13. ¿Qué es la citometría de flujo? FSC 90º 2- 4º Columna de muestra Meeting point Láser Detectores de luz Amplificación digitalización Representación y Analisis Flujo
14.
15. 1.1. SISTEMA DE ABSORCION DE MUESTRA MUESTRA AIRE FLUJO MUESTRA
16. 1.2. Cámara de flujo FSC 90º Fluido envolvente Columna de muestra Luz dispersada lateralmente y luz fluorescente, = 90 º Luz incidente Luz dispersada hacia delante, = 2- 4º
17. Luz dispersada a 90 grados (Side SCattered light ) Detector FSC Detector de 90º SSC Laser
18. DETECCION DE LUZ DISPERSADA HACIA DELANTE (FORWARD SCATTERED LIGHT, FSC) El detector de FSC convierte luz dispersada hacia delante en un pulso de voltaje proporcional al tamaño de la célula/particula FSC SSC
19. DETECCION DE LUZ DISPERSADA LATERALMENTE (SIDE SCATTERED LIGHT, SSC) El detector de SSC convierte la luz dispersada lateralmente en un pulso de voltaje proporcional a l contenido en orgánulos membranosos (granularidad) FSC SSC
20. Granulocitos CD15+ Monocitos CD14+ Linfocitos CD3+ T2ab T1gd CD4+ CD8+ CD56+ CD19+ CD5+ CD5- Morfología y antígenos de diferenciación en el análisis de la heterogeneidad celular
21. Laser Detectores de fluorescencia Fluorescencia Detector Detector de fluorescencia (PMT3, PMT4 etc.)
29. Representación monoparamétrica de datos. Histogramas. Se representa en cada valor de x (intensidad de fluorescencia) el número de células que emiten esa intensidad.
32. Representación 3D Countour plot / Diagramas de contornos X, Y más una tercera dimensión. La altura representa el número de células con una determinada combinación de ambos parámetros. Densidad=altura Diagrama de dot plot density Usa colores para representar densidad
33. Selección de subpoblaciones definidas en diagramas monoparamétricos Sitúan los valores límite superior e inferior de un parámetro que definen a las células de interés. Selección de la información Gates (Puertas) / ventanas (windows)