kohguchi M,
Nomura Y, Kurimoto M. Cell cycle and apoptosis in
cancer induced by the artepillin C extracted from
Brazilian propolis. Gan To Kagaku Ryoho. 1996
Nov;23(13):1855-9
Kimoto T, Arai S, Kohguchi M, Aga M, Nomura Y,
Micallef MJ, Kurimoto M, Mito K. Apoptosis and
suppression of tumor growth by artepillin C extracted
from Brazilian propolis. Cancer Detect Prev.
1998;22(6):506-15
Lee YJ, Kuo HC, Chu CY, Wang CJ, Lin WC, Tseng
TH. Involvement of tumor suppressor protein p53
and p38 MAPK in caffeic acid phenethyl ester-induced
apoptosis of C6 glioma cells. BiochBiochem
Pharmacol. 2003 Dec 15;66(12):2281-9
CAPE
Akao Y, Maruyama H, Matsumoto K, Ohguchi K,
Nishizawa K, Sakamoto T, Araki Y, Mishima S,
Nozawa Y. Cell growth inhibitory effect of cinnamic
acid derivatives from propolis on human tumor cell
lines. Biol Pharm Bull. 2003 Jul;26(7):1057-9
Chen CN, Wu CL, Lin JK. Propolin C from propolis
induces apoptosis through activating caspases, Bid
and cytochrome c release in human melanoma cells.
Biochem Pharmacol. 2004 Jan 1;67(1):53-66
Propolin C
Woo KJ, Jeong YJ, Park JW, Kwon TK. Chrysin-induced
apoptosis is mediated through caspase
activation and Akt inactivation in U937 leukemia
cells. Biochem Biophys Res Commun. 2004 Dec
24;325(4):1215-22
Bacharin, Drupanin e Crisina
Artepillin C
Scheller S, Krol W, Swiacik J, Owczarek S, Gabrys J,
Shani J. Antitumoral property of ethanolic extract of
propolis in mice-bearing Ehrlich carcinoma, as
compared to bleomycin. Z Naturforsch [C]. 1989
Nov-Dec;44(11-12):1063-5.
Green
Propolis
Kimoto T, Koya S, Hino K, Yamamoto Y, Nomura
Y, Micallef MJ, Hanaya T, Arai S, Ikeda M,
Kurimoto M. Renal carcinogenesis induced by ferric
nitrilotriacetate in mice, and protection from it by
Brazilian propolis and artepillin C. Pathol Int. 2000
Sep;50(9):679-89
Kimoto T, Koya-Miyata S, Hino K, Micallef MJ, Hanaya
T, Arai S, Ikeda M, Kurimoto M. Pulmonary
carcinogenesis induced by ferric nitrilotriacetate in mice
and protection from it by Brazilian propolis and artepillin
C. Virchows Arch. 2001 Mar;438(3):259-70
Própolis induz Apoptose em Células Tumorais
A fragmentação do
DNA induzido pela
caspase 3 promove o
desmonte programado
da célula

33. Conclusão:
Artepillin C, Drupanina e Bacharina (derivados do ácido cinâmico) São efetivos contra linhagens celulares tumorais:
Câncer de colo
Câncer Gastric
Leucemia

34. Cell cycle
G1 - S
Nucleus
DAMAGE
DNA
Radiação ionizante,
UV, Quimioterápicos,
Hiperóxia
External
stimulus
Antiapoptotic p53
p21
Ciclyn B1
Cdk1, 2, 4 e 6
Inhibit topoisomerase II
Inhibit DNA-Polymerase 
Proto-oncogene CAAT
Proto-oncogene Myc
Proto-oncogene STAT3
Inhibit NFB
Em resposta a célula
expressa a p53.
Que promove a
transcrição da p21
P21 reprime a
expressão e/ou a
atividade de proteinas
que atuam sobre o
ciclo celular
Retardo na maturação
da celula tumoral
Regulação da Diferenciação Celular em Células
Tumorais
Crisin
CAPE
Artepillin C
Compostos promovem
a expressão da p21
p38

35. Cell cycle
G1 - S
Nucleus
DAMAGE
DNA
External
stimulus
Antiapoptotic p53
p21
Ciclyn B1
Cdk1, 2, 4 e 6
Inhibit topoisomerase II
Inhibit DNA-Polymerase 
Proto-oncogene CAAT
Proto-oncogene Myc
Proto-oncogene STAT3
Inhibit NFB
Regulação da Diferenciação Celular em Células
Tumorais
Crisin
CAPE
Artepillin C
p38
Weng MS, Ho YS, Lin JK. Chrysin induces G1 phase
cell cycle arrest in C6 glioma cells through inducing
p21Waf1/Cip1 expression: involvement of p38
mitogen-activated protein kinase. Biochem
Pharmacol. 2005 Jun 15;69(12):1815-27
Kuo HC, Kuo WH, Lee YJ, Lin WL, Chou FP, Tseng
TH. Inhibitory effect of caffeic acid phenethyl ester
on the growth of C6 glioma cells in vitro and in vivo.
Cancer Lett. 2006 Mar 28;234(2):199-208
Shimizu K, Das SK, Hashimoto T, Sowa Y, Yoshida
T, Sakai T, Matsuura Y, Kanazawa K. Artepillin C in
Brazilian propolis induces G(0)/G(1) arrest via
stimulation of Cip1/p21 expression in human colon
cancer cells. Mol Carcinog. 2005 Dec;44(4):293-9

36. Conclusão: Crisina aumenta a expressão da p21 e induz a parada no ciclo celular em linhagem de células de glioma.

37. Conclusão: Galangina bloqueia o crescimento do cancer de mama através da regulação negativa das ciclina D3, E e A.

38. Redução da inflamação e angiogenese

39. Conceitos Gerais em Inflamação
INFLAMAÇÃO é uma resposta produzida por tecido vivo e vascularizado em resposta a um estímulo lesivo
Inflamação envolve o sistema vascular, químico e celular de maneira estereotipada e sequencial.

40. Estímulos
TLR
Myd-88 IRAK
TRAF6
NIK
p50 p65
p50 p65
IKK
IKKb
IB
 TNF-
 iNOS
 COX-2
 IL-12
NO
PG
 IL1
Redução da inflamação e da angiogênese
associada ao tumor Quimioterápicos, LPS
Ativação de
receptores tipo TLR
Desencadeia uma
cascata de fosforilação
Ativação da
quinase do
IkappaB
Fosforilação do
inibidor do NFkB
Liberação do Fator
de Transcrição
Nuclear NFkB
Translocação
nuclear para a
ativação da
expressão gênica
Expressão de
inúmeros genes
pró-inflamatórios
Expressão de
genes das citocinas
IL1, 12 e TNF-
Expressão de
genes da
cicloxigenase 2
Aumento da
produção de PGE2,
PGF2 ...
Inflamação:
aumento da
permeabilidade
vascular,
vasodilatação,
migração celular,
etc…
Condições ideiais
para o crescimento
do tumor e
metástase

41. Estímulos
TLR
Myd-88 IRAK
TRAF6
NIK
IKK
IKKb
IB
p50 p65
p50 p65
 TNF-
 iNOS
 COX-2
 IL-12
NO
PG
 IL1
Própolis Reduz a inflamação e da angiogenese
Liao HF, Chen YY, Liu JJ, Hsu ML, Shieh HJ, Liao
HJ, Shieh CJ, Shiao MS, Chen YJ. Inhibitory effect
of caffeic acid phenethyl ester on angiogenesis, tumor
invasion, and metastasis. J Agric Food Chem. 2003
Dec 31;51(27):7907-12
Hwang HJ, Park HJ, Chung HJ, Min HY, Park EJ,
Hong JY, Lee SK. Inhibitory effects of caffeic acid
phenethyl ester on cancer cell metastasis mediated by
the down-regulation of matrix metalloproteinase
expression in human HT1080 fibrosarcoma cells. J
Nutr Biochem. 2006 May;17(5):356-62.
Abdel-Latif MM, Windle HJ,
Homasany BS, Sabra K, Kelleher D.
Caffeic acid phenethyl ester modulates
Helicobacter pylori-induced nuclear
factor-kappa B and activator protein-1
expression in gastric epithelial cells. Br
J Pharmacol. 2005 Dec;146(8):1139-47
Paulino N, Teixeira C, Martins R,
Scremin A, Dirsch VM, Vollmar AM,
Abreu SR, de Castro SL, Marcucci
MC. Evaluation of the Analgesic and
Anti-Inflammatory Effects of a
Brazilian Green Propolis. Planta Med.
2006 Aug 10;
Paulino N, Teixeira C, Martins R,
Scremin A, Dirsch VM, Vollmar AM,
Abreu SR, de Castro SL, Marcucci
MC. Evaluation of the Analgesic and
Anti-Inflammatory Effects of a
Brazilian Green Propolis. Planta Med.
2006 Aug 10;

42. Conclusão: Própolis diminui a aprodução de LTB4, LTC4 e PGE2 durante a inflamação.

43. Conclusão: Própolis verde é antiinflamatória, reduz a produção de óxido nítrico e reduz a atividade do NF kappa B (NFB: p50-p65).

44. Epiderm
Epiderm
OERITEMA
Inflammatory mediator
PGE2
O2-
Vaso
Macrophage
PMN
ROS
Apoptose or Necrose
PGs
AA
COX
OEDEMA
NO
Cytokines
PGE2
G1
Linfocyte
Carrageina
Inflammation
G1
G1
G1
G1
G1
Paulino N, Teixeira C, Martins R, Scremin A, Dirsch VM, Vollmar AM, Abreu SR, de Castro SL,
Marcucci MC. Evaluation of the Analgesic and Anti-Inflammatory Effects of a Brazilian Green Propolis.
Planta Med. 2006 Aug 10.
Este efeito foi mediado pela inibição do NFB

45. IMUNOMODULAÇÃO: Conceitos Gerais

46. Conceitos Gerais em Imunomodulação
IMUNOMODULAÇÃO significa a modulação da resposta imunológica desencadeada por estímulos externos: biológicos (bacterias, virus, fungos), físico-químicos (radiação ionizante, UV) ou químicos (LPS, proteinas estranhas, radicais livres).
Resposta controlada por uma complexa rede de mediadores químicos que envolvem citocinas, quimiocinas, prostanóides e fatores de transcrição gênica

47. Regulação fisiológica da resposta imunológica
O sistema hematopoiético humano é extremamente complexo e suas células interagem entre si para definir o grau de resposta celular do nosso organismo aos estímulos nocivos do ambiente.

48. Regulação fisiológica da resposta imunológica
Sob determinadas condições ou estímulos ambientais os linfócitos T assumem os fenótipos de Th1 ou Th2 e modulam a maioria das respostas imunológicas no organismo.

49. Mecanismos farmacológicos da ação imunomodulatória da própolis ou de seus constituintes

50. Carcinogenic
stimulus
Rac2 Cdc42
GTP
Rac2 Cdc42
GDP
P
+
MKK3
MKK6
p38
TLR
Myd-88 IRAK
TRAF6
NIK
IKK
IKKb
IB
p50 p65
p50 p65
 TNF-
 IL-1
 iNOS
 COX-2
 IL-12
NO
PG
Carcinogenic
stimulus
External mitogenic
stimulus
Activation of proteins:
Ras (GTPase)
Prenylation pos-translational
Activation of proteins
kinase activated by
mitogen
Activation of p38-MAPK
Green
Propolis
Activation of
immunological
modulating factor
Increase the
cell immunity
Green
Propolis
Green
Propolis
Regulação do sistema imune nos Linfócitos T

51. Carcinogenic
stimulus
Rac2 Cdc42
GTP
Rac2 Cdc42
GDP
P
+
MKK3
MKK6
p38
TLR
Myd-88 IRAK
TRAF6
NIK
IKK
IKKb
IB
p50 p65
p50 p65
 TNF-
 IL-1
 iNOS
 COX-2
 IL-12
NO
PG
Carcinogenic
stimulus
Green
Propolis
Green
Propolis
Green
Propolis
Kimoto T, Arai S, Kohguchi M,
Aga M, Nomura Y, Micallef
MJ, Kurimoto M, Mito K.
Apoptosis and suppression of
tumor growth by artepillin C
extracted from Brazilian
propolis. Cancer Detect Prev.
1998;22(6):506-15
Paulino N, Teixeira C,
Martins R, Scremin A,
Dirsch VM, Vollmar AM,
Abreu SR, de Castro SL,
Marcucci MC. Evaluation
of the Analgesic and Anti-
Inflammatory Effects of a
Brazilian Green Propolis.
Planta Med. 2006 Aug 10;
Paulino N, Teixeira C,
Martins R, Scremin A,
Dirsch VM, Vollmar AM,
Abreu SR, de Castro SL,
Marcucci MC. Evaluation
of the Analgesic and Anti-
Inflammatory Effects of a
Brazilian Green Propolis.
Planta Med. 2006 Aug 10;
Paulino N, et al.,
umpublished results
Própolis Regula o sistema imune nos Linfócitos T

53. Fig. 3. Gel de agarose da eletroforese do produto de RT-PCR para o mRNA do IFN-γ em esplenócitos.
Fig. 1. Títulos de anticorpos (Log2) de camundongos imunizados com SuHV-1 associados ao Al(OH)3, Al(OH)3 + 5 mg/dose de extrato etanólico de própolis de Baccharis or 5 mg/dose of ethanolic extract of green propolis.
Em conclusão: Em camundongos imunizados com SuHV-1, a associação da própolis com o hidróxido de alumínio aumentou a potencia da resposta humoral e celular e aumentou a proteção dos animais tratados, podendo com isso melhorar a eficácia vacinal contra o Herpes Vírus.

54. Atividade Imunomodulatória da própolis
Aumento da atividade imunológica inespecífica
Orsolic N, Saranovic AB, Basic I. Direct and indirect mechanism(s) of antitumour activity of propolis and its polyphenolic compounds. Planta Med. 2006 Jan;72(1):
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55. Aumento da produção de anticorpos
Sforcin JM, Orsi RO, Bankova V. Effect of propolis, some isolated compounds and its source plant on antibody production J Ethnopharmacol. 2005 Apr 26;98(3):301-5
Modulação da produção de citocinas
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Atividade Imunomodulatória da própolis

56. ESTRESSE OXIDATIVO: Conceitos Gerais

57. REGULAÇÃO BIOQUIMICA NA CÉLULA
O sistema bioquímico complexo que produz espontaneamente formas radicalares de oxigênio reativo (ROS) a cada movimento de respiração celular. Esses radicias livres são consumidos pelos nossos sistemas de defesa antioxidante: SOD, CAT, GSHpx, etc...

58. REGULAÇÃO DA RESPOSTA ANTIOXIDANTE
Além disso, fatores ambientais: inflamação, radiação, agentes químicos, lesão de reperfusão, podem induzir radicais livres adicionais nas células levando a danos celulares.

59. Green
Propolis
Green
Propolis
Green
Propolis
PRÓPOLIS REGULA A RESPOSTA ANTIOXIDANTE

60. Atividade Antioxidante da própolis
Inibição direta da oxidação induzida por radicais livres:
1.Redução da peroxidação lipídica
2.Aumento da expressão de SOD, CAT e GSHpx
3.Aumento da NAPHquinona oxidoredutase
4.Inibição da xantina-oxidase e sequestro de O2- e alcoxil. Okonenko LB. Propolis as an inhibitor of free radical lipid oxidation in salmonellosis. Vopr Med Khim. 1986 May-Jun;32(3):45-8. Marquele FD, Di Mambro VM, Georgetti SR, Casagrande R, Valim YM, Fonseca MJ. Assessment of the antioxidant activities of Brazilian extracts of propolis alone and in topical pharmaceutical formulations. J Pharm Biomed Anal. 2005 Sep 15;39(3-4):455-62 Liu CF, Lin CC, Lin MH, Lin YS, Lin SC. Cytoprotection by propolis ethanol extract of acute absolute ethanol-induced gastric mucosal lesions. Am J Chin Med. 2002;30(2-3):245-54 Shinohara R, Ohta Y, Hayashi T, Ikeno T. Evaluation of antilipid peroxidative action of propolis ethanol extract. Phytother Res. 2002 Jun;16(4):340-7 Ozyurt H, Irmak MK, Akyol O, Sogut S. Caffeic acid phenethyl ester changes the indices of oxidative stress in serum of rats with renal ischaemia-reperfusion injuryCell Biochem Funct. 2001 Dec;19(4):259-63.

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Atividade Antioxidante da própolis

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Atividade Antioxidante da própolis

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Atividade Antioxidante da própolis

64. CLINICAL EVIDENCE
Are preclinical effects reproducible in humans with cancer, during nutritional supplementation with propolis?

65. Breast Cancer: A Case Report
Dr Ellen R. T. Silveira MD PhD mail@ellensilveira.com Santa Casa de Misericórdia de Belo Horizonte Centro de Pesquisa em Cardiologia e Doenças Crônico-degenerativas Av. Francisco Sales 1111 - 8 andar Centro CEP 30150-221, Belo Horizonte, MG, Brazil Tel: +55 (31) 3238 8698
Clinical history:
Female, aged 60 years, apprx. 70kgs, married, 3 children, social drinker, non-smoker, family history negative for breast cancer.
Had 2 extranumerary breasts surgically removed in 1998. Started annual check-up mammograms at age 40.
Started HRT at age 44 years, irregularly and mainly as skin patches.

66. First Step: Ultrasonography

67. First Step: Ultrasonography Medical Report
9h : Hypoecoic image with bizarre and irregular form, and internal calcification (12 x 12 mm).
11h: From 3 cm to areolas board line, hypoecoic image with the same characteristics (7,3 x 7,6 mm).
12-1h : hypoecoic image with regular boards and homogeneous internal (10 x 6,9 mm).
Suggesting biopsy.

68. First Step: Mamography

69. First Step: Diagnosis
Nodular image observed in the upper left quadrant with calcification. We suggest correlation with ultrasonography.
Inconclusive mammography contents.

70. Second Step: Anatomopathological evaluation
Macroscopy:
1.Tumor 11h mamma (R). 2. Tumor 9h mamma (R). 3. 16 nodules
Microscopy:
1.Epithelial neoplasy ductal
2.Ductal epithelial neoplasy with linfatic invasion
3.Linfonodo with metastatic ductal neoplasy cells

71. Second Step: Immunohistochemical
Medical report:
Breast cancer estrogen receptor- sensitive to 80-90% of cells.

72. Radiatherapy
Had a total of 31 sessions of radiotherapy daily, from Nov to Dec 2004.

73. Tamoxifen and Propolis
From January 2005 started on Tamoxifen (one tablet daily, recommended 5 years) and propolis extract (aqueous and alcoolic) initially for 3 months, then as capsules until Dec 2005.
Since January 2006 has been taking a total of 4 capsules daily of cytopropolis. Reports increase in level of energy with propolis. The patient is in good condition currently.

74. no-Hodgkin‘s lymphoma
Clinical history:
Male, aged 65 years, apprx 77kgs, married, social drinker, past of heavy smoking (1 pack/daily for 50 years, stopped in 2002). Reported in mid 2002 (at age 61 years) high temperature (39-40C) and sudoresis for 2 months.
Had treatment with antipyretic, antiinflamatory and antibiotic drugs with no improvement. Also presented frequent headaches, cough and hoarseness (this last started two years before the diagnosis of Ca was made). A mass (node) was detected in the right cervical region the same year (2002). He was then referred to a throat specialist.
Had an excisional biopsy of a right cervical linfonode followed by immunohistochemistry which revealed a Non-Hodgkin'b4s lymphoma. Had 8 sessions of chemotherapy (from beginning of March to August 2003 at 20-day intervals apprx).

75. Lymphoma: A Case Report
An anatomic pathological exam of a right cervical lymphonode (21/02/03) (measuring 2cms in diameter) suggested Hodgkin'b4s Lymphoma (CID-10 C81; nodular sclerosis type)
21/02/2003

76. Lymphoma: A Case Report
Immunohistochemistry revealed a Non-Hodgkin'b4s lymphoma
28/02/2003

77. Lymphoma: A Case Report
12/05/2003

78. Lymphoma: A Case Report
Scarce nodules in both lungs, the biggest with 6 cm.
12/05/2003

79. Cisto with regular walls and
Homogenic anecoic containing,
Size 4,6 x 4,4 cm
10/03/2004

80. Propolis Supplement Protocol:
Propolis was started initially as aqueous/alcoholic extracts for three months then in the form of capsules around the same time the chemo was started.

81. Lymphoma: A Case Report
only paraseptal emphysema in both superior pulmonary lobes
18/04/2005

82. Follow-up Thorax CT on 18/04/05 showed only paraseptal emphysema in both superior pulmonary lobes and some residual pleuropulmonary alterations (discrete opacity) in the right lung apex. Liver steatosis in the thoracoabdominal transition shown on CT. No linfoadenomegaly.
18/04/2005

83. Propolis Suplemment Protocol: A CT and Rx of the thorax done in April 2005 did not show any Ca signs (nodes). He is in good condition currently. He continue to intake 4 caps/day of Cytopropolis.

84. Propolis in Wound:
Male patient, aged 17 years, who had pre-auricular furunculosis (lymphadenopathy) due to MRSA (Methycillin resistant Staphylococcus aureus). The pus was extracted and propolis extract was applied for 7 days with good resolution of the infection.

85. Propolis in Wound:
Complete resolution!

86. Teenager (14 years old) was burnt with hot water. Damaged skin was removed and the surface was cleaned with sterile saline and then recovers with a propolis curative. 48 hours after, without remove the curative, was applied daily a propolis loction (16/06 to 3/07).
Propolis in Wound:

87. Propolis in Wound:

88. Propolis in Wound:

90. Dr. Franco FERABOLI VIA MONTELLO, 24. 26100 CREMONA ITALY. Phone: 0039- 372- 28392 Ospedale Civile di Cremona – Reparto Ortopedia E-mail: feraboli@digicolor.net + feraboli@supereva.it Website: www.apicolturaonline.it/apiterapia

94. AGRADECIMENTOS
(ACKNOWLEDGMENT)
PHARMANECTAR
Propotherapy Division
Certified Quality System Marks