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INTRODUCCIÓN A LA
MICROBIOLOGÍA,
ESTRUCTURA Y FISOLOGIA
BACTERIANA
Presentado por: MSc. COTAQUISPE NALVARTE RONY YUNIOR
Sesión N° 01
02-10-2022
PAUTAS PARA EL DESARROLLO DE LA SESIÓNDE APRENDIZAJE
Iniciar con el saludo, todos deben de tener cámaras y micrófono deshabilitado
Puede hacer consultas por el chat.
Levantar la mano para poder participar
Habilitar micrófono y/o cámara cuando el docente le de el pase y sea necesario
La sesión será grabada y compartida en los grupos de trabajo
Procurar siempre tratar de hacer preguntas relacionadas al tema
#
LA INTRODUCCION A LA
MICROBIOLOGIA,
ESTRUCTURA Y
FISIOLOGIA BACTERIANA
ENTENDER LA IMPORTANCIA DE LOS MICROORGANISMOS,
SU ESTRUCTURA Y FISIOLOGIA
• INTRODUCCION
• ESTRUCTURA BACTERIANA
• FISIOLOGIA BACTERIANA
#
ACTIVIDADES PREVIAS - MOTIVACIÓN
1.
2.
3.
Revisa el material (audiovisual, interactivo, etc.) en el siguiente
link:
https://www.youtube.com/watch?v=xsX041EuB9M
Responde: ¿Qué podemos observar con el microscopio?
Participa, xxxxxxxxxxxxxxxxxx
#
LA MICROBIOLOGÍA
• Deriva de 3 palabras griegas: mikros(pequeño), bios(vida) y logos (ciencia), el estudio de la vida
microscópica.
• Ciencia de los seres vivos muy pequeños, aquellos cuyo tamaño esta por debajo del poder
resolutivo del ojo humano
Objeto de la Microbiología: estudio de
los microorganismos utilizando
metodología apropiada como:
 Microscopio óptico, electrónico etc.
 Técnicas de cultivo puro en
laboratorio.
 Técnicas de tinción en lamina
porta y cubre objetos.
HISTORIA DE LA MICROBIOLOGÍA
Fases en la historia de la Microbiología
• Periodo especulativo (desde la antigüedad hasta primeros
microscopios)
• Primeros microscopistas (1675 -mediados del s. XIX)
• Cultivo de microorganismos (hasta finales del siglo XIX)
• Hasta nuestros días: multitud de enfoques en el estudio
microbiano. Ciencias “emancipadas” (Virología, Inmunología).
HISTORIA DE LA MICROBIOLOGÍA
Fase especulativa
• La humanidad conoce las actividades microbianas sin
saber nada de los microorganismos:
• Enfermedades infecciosas
• “miasmas” (Efluvio dañino que desprenden cuerpos
enfermos, materias en descomposición o aguas estancadas).
• Frascatorius(1546): gérmenes vivos
• Alimentos y bebidas fermentados (queso, leches
fermentadas, vino, cerveza)
HISTORIA DE LA
MICROBIOLOGÍA
Primeros microscopistas
Antonee van Leeuwenhoek:
• Microscopio simple
• Descubrimiento de los microorganismos
(“animálculos” en gota de estanque,
1675)
• Describe bacterias (1683)
• Describe protozoos
Robert Hooke:
• Microscopio compuesto
• Describe hongos filamentosos (1667)
Destacados Microbiólogos
Louis Pasteur
• Descarta teoría generación espontánea
en 1864
• Propuso a los m.o como agentes
causales de enfermedad.
• Fermentaciones lácticas, alcohólicas,
butíricas.
• (1857) resuelve un problema de las
destilerías de Lille.
• Enfermedad del gusano de seda:
Nosema bombycis.
• Vacunas contra carbunco, cólera aviar y
rabia
Robert Koch
* Identificó a los m.o. como agentes causales de
enfermedad.
* Definió postulados para probar la etiología de una enf.
Infecciosa.
* Medios sólidos con rodajas de papa, gelatina..agar.
• Lentes acromáticos, condensador, objetivo inmersión.
• Tinciones con a. metileno, fucsina, v. genciana.
• 1876 aísla en cultivo puro B. anthracis.
• 1882 aísla M. tuberculosis.
• En su Laboratorio:
 Cólera (1883)
 Difteria (1884)
 Tétanos (1885)
 Neumonía (1886)
 Meningitis (1887)
 Peste (1894)
 Sífilis (1905)
Postulados de Koch (1882)
1º El agente patógeno debe estar presente
en los individuos enfermos
2º El microorganismo debe poder aislarse
del huésped enfermo en cultivo puro
3º El microorganismo crecido en cultivo
puro, al inocularse en animales sanos,
induce en ellos la enfermedad
4º De estos animales experimentales
inoculados y ya enfermos, se puede volver
a aislar el microorganismo
Otros aportes microbiológicos
• Redi (1668): experimentos que descartan la generación
espontánea de animales .
• Brefeld, primeros cultivos puros en medios con gelatina.
• Hesse (1882) introdujo el agar.
• Ziehl y Neelsen (1883) tinción diferencial AAR.
• Gram (1884) tinción diferencial Gram
• Petri (1887) inventa placas de cristal para medios sólidos.
• Lister (1827-1912) empleo de fenol como desinfectante.
• Paul Ehrlich : “Balas mágicas. 1909 Salvarsan (606) 
Sífilis.
• Domak (1927): “Prontosil” contra neumococos
hemolíticos Sulfamidas.
• Fleming (1929) penicilina del Penicillium notatum.
• Chain y Florey (1940) purificación de penicilina.
Los tres grandes dominios de la vida
Comparación de célula procariótica y eucariótica
LA MICROBIOLOGÍA
Los microorganismos incluyen:
• -Bacterias
• -Hongos (levaduras y hongos
filamentosos)
• -Virus
• -Protozoos
• -Algas microscópicas
• Microbio u organismo microscópico, es
un ser vivo de tamaño microscópico.
• Los microorganismos existen donde quiera
y si piensas que en algún lugar no existe la
vida, un microorganismo te hará quedar
mal.
ACTIVIDADES PREVIAS - MOTIVACIÓN
1.
2.
3.
Revisa el material (audiovisual, interactivo, etc.) en el
siguiente link:
https://www.youtube.com/watch?v=olQwLBCKO-w
Responde:¿Microorganismos perjudiciales
o beneficiosos?
Participa,
#
Agente patógeno y saprofito
Agente patógeno, agente biológico patógeno o
comúnmente conocido como germen, es
cualquier microorganismo capaz de producir
alguna enfermedad o daño en un huésped,
sea animal o vegetal.
Un saprófito (del griego σαπρος, saprós, "podrido" y φυτος
fitos, "planta") es un organismo heterótrofo que obtiene su
energía de materia orgánica muerta o de los detritos
desechados por otros seres vivos, de los cuales extrae los
compuestos orgánicos que requiere como nutrientes.
IMPORTANCIA DE LOS MICROORGANISMOS
 Los microorganismos son extraordinariamente
relevante para la humanidad, dado a que están
presentes en todos los hábitats y ecosistemas
de la Tierra, donde realizan importantes
actividades.
 Los microorganismos han sido los primeros en
aparecer en la evolución, y constituyen
seguramente la mayor parte de la biomasa de
nuestro planeta.
 Las actividades microbianas sustentan los
ciclos biogeoquímicos de la Tierra: los ciclos del
carbono, del nitrógeno, del azufre o del fósforo
dependen de modo fundamental de los
microorganismos.
 Las actividades metabólicas microbianas son
excepcionalmente variadas, siendo algunas de
ellas exclusivas del mundo procariótico.
 El aspecto aplicado y la incidencia económica y
social de los microorganismos es ingente.
IMPORTANCIA DE LOS MICROORGANISMOS
Aspectos beneficiosos:
• Bebidas y alimentos derivados de fermentaciones microbianas: vino,
cerveza, pan, verduras fermentadas, etc.
• Productos industriales: alcoholes, ácidos orgánicos, antibióticos,
enzimas, polímeros, etc.
• Ingeniería genética: nueva generación de medicamentos
recombinantes y de terapias novedosas
• Control biológico
• Biolixiviación
• Ciclos biogeoquímicos
IMPORTANCIA DE LOS MICROORGANISMOS
Aspecto perjudicial:
• Las enfermedades microbianas : la peste
(muerte negra) causó a mediados del siglo
XIV la muerte de la tercera parte de la
población europea. La viruela europea en
población indígena y Sífilis importada a
Europa
• Ahora nuevos retos (SIDA, fiebres
hemorrágicas, etc.), la Microbiología está
permanente batalla contra los gérmenes
patógenos.
• Existen gérmenes que afectan a animales,
plantas, instalaciones industriales, que
afectan a alimentos, etc., representando
otras tantas áreas de atención para la
Microbiología.
IMPORTANCIA DE LOS MICROORGANISMOS
• En Ingeniería Genética existe
cada vez mayor interés en
mejorar la capacidad de
microorganismos, para resolver
problemas ambientales.
• En biodegradación de
hidrocarburos, pesticidas y
metales pesados.
MICROBIOTA
• Microorganismos presentes en tejidos sanos y
que han desarrollado una relación intima con los
tejidos del hospedador.
El ser humano tiene:
1013 células eucarióticas
1014 bacterias simbiontes
COLONIZACIÓN
Adherencia, adaptación y
proliferación
ORIGEN DE LA MICROBIOTA
• Antes del nacimiento un feto humano sano
está libre de microorganismos.
• El primer encuentro del recién nacido, que
nacen por vía vaginal son colonizados
primero por bacterias fecales y vaginales
de la madre, los bebés nacidos por cesárea
inicialmente se ven expuestos a bacterias
que se originan del ambiente hospitalario y
del personal de atención médica.
• El recién nacido adquiere los
microorganismos por contacto superficial,
tragando o inhalando.
• Posteriormente los adquiere a través de
objetos y personas que los cuidan
• En un corto tiempo el niño tendrá el mismo
tipo general de microbiota que una persona
adulta que viva en el mismo ambiente.
La piel y las mucosas hospedan una gran variedad de
microorganismos, los cuales pueden ser divididos en dos
grupos:
FLORA RESIDENTE: Está compuesta de tipos
relativamente fijos de microorganismos, los
cuales se encuentran constantemente en un sitio
dado a una edad dada; si se trastorna, se
restablece espontáneamente con rapidez.
FLORA TRANSITORIA: Está formada por
microorganismos no patógenos o sólo
potencialmente patógenos hospedados en la piel
o las mucosas durante horas, días o semanas;
provienen del ambiente y no se establecen por si
mismos permanentemente sobre la superficie.
INTERACCIONES MICROBIANAS
• MUTUALISTA SIMBIONTE
• COMENSAL
• OPORTUNISTA
Comensalismo Simbiosis
MICROBIOTA
NORMAL
PATOGÉNESIS
Beneficio de la Flora Normal
 La flora normal sintetiza y proporciona
vitaminas para sus propias necesidades,
por lo cual ayuda a la absorción de nutrientes
por el huésped. Por ejemplo, las bacterias
entericas secretan vitamina K y vitamina B12,
y las bacterias acido lácticas producen ciertas
vitaminas B.
• La flora normal previene la colonización por
patógenos, por competencia de los sitios
/receptores de fijación en las células del
huésped o por nutrientes esenciales. Este es el
principal efecto benefico, lo cual ha sido
demostrado en la cavidad oral, en el intestino,
piel, y epitelio vaginal.
La flora normal puede antagonizar con otra bacteria, a través de
sustancias puede inhibir o matar a especies no autoctonas. La flora
intestinal produce una variedad de sustancias como acidos grasos,
peroxidasas, bacteriocinas las cuales inhiben o matan a la bacteria
• La flora normal estimula el desarrollo
de ciertos tejidos por ejemplo y en el
ciertos tejidos linfáticos ( placas de Peyer)
en el tracto gastrointestinal.
La flora normal estimula la producción cruzada
de anticuerpos La presencia de microorganismos
estimula la producción basal de anticuerpos, en
especial de IgA que son secretadas a través de las
mucosas
ACTIVIDADES PREVIAS - MOTIVACIÓN
1.
2.
3.
Revisa el material (audiovisual, interactivo, etc.) en el
siguiente
https://www.youtube.com/watch?v=lkoUQwwMsfc
Responde: ¿Cómo están formados las bacterias?
Participa, xxxxxxxxxxxxxxxxxx
#
Aprender de la fisiología y metodos de cultivo bacteriano
• Morfología bacteriana
• Metabolismo bacteriano
• Metodos de cultivo bacteriano
• Técnicas de siembra
#
ESTRUCTURA Y
FISIOLOGIA
BACTERIANA
COMPOSICIÓN QUÍMICA BACTERIANA
• Agua: 75% (E.coli) a 85% (M.tuberculosis, C.
diphtheriae).
• Sust. Orgánicas:
- Proteínas: 50-80% en el citoplasma y otras
estructuras.
- Carbohidratos: Forman parte de un complejo de
polisacáridos, a veces ligados a proteínas y lípidos.
- Lípidos: 10% de materia seca. 40% los que
contienen inclusiones lipídicas.
- Acidos nucleicos: 10 – 30%, depende de la
especie y del medio nutritivo.
• Sust. Inorgánicas: 2 – 14%; P, Na, S, Mg, K, Ca,
Fe, etc.
Morfología bacteriana
Formas típicas
• Cocos
• Bacilos
• Espirilos
• Vibrios
• Otras formas
• Filamentos
• Anillos casi cerrados
• Con prolongaciones
(prostecas)
Tamaño de las bacterias
Estructuras
bacterianas
VITALES
• Pared
• Membrana plasmática
• Citoplasma
• Material genético
NO VITALES
• Cápsula
• Flagelos
• Pelos
• Espora
Bacterias GRAM POSITIVAS
• Confiere rígidez: aguanta las fuerzas
osmóticas del protoplasto (5-15 atm).
• Responsable de la forma celular
• Barrera contra ciertos agentes tóxicos
• Componente básico: Peptidoglucano
o mureína
Pared bacteriana
PEPTIDOGLUCANO (PG): Composición
química
* La unidad disacarídica que se repite es:
- N-acetilglucosamina (NAG)
- N-acetilmurámico (NAM)
PG de bacterias Gram-negativas
Pared bacteriana
* Normalmente:
• 1 o unas pocas capas de PG.
• Estructuralmente más compleja que
Gram-positivas
• El delgado peptidoglucano está
inmerso en un compartimento llamado
espacio periplásmico
• Espacio periplásmico (lleno con el gel
periplásmico), el cual a su vez limita
con la membrana externa
NUTRICIÓN BACTERIANA Y FISIOLOGIA BACTERIANA
TIPOS NUTRICIONALES
• Mixotrofas (quimiolitotrofas y quimiorganotrofos): con metabolismo energético litotrofo (obtienen energía
de compuestos inorgánicos), pero requieren sustancias orgánicas como nutrientes para su metabolismo
biosintético.
NUTRICIÓN BACTERIANA
TIPOS DE NUTRIENTES:
A) Macronutrientes: C,H,O,N,P,S.
B) Micronutrientes o el. traza: Co, Cu, Zn, Mg, Ca, Fe, Mn, …
C) Factores de crecimiento: vitaminas, coenzimas o sus
precursores, aminoácidos, purinas..
CARBONO
- Base estructural de compuestos bioquímicos.
- Más común es la glucosa.
- En medios de cultivo: glucosa, polisacáridos, ácidos
orgánicos, alcoholes.
- Como CO2, es requerido por todo tipo de bacterias (0,03%).
- Neisseria y Brucella  5-10% CO2 (aislamiento primario)
OXIGENO
- Todas bacterias requieren oxígeno elemental,
pero no todas el oxígeno atmosférico.
- Bacterias aerobias producen oxigenasas,
superóxido dismutasa y catalasa.
- Oxígenasas: captación del oxígeno
atmosférico.
- Superóxido dismutasa: destruye superóxido
convirtiendo en O2 y peróxido de
hidrógeno.
- Catalasa: convierten el peróxido de
hidrógeno en agua y O2.
- Bacterias carentes de estas enzimas mueren
en ambiente con oxígeno
NUTRICIÓN BACTERIANA
• Bacterias aerobios estrictas: necesitan una concentración de
alrededor del 21% de oxígeno para poder desarrollar.
(Pseudomonas, Mycobacterium, Corynebacterium)
• Bacterias microaerófilas: sólo necesitan alrededor de un 5% de
oxígeno para desarrollar. Mayores concentraciones inhiben su
desarrollo. (Campylobacter, Helicobacter)
• Bacterias anaerobios obligadas o estrictas: son incapaces de
sobrevivir en presencia de oxígeno, es decir requieren un 0%
de oxígeno (Fusobacterium, Clostridium)
• Bacterias anaerobias aerotolerantes: pueden sobrevivir,
aunque no crecer, en presencia de hasta un 0,5% de oxígeno.
(Actinomyces, Propionibacterium)
• Bacterias anaerobias facultativas: son capaces de crecer en
una atmósfera tanto con o sin oxígeno. (Streptococcus,
Staphylococcus, Enterobacteriaceae)
• Bacterias capnófilas: son bacterias aerobias que necesitan
además para crecer un 5-10% de CO2. (Neisseria,
Haemophilus)
Requerimientos de oxigeno y CO2
FACTORES FÍSICOS Y QUÍMICOS
1. Humedad: (el agua)
- Requieren de cierta humedad para crecer, porque agua es:
a) Principal constituyente del protoplasma bacteriano
b) Medio universal donde ocurren reac. biológicas.
c) Producto resultante de algunas reac. bioquímicas.
- Agua puede ser: endógena (Ox-Red) o exógena (medio).
- Su disponibilidad se mide como actividad del agua (potencial
de agua aW )
- En bacterias oligotróficas, aw está cercano a 1
- En bacterias que viven en sangre y fluidos, aw = 0.995
- E.coli y Streptococcus  aw cerca de 0.995.
- V. cholerae y Pseudomonas  aw de 0.980
- Bacterias xerófilas  aw de 0.75
NUTRICIÓN BACTERIANA
2.Temperatura
• Psicrófilas: soportan bajas temperaturas, entre 0 - 20ºC
(Pseudomonas, Listeria)
• Mesófilas: desarrollan mejor a temperaturas intermedias,
entre 20 - 45ºC (Staphylococcus, Streptococcus)
• Termófilas: son capaces de soportar altas temperaturas, de
55ºC o más (Bacterias no patógenas)
• Estenotérmicas: son mesófilas pero sólo desarrollan y
sobreviven en rangos estrechos de temperatura, entre 35 -
36ºC (Neisseria)
• Euritérmicas: son capaces de sobrevivir en amplios rangos de
temperatura, entre 0- 44ºC. (Enterococcus)
-Termófilos extremos: encima de 70ºC
- Pseudomonas  hasta 5ºC (psicotrofa o facultativa)
3. pH.
a) Acidófilas: Lactobacillus, Thiobacillus,
Helicobacter.
b) Neutrofílicas: Staphylococcus, enterobacterias
c) Alcalófilas: en lagos salinos , ej.
Natronobacterium, Vibrio
4. Presión osmótica
- Contenido celular tiene mayor presión que del
medio.
- Halófilas: viven en altas concentraciones de sal.
5. Presión hidrostática
- E. coli  crece hasta en 300 atmósferas
- Barófilas  en fondo del océano, hasta 1500
atmósferas.
METABOLISMO BACTERIANO
* En bacterias heterótrofas el metabolismo de
carbohidratos, proteínas y lípidos  ATP
* Metabolismo aerobio: O2 es aceptor final de
electrones. Glucosa produce 38 moléculas de
ATP
* Metabolismo anaerobio (fermentación):
molécula orgánica es aceptor final. Se
producen 2 ATP
* Comprende 5 etapas secuenciales:
- Mecanismos de entrada
- Reacciones catabólicas
- Biosíntesis
- Polimerización
- Ensamblaje.
MECANISMOS DE ENTRADA
- En Gram (+) sustratos deben atravesar capas de mureína
y plasmalema.
- En Gram (-), deben atravesar las porinas, espacio
periplásmico y plasmalema.
- Plasmalema impide paso de moléculas hidrofílicas. Las
permeasas transportan a través de la membrana.
REACCIONES CATABÓLICAS
- Se transforman los sustratos en metabolitos precursores,
ATP y poder reductor.
- E. coli  12 metabolitos precursores, ATP y NADP.
- Mayoría de bacterias de interés clínico utilizan
carbohidratos por varias vías metabólicas.
- Moraxella, no utiliza carbohidratos.
- Algunas bacterias de vida libre y las fijadoras de N,
oxidadoras de S o Fe, obtienen energía de sustancias
inorgánicas simples.
- La glucosa, principal carbohidrato sigue 3 vías.
METABOLISMO BACTERIANO
Reacciones catabólicas
• 1) Glucólisis (Embden-Meyerhof Parnas)
• 2) Vía de las Pentosas fosfato o shunt de las
pentosas
• 3) Vía de Entner-Doudoroff
CULTIVO DE MICROORGANISMOS Y
TÉCNICAS DE SIEMBRA
 Un medio de cultivo es un conjunto de
nutrientes, factores de crecimiento y
otros componentes que crean las
condiciones necesarias para el
desarrollo de los microorganismos.
Deben tener:
 Sustancias nutritivas apropiadas (
proteínas, carbohidratos, minerales)
 Humedad, temperatura y pH óptimo
 Estar protegidos de la contaminación
 estar previamente esterilizados.
 la variedad de medios de cultivo es muy
grande.
 La mayoría de los medios de cultivo se
comercializan en forma de liofilizados
que es preciso rehidratar.
 La preparación de un medio de cultivo se
reduce en general a pesar la cantidad de
medio y redisolverla en agua destilada
(libre de inhibidores del crecimiento).
 Las sustancias termolábiles se esterilizan
por filtración y se añaden al resto de los
componentes previamente esterilizados
en el autoclave
Los constituyentes habituales de los medios de cultivo son:
1. Agar. Se utiliza como agente
solidificante. Es un polisacárido que se
obtiene de ciertas algas marinas. Las
bacterias no son capaces de
degradarlo.
2. Azúcares. Son una fuente de carbono
para los microorganismos. Los más
empleados son la glucosa, la lactosa y
la sacarosa.
3. Extractos. Son preparados de ciertos
órganos o tejidos animales o vegetales
obtenidos con agua y calor. Ej.: extracto
de carne, de levadura, de malta, etc.
4. Peptonas. Son proteínas hidrolizadas,
se obtienen por digestión química o
enzimática de proteínas animales o
vegetales
5. Fluidos corporales. Sangre completa,
sangre desfibrinada, plasma o suero
sanguíneo son añadidos a los medios
empleados para el cultivo de algunos
microorganismos patógenos.
6. Sistemas amortiguadores. Son sales que
se añaden al medio para mantener el pH
dentro del rango óptimo del crecimiento
bacteriano. Ej.: fosfatos bisódicos o
bipotásicos.
7. .Indicadores de pH. Son indicadores
ácido-base que se añaden para detectar
cambios de pH en el medio.
8. Agentes reductores. Sustancias que se añaden al
medio para crear las condiciones que permitan el
desarrollo de los gérmenes microaerófilos o
anaerobios. Ej.: cisteína y tioglicolato.
9. Agentes selectivos. Sustancias como el cristal
violeta, las sales biliares etc. que a determinadas
concentraciones en el medio actúan como agentes
selectivos frente a determinados microorganismos.
CLASE DE MEDIOS DE CULTIVO
 Según su origen:
 Naturales: Son de origen natural o
vegetal cuya composición química
estructural no se conoce con
exactitud Ejm, extracto de carne,
leche, rebanadas de papa, extracto
de coco
 Sintéticos Son aquellos que se
conoce la identidad y la cantidad de
cada compuesto químico, es un
medio químicamente definido. Ej.
Azúcares, vitaminas, aminoácidos
 Semisintéticos Son medios
sintéticos a que se le agrega medios
orgánicos complejos Ejm extracto
de levadura, extracto de carne,
peptonas
 Según su consistencia
 Líquidos: De consistencia fluida,
conocidos como caldos y en su
composición no contiene sustancias
gelificantes. Ej. Caldo Nutritivo, caldo
thioglicolato. Se prepara en erlenmayer,
tubos,
 Sólidos: de cosnistencia rífgida, compacta,
dura.Tienes un solidificante 1, 5 a 2% que
puede ser :Agar Agar, gelatina( 12 -15%)
Silicagel . Ej, Agar nutritivo. Agar Plate
count
 Semisólidos de consistencia blanda,
tienen menos solidificante 0,2 a 0,3 % de
Agar agar u otra sustancia gelificante. Se
utiliza para estudios de movilidad de los
microorganismos y como ambiente para
cepario.
 Según los requerimientos
 Medios comunes: son los medios que contienen los requerimientos
mínimos necesarios para el desarrollo de los microorganismos Ej.
Caldo nutritivo, Agar nutritivo
 Medios Enriquecidos: son aquellos medios básicos que han sido
suplementados con sustancias de mayor valor nutritivo como suero
sanguíneo, leche, sangre, yema de huevo. Ej. Agar sangre, Agar
chocolate
 Medios de enriquecimiento: son medios que favorecen el crecimiento
de un grupo de microorganismos e inhiben a otros que se encuentran
como acompañantes Ej, Agua peptonada Alcalina, caldo selenito,
caldo tetrationato.
 Medios Selectivos: Son medios básicos a los cuales se les han
agregado sustancias que impiden el crecimiento de la mayoría de
bacterias permitiendo por lo tanto la selección de un microorganismo
Ej. Agar MacConkey, agar manitol Hipertónico
 Medios Diferenciales son medios básicos o enriquecidos a los cuales
se les ha agregado sustancias conocidas que al utilizarlos o no por los
microorganismos permite su diferenciación. Estos medios se utilizan
para apreciar cambios bioquímicos específicos de un
microorganismos frente a determinado sustrato. Generalmente se
utilizan sustancias detectoras como indicadores de pH., sustancias
químicas Ej. TSI, Agar citrato, Agar LIA, medios azucarados, agar
citrato
PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO
 Pesar cuidadosamente los ingredientes de acuerdo a
la formulación, en caso de medios deshidratados
pesar de acuerdo a lo indicado por el fabricante
 Agregar Agua destilada o rehidratar
 Homogeneizar los ingrediente llevándolo a calor
 Enfriar y medir el pH
 Colocar en matraces, tubos, etc
 LLevar a esterilizar en autoclave a 121ºC por 15
minutos
 Repartir en placas, tubos
 Control de esterilidad
https://www.youtube.com/watch?v=VcqvgUsbZiY
Siembra por aislamiento
 Se realiza con la finalidad de separa
especies microbianas para obtener un
cultivo puro a partir de una muestra
problema ( orina, heces, agua, alimentos,
secreciones)Estas pueden ser:
 Siembra por agotamiento en superficie:
consiste en diseminar los microorganismos en
la superficie del medio en placas de pétri y
pueden ser:
 Siembra por agotamiento y estría
 Siembra por agotamiento en superficie con espátula
de Drigalsky
 Siembra por diluciones sucesivas consiste en
hacer diluciones de una muestra y luego
colocar 1 ml de cada dilución en placas petri,y
luego se vierte a la placa el medio licuado y
mantenido a 45ºC luego se homogeniza la
placa ( placa vertida o incorporación)
AGOTAMIENTO Y
ESTRIA
ACTIVIDADES PREVIAS - MOTIVACIÓN
1.
2.
3.
Revisa el material (audiovisual, interactivo, etc.) en el siguiente
link:
https://www.youtube.com/watch?v=zVqrSpIFe_M
Responde: ¿Cuáles son las técnicas de cultivo?
Participa, xxxxxxxxxxxxxxxxxx
#
1.
2.
3.
Revisa el material (audiovisual, interactivo, revista, manual,
libro, etc.) en el siguiente link:
Taller de trabajo en plataforma
Realiza: un mapa conceptual de cualquiera de lecturas 1 y 2
Participa, grupal
ACTIVIDADES DE SOCIALIZACIÓN O TRABAJO EN EQUIPO
#
GRACIAS POR SU:
1.
2.
3.
4.
5.
Atención
Comprensión
Compromiso
Participación
Interés de mejorar cada día
#

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  • 1. INTRODUCCIÓN A LA MICROBIOLOGÍA, ESTRUCTURA Y FISOLOGIA BACTERIANA Presentado por: MSc. COTAQUISPE NALVARTE RONY YUNIOR Sesión N° 01 02-10-2022
  • 2. PAUTAS PARA EL DESARROLLO DE LA SESIÓNDE APRENDIZAJE Iniciar con el saludo, todos deben de tener cámaras y micrófono deshabilitado Puede hacer consultas por el chat. Levantar la mano para poder participar Habilitar micrófono y/o cámara cuando el docente le de el pase y sea necesario La sesión será grabada y compartida en los grupos de trabajo Procurar siempre tratar de hacer preguntas relacionadas al tema #
  • 3. LA INTRODUCCION A LA MICROBIOLOGIA, ESTRUCTURA Y FISIOLOGIA BACTERIANA
  • 4. ENTENDER LA IMPORTANCIA DE LOS MICROORGANISMOS, SU ESTRUCTURA Y FISIOLOGIA • INTRODUCCION • ESTRUCTURA BACTERIANA • FISIOLOGIA BACTERIANA #
  • 5. ACTIVIDADES PREVIAS - MOTIVACIÓN 1. 2. 3. Revisa el material (audiovisual, interactivo, etc.) en el siguiente link: https://www.youtube.com/watch?v=xsX041EuB9M Responde: ¿Qué podemos observar con el microscopio? Participa, xxxxxxxxxxxxxxxxxx #
  • 6. LA MICROBIOLOGÍA • Deriva de 3 palabras griegas: mikros(pequeño), bios(vida) y logos (ciencia), el estudio de la vida microscópica. • Ciencia de los seres vivos muy pequeños, aquellos cuyo tamaño esta por debajo del poder resolutivo del ojo humano Objeto de la Microbiología: estudio de los microorganismos utilizando metodología apropiada como:  Microscopio óptico, electrónico etc.  Técnicas de cultivo puro en laboratorio.  Técnicas de tinción en lamina porta y cubre objetos.
  • 7. HISTORIA DE LA MICROBIOLOGÍA Fases en la historia de la Microbiología • Periodo especulativo (desde la antigüedad hasta primeros microscopios) • Primeros microscopistas (1675 -mediados del s. XIX) • Cultivo de microorganismos (hasta finales del siglo XIX) • Hasta nuestros días: multitud de enfoques en el estudio microbiano. Ciencias “emancipadas” (Virología, Inmunología).
  • 8. HISTORIA DE LA MICROBIOLOGÍA Fase especulativa • La humanidad conoce las actividades microbianas sin saber nada de los microorganismos: • Enfermedades infecciosas • “miasmas” (Efluvio dañino que desprenden cuerpos enfermos, materias en descomposición o aguas estancadas). • Frascatorius(1546): gérmenes vivos • Alimentos y bebidas fermentados (queso, leches fermentadas, vino, cerveza)
  • 9. HISTORIA DE LA MICROBIOLOGÍA Primeros microscopistas Antonee van Leeuwenhoek: • Microscopio simple • Descubrimiento de los microorganismos (“animálculos” en gota de estanque, 1675) • Describe bacterias (1683) • Describe protozoos Robert Hooke: • Microscopio compuesto • Describe hongos filamentosos (1667)
  • 11. Louis Pasteur • Descarta teoría generación espontánea en 1864 • Propuso a los m.o como agentes causales de enfermedad. • Fermentaciones lácticas, alcohólicas, butíricas. • (1857) resuelve un problema de las destilerías de Lille. • Enfermedad del gusano de seda: Nosema bombycis. • Vacunas contra carbunco, cólera aviar y rabia
  • 12. Robert Koch * Identificó a los m.o. como agentes causales de enfermedad. * Definió postulados para probar la etiología de una enf. Infecciosa. * Medios sólidos con rodajas de papa, gelatina..agar. • Lentes acromáticos, condensador, objetivo inmersión. • Tinciones con a. metileno, fucsina, v. genciana. • 1876 aísla en cultivo puro B. anthracis. • 1882 aísla M. tuberculosis. • En su Laboratorio:  Cólera (1883)  Difteria (1884)  Tétanos (1885)  Neumonía (1886)  Meningitis (1887)  Peste (1894)  Sífilis (1905)
  • 13. Postulados de Koch (1882) 1º El agente patógeno debe estar presente en los individuos enfermos 2º El microorganismo debe poder aislarse del huésped enfermo en cultivo puro 3º El microorganismo crecido en cultivo puro, al inocularse en animales sanos, induce en ellos la enfermedad 4º De estos animales experimentales inoculados y ya enfermos, se puede volver a aislar el microorganismo Otros aportes microbiológicos • Redi (1668): experimentos que descartan la generación espontánea de animales . • Brefeld, primeros cultivos puros en medios con gelatina. • Hesse (1882) introdujo el agar. • Ziehl y Neelsen (1883) tinción diferencial AAR. • Gram (1884) tinción diferencial Gram • Petri (1887) inventa placas de cristal para medios sólidos. • Lister (1827-1912) empleo de fenol como desinfectante. • Paul Ehrlich : “Balas mágicas. 1909 Salvarsan (606)  Sífilis. • Domak (1927): “Prontosil” contra neumococos hemolíticos Sulfamidas. • Fleming (1929) penicilina del Penicillium notatum. • Chain y Florey (1940) purificación de penicilina.
  • 14. Los tres grandes dominios de la vida
  • 15. Comparación de célula procariótica y eucariótica
  • 16. LA MICROBIOLOGÍA Los microorganismos incluyen: • -Bacterias • -Hongos (levaduras y hongos filamentosos) • -Virus • -Protozoos • -Algas microscópicas • Microbio u organismo microscópico, es un ser vivo de tamaño microscópico. • Los microorganismos existen donde quiera y si piensas que en algún lugar no existe la vida, un microorganismo te hará quedar mal.
  • 17. ACTIVIDADES PREVIAS - MOTIVACIÓN 1. 2. 3. Revisa el material (audiovisual, interactivo, etc.) en el siguiente link: https://www.youtube.com/watch?v=olQwLBCKO-w Responde:¿Microorganismos perjudiciales o beneficiosos? Participa, #
  • 18. Agente patógeno y saprofito Agente patógeno, agente biológico patógeno o comúnmente conocido como germen, es cualquier microorganismo capaz de producir alguna enfermedad o daño en un huésped, sea animal o vegetal. Un saprófito (del griego σαπρος, saprós, "podrido" y φυτος fitos, "planta") es un organismo heterótrofo que obtiene su energía de materia orgánica muerta o de los detritos desechados por otros seres vivos, de los cuales extrae los compuestos orgánicos que requiere como nutrientes.
  • 19. IMPORTANCIA DE LOS MICROORGANISMOS  Los microorganismos son extraordinariamente relevante para la humanidad, dado a que están presentes en todos los hábitats y ecosistemas de la Tierra, donde realizan importantes actividades.  Los microorganismos han sido los primeros en aparecer en la evolución, y constituyen seguramente la mayor parte de la biomasa de nuestro planeta.  Las actividades microbianas sustentan los ciclos biogeoquímicos de la Tierra: los ciclos del carbono, del nitrógeno, del azufre o del fósforo dependen de modo fundamental de los microorganismos.  Las actividades metabólicas microbianas son excepcionalmente variadas, siendo algunas de ellas exclusivas del mundo procariótico.  El aspecto aplicado y la incidencia económica y social de los microorganismos es ingente.
  • 20. IMPORTANCIA DE LOS MICROORGANISMOS Aspectos beneficiosos: • Bebidas y alimentos derivados de fermentaciones microbianas: vino, cerveza, pan, verduras fermentadas, etc. • Productos industriales: alcoholes, ácidos orgánicos, antibióticos, enzimas, polímeros, etc. • Ingeniería genética: nueva generación de medicamentos recombinantes y de terapias novedosas • Control biológico • Biolixiviación • Ciclos biogeoquímicos
  • 21. IMPORTANCIA DE LOS MICROORGANISMOS Aspecto perjudicial: • Las enfermedades microbianas : la peste (muerte negra) causó a mediados del siglo XIV la muerte de la tercera parte de la población europea. La viruela europea en población indígena y Sífilis importada a Europa • Ahora nuevos retos (SIDA, fiebres hemorrágicas, etc.), la Microbiología está permanente batalla contra los gérmenes patógenos. • Existen gérmenes que afectan a animales, plantas, instalaciones industriales, que afectan a alimentos, etc., representando otras tantas áreas de atención para la Microbiología.
  • 22. IMPORTANCIA DE LOS MICROORGANISMOS • En Ingeniería Genética existe cada vez mayor interés en mejorar la capacidad de microorganismos, para resolver problemas ambientales. • En biodegradación de hidrocarburos, pesticidas y metales pesados.
  • 23. MICROBIOTA • Microorganismos presentes en tejidos sanos y que han desarrollado una relación intima con los tejidos del hospedador. El ser humano tiene: 1013 células eucarióticas 1014 bacterias simbiontes COLONIZACIÓN Adherencia, adaptación y proliferación
  • 24. ORIGEN DE LA MICROBIOTA • Antes del nacimiento un feto humano sano está libre de microorganismos. • El primer encuentro del recién nacido, que nacen por vía vaginal son colonizados primero por bacterias fecales y vaginales de la madre, los bebés nacidos por cesárea inicialmente se ven expuestos a bacterias que se originan del ambiente hospitalario y del personal de atención médica. • El recién nacido adquiere los microorganismos por contacto superficial, tragando o inhalando. • Posteriormente los adquiere a través de objetos y personas que los cuidan • En un corto tiempo el niño tendrá el mismo tipo general de microbiota que una persona adulta que viva en el mismo ambiente. La piel y las mucosas hospedan una gran variedad de microorganismos, los cuales pueden ser divididos en dos grupos: FLORA RESIDENTE: Está compuesta de tipos relativamente fijos de microorganismos, los cuales se encuentran constantemente en un sitio dado a una edad dada; si se trastorna, se restablece espontáneamente con rapidez. FLORA TRANSITORIA: Está formada por microorganismos no patógenos o sólo potencialmente patógenos hospedados en la piel o las mucosas durante horas, días o semanas; provienen del ambiente y no se establecen por si mismos permanentemente sobre la superficie.
  • 25. INTERACCIONES MICROBIANAS • MUTUALISTA SIMBIONTE • COMENSAL • OPORTUNISTA Comensalismo Simbiosis MICROBIOTA NORMAL PATOGÉNESIS
  • 26. Beneficio de la Flora Normal  La flora normal sintetiza y proporciona vitaminas para sus propias necesidades, por lo cual ayuda a la absorción de nutrientes por el huésped. Por ejemplo, las bacterias entericas secretan vitamina K y vitamina B12, y las bacterias acido lácticas producen ciertas vitaminas B. • La flora normal previene la colonización por patógenos, por competencia de los sitios /receptores de fijación en las células del huésped o por nutrientes esenciales. Este es el principal efecto benefico, lo cual ha sido demostrado en la cavidad oral, en el intestino, piel, y epitelio vaginal.
  • 27. La flora normal puede antagonizar con otra bacteria, a través de sustancias puede inhibir o matar a especies no autoctonas. La flora intestinal produce una variedad de sustancias como acidos grasos, peroxidasas, bacteriocinas las cuales inhiben o matan a la bacteria
  • 28. • La flora normal estimula el desarrollo de ciertos tejidos por ejemplo y en el ciertos tejidos linfáticos ( placas de Peyer) en el tracto gastrointestinal. La flora normal estimula la producción cruzada de anticuerpos La presencia de microorganismos estimula la producción basal de anticuerpos, en especial de IgA que son secretadas a través de las mucosas
  • 29.
  • 30. ACTIVIDADES PREVIAS - MOTIVACIÓN 1. 2. 3. Revisa el material (audiovisual, interactivo, etc.) en el siguiente https://www.youtube.com/watch?v=lkoUQwwMsfc Responde: ¿Cómo están formados las bacterias? Participa, xxxxxxxxxxxxxxxxxx #
  • 31. Aprender de la fisiología y metodos de cultivo bacteriano • Morfología bacteriana • Metabolismo bacteriano • Metodos de cultivo bacteriano • Técnicas de siembra #
  • 33. COMPOSICIÓN QUÍMICA BACTERIANA • Agua: 75% (E.coli) a 85% (M.tuberculosis, C. diphtheriae). • Sust. Orgánicas: - Proteínas: 50-80% en el citoplasma y otras estructuras. - Carbohidratos: Forman parte de un complejo de polisacáridos, a veces ligados a proteínas y lípidos. - Lípidos: 10% de materia seca. 40% los que contienen inclusiones lipídicas. - Acidos nucleicos: 10 – 30%, depende de la especie y del medio nutritivo. • Sust. Inorgánicas: 2 – 14%; P, Na, S, Mg, K, Ca, Fe, etc.
  • 34. Morfología bacteriana Formas típicas • Cocos • Bacilos • Espirilos • Vibrios • Otras formas • Filamentos • Anillos casi cerrados • Con prolongaciones (prostecas)
  • 35. Tamaño de las bacterias
  • 36. Estructuras bacterianas VITALES • Pared • Membrana plasmática • Citoplasma • Material genético NO VITALES • Cápsula • Flagelos • Pelos • Espora
  • 37. Bacterias GRAM POSITIVAS • Confiere rígidez: aguanta las fuerzas osmóticas del protoplasto (5-15 atm). • Responsable de la forma celular • Barrera contra ciertos agentes tóxicos • Componente básico: Peptidoglucano o mureína Pared bacteriana PEPTIDOGLUCANO (PG): Composición química * La unidad disacarídica que se repite es: - N-acetilglucosamina (NAG) - N-acetilmurámico (NAM)
  • 38. PG de bacterias Gram-negativas Pared bacteriana * Normalmente: • 1 o unas pocas capas de PG. • Estructuralmente más compleja que Gram-positivas • El delgado peptidoglucano está inmerso en un compartimento llamado espacio periplásmico • Espacio periplásmico (lleno con el gel periplásmico), el cual a su vez limita con la membrana externa
  • 39. NUTRICIÓN BACTERIANA Y FISIOLOGIA BACTERIANA TIPOS NUTRICIONALES • Mixotrofas (quimiolitotrofas y quimiorganotrofos): con metabolismo energético litotrofo (obtienen energía de compuestos inorgánicos), pero requieren sustancias orgánicas como nutrientes para su metabolismo biosintético.
  • 40. NUTRICIÓN BACTERIANA TIPOS DE NUTRIENTES: A) Macronutrientes: C,H,O,N,P,S. B) Micronutrientes o el. traza: Co, Cu, Zn, Mg, Ca, Fe, Mn, … C) Factores de crecimiento: vitaminas, coenzimas o sus precursores, aminoácidos, purinas.. CARBONO - Base estructural de compuestos bioquímicos. - Más común es la glucosa. - En medios de cultivo: glucosa, polisacáridos, ácidos orgánicos, alcoholes. - Como CO2, es requerido por todo tipo de bacterias (0,03%). - Neisseria y Brucella  5-10% CO2 (aislamiento primario) OXIGENO - Todas bacterias requieren oxígeno elemental, pero no todas el oxígeno atmosférico. - Bacterias aerobias producen oxigenasas, superóxido dismutasa y catalasa. - Oxígenasas: captación del oxígeno atmosférico. - Superóxido dismutasa: destruye superóxido convirtiendo en O2 y peróxido de hidrógeno. - Catalasa: convierten el peróxido de hidrógeno en agua y O2. - Bacterias carentes de estas enzimas mueren en ambiente con oxígeno
  • 41. NUTRICIÓN BACTERIANA • Bacterias aerobios estrictas: necesitan una concentración de alrededor del 21% de oxígeno para poder desarrollar. (Pseudomonas, Mycobacterium, Corynebacterium) • Bacterias microaerófilas: sólo necesitan alrededor de un 5% de oxígeno para desarrollar. Mayores concentraciones inhiben su desarrollo. (Campylobacter, Helicobacter) • Bacterias anaerobios obligadas o estrictas: son incapaces de sobrevivir en presencia de oxígeno, es decir requieren un 0% de oxígeno (Fusobacterium, Clostridium) • Bacterias anaerobias aerotolerantes: pueden sobrevivir, aunque no crecer, en presencia de hasta un 0,5% de oxígeno. (Actinomyces, Propionibacterium) • Bacterias anaerobias facultativas: son capaces de crecer en una atmósfera tanto con o sin oxígeno. (Streptococcus, Staphylococcus, Enterobacteriaceae) • Bacterias capnófilas: son bacterias aerobias que necesitan además para crecer un 5-10% de CO2. (Neisseria, Haemophilus) Requerimientos de oxigeno y CO2 FACTORES FÍSICOS Y QUÍMICOS 1. Humedad: (el agua) - Requieren de cierta humedad para crecer, porque agua es: a) Principal constituyente del protoplasma bacteriano b) Medio universal donde ocurren reac. biológicas. c) Producto resultante de algunas reac. bioquímicas. - Agua puede ser: endógena (Ox-Red) o exógena (medio). - Su disponibilidad se mide como actividad del agua (potencial de agua aW ) - En bacterias oligotróficas, aw está cercano a 1 - En bacterias que viven en sangre y fluidos, aw = 0.995 - E.coli y Streptococcus  aw cerca de 0.995. - V. cholerae y Pseudomonas  aw de 0.980 - Bacterias xerófilas  aw de 0.75
  • 42. NUTRICIÓN BACTERIANA 2.Temperatura • Psicrófilas: soportan bajas temperaturas, entre 0 - 20ºC (Pseudomonas, Listeria) • Mesófilas: desarrollan mejor a temperaturas intermedias, entre 20 - 45ºC (Staphylococcus, Streptococcus) • Termófilas: son capaces de soportar altas temperaturas, de 55ºC o más (Bacterias no patógenas) • Estenotérmicas: son mesófilas pero sólo desarrollan y sobreviven en rangos estrechos de temperatura, entre 35 - 36ºC (Neisseria) • Euritérmicas: son capaces de sobrevivir en amplios rangos de temperatura, entre 0- 44ºC. (Enterococcus) -Termófilos extremos: encima de 70ºC - Pseudomonas  hasta 5ºC (psicotrofa o facultativa) 3. pH. a) Acidófilas: Lactobacillus, Thiobacillus, Helicobacter. b) Neutrofílicas: Staphylococcus, enterobacterias c) Alcalófilas: en lagos salinos , ej. Natronobacterium, Vibrio 4. Presión osmótica - Contenido celular tiene mayor presión que del medio. - Halófilas: viven en altas concentraciones de sal. 5. Presión hidrostática - E. coli  crece hasta en 300 atmósferas - Barófilas  en fondo del océano, hasta 1500 atmósferas.
  • 43. METABOLISMO BACTERIANO * En bacterias heterótrofas el metabolismo de carbohidratos, proteínas y lípidos  ATP * Metabolismo aerobio: O2 es aceptor final de electrones. Glucosa produce 38 moléculas de ATP * Metabolismo anaerobio (fermentación): molécula orgánica es aceptor final. Se producen 2 ATP * Comprende 5 etapas secuenciales: - Mecanismos de entrada - Reacciones catabólicas - Biosíntesis - Polimerización - Ensamblaje. MECANISMOS DE ENTRADA - En Gram (+) sustratos deben atravesar capas de mureína y plasmalema. - En Gram (-), deben atravesar las porinas, espacio periplásmico y plasmalema. - Plasmalema impide paso de moléculas hidrofílicas. Las permeasas transportan a través de la membrana.
  • 44. REACCIONES CATABÓLICAS - Se transforman los sustratos en metabolitos precursores, ATP y poder reductor. - E. coli  12 metabolitos precursores, ATP y NADP. - Mayoría de bacterias de interés clínico utilizan carbohidratos por varias vías metabólicas. - Moraxella, no utiliza carbohidratos. - Algunas bacterias de vida libre y las fijadoras de N, oxidadoras de S o Fe, obtienen energía de sustancias inorgánicas simples. - La glucosa, principal carbohidrato sigue 3 vías. METABOLISMO BACTERIANO Reacciones catabólicas • 1) Glucólisis (Embden-Meyerhof Parnas) • 2) Vía de las Pentosas fosfato o shunt de las pentosas • 3) Vía de Entner-Doudoroff
  • 45. CULTIVO DE MICROORGANISMOS Y TÉCNICAS DE SIEMBRA  Un medio de cultivo es un conjunto de nutrientes, factores de crecimiento y otros componentes que crean las condiciones necesarias para el desarrollo de los microorganismos. Deben tener:  Sustancias nutritivas apropiadas ( proteínas, carbohidratos, minerales)  Humedad, temperatura y pH óptimo  Estar protegidos de la contaminación  estar previamente esterilizados.  la variedad de medios de cultivo es muy grande.  La mayoría de los medios de cultivo se comercializan en forma de liofilizados que es preciso rehidratar.  La preparación de un medio de cultivo se reduce en general a pesar la cantidad de medio y redisolverla en agua destilada (libre de inhibidores del crecimiento).  Las sustancias termolábiles se esterilizan por filtración y se añaden al resto de los componentes previamente esterilizados en el autoclave
  • 46. Los constituyentes habituales de los medios de cultivo son: 1. Agar. Se utiliza como agente solidificante. Es un polisacárido que se obtiene de ciertas algas marinas. Las bacterias no son capaces de degradarlo. 2. Azúcares. Son una fuente de carbono para los microorganismos. Los más empleados son la glucosa, la lactosa y la sacarosa. 3. Extractos. Son preparados de ciertos órganos o tejidos animales o vegetales obtenidos con agua y calor. Ej.: extracto de carne, de levadura, de malta, etc. 4. Peptonas. Son proteínas hidrolizadas, se obtienen por digestión química o enzimática de proteínas animales o vegetales 5. Fluidos corporales. Sangre completa, sangre desfibrinada, plasma o suero sanguíneo son añadidos a los medios empleados para el cultivo de algunos microorganismos patógenos. 6. Sistemas amortiguadores. Son sales que se añaden al medio para mantener el pH dentro del rango óptimo del crecimiento bacteriano. Ej.: fosfatos bisódicos o bipotásicos. 7. .Indicadores de pH. Son indicadores ácido-base que se añaden para detectar cambios de pH en el medio.
  • 47. 8. Agentes reductores. Sustancias que se añaden al medio para crear las condiciones que permitan el desarrollo de los gérmenes microaerófilos o anaerobios. Ej.: cisteína y tioglicolato. 9. Agentes selectivos. Sustancias como el cristal violeta, las sales biliares etc. que a determinadas concentraciones en el medio actúan como agentes selectivos frente a determinados microorganismos.
  • 48. CLASE DE MEDIOS DE CULTIVO  Según su origen:  Naturales: Son de origen natural o vegetal cuya composición química estructural no se conoce con exactitud Ejm, extracto de carne, leche, rebanadas de papa, extracto de coco  Sintéticos Son aquellos que se conoce la identidad y la cantidad de cada compuesto químico, es un medio químicamente definido. Ej. Azúcares, vitaminas, aminoácidos  Semisintéticos Son medios sintéticos a que se le agrega medios orgánicos complejos Ejm extracto de levadura, extracto de carne, peptonas  Según su consistencia  Líquidos: De consistencia fluida, conocidos como caldos y en su composición no contiene sustancias gelificantes. Ej. Caldo Nutritivo, caldo thioglicolato. Se prepara en erlenmayer, tubos,  Sólidos: de cosnistencia rífgida, compacta, dura.Tienes un solidificante 1, 5 a 2% que puede ser :Agar Agar, gelatina( 12 -15%) Silicagel . Ej, Agar nutritivo. Agar Plate count  Semisólidos de consistencia blanda, tienen menos solidificante 0,2 a 0,3 % de Agar agar u otra sustancia gelificante. Se utiliza para estudios de movilidad de los microorganismos y como ambiente para cepario.
  • 49.  Según los requerimientos  Medios comunes: son los medios que contienen los requerimientos mínimos necesarios para el desarrollo de los microorganismos Ej. Caldo nutritivo, Agar nutritivo  Medios Enriquecidos: son aquellos medios básicos que han sido suplementados con sustancias de mayor valor nutritivo como suero sanguíneo, leche, sangre, yema de huevo. Ej. Agar sangre, Agar chocolate  Medios de enriquecimiento: son medios que favorecen el crecimiento de un grupo de microorganismos e inhiben a otros que se encuentran como acompañantes Ej, Agua peptonada Alcalina, caldo selenito, caldo tetrationato.  Medios Selectivos: Son medios básicos a los cuales se les han agregado sustancias que impiden el crecimiento de la mayoría de bacterias permitiendo por lo tanto la selección de un microorganismo Ej. Agar MacConkey, agar manitol Hipertónico  Medios Diferenciales son medios básicos o enriquecidos a los cuales se les ha agregado sustancias conocidas que al utilizarlos o no por los microorganismos permite su diferenciación. Estos medios se utilizan para apreciar cambios bioquímicos específicos de un microorganismos frente a determinado sustrato. Generalmente se utilizan sustancias detectoras como indicadores de pH., sustancias químicas Ej. TSI, Agar citrato, Agar LIA, medios azucarados, agar citrato
  • 50. PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO  Pesar cuidadosamente los ingredientes de acuerdo a la formulación, en caso de medios deshidratados pesar de acuerdo a lo indicado por el fabricante  Agregar Agua destilada o rehidratar  Homogeneizar los ingrediente llevándolo a calor  Enfriar y medir el pH  Colocar en matraces, tubos, etc  LLevar a esterilizar en autoclave a 121ºC por 15 minutos  Repartir en placas, tubos  Control de esterilidad https://www.youtube.com/watch?v=VcqvgUsbZiY
  • 51. Siembra por aislamiento  Se realiza con la finalidad de separa especies microbianas para obtener un cultivo puro a partir de una muestra problema ( orina, heces, agua, alimentos, secreciones)Estas pueden ser:  Siembra por agotamiento en superficie: consiste en diseminar los microorganismos en la superficie del medio en placas de pétri y pueden ser:  Siembra por agotamiento y estría  Siembra por agotamiento en superficie con espátula de Drigalsky  Siembra por diluciones sucesivas consiste en hacer diluciones de una muestra y luego colocar 1 ml de cada dilución en placas petri,y luego se vierte a la placa el medio licuado y mantenido a 45ºC luego se homogeniza la placa ( placa vertida o incorporación) AGOTAMIENTO Y ESTRIA
  • 52.
  • 53. ACTIVIDADES PREVIAS - MOTIVACIÓN 1. 2. 3. Revisa el material (audiovisual, interactivo, etc.) en el siguiente link: https://www.youtube.com/watch?v=zVqrSpIFe_M Responde: ¿Cuáles son las técnicas de cultivo? Participa, xxxxxxxxxxxxxxxxxx #
  • 54. 1. 2. 3. Revisa el material (audiovisual, interactivo, revista, manual, libro, etc.) en el siguiente link: Taller de trabajo en plataforma Realiza: un mapa conceptual de cualquiera de lecturas 1 y 2 Participa, grupal ACTIVIDADES DE SOCIALIZACIÓN O TRABAJO EN EQUIPO #